药物分析学课件：12 羧酸及其酯类药物分析.pptx

1、姚美村姚美村中山大学药学院中山大学药学院各各 论论第一章第一章 羧酸及其酯类羧酸及其酯类药物的分析药物的分析2要求要求n掌握水杨酸类等药物掌握水杨酸类等药物的的基本结构、结构特征和基本结构、结构特征和理化性质，结构、理化性质与分析方法的关系理化性质，结构、理化性质与分析方法的关系n掌握阿司匹林掌握阿司匹林等药物的鉴别、特殊杂质检查和等药物的鉴别、特殊杂质检查和含量测定方法及原理含量测定方法及原理n熟悉对氨基水杨酸钠等熟悉对氨基水杨酸钠等药物的鉴别、特殊杂质药物的鉴别、特殊杂质检查和含量测定方法检查和含量测定方法n了解其他药物了解其他药物的分析方法的分析方法Yao Meicun, Tel: 13

2、302209526, Email: Y34医药史上三大经典药物之一567第一节第一节 芳酸及其酯类药物的分析芳酸及其酯类药物的分析Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y 结构特征： 苯环 直接与苯环相连的羧基 羧基可形成盐或酯 主要类别：苯甲酸类药物水杨酸类药物8结构与性质结构与性质-典型药物结构典型药物结构COOHOHCOOHOCOCH3salycylic acid 水杨酸水杨酸Aspirin 阿司匹林阿司匹林sodium aminosalicylate对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠salsalate 双水杨酯双水杨酯COONaOHNH2COOHOCOOH

3、水杨酸类水杨酸类9结构与性质结构与性质-典型药物结构典型药物结构苯甲酸类苯甲酸类HOOCSNCH3OOCH3丙磺舒(probenecid)COOHNHCH3CH3甲芬那酸 (mefenamic acid)10n不成盐情况下：不成盐情况下：n在水中基本不溶在水中基本不溶n在极性小的溶剂中溶解或易溶。在极性小的溶剂中溶解或易溶。n成盐的药物：成盐的药物：n在水中溶解在水中溶解n在有机溶剂中难溶在有机溶剂中难溶Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y（1 1）溶解性）溶解性11Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y（2 2）酸

4、性）酸性n羧基羧基酸性酸性：中等或弱酸：中等或弱酸n邻位-OH：分子内氢键：酸性增强 n邻位致活基团：-OH、-OCOCH3：酸性增强水杨酸阿司匹林苯甲酸 HAc H2CO3 苯酚pKa 2.953.49 4.264.76pKa1 6.38 9.95u 酸性大小：12Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y（3 3）水解性）水解性- -酯类酯类u酸性介质酸性介质: : 不可能全部水解u碱性介质碱性介质: : 过量碱(氢氧化钠和碳酸钠)存在，可水解完全13（4 4）官能团反应特性和分解特性）官能团反应特性和分解特性u含酚羟基、潜在酚羟基的水杨酸类含酚羟基、潜在

5、酚羟基的水杨酸类 （5 5） 光谱特性光谱特性与三氯化铁试液反应，显色重氮化反应、重氮化-偶合反应u含芳伯氨基、潜在芳伯氨基u含硫的丙磺舒 分解生成硫化物u用于鉴别、含量测定 用于鉴别、含量测定 14二、鉴别试验（二、鉴别试验（Identification）Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y1 1、水解反应、水解反应COOHOCOCH3+ Na2CO3COONaOH+ CH3COONa + CO2COONaOH+ H2SO42COOHOH2+ Na2SO42 CH3COONa + H2SO42 CH3COOH + Na2SO415（2 2）与三氯化铁与

6、三氯化铁反应反应反应最适宜反应最适宜 pHpH：4-64-6强酸性溶液强酸性溶液分解分解u水杨酸类：水杨酸类： 含酚羟基酚羟基或潜在酚羟基潜在酚羟基的药物, 在中性或弱酸性弱酸性条件下, 可与FeCl3试液反应, 生成类似紫色 (紫色, 紫堇色,紫红色) 的配位化合物16u苯甲酸类：苯甲酸类：丙磺舒钠盐在pH5.06.0水溶液中与三氯化铁试液反应，生成米黄色沉淀COOHO2S(CH3CH2CH2)2NNaOHCOONaO2S(CH3CH2CH2)2NCOOO2S(CH3CH2CH2)2N3FeFeCl3COONaO2S3(CH3CH2CH2)2NpH5.06.0（2 2）与三氯化铁与三氯化铁反

7、应反应17（3 3）重氮化）重氮化- -偶合偶合反应反应 Diazotization coupling 对氨基水杨酸钠 贝诺酯水解产物 18（4 4）分解反应）分解反应- -了解了解HOOCSO2N(CH2CH2CH3)2+ 3 NaOHONa + CO2+ H2O + Na2SO3 + HN(CH2CH2CH3)2 Na2SO3 Na2SO4 O丙磺舒的鉴别：19（5 5）UV法法 最大、最小吸收波长 最大波长及其吸收系数或吸光度 两特征吸收波长及其吸光度之比 u 应注明所用应注明所用溶剂溶剂、药物的、药物的浓度浓度等条件等条件u UV鉴别参数：鉴别参数：20（6 6）IRIR法法供试品图谱

8、与供试品图谱与对照图谱对照图谱一致！一致！供试品与对照品在同样条件下分析，比较图谱，基本一致！供试品与对照品在同样条件下分析，比较图谱，基本一致！21三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查n杂质来源：杂质来源：生产生产 和和 储存储存。n具体药物具体分具体药物具体分析析n阿司匹林中特殊杂质的检查阿司匹林中特殊杂质的检查n对对氨基水杨酸钠中间氨基酚等氨基水杨酸钠中间氨基酚等n有有关物质的检查关物质的检查Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y22阿司匹林中特殊杂质的检查阿司匹林中特殊杂质的检查Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email:

9、Y2324阿司匹林中特殊杂质的检查阿司匹林中特殊杂质的检查 检查方法： u溶液的澄清度溶液的澄清度（生产过程中的杂质）（生产过程中的杂质） 检查碳酸钠试液中的不溶物：未反应完全的水杨酸脱羧产生的 苯酚乙酸苯酯水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯一定量阿司匹林在碳酸钠试液中溶解应澄清。苯酚发生副反应产生的 阿司匹林溶于碳酸钠25u游离水杨酸游离水杨酸（生产和贮藏过程中）（生产和贮藏过程中） 来源：来源：生产中乙酰化不完全、贮藏中水解都会产生检查原因：检查原因：有毒；易氧化，形成醌型有色物质Chp(2005) 检查依据及方法：检查依据及方法： 阿司匹林阿司匹林无酚羟基无酚羟基，不能与直接高铁盐作用，不能与直接

10、高铁盐作用 水杨酸可直接与水杨酸可直接与高铁盐高铁盐反应呈色反应呈色对照法：对照法：与一定量水杨酸对照液生成的色泽比较，控制游离水杨酸的限量与一定量水杨酸对照液生成的色泽比较，控制游离水杨酸的限量。26u游离水杨酸游离水杨酸（原料以及制剂）（原料以及制剂） ChP（现行版）检查（现行版）检查方法：方法：HPLCHPLC法法 流动相： 乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70） 固定相： ODS 定量方法：外标一点法说明：说明：一般，制剂不再检查原料药项下的相关杂质，但ASA制剂在制备和贮藏过程中均可能引入水杨酸,故仍需检查游离水杨酸的限量。27u有关物质有关物质 检查方法：检查方法：HP

11、LC中不加校正因子的主成分自身对照法除“游离水杨酸”之外的其他合成副产物包括：固定相： ODS流动相: A为乙腈- 四氢呋喃- 冰乙酸-水（20 5 5 70） B为乙腈 梯度洗脱 苯酚 乙酸苯酯水杨酸苯酯 乙酰水杨酸苯酯双水杨酯 乙酰水杨酰水杨酸水杨酸酐 乙酰水杨酸酐28四、含量测定四、含量测定Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y28 酸碱滴定法酸碱滴定法 UV法法 HPLC法法直接滴定法直接滴定法水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法非水溶液滴定法29酸碱滴定法酸碱滴定法强碱滴定本类药物的羧基强碱滴定本类药物的羧基 u直接滴定法直接滴定法乙醇溶解样品：乙醇

12、溶解样品：样品易于溶解; 防止水解而导致结果偏高阿司匹林的含量测定：COOHOCOCH3NaOHCOONaOCOCH3H2O边滴边摇：边滴边摇：防止局部碱度过大，促使水解中性乙醇：中性乙醇：对所用指示剂显中性 ( (取乙醇适量，加酚酞指示液2滴，用 0.1mol/LNaOH液滴定至微红色，即得。) )专属性差：专属性差：供试品中所含游离水杨酸超过规定限量时，不宜采用30u水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法阿司匹林的含量测定：COOHOCOCH3NaOH2COONaOHCH3COONaNaOH2H2SO4Na2SO4H2O2空白试验空白试验: 校正 NaOH 滴定液因加热吸收空气中 CO2 带来的

13、误差专属性差：专属性差：供试品中所含游离水杨酸超过规定限量时，不宜采用%100)()(%4242mgWVVTFSOHoNaOHSOH含量1mol Asp 2mol NaOH 1mol H2SO431UV 法法u直接直接 UV 法法丙磺舒片剂的含量测定：取本品10 片，精密称定，研细，精密称取适量，置200 ml 量瓶中，加乙醇150 ml 与盐酸溶液（9 100）4 ml，置70水浴上加热30 min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 ml，置100 ml 量瓶中，加盐酸溶液（9 100）2 ml，用乙醇稀释至刻度，摇匀，在249 nm 波长处测定吸光度，按C13H19NO

14、4S 的吸收系数 为338 计算含量。32栓剂样品的预处理：栓剂样品的预处理：多粒栓剂加热熔融，混匀，冷却，称样，加溶剂溶解待测药物，定容，摇匀，冰浴，过滤，取续滤液 HPLC法法u对氨基水杨酸钠及其制剂：对氨基水杨酸钠及其制剂：离子对分离模式 （流动相中加入四丁基氢氧化铵作为离子对试剂）u其余芳酸类药物及制剂：其余芳酸类药物及制剂：离子抑制分离模式 （流动相为酸性，抑制芳酸类药物电离）u定量方式：定量方式：外标一点法（与标准曲线法区别？）阿司匹林肠溶栓剂的含量测定阿司匹林肠溶栓剂的含量测定33Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y第二节第二节 脂肪酸脂肪

15、酸及其酯类药物的分析及其酯类药物的分析饱和脂肪酸、不饱和脂肪饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸、反式脂肪酸的区别？酸、反式脂肪酸的区别？34Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y 结构特征： 与脂肪链碳原子相连接的羧基羧基可形成盐或酯芳基烷酸类脯氨酸类（普利类）2- 甲基丁酸萘酯类（他汀类）苯氧基烷酸类 主要类别：35结构和性质结构和性质-典型药物结构典型药物结构芳基烷酸类芳基烷酸类36结构和性质结构和性质-典型药物结构典型药物结构脯氨酸类（普利类）脯氨酸类（普利类）37结构和性质结构和性质-典型药物结构典型药物结构2- 2- 甲基丁酸萘酯类（他汀类）甲基丁酸萘酯类

16、（他汀类）38结构和性质结构和性质-典型药物结构典型药物结构苯氧基烷酸类苯氧基烷酸类39 溶解性溶解性水中几乎不溶（成盐的可溶）在有机溶剂中可溶或易溶。酸碱性和水解性酸碱性和水解性依那普利：含有羧基、仲胺基，显酸、碱两性氯贝丁酯：脂肪酸酯，在碱性溶液中易水解-酸碱滴定含量测定法的依据酸碱滴定含量测定法的依据旋光性旋光性-用于纯度检查40官能团反应特性官能团反应特性光谱特性光谱特性卡托普利：含巯基，具有还原性，巯基还能被酰化酮洛芬：含酮基，可与羰基试剂反应-用于鉴别、特殊杂质产生依据、含量测定共轭体系：-用于鉴别、含量测定41二、鉴别试验二、鉴别试验异羟肟酸铁反应异羟肟酸铁反应-多用于酯类药物的

17、鉴别氯贝丁酯的鉴别：42官能团反应官能团反应u酰化反应酰化反应-卡托普利的鉴别亚硝酰硫醇酯，红色u缩合反应缩合反应-酮洛芬酮洛芬的鉴别酮洛芬 + 二硝基苯肼 偶氮化合物 (橙色）43UV 法法u规定一定浓度药物的 max 和（或） minu规定供试药物和其对照品在相同条件下测得的UV光谱应一致 USP法: 氯贝丁酯、洛伐他汀原料的鉴别44IR IR 法法45三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查布洛芬中有关物质的检查布洛芬中有关物质的检查H3CCH3CH3COClAICl3CH3CH3CCH3OH2催化剂H3CCH3CH3OHCO催化剂H3CCH3COOHCH3有10 余种，主要包括合成中间体及其副

18、产物。1-（4- 异丁基苯基）乙醇、4- 异丁基苯乙酮具有成纤维细胞和红细胞毒性。1-（4- 异丁基苯基）乙醇4- 异丁基苯乙酮46ChP 和 JP : TLC 法法USP : HPLC 法法BP: HPLC，GC法法 ChP方法方法： 供试品溶液自身稀释对照法 先配制高浓度样品，再稀释 成低浓度样品，然后同样条件 下 比较分析。47萘普生中有关物质的检查萘普生中有关物质的检查6-甲氧基-2萘乙酮其它未知杂质uChP 检查法：检查法：固定相：ODS流动相：甲醇-0.01 mol/L 磷酸二氢钾溶液（75 25），磷酸调节pH 至3.0HPLC 外标法 不加校正因子的主成分自身对照法 4849四

19、、四、含量测定含量测定 酸碱滴定法酸碱滴定法 氧化还原滴定法氧化还原滴定法 UV法 HPLC法法直接滴定法两步滴定法两步滴定法非水溶液滴定法50 两步滴定法两步滴定法水解后剩余滴定法测定含量时，合成过程中引入的酸性杂质会使测定结果偏高。氯贝丁酯的含量测定：（1）中和：供试品中共存的酸性杂质（2）水解后剩余滴定：51 氧化还原滴定法氧化还原滴定法%100)(%mVVTo含量碘酸钾法，ChP 和 USP法 淀粉指示液显蓝色 52 HPLC 法法 定量方式：定量方式：外标一点法 脂肪酸类药物及制剂：脂肪酸类药物及制剂： 多采用离子抑制分离模式（流动相为酸性，抑制药物电离） 辛伐他汀的含量测定：流动相

20、：流动相：A 为乙腈-0.1% 磷酸溶液（50 50） B 为0.1% 磷酸的乙腈溶液 梯度洗脱固定相：固定相：ODS5354课后思课后思考题考题n1、对氨基乙酰水杨酸的结构特点及可能的性、对氨基乙酰水杨酸的结构特点及可能的性质有哪些？有无此药物上市？质有哪些？有无此药物上市？n2、为何苯甲酸可做防腐剂？、为何苯甲酸可做防腐剂？n3、阿司匹林的经久不衰有何启示？但为何国、阿司匹林的经久不衰有何启示？但为何国内不常用？内不常用？Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y55重点内容重点内容1、有关阿司匹林的结构、性质、鉴别、检查；、有关阿司匹林的结构、性质、鉴别、检查；2、有特殊基团的药物的鉴别，如芳伯胺基、巯、有特殊基团的药物的鉴别，如芳伯胺基、巯基、酚羟基等；基、酚羟基等；Yao Meicun, Tel: 13302209526, Email: Y