1、临床检验标本采集规范检验科 1 检验医学是一项细致的工作,临床检验的目的是为临床诊断和治疗疾病提供诊断依据和治疗效果。因此临床检验结果直接关系到患者诊断和治疗的准确性。但检验结果受临床标本的影响, ,标本的采集和运送直接关系到检验结果的正误,因此在标本采集、送检、保存等各个环节都要规范操作、严格控制,这是确保检验结果准确可靠的前提。2第一部分检验标本正确采集和运送的重要性3 采集标本要选择最佳时间 采集标本要选择最具代表性 采集标本要最大满足要求 重视标本唯一性标志 4 临床检验血液标本原则上晨起空腹时采集,其结果准确可靠,因它避免了摄入成分和生理活动对检测指标的影响。比如需做血脂检查,在化验
2、前24h24h要禁高脂饮食,12h12h禁流质。若要做大便隐血试验,则要在收集标本前3 3天禁动物性饮食。 特定时间采血因人体生物节律昼夜的周期变化,所以24h24h内不同时间所采集的标本其检测结果是不同的, ,如糖、激素及药物疗效监测等。尿常规采集晨尿,由于肾脏浓缩功能,易发现病理成分。 采集标本要选择最佳时间5 急诊检验采血不受时间的限制,但在检验单上应注明采血时间和“急诊”字样,以便临床医生根据其特殊性综合分析检验报告。受饮食影响较少的检验项目,如某些抗原、抗体的检测,不受时间限制。 6 细菌培养应尽量争取在抗生素使用前采集标本;临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者,需做血液细
3、菌培养,采血宜在患者发冷、发热期间,越早越好,最好在抗菌治疗前,以正在发冷、发热时或发冷、发热前半小时为宜。急性心肌梗死患者查cTnTcTnT在发病4 46 6小时采样较好。7 采集标本要选择最具代表性 由于患者标本采集不当,常导致阳性率降低,因此标本的采集应具有代表性,比如大便标本应采取新鲜标本,且选取异常成分的粪便,如含有黏液、脓、血等病变成分的标本取3 35g5g送检; ;应避免混有尿液、消毒剂及污水等杂物。如痰液也要求新鲜,一般检查以清晨第1 1口痰作标本最适宜,做细胞学检查则以上午9 9:00001010:0000留痰为好。骨髓穿刺、脑脊液穿刺应防止外伤性血液的渗入,还应避免凝固。血
4、标本采集时患者应采取坐位或仰卧位,还应防止压脉带时间过长等。 8采集标本要最大满足要求 抗凝剂、防腐剂的正确应用:临床上很多检验项目涉及到抗凝剂、防腐剂的应用,如抗凝管使用错误,就会造成错误的结果。 容器清洁度或无菌程度:如2424小时或1212小时尿中一些成分分析需加防腐剂,而细菌培养的容器绝对不能有防腐剂;微量元素测定对容器洁净度的要求远远高于其他检测。因此标本容器必须干燥、清洁、无污染物、无渗漏。 防溶血、防血脂、防污染:溶血标本引起的血细胞计数、血细胞比容、电解质离子及一些酶类、尿素、肌酐、尿酸、血糖等项目的变化临床上经常碰到。脂血标本、被污染标本引起对实验吸光度的干扰,这些都应引起重
5、视。 9 采集标本运送应注意一些问题:首先标本要专人输送,除门诊患者自行采集的某些标本允许患者自行送外,其他情况原则上一律专人运送。其次送检标本保证安全,防止过度震荡,防止容器破损,防止污染,水分蒸发等。最后保证运送及时性,标本采集后立即送检,标本在室温放置时间直接影响检测结果的真实性。 10 防止过失采集:不可利用输液、输血通道采集血液标本。除急诊抢救外应尽量避免在输液、输血的同时采集标本;如确需抽血要在另一侧肢体抽取。一般要求在输液、输血前或后1 1小时采集血液标本。11重视标本唯一性标志 申请单上病案号、患者姓名、性别、年龄、科室、床号、临床诊断、标本类型和申请项目以及申请医生和开单时间
6、都应明确和完善。标本采集容器标签上应注明送检科别, ,床号,患者姓名,与检验单上应相对应,防止张冠李戴。 12 总之,规范实验室标本采集和运送至关重要,除以上涉及到的诸多因素外,还有许多能影响体液成分或干扰测定,如患者年龄、性别、情绪、饮食、运动和药物等的影响,因此在标本采集前应尽可能排除这些因素的干扰,获取准确的检验结果,为临床提供科学可靠的诊断依据。13 第二部分 各种临床检验标本的正确采集方法14 检验标本的采集是保证检验结果准确的前提。因此,各临床科室医护人员、送检者及相关人员要严格的规范标本的采集和运送。 15血液常规检查标本1.1.静脉血采集静脉血标本采集前病人应注意的问题: :
7、1)避免剧烈运动,一般主张抽血前24h内不做剧烈运动,清晨取血,住院病人可在起床前采血,匆忙赶到门诊的人应至少休息15分钟后采血,如性激素标本应在采集前静坐30分钟。 )注意合理饮食。除了急诊或其它特殊原因外,一般主张在禁食12h后空腹取血,延长空腹时间(饥饿)或餐后血液的化学成分都会引起变化,饮酒对实验亦有影响。 )药物的影响:很多的药物进入人体后可影响某些化验项目的结果,病人在化验前应尽可能停服对实验有干扰的药物。 16静脉采血时护士应注意的问题 :)采用一次性真空采血管,多项化验采血顺序应首先将血注入凝血项目管、血常规管,然后是其它抗凝管,最后是非抗凝管。血常规、血凝、血沉抽血量务必准确
8、抽取规定的量,并轻轻颠倒混匀5-10次。 )采血时的体位建议以坐位5分钟后取血为宜,止血带使用应少于1分钟,以免引起血液淤滞,造成血管内溶血或血液某些成分改变。 )当一侧手臂输液时应从对侧手臂取血,以免影响血糖、血钾等的浓度。 )血标本应防止溶血,影响溶血的因素有:用止血带时间过长;抗凝管使用不当或抗凝混合时过度振荡;容器污染;血液中泡沫注入试管;标本放置时间长或突然冷却和受热等。 )正确使用抗凝剂。 17(一)血常规检验标本l 一般用EDTA-K2 1.52.2mg/ml抗凝(EDTA抗凝管,紫色帽 )采血。 采血注意事项: .应按抗凝管刻度准确采静脉血至ml。 .采血后立即上下颠倒混匀(5
9、-10次,不可用强力震荡,以免造成溶血。); .采血后应尽快送检(为保证结果准确需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定,因为超过2h WBC形态会发生改变)。 18( (二)凝血检测( PT PT、APTT APTT 、 TT TT 、 FBG FBG )标本 静脉采集抗凝血,抗凝剂用枸橼酸钠(109mmol/L109mmol/L,即32.06g/L,32.06g/L,抗凝剂: :全血 = 0.2 = 0.2:1.8 1.8 )抗凝血(枸橼酸钠抗凝管、蓝绿色帽) 。 采血注意事项:1.1.空腹采静脉血(餐后脂血影响检测结果,使因子活化,导致PTPT延长);2.2.采血时患者应保持平静状态3
10、0min30min以上(剧烈活动可使因子活化,APTTAPTT明显缩短); 3. 3.应单独1 1管血, ,必须准确采血至刻度线2ml2ml; 4. 4.采血后应立即上下颠倒混匀5-105-10次,不可有凝块; 5. 5.采血后应尽快送检(必须2h2h内检测)。 19(三)血型与交叉合血标本 用EDTA-KEDTA-K2 2 1.5-2.2mg/ml 1.5-2.2mg/ml抗凝(EDTAEDTA抗凝管、紫色帽)采血。 采血注意事项: 1. 1. 按抗凝管刻度准确采静脉血, ,采血量分别为1ml1ml和2ml2ml; 2. 2.采血后立即上下颠倒混匀(5 51010次), ,不可有凝块, ,且
11、不可用强力振荡,以免造成溶血。 3. 3.血型鉴定与交叉合血各采集1 1管血,保证标本的准确性。 20(四)红细胞沉降率(血沉, ESR ESR)检验标本 静脉采集枸橼酸钠(109mmol/L109mmol/L)抗凝血,(枸橼酸钠抗凝管采血, ,黑色帽 )。 采集注意事项: 1. 1.单独采集1 1管血, ,按抗凝管刻度准确采血至2ml2ml(抗凝剂:全血 = 0.4 = 0.4 :1.61.6); 2. 2. 采血后立即上下颠倒混合5-105-10次, ,不可用强力振荡 ; 3. 3.采血后应尽快送检(为保证结果准确, ,必须2h2h内检测)。 21(五)临床生化检验标本 临床生化检验多用非
12、抗凝血标本。(特殊项目例外: 如血气分析用专用采血针;糖化血红蛋白用紫头管等) 采集注意事项: 1. 1.多项化学检测一般可采集1 1管血; 2. 2.采血量视检查项目多少不同而异,单管通常3.0ml3.0ml。 22附: :真空采血管采集血液标本一览表 试管分类 抗凝剂类型 采血量 检查项目 蓝绿色3.8枸橼酸钠2ml凝血检查紫色 EDTAK2 2ml 血常规、血型 绿色 肝素钠 3ml 血液流变学 、输血全套黑色 3.8枸橼酸钠 2ml 血沉 红色 无抗凝剂 3ml 免疫类、PCR定量等 黄色 有分离胶3ml 生化类 、产筛23 尿液常规检查标本. .尿液常规检查标本应按以下原则进行采集:
13、 (1 1)新鲜晨尿最佳,门诊病人亦可留随机尿; (2 2)尿液采集于干净带盖容器中,不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿; (3 3)避免混有经血、白带、精液和粪便; (4 4)尿液成分定量检查应留取24h24h防腐混合尿5050100ml100ml(须记取24h24h尿液总量); 24. .尿液常规检查标本采集方法:()晨尿最好(安静状态下留取清晨第一次尿,浓缩,无其他影响);()随机尿较常用(随时留尿,适用于门诊和急诊病人,结果易受多种因素影响);()清洁尿(中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿,用于病原微生物学培养、鉴定和药敏);()24h24h尿(用于尿液成分24h24h定量检查分析)。()、
14、等计时尿和餐后尿等特殊实验尿,则应按医嘱要求进行留尿。25 粪便常规检查标本 1.1.一般应为新鲜的自然排出的粪便,必要时可肛拭子采取; 2. 2. 送检粪便应盛于洁净带盖的塑料盒中送检,要做好标记;3.3.要选取粪便的脓、血、黏液等异常成分进行检查;4.4.检查蛲虫卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm12pm或早晨排便前,于肛门周围皱襞处拭取标本,并立即送检;5.5.做便隐血试验时,应嘱病人检查前3d3d内禁食肉类、含动物血的食物及某些蔬菜,禁服铁剂和维生素C C等对实验有干扰作用的药物。 266.6.检查血吸虫卵时应取粘液、脓、血部分,如需孵化毛蚴应留取不少于30g30g的粪便,并尽快送检,必
15、要时留取整份粪便送检。7.7.检查痢疾阿米巴滋养体时,应床边留取新排出的粪便,从脓血和稀软部分取材,并立即保温送实验室,并且实验室接受标本后应立即进行检查。27 其它体液常规检查标本浆膜腔积液检查标本(1 1)浆膜腔积液标本一般由医生无菌穿刺采取; (2 2)送检标本量:理学检查、化学检查、细胞学检查各留取mlml;细菌学检查用无菌管采集标本,厌氧菌培养留取mlml,结核菌检查留取mlml。(3 3)标本采集后必须立即送检(否则可出现细胞变性,标本凝集,细菌溶解)。 28微生物检验标本采集 微生物学检验标本的正确采集运送及处理,与细菌的培养鉴定结果有十分密切的关系;对可疑烈性呼吸道传染病(如S
16、ARS SARS 炭疽肺鼠疫等)患者采集标本时,必须按国家规范化要求严格注意生物安全;医生护士检验人员均应重视微生物学检验标本正确采集的有关问题,并有责任向患者及其家属进行正确采集标本的宣传和指导。291 1微生物学检验标本采集、运送、验收和处理注意事项 标本采集1 1)申请单标记必须清楚(姓名、性别、年龄、病案号、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等),以便实验室能够合理选择培养环境和培养基;2 2)尽量在抗生素应用前采集标本,以避免漏检和提高阳性检出率;3 3)标本采集应严格执行无菌操作;4 4)咽拭、肛拭、伤口拭子等拭子标本,应插入运送培养基送检;5 5)采集标本的容
17、器必须经灭菌处理,但不可用消毒剂。 30标本运送1 1)标本采集后应尽快送到微生物实验室;2 2)标本采集后在室温下超过2h2h未送达实验室,可视为不合格标本。31标本验收1 1)实验室只能接受和处理合格标本;2 2)实验室对不合格标本退回必须说明原因,并应及时与临床联系。32 2 2微生物学检验标本采集和处理(1 1)尿液标本采集和处理 通常留取晨起第一次尿液(此时尿液在膀胱内储存4h以上);尿液采集后要及时送检,并保证2h内接种;尿液微生物学检验标本采集方法如下:1)中段尿采集法:成年男性和女性分别用肥皂水清洗尿道口和外阴部,再用灭菌水冲洗尿道口,然后排尿弃去前段尿液,于带盖的无菌容器中留
18、取中段尿液510ml; 332)导尿法:用导尿管导取1015ml尿液,置灭菌容器中送检;长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿;留置导尿时,用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口,用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检(不可采集尿液收集袋中的尿液送检);3)集尿法:怀疑结核分枝杆菌感染时,于清洁盛器中留取24h尿液,取其沉渣1015ml送检;4)耻骨上膀胱穿刺法:培养结果与临床病情矛盾时可采用此法,一般较少应用;5)肾盂尿采集法:必须由临床医生采集。34(2 2)粪便标本采集和处理1 1)采集时间:腹泻患者于急性期,尽量在用药前采集粪便;伤寒患者于发病2天以后采集粪便;怀疑霍乱时立即采集粪便送检。2)
19、2) 采集方法: 自然排便:取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分,2-3g或1-2ml,盛无菌容器内或置于保存液或增菌液内送检;直肠拭子:用于难以获得粪便或排便困难的患者和婴幼儿,标本采集后插入灭菌试管内送检。35(3 3)痰及下呼吸道标本采集和处理1 1) 自然咳痰法: 晨痰为佳; 先冷开水漱口清洁口腔和牙齿; 再用力咳出呼吸道深部的痰; 痰量不得少于1ml; 痰咳出困难时可先雾化吸入NaCl溶液(100g/L,加温到45)使痰容易咳出。2 2)小儿取痰法:用弯压舌板向后压舌,将拭子深入咽部,小儿因压舌板刺激引起咳嗽,喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上可送检。3 3)支气管镜、支气管穿刺
20、、支气管肺胞灌洗等采集法:此采集方法必须由医生操作。 36(4 4)血液及骨髓培养标本1) 抗生素治疗前,严格无菌静脉采血510ml(儿童14ml);2)无菌注入专用培养瓶(成人、儿童、需氧菌、厌氧菌、L型菌不同培养瓶)中送检;3)如已用抗生素不能停用时,可于48h内分别于下次用抗生素之前,采取6份血液标本送检;4)必要时可需氧菌、厌氧菌(占10%)和L型菌同时培养;5)疑为心内膜炎时,为提高阳性检出率,可酌情不同部位、不同时间,多次采血或动脉采血进行培养;6)必要时可取骨髓12ml,无菌注入专用培养瓶中送检37( 5( 5)脑脊液培养标本1) 1) 采集时间: 怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液,
21、最是在应用抗生素之前采集脑脊液。2) 2) 采集方法: 无菌腰穿采集脑脊液35ml,分装到3个无菌小瓶中(各12ml)。用于细菌和病毒检测时脑脊液量不少于1ml;用于真菌和抗酸杆菌检测脑脊液量不少于2ml。 38(6 6)穿刺液培养标本1) 1) 采集时间: 一般在用抗生素等抗菌药物治疗之前,或在停止使用抗菌药物之后2-3d采集标本。2) 2) 采集方法:无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本;标本采集量应1ml(结核分支杆菌培养时应为15ml);标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中送检;可在容器中先加入灭菌肝素然后再加入穿刺液,以防止穿刺液凝固(0.5ml肝素可抗凝5ml标本)39(7 7)胃
22、液及胆汁培养标本 抽取空腹胃液5ml,置无菌管内送检;胆汁培养标本由十二指肠引流法或胆囊穿刺法或手术中留取胆汁,采集胆汁量为5ml,置无菌管内送检;胃液和胆汁采集后必须立即送检。 (8 8)脓汁和病灶分泌物培养标本: : 采集前局部消毒,然后无菌采取脓汁或病灶分泌物或组织。标本采集后立即置无菌管内送检。 (9 9)眼. .耳. .鼻. .咽拭子培养标本: : 用拭子常规采集各种标本。标本采集过程中应注意避免被黏膜上的正常菌群污染,标本采集后连同拭子一起置无菌管内送检。 40(1010)泌尿生殖道培养标本1)尿道分泌物:清洗尿道口采取尿道口溢出的脓性等分泌物,或用无菌拭子插入尿道24cm处轻轻转
23、动后取出,置无菌试管中送检。2)阴道、宫颈分泌物:通过阴道扩张器,用灭菌拭子采取阴道口或宫颈管12cm处分泌物,置无菌试管中送检。3)前列腺液:清洗尿道口冲洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液送检。4)精液:受检者应5d未排精,清洗尿道口后手淫或体外排精法,射精于无菌容器内送检。5)溃疡分泌物:灭菌生理盐水溶液清洗患处,用无菌拭子取其边缘或基底部的分泌物,置无菌试管中送检。41( 11( 11)烧伤感染培养标本 烧伤12h后用无菌棉拭子无菌操做采集标本;要注意从多个创面取样;烧伤严重感染时易发生败血症,创面取样的同时应该采集血样送做血培养(最好同时做需氧菌培养和厌氧菌培养)。(1212)厌氧菌感
24、染培养标本1 1)标本采集要注意避免标本污染和与空气接触,严格遵守无菌操作;用注射器抽取胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液或无菌手术抽出脓液;抽出液体标本后,要尽快排除注射器内的空气。 422 2)标本运送 标本采集后不得冰箱储存,必须尽快(半小时内)送实验室; 运送方法:a注射器运送 (标本抽取后尽快排除空气)或接种到专门的运送培养基中直接运送;b含运送培养基的无氧小瓶运送;c厌氧罐运送(组织块);d 大量液体标本运送时要装满标本瓶并立即驱氧,加盖运送;e一般不采用棉拭子法。43( 13( 13)真菌感染培养标本1)浅部真菌感染标本采集 皮肤:常规消毒皮肤,从皮肤癣菌皮损边缘刮取鳞屑,
25、置无菌平皿内送检;皮肤溃疡则采集病损边缘脓汁或组织; 指(趾)指甲:消毒指(趾)指甲并去掉其表面部分,取可疑病变部分,用刀片修成小薄片56片,置无菌容器内送检;毛发:采集根部断折处,至少56根送检。 442 2)深部真菌感染标本采集 血液:无菌采血810ml,注入未用过抗生素的或可中和抗生素的血培养瓶中,立刻送检;如不能立刻送检时血培养瓶应放室温,但不可超过89h; 脑脊液:采样量不少于35ml,分别注入两支无菌试管中送检(一管做真菌培养和墨汁染色;一管测隐球菌抗原和其他培养);呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染标本采集同一般菌培养标本。45第三部分 临床检验标本的运送和接收46 标本运送及接收流
26、程1.急诊标本,采集后将标本装集在标本运送箱中,由运送人员立即送到检验科,检验科人员核对签收,对符合接受要求的标本进行登记、处理。2.门诊患者的标本由患者或患者家属运送,门诊一般标本送检验科标本接收室。3.住院标本由专人运送,将标本装在标本运送箱内运送,送到检验科标本接收室,由检验科人员核对签收,签字认可。47 不合格及拒收标本1、采集样品与申请单内容不一致(如血清标本抽成血浆,动脉血抽成静脉血,应装消毒容器的装成普通容器。应装抗凝容器的装成不抗凝容器)。标本标签与申请单内容不一致(如姓名、性别、年龄、床号、科别等)。2、标本量太少,不足以完成所要求的检验项目。3、抗凝标本出现凝固。4、标本容
27、器破损,标本流失或可能受污染。5、溶血和脂血标本。6、延迟送达的标本(血常规、生化检查、体液标本必须在采取标本后2小时内送到,凝血实验、血流变等需在1小时内送到)7、24小时尿蛋白定量必须注明尿量;糖耐量实验须注明采集标本时间;细菌学标本必须使用无菌容器等。48 对不合格标本的处理办法 1、及时与送检部门相关人员取得联系,联系方式:电话联系。联系对象:送检人或相关科室负责人。建议其重新核实或重新取样。并作好记录。2、对检测结果与临床表现不符的标本以及危急值项目(如钾、血糖等高于医学决定水平高值低于低值),要及时与相关科室取得联系,说明情况,是否需要重新抽血复查。3、对难得标本或对再次采样确有困难者则可以协商进行部分项目的检测,在检验报告单上注明标本不合格原因,及“检验结果仅供参考”字样。49 50
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