心脑血管药理、食管癌放疗增敏研究mnsod基因单核苷酸多态性与食管癌放疗敏感性课件.ppt

1、MnSOD基因单核苷酸多态性与基因单核苷酸多态性与食管癌放疗敏感性的关系食管癌放疗敏感性的关系河北医科大学第四医院放疗科河北医科大学第四医院放疗科王雅棣王雅棣 程云杰程云杰 刘青刘青 2009.11.21研研 究究 背背 景景锰超氧化物歧化酶锰超氧化物歧化酶（ MnSOD ）存在于线粒体中，可使细存在于线粒体中，可使细胞代谢过程中产生的超氧阴离子（胞代谢过程中产生的超氧阴离子（ O2-. ）转化为）转化为H2O2，H2O2又在谷胱甘肽过氧化物酶（又在谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和过氧化氢酶（）和过氧化氢酶（ CAT ）两酶的作用下，生成水和氧，使细胞无毒化，）两酶的作用下，生成水和氧，使细胞无

2、毒化，是体是体内重要的抗氧化物质内重要的抗氧化物质 。 O2-. H2O2 H2OO2 研究背景研究背景放射治疗放射治疗直接作用：直接作用：放射线损伤放射线损伤DNA细胞死亡细胞死亡MnSOD间接作用：间接作用：H2O O2-、OH和和H自由基与生物大分子相互作用，自由基与生物大分子相互作用，形成不可逆损伤形成不可逆损伤放射线放射线研究背景研究背景MnSOD对放射敏感性的影响对放射敏感性的影响中国仓鼠卵巢细胞系中国仓鼠卵巢细胞系新型抑癌基因新型抑癌基因 胃癌、前列腺癌、乳腺癌等多种胃癌、前列腺癌、乳腺癌等多种 肿瘤组织中存在肿瘤组织中存在 MnSOD低表达低表达 或不表达或不表达 MnSOD

3、高表达使细胞转移能力高表达使细胞转移能力和肿瘤形成能力降低和肿瘤形成能力降低研究背景研究背景 染色体基因组水平染色体基因组水平上单个核苷酸变异引起的上单个核苷酸变异引起的DNA序列多态性。包括序列多态性。包括单碱基的单碱基的转换、颠换，转换、颠换，不不包括插入、缺失等其它的包括插入、缺失等其它的遗传变化类型遗传变化类型 。它是人。它是人类可遗传的变异中最常见类可遗传的变异中最常见的一种。的一种。 研究背景研究背景研究背景研究背景Sutton A et al. Pharmacogenetics 2003;13(3):145157 启动子上游第启动子上游第9位点位点TC缬氨酸缬氨酸(Val)丙氨酸

4、丙氨酸(Ala)Ala-MnSODT）SNP 延长了放疗后乳腺癌患者的无复发延长了放疗后乳腺癌患者的无复发 生存时间。生存时间。 研究背景研究背景研究目的研究目的 探讨探讨MnSOD基因启动子区上游第基因启动子区上游第9位点位点TC多态性与食管癌放射敏感多态性与食管癌放射敏感性的关系性的关系目目 的的材料与方法材料与方法 2006.92007.12 我科收治的食管鳞状细胞癌患者我科收治的食管鳞状细胞癌患者93例。例。 符合放疗入组标准，完成所有放疗计划且可行放疗后评价。符合放疗入组标准，完成所有放疗计划且可行放疗后评价。 材料与方法材料与方法入入 组组 标标 准准23例例照射范围：照射范围：食

5、管原发灶上下外扩食管原发灶上下外扩35 cm ，野宽，野宽58cm照射方式：照射方式：等中心照射技术，三野或四野照射，等中心照射技术，三野或四野照射， 照射剂量：照射剂量：6064 Gy/3032次次/66.5W普通普通70例例照射范围：照射范围： GTV：食管原发灶（长度以影像学和内镜检查为主要依据，食管原发灶（长度以影像学和内镜检查为主要依据， 前后左右以前后左右以CT显示大小）和长径显示大小）和长径1cm肿大淋巴结肿大淋巴结 CTV：临床靶区包括原发灶上下外扩临床靶区包括原发灶上下外扩3cm、周围外扩、周围外扩0.8 1.0cm 及相应的淋巴引流区及相应的淋巴引流区 PTV：计划靶区为计

6、划靶区为CTV均匀外扩均匀外扩0.5cm适形适形照射剂量：照射剂量： 6064Gy/3032次次/66.5W，材料与方法材料与方法疗疗 效效评评价价万钧等万钧等“食管癌近期疗效评价标准食管癌近期疗效评价标准”CR：X片上显示粘膜像，可见粘膜基本恢复正常或增粗；若食管钡餐造影充盈片边缘片上显示粘膜像，可见粘膜基本恢复正常或增粗；若食管钡餐造影充盈片边缘 光滑，钡剂通过顺利，但管壁可稍僵硬，管壁无狭窄或稍显狭窄，病变上最宽光滑，钡剂通过顺利，但管壁可稍僵硬，管壁无狭窄或稍显狭窄，病变上最宽处处 横径与病变最狭窄处横径之比，小于或等于横径与病变最狭窄处横径之比，小于或等于1.5PR：食管钡餐食管走行

7、无明显扭曲或成角，无明显溃疡，钡剂通过尚顺利，但边缘欠食管钡餐食管走行无明显扭曲或成角，无明显溃疡，钡剂通过尚顺利，但边缘欠 光滑，有小的充盈缺损及或小龛影，或边缘虽光滑，但管腔有明显的狭窄，病光滑，有小的充盈缺损及或小龛影，或边缘虽光滑，但管腔有明显的狭窄，病变变 上最宽处横径与病变最狭窄处横径之比大于上最宽处横径与病变最狭窄处横径之比大于1.5NR：食管钡餐片病变仍有残留或看不出病变有明显好转，食管钡餐片病变仍有残留或看不出病变有明显好转， 仍有明显的充盈缺损及龛影仍有明显的充盈缺损及龛影 或狭窄加重或狭窄加重材料与方法材料与方法疗效评价疗效评价疗疗 效效评评价价材料与方法材料与方法随访截

8、止时间为随访截止时间为2009年年2月月22日，共计随访患日，共计随访患者者93例，失访例，失访3例，随访率例，随访率97%，总体中位生，总体中位生存时间（存时间（median survival time，MST）18.0个月。个月。 疗效评价疗效评价提取基因组提取基因组DNADNAPCR-RFLPPCR-RFLPMnSODMnSOD基因型分析基因型分析采集外周血采集外周血5ml5ml各组间基因型分析各组间基因型分析食管癌患者食管癌患者材料与方法材料与方法PCR-RFLP（聚合酶链反应（聚合酶链反应-限制性片段长度多态性）限制性片段长度多态性）预变性预变性预变性：预变性：95 5min变变 性

9、：性： 95 30s退退 火：火：64.5 30s延延 伸：伸：72 1min延延 伸：伸： 72 5min 延伸延伸35个循环个循环上游引物上游引物： 5 -ACCAGCAGGCAGCTGGCGCCGG-3下游引物：下游引物： 5 -GCGTTGATGTGAGGTTCCAG-3材料与方法材料与方法 卡方检验分析不同MnSOD基因型之间 即期疗效的差异 采用Kaplan-Meier法计算生存率，差异 显著性检验采用Logrank法检验 分析不同MnSOD基因型之间预后的差 异，显著性水平为P0.05C/C或或C/T262273%结结 果果讨讨 论论讨讨 论论 讨讨 论论 缬氨酸缬氨酸(Val)

10、丙氨酸丙氨酸(Ala)Ala-MnSODVal-MnSODMnSOD 启动子上游启动子上游第第9位点位点TC多态多态MnSOD活性活性放射敏感性放射敏感性ROS清除能力清除能力结结 论论 病变长度病变长度5cm患者中，携带患者中，携带T/C或或C/C基因型患基因型患者即期疗效优于携带者即期疗效优于携带T/T基因型患者，即基因型患者，即MnSOD（T/CC/C）基因型增加了病变长度）基因型增加了病变长度5cm食管癌食管癌患者的放疗敏感性。患者的放疗敏感性。结结 论论 本研究显示：携带本研究显示：携带MnSOD （T/C+C/C）基因型）基因型患者患者1年生存率为年生存率为73%，好于携带，好于携带MnSOD（T/T）基）基因型患者一年生存率因型患者一年生存率68%，但未显出统计学差异，可，但未显出统计学差异，可能与病例数少，或观察时间短有关，有待于加大样本能与病例数少，或观察时间短有关，有待于加大样本量及进一步随访，以期得出可靠的结论。量及进一步随访，以期得出可靠的结论。 结结 论论 谢谢！