呼吸道九联检病原体检测及其临床意义资料讲解课件.ppt

1、呼吸道感染呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统分为上呼吸道感染和下呼吸道感染上呼吸道感染常见急性上呼吸道感染，指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称，是呼吸道最常见的一种传染病常见病因为病毒，少数由细菌引起。患者不分年龄、性别、职业和地区。不仅具有较强的传染性，而且可引起严重并发症下呼吸道感染包括急性气管/支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起，其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则，治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素呼吸道病原体常见的呼吸道病原体主要有病毒、细菌、支原体、衣原体和立克次体等据统计，9

2、0%以上急性呼吸道感染由病毒引起一种病原体可引起多种临床症状，同一临床表现可由多种病原体引起（三）真菌性肺炎白色念珠菌肺炎白色念珠菌肺炎 社区获得性肺炎l社区获得性肺炎社区获得性肺炎（community-acquired pneumonia, community-acquired pneumonia, CAPCAP）是指在非医院环境中受感染因子侵袭所发生的肺部）是指在非医院环境中受感染因子侵袭所发生的肺部炎症，以及住院后炎症，以及住院后4848小时内或特殊病原菌在潜伏期小时内或特殊病原菌在潜伏期1010天天内所患肺炎，又称院外获得性肺炎。内所患肺炎，又称院外获得性肺炎。这种肺炎之所以被这种肺炎

3、之所以被叫做叫做”社区获得性肺炎社区获得性肺炎”是由于它很容易从社区中的一个是由于它很容易从社区中的一个成员传播到另一个成员传播到另一个。lCAPCAP的发病率为的发病率为4.7%-11.6%4.7%-11.6%，其中，其中22%-51%22%-51%的的CAPCAP需住院需住院治疗；住院治疗；住院CAPCAP死亡率死亡率7%7%，重症，重症CAPCAP死亡率死亡率29%29%。（数据来。（数据来自西班牙）自西班牙） 社区获得性肺炎 美国：感染率美国：感染率第一位第一位的疾病的疾病美国：每年美国：每年560560万万感染肺炎，感染率感染肺炎，感染率5-105-10人人/1000/1000人人/

4、 /年年WHOWHO：第二大第二大死因，仅次于心血管疾病死因，仅次于心血管疾病中国：中国：第五大第五大死因死因中国：儿童死亡的中国：儿童死亡的第一第一病因病因 各国社区获得性肺炎指南对非典型病原体的重视情况各国社区获得性肺炎指南对非典型病原体的重视情况肺炎的诊断与治疗研究进展肺炎的诊断与治疗研究进展数据来源：数据来源：重视非典型病原体在重视非典型病原体在CAP致病中的作用致病中的作用要重视非典型病原体在小儿呼吸道疾病中的致病作用等要重视非典型病原体在小儿呼吸道疾病中的致病作用等呼吸道病原菌合并感染的分析119例小儿肺炎细菌感染97例，细菌感染及肺炎支原体同时感染19例。 -检验医学与临床200

5、9年12月第6卷第23期在SARS发病前阶段，合并MP感染阳性率为693 (3956) ；发病后阶段，合并MP感染阳性率为l86 (843） -Joumal of Tropical Medicine Vo13 No3 Sep2003Mpn和Cpn合并阳性有27例占总阳性数的450 -中国优生与遗传杂志2001年第9卷第3期9例(12)患儿MP-IgM 和CpnIgM 同时阳性； -世界感染杂志2006年第6卷第4期本次调查同时检测了8种感染呼吸道的常见病毒，结果提示Mp、Cp多混合有病毒感染。 -中国人兽共患病杂志：1002-2694(2005)030269-02社区获得性肺炎非典型呼吸道病原

6、体这些病原体变异快，传播广，由于不易形成长期免疫力而难以预防和控制 流感病毒 副流感病毒病毒 呼吸道合胞病毒 腺病毒 呼吸道病原体检测现有的主要方法：病毒分离培养抗原检测抗体检测分子生物学方法等检测方法的比较采样抗原检测拭子伸入鼻部后向鼻咽部水平伸入，不是向鼻腔伸入。 伸入距离为从耳垂部到鼻尖长度的一半，一般针对两周岁以下儿童，伸入距离约为拭子绒毛头的长度两倍拭子伸入后要轻轻捻动拭子转3圈。 取样后在一小时之内洗脱到生理盐水中，12小时内送检抗原检测采样采样对结果影响较大非典型感染多为干咳，无痰/少痰阳性率低（标本问题，病毒颗粒小）抗原在体内存在时间短抗原检测的劣势采样抗体检测九项呼吸道病原体

7、IgM抗体检测试剂九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测常见检测的九种非典型病原体l嗜肺军团菌嗜肺军团菌l肺炎支原体肺炎支原体lQ Q热立克次体热立克次体l肺炎衣原体肺炎衣原体l腺病毒腺病毒l呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒l流感病毒流感病毒( (甲型、乙型甲型、乙型) )l副流感病毒副流感病毒嗜肺军团菌l广泛分布于天然淡水或人工水域，革兰氏阴性短杆菌广泛分布于天然淡水或人工水域，革兰氏阴性短杆菌l易感人群：通常为老年人、儿童、吸烟者、等免疫功能易感人群：通常为老年人、儿童、吸烟者、等免疫功能低下者。低下者。l流行：夏秋季节。尤其是在装有中央空调的封闭空间内流行：夏秋季节。尤其是在装有中央空调的封闭空

8、间内易爆发。易爆发。l军团菌肺炎潜伏期为军团菌肺炎潜伏期为2-102-10天，症状：发冷、不适、肌痛、天，症状：发冷、不适、肌痛、头晕、头痛，并有烦躁、呼吸困难、胸痛。头晕、头痛，并有烦躁、呼吸困难、胸痛。IgMIgM抗体在感抗体在感染后染后1 1周左右出现，并可持续存在周左右出现，并可持续存在3-63-6个月。个月。l我国各省市每年均有病例报告。阳性率我国各省市每年均有病例报告。阳性率2%-5%2%-5%肺炎支原体 肺炎支原体，是介于病毒与细菌之间的一种没有细胞肺炎支原体，是介于病毒与细菌之间的一种没有细胞壁的病原体壁的病原体l经经14-2114-21天的潜伏期开始发病，患者有头痛、乏力、无

9、天的潜伏期开始发病，患者有头痛、乏力、无力干咳等症状力干咳等症状lIgMIgM抗体一般在感染后抗体一般在感染后1 1周出现，周出现，3-43-4周达到高峰，可持周达到高峰，可持续存在续存在3-63-6个月个月l学龄儿童、婴幼儿、青少年患病较多，儿童中最典型的学龄儿童、婴幼儿、青少年患病较多，儿童中最典型的综合症是气管支气管炎，综合症是气管支气管炎，许多成年感染者是无临床症状的许多成年感染者是无临床症状的l社区获得性肺炎患者中由肺炎支原体引起的达社区获得性肺炎患者中由肺炎支原体引起的达40%l冬季较多，地区性流行冬季较多，地区性流行Q热立克次体lQ Q热立克次体，是介于最小细菌和病毒之间的一类独

10、特的严格在活热立克次体，是介于最小细菌和病毒之间的一类独特的严格在活细胞内寄生的原核细胞型微生物细胞内寄生的原核细胞型微生物 l病原体储存于动物中，传染源主要是受染的牛，羊等家畜，在动物间病原体储存于动物中，传染源主要是受染的牛，羊等家畜，在动物间以蜱传播。动物感染后多无症状，但乳汁，尿，粪中可长期带有病原以蜱传播。动物感染后多无症状，但乳汁，尿，粪中可长期带有病原体。对人的感染力特别强，是立克次体中唯一可不借助于媒介节肢动体。对人的感染力特别强，是立克次体中唯一可不借助于媒介节肢动物而通过感染动物的排泄物污染环境后，通过接触气溶胶感染呼吸道。物而通过感染动物的排泄物污染环境后，通过接触气溶胶

11、感染呼吸道。消化道等途径感染。消化道等途径感染。l大部分病例发于春天或是初夏。其流行行分布全世界，我国吉林、四大部分病例发于春天或是初夏。其流行行分布全世界，我国吉林、四川、云南、新疆、西藏、广西、福建、贵州等十几个省市、自治区均川、云南、新疆、西藏、广西、福建、贵州等十几个省市、自治区均有本病流行。有本病流行。l其潜伏期其潜伏期12123939天，平均天，平均1818天。天。IgMIgM抗体一般在感染后抗体一般在感染后2 2周左右出现，周左右出现，4-84-8周达高峰，可持续存在周达高峰，可持续存在3-43-4个月。症状主要是高热，剧烈头痛，寒个月。症状主要是高热，剧烈头痛，寒颤，严重乏力，

12、肌痛，且常有胸痛，颤，严重乏力，肌痛，且常有胸痛， 体温升高。体温升高。l阳性率阳性率1%-2%1%-2%肺炎衣原体l肺炎衣原体是一种比细菌小但比病毒大的生物，专性细肺炎衣原体是一种比细菌小但比病毒大的生物，专性细胞内寄生胞内寄生l感染方式：人与人可通过呼吸道分泌物传播感染方式：人与人可通过呼吸道分泌物传播l8岁以上儿童岁以上儿童易被感染，尤其是人群聚集处。肺炎衣原易被感染，尤其是人群聚集处。肺炎衣原体肺炎占社区获得性肺炎比例的体肺炎占社区获得性肺炎比例的10%10%左右左右l多数起病缓慢，潜伏期多数起病缓慢，潜伏期3030天左右，天左右，IgMIgM抗体在发病抗体在发病2-32-3周周出现，

13、一般来说可持续存在出现，一般来说可持续存在2-62-6个月。临床开始出现流感个月。临床开始出现流感样的症状如咽痛、头痛、发热。样的症状如咽痛、头痛、发热。l阳性率一般在阳性率一般在1-5%1-5%左右左右腺病毒l腺病毒是一种无外壳的双链腺病毒是一种无外壳的双链DNADNA病毒，其很多与人类上、病毒，其很多与人类上、下呼吸道感染密切有关。下呼吸道感染密切有关。 l腺病毒肺炎多发生于腺病毒肺炎多发生于7 72424月婴幼儿月婴幼儿。l起病时潜伏期起病时潜伏期2-142-14天，天，IgMIgM抗体在发病抗体在发病1 1周左右出现，可周左右出现，可持续存在持续存在2-32-3个月。个月。l冬春两季常

14、见，腺病毒肺炎约占病毒性肺炎的冬春两季常见，腺病毒肺炎约占病毒性肺炎的20%20%30%30%。l阳性率：阳性率：15%-25%15%-25%，居病毒性肺炎的第二位；，居病毒性肺炎的第二位；呼吸道合胞病毒l呼吸道合胞病毒是呼吸道合胞病毒是RNARNA病毒；病毒； l呼吸道合胞病毒（呼吸道合胞病毒（RSVRSV）是婴幼儿下呼吸道感）是婴幼儿下呼吸道感染染( (包括毛细支气管炎和肺炎包括毛细支气管炎和肺炎) )最重要的病因之一，最重要的病因之一，可能是致命性的；在年长儿和成年人中也非常常可能是致命性的；在年长儿和成年人中也非常常见见。l在冬季爆发流行。呼吸道合胞病毒感染的潜伏在冬季爆发流行。呼吸道

15、合胞病毒感染的潜伏期为期为3-73-7天，天，IgMIgM抗体在发病抗体在发病1 1周左右出现，可持周左右出现，可持续存在续存在2 23 3个月；个月；l占病毒性肺炎的占病毒性肺炎的25%-35%25%-35%左右；位居儿童病毒左右；位居儿童病毒性肺炎第一位性肺炎第一位；流感病毒l流行性感冒流行性感冒病毒是一种造成人类及动物患流行性感冒的病毒是一种造成人类及动物患流行性感冒的RNARNA病毒，呈球形；根据其核蛋白的抗原性可以分为三类病毒，呈球形；根据其核蛋白的抗原性可以分为三类: :甲型、甲型、乙型、丙型乙型、丙型l该病毒呈季节性周期性流行爆发（该病毒呈季节性周期性流行爆发（1212月月-4-

16、4月）月） l甲型流感的流行每年都会发生甲型流感的流行每年都会发生 l乙型流感的流行只在每乙型流感的流行只在每3-63-6年爆发一次，感染人数超过总人年爆发一次，感染人数超过总人口的口的25%25%l流感病毒的潜伏期为流感病毒的潜伏期为1-71-7天，天，IgMIgM抗体在发病抗体在发病1 1周左右出现，周左右出现，可持续存在可持续存在2-32-3个月个月副流感病毒l常常引起儿童下呼吸道感染的一种病毒，其致病性仅次于常常引起儿童下呼吸道感染的一种病毒，其致病性仅次于呼吸道合胞病毒，它是单链的呼吸道合胞病毒，它是单链的RNA病毒病毒l副流感病毒的潜伏期为副流感病毒的潜伏期为2-7天，天，IgM抗

17、体在发病抗体在发病1周左右出周左右出现，可持续存在现，可持续存在2-3个月个月 l副流感病毒感染全年均可发生，第副流感病毒感染全年均可发生，第1和第和第2型副流感病毒感型副流感病毒感染常见于幼儿，局部流行发生于托儿所，儿科病房，小学及染常见于幼儿，局部流行发生于托儿所，儿科病房，小学及其他儿童场所。第其他儿童场所。第3型为地方性流行，传染性强型为地方性流行，传染性强l阳性率：阳性率：10%-20%l临床无法做出副流感的诊断，只能通过实验室检测来诊断临床无法做出副流感的诊断，只能通过实验室检测来诊断检测原理间接免疫荧光法（IFA）是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。样本中存在

18、的特异性抗体和抗原反应，未与抗原结合的免疫球蛋白在洗涤步骤中除去。在下一步骤中，抗原-抗体复合物与荧光素标记的抗人球蛋白反应，用免疫荧光显微镜观察结果实验步骤1样本的稀释：血清标本与PBS按1:1比例稀释稀释后的血清加入吸附剂中，彻底混匀。处理后的血清要离心10-15分钟除去沉淀，以防干扰检测实验步骤2嗜肺军团菌阴性：荧光弱、少、不规则嗜肺军团菌阳性：荧光密集，且亮度较好，杆状形态肺炎支原体阴性：红色细胞周围无或少量荧光，亮度弱肺炎支原体阳性：荧光占视野50%以上，亮度好，形态为明显的细胞膜或胞浆Q热立克次体阴性：荧光弱、少、不规则Q热立克次体阳性：荧光亮度强且数量多，形态典型肺炎衣原体阴性：

19、荧光弱、少肺炎衣原体阳性：荧光密集，且亮度较好腺病毒阴性：荧光弱、少腺病毒阳性：荧光亮度强且数量多，平均每个视野的阳性细胞3-5个呼吸道合胞病毒阴性：荧光弱、少呼吸道合胞病毒阳性：荧光亮度强且数量多，平均每个视野的阳性细胞3-5个甲型流感病毒阴性：荧光弱、少甲型流感病毒阳性：荧光亮度强且数量多，平均每个视野的阳性细胞3-5个乙型流感病毒阴性：荧光弱、少乙型流感病毒阳性：荧光亮度强且数量多，平均每个视野的阳性细胞3-5个副流感病毒阴性：荧光弱、少副流感病毒阳性：荧光亮度强且数量多，平均每个视野的阳性细胞3-5个总结1 、 一卡九项，范围更广，不仅可以检测五项病毒，而且可以检测肺炎支原体、肺炎衣原体、嗜肺军团菌、Q热立克次体2、检测IgM抗体，利于早期发现，采用间接免疫荧光法，操作简便，结果快速3、标本为血清标本，容易采集、容易保存4、镜下荧光形态清晰，容易判定5、观察荧光，准确性好6、准确检测出哪种病原体感染，能为临床诊断、治疗提供强有力的帮助