性病的试验室检测及其意义课件.ppt

1、性病的实验室检测及其意义性病的实验室检测及其意义 上海市皮肤病医院上海市皮肤病医院周平玉周平玉淋病的实验室诊断淋病的实验室诊断 淋病的主要实验室诊断方法淋病的主要实验室诊断方法 直接显微镜检查；直接显微镜检查； 分离培养淋球菌；分离培养淋球菌； 非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原 或或DNADNA（EIA, PCR/LCREIA, PCR/LCR） 显微镜检查的临床意义显微镜检查的临床意义 男性尿道标本男性尿道标本: 多形核细胞内见到形态典型的革兰阴性双球菌多形核细胞内见到形态典型的革兰阴性双球菌具诊断价值具诊断价值 敏感性及特异性：敏感性及特异性：95%99

2、% 宫颈标本、无症状男性尿道标本宫颈标本、无症状男性尿道标本 敏感性：敏感性：4070% 不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌感染。感染。 如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性双球菌，需进一步培养确认双球菌，需进一步培养确认。 淋球菌培养淋球菌培养n培养法为诊断淋病的金标准。培养法为诊断淋病的金标准。 从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。从选择性培养基上分离出淋球菌即可诊断淋病。n初步鉴定淋球菌的主要依据初步鉴定淋球菌的主要依据 菌落特征菌落特征 氧化酶试验氧化酶试验 革兰染色革兰染色淋球菌培养的的临

3、床意义淋球菌培养的的临床意义 n培养特异性：培养特异性：100%，敏感性，敏感性 81-100% 。n宫颈、无症状男性尿道、直肠、咽部标本等宫颈、无症状男性尿道、直肠、咽部标本等应做淋球菌培养应做淋球菌培养n可发现无症状淋球菌感染患者；可发现无症状淋球菌感染患者；n可用于进一步作药敏试验；可用于进一步作药敏试验；n可用于治疗后的判愈试验。可用于治疗后的判愈试验。淋病其它诊断技术淋病其它诊断技术核酸检测的特点及临床意义核酸检测的特点及临床意义 不依赖于活的病原体的存在，无需特殊运送条件；不依赖于活的病原体的存在，无需特殊运送条件； 敏感性高，不仅适合尿道或宫颈标本，还可以采用敏感性高，不仅适合尿

4、道或宫颈标本，还可以采用尿液、阴道标本；尿液、阴道标本； 不能进行抗生素敏感性试验；不能进行抗生素敏感性试验； 用于判愈试验需在治疗后至少用于判愈试验需在治疗后至少3 周以上进行周以上进行.沙眼衣原体感染的实验室诊断沙眼衣原体感染的实验室诊断 细胞培养法细胞培养法 免疫层析快速抗原检测免疫层析快速抗原检测 酶联免疫抗原检测酶联免疫抗原检测 核酸扩增检测核酸扩增检测衣原体培养的临床意义衣原体培养的临床意义 敏感性敏感性70708080 特异性特异性100100 可用于判愈可用于判愈 可用于确诊可用于确诊 缺点缺点 费时（需费时（需3 35 5天），费力，技术要求高天），费力，技术要求高 不宜作为

5、临床常规检查不宜作为临床常规检查 不宜用于大规模的筛查和流行病学调查不宜用于大规模的筛查和流行病学调查衣原体抗原快速检测的临床意义衣原体抗原快速检测的临床意义优点：优点：简易，方便，快速，尤其简易，方便，快速，尤其适用于基层单位适用于基层单位宫颈标本宫颈标本阴道标本阴道标本敏感性敏感性50%33%特异性特异性98%99%缺点：缺点：标本中需要足够数量的沙眼衣标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原，否则有假阴性结果原体抗原，否则有假阴性结果现有的核酸检测方法现有的核酸检测方法 PCR PCR LCR LCR SDA SDA TMA TMA Real time PCRReal time PCR衣原体核

6、酸检测衣原体核酸检测优优 点点: :敏感性：敏感性：-98-98 特异性特异性: -99: -99 缺缺 点：点：实验室条件和技术要求高实验室条件和技术要求高 成本高成本高、费时费时、假阳性假阳性衣原体核酸检测的临床意义衣原体核酸检测的临床意义 生殖器疱疹实验室诊断生殖器疱疹实验室诊断HSV实验室诊断的意义实验室诊断的意义 临床诊断的准确性：临床诊断的准确性：50%70%，通过实验室检测手段，通过实验室检测手段可帮助诊断可帮助诊断 亚临床感染亚临床感染: 孕妇、性伴的检测等孕妇、性伴的检测等进行进行HSV分型的意义分型的意义 HSV-2是该病的主要病原体，是该病的主要病原体， HSV-1约占该

7、病的约占该病的30% 两型两型HSV感染的预后不同感染的预后不同生殖器疱疹实验室诊断方法生殖器疱疹实验室诊断方法病原学诊断病原学诊断 病毒检测病毒检测 抗原检测抗原检测 DNA检测检测血清学检测血清学检测-抗体检测抗体检测 HSV血清学检测的意义血清学检测的意义nHSVHSV感染的血清流行病学调查感染的血清流行病学调查n感染者性伴的感染者性伴的HSVHSV感染状况的判断感染状况的判断n孕妇产前监测孕妇产前监测 HSVHSV型特异性血清抗体检测是发现亚临床及无症型特异性血清抗体检测是发现亚临床及无症状生殖器状生殖器HSVHSV感染者的最可行手段，对于防止性伴间感染者的最可行手段，对于防止性伴间和

8、母婴间和母婴间HSVHSV传播有着重要意义传播有着重要意义HPV-DNA检测的意义检测的意义nHPVHPV感染流行病学调查感染流行病学调查nHPV DNA定型定型 高危型高危型HPV病毒负荷的增加可使病毒负荷的增加可使女性发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险显著增加女性发生宫颈癌及宫颈癌前病变的风险显著增加 梅毒实验室监测及临床意义梅毒实验室监测及临床意义 梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体苍白亚种梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum)，是一种小而纤细的是一种小而纤细的螺旋状微生物，长螺旋状微生物，长515 m，直径约直径约0.2

9、m，活体活体平均有平均有814个规则的螺旋。个规则的螺旋。 梅毒螺旋体透明而不易被染色，在普通显微镜梅毒螺旋体透明而不易被染色，在普通显微镜下不易发现，只有在暗视野显微镜、免疫荧光下不易发现，只有在暗视野显微镜、免疫荧光或或Fontana镀银染色等特殊染色下才能观察到镀银染色等特殊染色下才能观察到。 梅毒螺旋体在体外不易生存，离开人体很快死梅毒螺旋体在体外不易生存，离开人体很快死亡，其生存最适温度为亡，其生存最适温度为37。煮沸、干燥、肥。煮沸、干燥、肥皂水以及一般的消毒剂很容易将其杀死。皂水以及一般的消毒剂很容易将其杀死。 梅毒螺旋体不耐热，加热至梅毒螺旋体不耐热，加热至42 2个小时可将个

10、小时可将它杀死，它杀死，100时立即死亡；但耐低温，在时立即死亡；但耐低温，在0时可存活时可存活48小时，置于小时，置于-78数年仍具有传染数年仍具有传染性。性。 梅毒螺旋体尚不能在体外培养繁殖，人是其唯梅毒螺旋体尚不能在体外培养繁殖，人是其唯一的自然宿主。梅毒螺旋体可在家兔睾丸中生一的自然宿主。梅毒螺旋体可在家兔睾丸中生长繁殖，用于抗原制备和实验研究。长繁殖，用于抗原制备和实验研究。 梅毒螺旋体传代时间为梅毒螺旋体传代时间为3033小时，繁殖方式主小时，繁殖方式主要为横断分裂。要为横断分裂。 1998年完成了梅毒螺旋体全基因组测序。年完成了梅毒螺旋体全基因组测序。梅毒实验室检测的特点梅毒实验

11、室检测的特点病原学检测病原学检测血清学检测血清学检测非梅毒螺旋体抗原血清学检测非梅毒螺旋体抗原血清学检测梅毒螺旋体抗原血清学检测梅毒螺旋体抗原血清学检测暗视野显微镜检查暗视野显微镜检查VDRLFTA-ABS银染色镜检银染色镜检USRTPPA/ APHA核酸检测核酸检测RPRELISATRUST发光法发光法 胶体金法胶体金法不同原理的方法：检测策略不同原理的方法：检测策略临床意义解释复杂：不同方法结果判断、血清固定、前带现象临床意义解释复杂：不同方法结果判断、血清固定、前带现象缺乏特殊梅毒的有效检测方法：胎传梅毒、神经梅毒缺乏特殊梅毒的有效检测方法：胎传梅毒、神经梅毒 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺

12、旋体暗视野检查 原理原理 暗视野映光检查是采用一个特殊的聚光器，分为干系暗视野映光检查是采用一个特殊的聚光器，分为干系和湿系两种，其中央均为黑漆所遮蔽，仅在圆周边留和湿系两种，其中央均为黑漆所遮蔽，仅在圆周边留有光线斜角处，光线只可从其圆周边缘斜角射到载玻有光线斜角处，光线只可从其圆周边缘斜角射到载玻片上。梅毒螺旋体检查一般采用湿系聚光器。倘若斜片上。梅毒螺旋体检查一般采用湿系聚光器。倘若斜射光线遇到载玻片上的物体，如螺旋体等，物体会发射光线遇到载玻片上的物体，如螺旋体等，物体会发光显现。本法检查梅毒螺旋体对于梅毒有病原学诊断光显现。本法检查梅毒螺旋体对于梅毒有病原学诊断的价值。的价值。 梅毒

13、螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 材料材料 暗视野显微镜、钝刀（刮勺）、载玻片、注射器、暗视野显微镜、钝刀（刮勺）、载玻片、注射器、注射针头、无菌等渗盐水。注射针头、无菌等渗盐水。 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 取材取材 皮肤粘膜损害取材：首先在载玻片（厚度为皮肤粘膜损害取材：首先在载玻片（厚度为1.01.01.21.2mmmm）上滴加上滴加5050100100LL盐水备用。然后用棉拭子盐水备用。然后用棉拭子取无菌盐水轻轻擦去皮损上的污物。如皮损上有痂取无菌盐水轻轻擦去皮损上的污物。如皮损上有痂皮，可用钝刀小心除去。再用钝刀轻轻地刮数次（皮，可用钝刀小心除去。再用钝刀轻轻地刮数

14、次（避免出血），取组织渗液与载玻片上的盐水混匀，避免出血），取组织渗液与载玻片上的盐水混匀，加盖玻片置暗视野显微镜下检查。加盖玻片置暗视野显微镜下检查。 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 取材取材 淋巴结取材：消毒淋巴结表面皮肤，用无菌干棉球淋巴结取材：消毒淋巴结表面皮肤，用无菌干棉球擦干。用擦干。用1 1mLmL无菌注射器配无菌注射器配1212号针头，吸取无菌等渗号针头，吸取无菌等渗盐水盐水0.250.250.50.5mLmL，以无菌操作穿刺淋巴结并注入盐以无菌操作穿刺淋巴结并注入盐水，再吸入注射器内，反复水，再吸入注射器内，反复2 23 3次后，取少量淋巴次后，取少量淋巴液于载玻片

15、上，加盖玻片，置暗视野显微镜下检查液于载玻片上，加盖玻片，置暗视野显微镜下检查 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 方法方法 在暗视野聚光器（此法用湿系暗视野聚光器）上加在暗视野聚光器（此法用湿系暗视野聚光器）上加一滴甘油缓冲液（甘油和一滴甘油缓冲液（甘油和0.10.1mol/L PBSmol/L PBS，pH 7.0pH 7.0按按7:37:3配制）。配制）。 载玻片置载物台上，上升聚光器使甘油缓冲液接触载玻片置载物台上，上升聚光器使甘油缓冲液接触载玻片，先用载玻片，先用1010倍物镜，使物像清晰，再用倍物镜，使物像清晰，再用4040倍物倍物镜观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体

16、镜观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 结果及解释结果及解释 暗视野显微镜下，典型的梅毒螺旋体呈白色发光暗视野显微镜下，典型的梅毒螺旋体呈白色发光, 其其螺旋较密而均匀。运动规律，运动性较强，其运动螺旋较密而均匀。运动规律，运动性较强，其运动方式包括方式包括旋转式，围绕其长轴旋转；旋转式，围绕其长轴旋转；蛇行式蛇行式, 全全身弯曲如蛇行；身弯曲如蛇行；伸缩其螺旋间距离而移动。观察伸缩其螺旋间距离而移动。观察其运动形式有助于与其他螺旋体相鉴别。其运动形式有助于与其他螺旋体相鉴别。 梅毒螺旋体暗视野检查梅毒螺旋体暗视野检查 结果及解释结果及解释 未检

17、出螺旋体不能排除梅毒的诊断，阴性结果可能未检出螺旋体不能排除梅毒的诊断，阴性结果可能说明：说明：螺旋体数量不足螺旋体数量不足(单次暗视野显微镜检查阳单次暗视野显微镜检查阳性率小于性率小于50%)。患者已接受抗生素或杀灭梅毒螺患者已接受抗生素或杀灭梅毒螺旋体的药物治疗。旋体的药物治疗。损害接近自然消退。损害接近自然消退。损害不损害不是梅毒。是梅毒。 梅毒实验室检测的特点梅毒实验室检测的特点 临床表现临床表现 取材部位取材部位 检查方法检查方法一期梅毒一期梅毒 溃疡溃疡 淋巴结淋巴结 病原学检查病原学检查 血液血液 血清学检查血清学检查二期梅毒二期梅毒 皮损皮损 淋巴结淋巴结 病原学检查病原学检查

18、 血液血液 血清学检查血清学检查潜伏梅毒潜伏梅毒 血液血液 血清学检查血清学检查三期梅毒三期梅毒 血液血液血清学检查血清学检查 神经梅毒神经梅毒 血液血液血清学检查血清学检查 脑脊液脑脊液细胞、蛋白量检查细胞、蛋白量检查VDRL等等梅毒血清学检测原理梅毒血清学检测原理 当人体感染梅毒螺旋体后当人体感染梅毒螺旋体后4周周-10周左右，血周左右，血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性抗体（反应素）和抗梅毒螺旋体抗原的异性抗体（反应素）和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。这些抗体均可用免疫学方法进特异性抗体。这些抗体均可用免疫学方法进行检测，是辅助诊断梅毒的重

19、要手断行检测，是辅助诊断梅毒的重要手断.梅毒血清学检测梅毒血清学检测非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 性病研究实验室试验性病研究实验室试验（VDRLVDRL） 血浆反应素环状卡片试验血浆反应素环状卡片试验（RPRRPR、TRUSTTRUST）梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验 梅毒螺旋体血球凝集试验梅毒螺旋体血球凝集试验 （TPHATPHA） 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPATPPA） 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABSFTA-ABS）、）、 梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（梅毒螺旋体抗体酶联免疫

20、试验（ELSAELSA） 胶体金梅毒快速检测试验胶体金梅毒快速检测试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 早期梅毒硬下疳出现早期梅毒硬下疳出现1 1周周-2-2周后，血清可呈阳性。周后，血清可呈阳性。 非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速，敏非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速，敏感性和特异性较好。适用于梅毒的筛查。感性和特异性较好。适用于梅毒的筛查。 经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。观察、判愈、复发或再感染的指征。非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验存在假阳性反应存在假阳

21、性反应 技术性假阳性反应技术性假阳性反应 由于标本的保存不当（如细胞污染或溶由于标本的保存不当（如细胞污染或溶血）、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。血）、试剂质量差或过期、或实验室操作错误所造成。 生物学假阳性反应生物学假阳性反应 是由于患者有其他疾病、吸毒或生理状是由于患者有其他疾病、吸毒或生理状态发生变化，使梅毒血清试验出现阳性态发生变化，使梅毒血清试验出现阳性 非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 所有的非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本成分都是一所有的非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本成分都是一样的，包括样的，包括RPRRPR、TRUSTTRUST等等 基本成分是心磷

22、脂基本成分是心磷脂 卵磷脂和胆固醇卵磷脂和胆固醇 抗原抗体结合形成复合物、凝集成网状沉淀颗粒、肉抗原抗体结合形成复合物、凝集成网状沉淀颗粒、肉眼可观察结果眼可观察结果 方法敏感性和特异性都基本相似方法敏感性和特异性都基本相似非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 未经治疗的病人和部分经过治疗的患者未经治疗的病人和部分经过治疗的患者，其血清内的反应素可其血清内的反应素可长期存在。长期存在。 经正规治疗后，反应素可以逐渐减少，并可转为阴性经正规治疗后，反应素可以逐渐减少，并可转为阴性 早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后3 3个月，

23、其个月，其抗体滴度下降抗体滴度下降2 2个稀释度，个稀释度，6 6个月下降个月下降4 4个稀释度。个稀释度。 一期梅毒一期梅毒1 1年后绝大部分转为阴性年后绝大部分转为阴性 二期梅毒二期梅毒2 2年后大部分转为阴性。年后大部分转为阴性。 晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢，大部分病人血清反应晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢，大部分病人血清反应可能终身阳性。可能终身阳性。非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读1 1、性病研究实验室（、性病研究实验室（VDRLVDRL）玻片试验玻片试验 定性试验定性试验 a. a. 血清标本需血清标本需5656灭活灭活3030分钟备

24、用；分钟备用； b. b. 吸取吸取0.050.05mLmL血清放入玻片圈内，将血清涂开至整个圈内；血清放入玻片圈内，将血清涂开至整个圈内； c. c. 用标准针头加入用标准针头加入1 1滴滴VDRLVDRL抗原；抗原； d. d. 将玻片置旋转器上摇动将玻片置旋转器上摇动4 4 minmin，1801805 5次次/ /minmin，立即置立即置10101010倍显微镜下观察。倍显微镜下观察。非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读 大或中等大小的絮状物，液体清亮大或中等大小的絮状物，液体清亮: 3+-4+: 3+-4+强阳性反应强阳性反应 絮状物较小，液

25、体较清亮絮状物较小，液体较清亮: 2+ : 2+ 阳性反应阳性反应 絮状物较小，均匀分布，液体混浊絮状物较小，均匀分布，液体混浊 1+ 1+ 弱阳性反应弱阳性反应 抗原颗粒稍粗，无凝集抗原颗粒稍粗，无凝集 可疑可疑 抗原颗粒均匀，针状细小抗原颗粒均匀，针状细小: : 阴性反应阴性反应非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读定量试验定量试验a. a. 在反应板在反应板1 18 8孔各加等渗盐水孔各加等渗盐水0.05 0.05 mLmLb. b. 吸取吸取0.05 0.05 mLmL血清标本（血清已灭活）置第血清标本（血清已灭活）置第1 1孔与等渗盐水混孔与等渗

26、盐水混匀，吸取匀，吸取0.05 0.05 mLmL稀释液至第稀释液至第2 2孔混匀，再吸取孔混匀，再吸取0.05 0.05 mLmL至第至第3 3孔，如此连续稀释至第孔，如此连续稀释至第8 8孔，弃孔，弃0.05 0.05 mLmL稀释液。稀释度为原稀释液。稀释度为原倍、倍、1:21:2、1:41:4、1:81:8、1:161:16、1:321:32、1:641:64、1:1281:128，必要时可，必要时可稀释至更高倍数稀释至更高倍数c. c. 每个稀释度加入抗原每个稀释度加入抗原1 1滴滴d. d. 旋转速度和时间同定性试验旋转速度和时间同定性试验非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读非梅

27、毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读2 2、快速血浆反应素（、快速血浆反应素（RPRRPR）环状卡片试验环状卡片试验 RPR试验是试验是VDRL试验的一种改良方法。该法试验的一种改良方法。该法是在抗原中加入活性炭颗粒作为指示物，特制的白是在抗原中加入活性炭颗粒作为指示物，特制的白色纸卡替代了玻片。试验结果易于判断，肉眼即可色纸卡替代了玻片。试验结果易于判断，肉眼即可观察，血清不需灭活，也可用血浆进行检测，试验观察，血清不需灭活，也可用血浆进行检测，试验结果可保存。抗原放结果可保存。抗原放4冰箱可保存冰箱可保存1年。年。 非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读

28、定性试验定性试验a. a. 吸取吸取0.05 0.05 mLmL血清或血浆加于卡片圈内，并均匀地涂血清或血浆加于卡片圈内，并均匀地涂布在整个圈内（每张纸卡有布在整个圈内（每张纸卡有1010个或个或1212个反应圈）；个反应圈）；b. b. 将抗原轻轻摇匀，用标准针头吸取抗原，每个标本加将抗原轻轻摇匀，用标准针头吸取抗原，每个标本加1 1滴抗原；滴抗原；c. c. 将卡片置水平旋转器旋转将卡片置水平旋转器旋转8 8 minmin，1001005 5转转/ /minmin；d. d. 立即在明亮光线下观察结果。立即在明亮光线下观察结果。 非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读非梅毒螺旋体抗原血清试

29、验操作与结果解读中到大的黑色絮状物，液体清亮中到大的黑色絮状物，液体清亮 3+-4+ 3+-4+ 强阳性强阳性小到中的黑色絮状物，液体较清亮小到中的黑色絮状物，液体较清亮 2+ 2+ 阳性阳性小的黑色絮状物，液体混浊小的黑色絮状物，液体混浊 1+ 1+ 弱阳性弱阳性仅见活性炭颗粒集于中央一点或均匀分散仅见活性炭颗粒集于中央一点或均匀分散 阴性阴性非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读定量试验定量试验RPRRPR定量试验的指证与定量试验的指证与VDRLVDRL试验相同试验相同a.a.在圈内加入在圈内加入0.05 0.05 mLmL等渗盐水（一般作等渗盐水（一

30、般作6 68 8个稀释度），勿个稀释度），勿将盐水涂开将盐水涂开b. b. 吸取吸取0.05 0.05 mLmL血清或血浆作系列稀释（血清或血浆作系列稀释（1:21:21:641:64），当稀释），当稀释到最后的第到最后的第6 6孔时，弃去孔时，弃去0.05 0.05 mLmL稀释液。从第稀释液。从第6 6孔起将血清孔起将血清稀释液涂布整个圈内，再涂布第稀释液涂布整个圈内，再涂布第5 5孔，依此向前到第孔，依此向前到第1 1孔孔c. 滴加抗原，旋转时间、速度和观察结果同定性试验。滴加抗原，旋转时间、速度和观察结果同定性试验。 非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与结果解读非梅毒螺旋体抗原血清试验操作与

31、结果解读 甲苯胺红不加热血清试验（甲苯胺红不加热血清试验（TRUSTTRUST） TRUSTTRUST试验原理与试验原理与RPRRPR试验原理相同试验原理相同 唯唯TRUSTTRUST试验的抗原中加入甲苯胺红颗粒代替活性炭颗粒指示试验的抗原中加入甲苯胺红颗粒代替活性炭颗粒指示物，使阳性结果出现红色絮状现象，阴性结果见红色颗粒集于物，使阳性结果出现红色絮状现象，阴性结果见红色颗粒集于中央或均匀分散。中央或均匀分散。 TRUST TRUST试验方法及结果判断均与试验方法及结果判断均与RPRRPR试验相同。试验相同。非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 假阳性反应的处理假阳性反应的处

32、理q 技术性假阳性反应一般是由于操作错误引起的假阳性反应，经过技术性假阳性反应一般是由于操作错误引起的假阳性反应，经过重复试验即可除外。重复试验即可除外。q 对生物学假阳性反应，应做对生物学假阳性反应，应做TPHATPHA（TPPATPPA）等梅毒螺旋体抗原血清等梅毒螺旋体抗原血清学试验。学试验。非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 前带现象前带现象 指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性反应高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性反应的结果，而临床上又表现为二期梅毒，此时将血清的结果，而

33、临床上又表现为二期梅毒，此时将血清稀释后再进行试验，出现了阳性的结果，该现象称稀释后再进行试验，出现了阳性的结果，该现象称为前带现象。为前带现象。非梅毒螺旋体抗原血清学试验非梅毒螺旋体抗原血清学试验 耐血清性（血清固定耐血清性（血清固定） 晚期耐血清性与梅毒的类型及开始治疗的时间早晚期耐血清性与梅毒的类型及开始治疗的时间早晚有关。晚期耐血清性病人已经足够量的治疗后，晚有关。晚期耐血清性病人已经足够量的治疗后，即使再予更多地或无限制地治疗也不能使血清滴度即使再予更多地或无限制地治疗也不能使血清滴度降低。对于这种病人，需经过详细的检查，除外神降低。对于这种病人，需经过详细的检查，除外神经、心脏与其

34、他内脏梅毒后，作定期随访。经、心脏与其他内脏梅毒后，作定期随访。梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验 采用梅毒螺旋体作抗原，是特异性的抗原体反应，用以检采用梅毒螺旋体作抗原，是特异性的抗原体反应，用以检测梅毒测梅毒IgMIgM、IgGIgG抗体。起特异性强，很少出现假阳性。抗体。起特异性强，很少出现假阳性。 梅毒螺旋体试验的作用是作为证实试验，帮助确定非梅毒梅毒螺旋体试验的作用是作为证实试验，帮助确定非梅毒螺旋体试验阳性反应是真阳性还是假阳性。螺旋体试验阳性反应是真阳性还是假阳性。梅毒螺旋体抗原血清学试验梅毒螺旋体抗原血清学试验 一般螺旋体抗原试验阳性患者，即使经过抗梅治疗一般螺旋

35、体抗原试验阳性患者，即使经过抗梅治疗，由于免疫细胞的记忆作用，抗体可终生阳性，因，由于免疫细胞的记忆作用，抗体可终生阳性，因此这些试验不能作为疗效观察的指标。此这些试验不能作为疗效观察的指标。 先天梅毒的实验室诊断方法先天梅毒的实验室诊断方法 依据实验指标诊断依据实验指标诊断 查到螺旋体查到螺旋体 其抗心磷脂抗体滴度持续上升其抗心磷脂抗体滴度持续上升 其抗心磷脂抗体滴度高于其母亲四倍其抗心磷脂抗体滴度高于其母亲四倍 检测抗梅毒的检测抗梅毒的IgMIgM特异性抗体阳性特异性抗体阳性神经梅毒的实验室检查 不能仅凭某一项试验不能仅凭某一项试验 前提前提 非梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性和梅毒螺非梅毒螺

36、旋体抗原血清学试验阳性和梅毒螺旋体抗原血清学试验阳旋体抗原血清学试验阳神经梅毒的实验室诊断神经梅毒的实验室诊断 细胞计数：正常时白细胞数应细胞计数：正常时白细胞数应3101010106 6L L，提示中枢神经系统有炎症现象；提示中枢神经系统有炎症现象； 蛋白量测定：总蛋白量正常为蛋白量测定：总蛋白量正常为0.1-0.40.1-0.4g/Lg/L，神经梅神经梅毒可稍升高，或高达毒可稍升高，或高达1.0-2.01.0-2.0g/Lg/L，2 2 一巨球蛋白、一巨球蛋白、IgGIgG特别是特别是IgMIgM也升高；也升高； 抗心磷脂抗体试验：作抗心磷脂抗体试验：作VDRLVDRL试验，但部分活动性神试验，但部分活动性神经梅毒此试验可呈阴性反应。经梅毒此试验可呈阴性反应。 确诊病例：确诊病例： 白细胞计数白细胞计数10 106/L，蛋白量蛋白量500mg/L，且无且无其他引起这些异常的原因其他引起这些异常的原因 脑脊液脑脊液VDRL试验或试验或FTA-ABS试验阳性试验阳性 无条件做后两项试验时，可行无条件做后两项试验时，可行RPR或或TPPA试验试验上海市皮肤病医院上海市皮肤病医院