药物分析课件第十三章.pptx

1、目 录CONTENTS绪论第一章 药品质量研究的内容与药典概况第二章 药物的鉴别试验第三章 药物的杂质检查第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药物的分析第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析第十章 巴比妥及苯二氮类镇静催眠药物的分析第十一章 吩噻嗪类抗精神病药物的分析第十二章 喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析第十四章 维生素类药物的分析第十五章 甾体激素类药物的分析第十六章 抗生素类药物的分析第十七章 合成抗菌药物的分析第十八章 药物制剂分析概论第十九章 中药材及

2、其制剂分析概论第二十章 生物制品分析第二十一章 药品质量控制中现代分析方法的进展第四章 药物的含量测定与分析方法的验证第五章 体内药物分析2 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析学习要求掌握了解熟悉莨菪烷类抗胆碱药物的结构特征、理化性质、鉴别和含量测定的基本原理与方法。了解其他分析方法在莨菪烷类药物分析中的应用 本类药物含量测定的酸性比色法，非水滴定法和HPLC法。3 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪（莨菪（Semen Semen HyoscyamiHyoscyami）本草纲目本草纲目一年或二年生草本植物。生于林边、田野、路旁

3、等处，有少量栽培。干燥的成熟种子可入药，于夏、秋间采摘炮制。其性温，味苦辛，入心、胃、肝三经，有毒，具有定痫、止痛的功效。分类地位：分类地位：界：植物界界：植物界 门：双子植物门门：双子植物门 纲：双子叶植物纲纲：双子叶植物纲 目：茄目目：茄目 科：茄科科：茄科 属：天仙属：天仙子属子属 种：种：莨菪莨菪4 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物莨菪烷类抗胆碱药物是由莨菪烷衍生物的氨基醇与不同有机酸缩合成酯的生物碱是由莨菪烷衍生物的氨基醇与不同有机酸缩合成酯的生物碱。如：颠茄生物碱，古柯生物碱。如：颠茄生物碱，古柯生物碱。从茄科植物，如颠茄、莨菪和

4、曼陀罗等从茄科植物，如颠茄、莨菪和曼陀罗等中提取的生物碱中提取的生物碱，5 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析第一节结构性质第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析016 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析（一）（一）典型药物的结构典型药物的结构 硫酸阿托品硫酸阿托品 氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱 （atropine sulfate） ( Scopolamine hydrobromide）OOHNOHCH3*2H2SO4H2OONOHCH3OOHH*HBr7 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析ONOHCH

5、3OHHHO*HBrNOOOH,HBrCH3*氢溴酸山莨菪碱氢溴酸山莨菪碱( Anisodamine hydrobromide）氢溴酸后马托品氢溴酸后马托品( Hormatropine hydrobromide）8 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析ONOHCH3HOCH2OHO*ONOHCH3OH3CHOH*+Br-樟柳碱樟柳碱 ( Anisodine ）甲溴东莨菪碱甲溴东莨菪碱( Methscopolamin Bromide ）9 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析NOOHOn莨菪烷（Tropane）骨架n莨菪醇的构象n外消旋

6、体10 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 莨菪烷3位带有羟基为莨菪醇（托品），羟基位于3位为伪莨菪醇。 手性碳原子C1、C3和C5， 内消旋而无旋光性NOH*135莨菪烷（Tropane）11 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪醇的构象 莨菪烷及莨菪醇都有两种稳定的构象 (椅式和船式)， 二者互为平衡。由于船式能量稍高于椅式，故通常写成椅式。NOHH椅式NOHH船式12 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 -羟甲基苯乙酸简称为莨菪酸（亦称托品酸，Tropic acid）。 天然的（-）-莨菪酸

7、为S-构型。HOOHO*莨菪酸NOOHO（二）主要化学性质（二）主要化学性质1. 水解性水解性 阿托品和东莨菪碱分子结构中，阿托品和东莨菪碱分子结构中，具有酯的结构，易水解具有酯的结构，易水解。以。以阿托品为例，阿托品为例，水解水解生成生成莨菪醇莨菪醇()和和莨菪酸莨菪酸()，其反应结构式，其反应结构式: : 2. 碱性碱性 阿托品和东莨菪碱结构中，五原脂环含有阿托品和东莨菪碱结构中，五原脂环含有叔胺氮原子叔胺氮原子，较强的，较强的碱性，易于酸成盐，如阿托品碱性，易于酸成盐，如阿托品pKb1为为4.353. 旋光性旋光性 氢溴酸东莨菪碱含有不对称碳原子，左旋体比旋度为氢溴酸东莨菪碱含有不对称碳

8、原子，左旋体比旋度为-24至至-27。阿托品虽然含有不对称碳原子，但外消旋化，无旋光性。阿托品虽然含有不对称碳原子，但外消旋化，无旋光性OOCH3NHH3COHNHH3C+HOOCH3()()14 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析第二节鉴别实验第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析0215 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析1 12 23 34 45 5 16 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析阿托品、莨菪碱等托烷类生物碱水解后阿托品、莨菪碱等托烷类生物碱水解后生成莨菪酸，均可发生生成莨菪酸，均可发生

9、Vitaili反应反应 生成具有生成具有共轭结构共轭结构的阴离子的阴离子而显而显深紫色深紫色 与发烟硝酸共热，得到黄色三硝与发烟硝酸共热，得到黄色三硝基衍生物，放冷，加醇制氢氧化基衍生物，放冷，加醇制氢氧化钾少许，即钾少许，即脱羧脱羧 一、托烷生物碱的鉴别反应（一、托烷生物碱的鉴别反应（Vitaili反应）反应）17 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪酸的特征反应 HOOCOH+3HNO3HOOCOHNO2O2NNO2+3H2OKOHC2H5OHHOOCOHNO2O2NNOHOKOHHOOCOHNO2O2NNOKO莨菪酸莨菪酸硝基化硝基化脱羧化脱羧化共轭结构

10、共轭结构深紫深紫18 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析托烷生物碱托烷生物碱水解水解莨菪酸莨菪酸发烟硝酸发烟硝酸 三硝基衍生物三硝基衍生物KOH（C2H5OH）固体固体KOH有色的醌型产物有色的醌型产物深紫色深紫色取供试品约取供试品约10mg10mg，加发烟硝酸，加发烟硝酸5 5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇放冷，加乙醇2 23 3滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。19 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析二、氧化反应二、氧化反应(与硫酸与硫酸-

11、重铬酸钾的反应）重铬酸钾的反应）HOOCOHH2OH2SO4HOOCCH22O2CHO+2CO2H2On与硫酸及重铬酸钾加热水解生成的莨菪酸被氧化为苯甲醛有苦杏仁特异臭味20 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析三三、 阿托品氯化汞醇试液阿托品氯化汞醇试液黄色沉淀黄色沉淀东莨菪碱氯化汞醇东莨菪碱氯化汞醇白色复盐沉淀白色复盐沉淀21 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析氢溴酸东莨氢溴酸东莨菪碱的鉴别菪碱的鉴别即生成白色沉淀（与即生成白色沉淀（与阿托品及后马托品的阿托品及后马托品的区别）区别） 取本品约取本品约10mg，加，加水水1ml溶

12、解后，置分溶解后，置分液漏斗中液漏斗中分取三氯甲烷液，置分取三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣中水浴上蒸干，残渣中加二氯化汞的乙醇溶加二氯化汞的乙醇溶液液1.5ml 加氨试液使成碱性后加氨试液使成碱性后，加三氯甲烷，加三氯甲烷5ml，摇匀摇匀 22 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析生物碱沉淀试剂生物碱沉淀试剂反应条件及结果反应条件及结果碘化铋钾试液（碘化铋钾试液（Dragendorff试剂）试剂）橙红或棕红色沉淀橙红或棕红色沉淀碘化钾碘试液碘化钾碘试液(Wagnen试剂试剂)棕色或棕褐色沉淀棕色或棕褐色沉淀碘化汞钾试液碘化汞钾试液(Mayen试剂试剂)在酸性或碱性

13、溶剂中生成白色或淡黄在酸性或碱性溶剂中生成白色或淡黄色沉淀色沉淀三硝基苯酚试液（三硝基苯酚试液（Hager试剂或苦味试剂或苦味酸试液）酸试液）结晶性沉淀并有特定熔点结晶性沉淀并有特定熔点硅钨酸试液（硅钨酸试液（Bertrend试剂）试剂）白色、淡黄色或黄棕色沉淀白色、淡黄色或黄棕色沉淀磷钨酸试液（磷钨酸试液（Scheibler试剂）试剂）酸性或中性溶液中，淡黄色沉淀酸性或中性溶液中，淡黄色沉淀常用的生物碱沉淀试剂及反应常用的生物碱沉淀试剂及反应The precipitation reagents and reaction for testing alkaloids 23 第十三章第十三章 莨菪

14、烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析四、硫酸盐与溴化物反应四、硫酸盐与溴化物反应阿托品阿托品+氯化钡溶液氯化钡溶液 白色沉淀白色沉淀氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱+硝酸银溶液硝酸银溶液 淡黄色沉淀淡黄色沉淀药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在，药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在，通过加沉通过加沉淀试剂如硝酸银等生成溴化银沉淀或加入氯试剂生淀试剂如硝酸银等生成溴化银沉淀或加入氯试剂生成溴溶于三氯甲烷而显色成溴溶于三氯甲烷而显色24 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析通过比较max、min或吸收光谱的一致性进行鉴别，也可比较其吸光度或吸收系数的比值来鉴别绝大多数

15、生物碱原料药都采用IR法鉴别 UV IR25 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析四、光谱鉴别法氢溴酸东莨菪氢溴酸东莨菪红外光谱红外光谱The infrared spectrum of Scopolamine Hydrobromide 26 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析色谱法一般用于已知生物碱的鉴别色谱法一般用于已知生物碱的鉴别TLCHPLCGCPC五、色谱法五、色谱法27 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析第三节有关物质第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析0328 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆

16、碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查氢溴酸东莨菪碱中特殊杂质检查氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱来源来源： 茄科植物颠茄、白曼陀罗、莨菪中等提取茄科植物颠茄、白曼陀罗、莨菪中等提取（我国，白曼陀罗的干燥品：洋金花中提取东莨菪碱，制成氢溴酸盐）（我国，白曼陀罗的干燥品：洋金花中提取东莨菪碱，制成氢溴酸盐） 制备方法制备方法： 洋金花粗粉洋金花粗粉乙醇乙醇/渗漉渗漉渗漉液渗漉液减压蒸馏减压蒸馏浸膏浸膏H2SO4/提取提取酸性提取液酸性提取液Na2CO3, CHCl3/提取提取总生物碱总生物碱Na2CO3, CHCl3/分离分离东莨菪碱东莨菪碱HBr/成盐成盐氢溴酸东莨菪碱

17、（粗品）氢溴酸东莨菪碱（粗品）75% C2H5OH/精制精制成品成品29 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析特殊杂质与检查特殊杂质与检查取本品0.50g，加水10ml溶解后，依法测定（附录 H），pH值应为4.05.5。强酸弱碱强酸弱碱取本品0.15g,加水5ml溶解后，在1520加高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)0.05ml，10分钟内红色不得完全消失。阿扑东莨菪碱、其他含有不阿扑东莨菪碱、其他含有不饱和双键的有机物质饱和双键的有机物质取本品0.10g ，加水2ml 溶解后，分成两等份：一份中加氨试液23滴，不得发生浑浊；另一份中加氢氧化钾试液数滴，只许发

18、生瞬即消失的类白色浑浊。阿扑阿阿扑阿托品、颠茄碱托品、颠茄碱 酸度易氧化物其他生物碱30 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析第四节含量测定第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析0431 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析一、酸性染料比色法的基本原理一、酸性染料比色法的基本原理有机相(BH+ In-)水相(BH+ In-)+HIn H+ In-+B H+ BH+UV 32 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析酸性染料酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝如磺酸酞类指示剂等，如

19、溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等等 其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行含量测定。的吸光度，即可进行含量测定。33 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析应用示例硫酸阿托品片的含量测定精密量取对照品溶液和供试品溶液各精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml2ml，分别置预先精密，分别置预先精密加入加入三氯甲烷三氯甲烷10ml10ml

20、的分液漏斗中，各加的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溴甲酚绿溶液溶液4ml4ml，振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫外振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫外- -可见可见分光光度法，在分光光度法，在420nm420nm波长处分别测定吸光度，计算，即得。波长处分别测定吸光度，计算，即得。34 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析35 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析u 水性最佳pH值：使得使得BHBH+ +和和InIn- -最多最多u 酸性染料及其浓度：定量结合；对离子对的溶解定量结合；对离子对的溶解性好；有较高的吸收度；

21、足够量即可性好；有较高的吸收度；足够量即可u 有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想提取效率高，氯仿最理想u 水分的影响：影响结果，脱水剂或滤纸除去水分影响结果，脱水剂或滤纸除去水分u 酸性染料中的有色杂质：有机溶剂萃取除去有机溶剂萃取除去36 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 测定法测定法 精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿2.0ml，振摇提取两分钟后，静止分层，分取澄清的三氯甲烷液，在420nm波长处分别测定吸光度，计算，并将结果与1.027相乘，即得本品（C17H23NO3）2H2SO4H

22、2O相当标示量的百分含量。百分标示量%100027. 150标示量mWCAASSx式中Ax、AS分别为供试品和对照品溶液的吸光度； CS为对照品溶液的浓度mg/ml； m为样品质量；为平均片重。1.027为（C17H23NO3）2H2SO4H2O与（C17H23NO3）2H2SO4H2O的质量换算系数。37 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析 Fig. 13-2 The UV-spectrum of atropine sulfate with BTB ions 1.离子对 2.染料空白（对照品平行测定，空白吸收可被扣除）3.阿托品（水溶液在420nm附近无吸收）

23、38 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析溶剂种类 使用范围常用溶剂酸性有机弱碱冰醋酸碱性有机弱酸二甲基甲酰胺两性酸/碱甲醇惰性酸/碱甲苯、氯仿、丙酮 非水溶液滴定法当当HAHA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HAHA的的酸性，使反应顺利地完成。酸性，使反应顺利地完成。BHBH+ + A A- -+ +HClOHClO4 4BHBH+ + ClOClO4 4+ +HAHA游离碱类盐游离碱类盐被置换出的弱酸被置换出的弱酸39 第十三章第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷类抗胆碱药物的分析供供试试品品+ +冰冰醋醋酸酸1010ml30mlml30ml若供试品为氢卤酸盐再若供试品为氢卤酸盐再加加5%5%醋酸汞的冰醋酸液醋酸汞的冰醋酸液3 3ml5mlml5ml结结果果HClO4滴定滴定空白试验空白试验校正校正指示剂碱性溶液碱性溶液pKpKb b1010，冰醋酸中滴，冰醋酸中滴定突跃不明显，需加入醋酐，定突跃不明显，需加入醋酐，使碱性增强，突跃更明显使碱性增强，突跃更明显参考来源1.杭太俊，药物分析第七版，中国药科大学2.俞松林，生物药物检测技术 浙江医药高等专科学校3.曾金祥，药物分析课件，江西中医学院4.中国药典2015版