免疫组化病理诊断-PPT课件.ppt

1、免疫组化在病理诊断中免疫组化在病理诊断中的正确应用的正确应用引言引言免疫组化技术已广泛应用于病理诊断：免疫组化技术已广泛应用于病理诊断：l在解决疑难病例诊断方面起着重要作用；在解决疑难病例诊断方面起着重要作用；l随着人们医疗风险意识的增强，许多普通的病随着人们医疗风险意识的增强，许多普通的病例也常常需要免疫组化进一步证实；例也常常需要免疫组化进一步证实；l成为病理医生常规工作不可缺少的重要工作；成为病理医生常规工作不可缺少的重要工作；常规手段常规手段；引言引言免疫组化技术广泛应用于病理诊断工免疫组化技术广泛应用于病理诊断工作得益于免疫组化技术的进步：作得益于免疫组化技术的进步：l抗原修复技术；

2、抗原修复技术；l更加敏感的检测系统或放大系统的建立；更加敏感的检测系统或放大系统的建立；l更多可用于常规标本的抗体的出现；更多可用于常规标本的抗体的出现；l快捷地抗体流通及良好的售后服务。快捷地抗体流通及良好的售后服务。引言引言肿瘤病理诊断：肿瘤病理诊断：lHE形态（标准模糊）：形态（标准模糊）：经验、权威主观性经验、权威主观性强强lHE形态形态 + 特染，电镜特染，电镜lHE形态形态 + 免疫组化免疫组化 + 分子病理？分子病理？免疫组化：免疫组化：l新的诊断标准！新的诊断标准！l更客观！更权威！更客观！更权威！l肿瘤分类有了本质的区别肿瘤分类有了本质的区别l有了客观标准作为对照，有了客观标

3、准作为对照，再不仅仅靠积累经验再不仅仅靠积累经验, 专家专家l大大缩短学习周期大大缩短学习周期l年青人有了更多的机会！年青人有了更多的机会！引言引言Experience based? Experience-Evidence based!The days of saying “It is what it is because I say it is” are gone!病理诊断进入新时代！病理诊断进入新时代！当代合格的病理医生当代合格的病理医生l临床知识临床知识 lHEHE形态知识形态知识 l免疫组化知识免疫组化知识l分子病理知识分子病理知识引言引言目前国内免疫组化在病理诊断应用中目前国内免疫组

4、化在病理诊断应用中存在的问题亟待解决存在的问题亟待解决:技术操作不规范，缺乏室内、室间质控技术操作不规范，缺乏室内、室间质控不充分了解应用范围不充分了解应用范围知识更新太快：每年知识更新太快：每年12000篇新的文献篇新的文献（2005年年, 人体病理），知识老化！人体病理），知识老化！简单化！抗体选择及结果判断失误简单化！抗体选择及结果判断失误过分或单纯依赖免疫组化！忽视临床、过分或单纯依赖免疫组化！忽视临床、HE结合！结合！带来新的误诊！带来新的误诊！不做误诊更多！不做误诊更多！必须做！但要正确应用！必须做！但要正确应用！一、免疫组化的应用范围一、免疫组化的应用范围肿瘤的病理诊断：肿瘤的病

5、理诊断：l帮助良恶性病变鉴别；帮助良恶性病变鉴别；l未分化恶性肿瘤（癌或肉瘤）性质的判断；未分化恶性肿瘤（癌或肉瘤）性质的判断；l各种圆细胞、梭形细胞、多形性肿瘤的鉴别各种圆细胞、梭形细胞、多形性肿瘤的鉴别诊断；诊断；l帮助确定转移性肿瘤的原发部位等。帮助确定转移性肿瘤的原发部位等。 CKAE3 T GCK20 CK7肺结肠癌转移肺结肠癌转移细胞角蛋白细胞角蛋白: CK 7 and 20: CK 7 and 20 CK7+ CK7 -CK20+ 泌尿上皮癌，卵巢黏液癌，泌尿上皮癌，卵巢黏液癌， 消化道癌消化道癌 （结肠）（结肠） 部分胃癌，部分胰胆道癌部分胃癌，部分胰胆道癌 Merkel细胞癌

6、细胞癌CK20- 消化道以外的腺癌：肺、消化道以外的腺癌：肺、 肝癌、肾细胞癌、前列肝癌、肾细胞癌、前列 乳腺、浆液性及宫内膜癌乳腺、浆液性及宫内膜癌 ， 腺癌、鳞状细胞癌腺癌、鳞状细胞癌 间皮瘤、膀胱、宫颈、胰腺间皮瘤、膀胱、宫颈、胰腺 内分泌癌（除甲状腺）内分泌癌（除甲状腺） 唾腺来源的癌唾腺来源的癌(90%)透明细胞癌的免疫组化鉴别透明细胞癌的免疫组化鉴别肾透明细胞癌肾透明细胞癌肝透明细胞癌肝透明细胞癌肾上腺腺瘤肾上腺腺瘤卵巢透明细胞癌卵巢透明细胞癌HEPPAR1HEPPAR1- -+ +- - -CD10CD10+ + +- - -34E-1234E-12- - - -+ +Inhab

7、inInhabin-/+-/+- -+ +- -Melan-AMelan-A- - -+ + - -EMAEMA+ + +- -+ +pCEApCEA- -+ +- -+/-+/-CK19CK19+/-+/- - -+ +CK7CK7- - - -+ +CK8/CK18CK8/CK18+ + +- -+ +一、免疫组化的应用范围一、免疫组化的应用范围淋巴造血系统疾病的淋巴造血系统疾病的诊断：诊断：l鉴别反应性增生性疾鉴别反应性增生性疾病与淋巴瘤；病与淋巴瘤；l各类淋巴瘤分型的重各类淋巴瘤分型的重要依据。要依据。在淋巴造血疾病的病在淋巴造血疾病的病理诊断中免疫组化目理诊断中免疫组化目前已成为常规

8、开展的前已成为常规开展的工作项目。工作项目。 Bcl-2 Bcl-2一、免疫组化的应用范围一、免疫组化的应用范围内分泌肿瘤的诊断：不仅可以帮助确定内分泌肿瘤的诊断：不仅可以帮助确定诊断，还可以通过检测肿瘤分泌激素达诊断，还可以通过检测肿瘤分泌激素达到功能分类的目的。到功能分类的目的。在软组织肿瘤、神经系统肿瘤等其他各在软组织肿瘤、神经系统肿瘤等其他各系统肿瘤的病理诊断中免疫组化也具有系统肿瘤的病理诊断中免疫组化也具有重要的作用。重要的作用。 一、免疫组化的应用范围一、免疫组化的应用范围小活检病理检查：能明确地显示癌细胞的小活检病理检查：能明确地显示癌细胞的存在（如胃粘膜活检中的印戒细胞癌）；存

9、在（如胃粘膜活检中的印戒细胞癌）；肿瘤穿刺活检时肿瘤类型的确定。肿瘤穿刺活检时肿瘤类型的确定。微小癌、微小转移灶（淋巴结及骨髓）、微小癌、微小转移灶（淋巴结及骨髓）、甚至不易察觉的病变得以确诊。甚至不易察觉的病变得以确诊。 CgAEMAM, 54, M, 54, 胃胃大弯溃疡大弯溃疡CD3CD3，CD20CD20，CD68CD68均散在细胞均散在细胞阳性，数量不等阳性，数量不等活检活检手术手术类癌类癌SCC类癌活检类癌活检手术手术CK类癌类癌SCCCgA类癌类癌SCCSCCSCCTTF-1类癌类癌Ki67类癌类癌活检标本类癌和小细胞癌的相对鉴别活检标本类癌和小细胞癌的相对鉴别 特点特点 类癌类

10、癌 小细胞癌小细胞癌肿瘤部位肿瘤部位 中央或周围中央或周围 中央多见中央多见核染色质核染色质 颗粒状，有时粗糙颗粒状，有时粗糙 细致、均匀细致、均匀血管血管 薄壁薄壁 厚壁、肾小球样厚壁、肾小球样核分裂像核分裂像 10/10HPF 10/10HPF CgA, Syn 阳性强阳性强 阳性弱阳性弱Ki-67 低（典型的低（典型的20%） 高（典型的高（典型的50%）From AJSP 2005, 29(2):179-187一、免疫组化的应用范围一、免疫组化的应用范围细针穿刺、细胞学诊断主要是定性细针穿刺、细胞学诊断主要是定性诊断？诊断？免疫组化的应用有可能对部分肿瘤免疫组化的应用有可能对部分肿瘤进

11、一步地进行分类或明确来源。进一步地进行分类或明确来源。LCA一、免疫组化的应用范围一、免疫组化的应用范围乳腺癌激素受体（乳腺癌激素受体（ER、PR）的检测在）的检测在指导临床治疗方面已起到了重要的作用。指导临床治疗方面已起到了重要的作用。针对肿瘤基因产物（针对肿瘤基因产物（C-erbB2, P53, ALK，CD117等）的抗体为基因治疗提供重要等）的抗体为基因治疗提供重要的参考依据。的参考依据。细胞增殖核抗原（细胞增殖核抗原（Ki-67）等免疫组化染）等免疫组化染色可为肿瘤的预后提供依据。色可为肿瘤的预后提供依据。已用于临床的新型靶向治疗药物已用于临床的新型靶向治疗药物美罗华：美罗华：CD2

12、0单克隆抗体，用于治疗单克隆抗体，用于治疗CD20+的的B细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤Herceptin：c-erbB-2（neu）单克隆抗）单克隆抗体，用于治疗体，用于治疗c-erbB-2过度表达的乳腺过度表达的乳腺癌癌STI-571（Gleevec，imatinib）：小分）：小分子选择性蛋白酪氨酸激酶抑制剂，用于子选择性蛋白酪氨酸激酶抑制剂，用于CML和和GIST治疗治疗一、免疫组化的应用范围一、免疫组化的应用范围某些感染性疾病的病因诊断，如某些感染性疾病的病因诊断，如HBV、HCV、EBV、CMV等病毒的检测。等病毒的检测。但与分子生物学等技术相比，免疫组化但与分子生物学等技术相比，免疫组化检

13、测病原微生物敏感性常常较差，因此检测病原微生物敏感性常常较差，因此应用范围有限。应用范围有限。 HPVHBsAg二、免疫组化的局限性免疫组化的局限性对于许多非肿瘤性疾病由于常常无特异对于许多非肿瘤性疾病由于常常无特异的抗原表达，因此其诊断仍依据于特异的抗原表达，因此其诊断仍依据于特异的常规光镜及电镜形态表现，如肾小球的常规光镜及电镜形态表现，如肾小球肾炎的诊断，多种感染性疾病、各种代肾炎的诊断，多种感染性疾病、各种代谢性疾病，细胞内谢性疾病，细胞内/外异常物质沉积性疾外异常物质沉积性疾病（如淀粉样变性），肌活检诊断等；病（如淀粉样变性），肌活检诊断等； 二、免疫组化的局限性二、免疫组化的局限性

14、至今无绝对特异的抗体！至今无绝对特异的抗体！相当多的肿瘤缺乏特异的抗原表达；相当多的肿瘤缺乏特异的抗原表达；同一种抗原常常可在多种肿瘤中表达，同一种抗原常常可在多种肿瘤中表达，不少肿瘤又由于分化太差或细胞分子结构不少肿瘤又由于分化太差或细胞分子结构改变而不表达相关的抗原。改变而不表达相关的抗原。 二、免疫组化的局限性二、免疫组化的局限性不同抗体滴度有不同的阳性结果：不同抗体滴度有不同的阳性结果：lHBME-1 1:100 (推荐浓度推荐浓度)间皮膜阳性，间皮膜阳性，几乎所有腺癌胞浆阳性几乎所有腺癌胞浆阳性l1:200015000 仅仅间皮膜阳性仅仅间皮膜阳性内源性生物素：假阳性（胞浆），如肝内

15、源性生物素：假阳性（胞浆），如肝细胞及肝细胞癌细胞及肝细胞癌不同克隆不同克隆ERER表达差异表达差异SP16F11二、免疫组化的局限性二、免疫组化的局限性免疫组化的标准免疫组化的标准化（同一实验室化（同一实验室及不同实验室间及不同实验室间结果的一致性）、结果的一致性）、定量结果的判断定量结果的判断等还存在不少的等还存在不少的问题尚待解决。问题尚待解决。 三、如何正确应用免疫组化三、如何正确应用免疫组化 正确、有价值的免疫组化结果：正确、有价值的免疫组化结果：l免疫组化实验室规范、合适的技术操作（包免疫组化实验室规范、合适的技术操作（包括组织固定、抗原修复、检测系统、各类试括组织固定、抗原修复、

16、检测系统、各类试剂的质量保证，染色技术等）是最重要的基剂的质量保证，染色技术等）是最重要的基础保证；础保证；l但病理医生在组织块的选择，抗体的选择，但病理医生在组织块的选择，抗体的选择，结果的判断等方面也起着不容忽视的作用。结果的判断等方面也起着不容忽视的作用。 三、如何正确应用免疫组化三、如何正确应用免疫组化 1、组织块的选择、组织块的选择首选有典型病变、分化较好、固定较好首选有典型病变、分化较好、固定较好的组织块。的组织块。应尽量选择有正常组织（有内对照组织）应尽量选择有正常组织（有内对照组织）的蜡块。的蜡块。对固定时间较长或未及时固定的组织，对固定时间较长或未及时固定的组织，冻融后的组织

17、或脱钙后的组织应尽可能冻融后的组织或脱钙后的组织应尽可能地避免使用。地避免使用。 2. 2. 抗体的选择抗体的选择经验性、知识性要求很高的一项艺术工作。经验性、知识性要求很高的一项艺术工作。选择到组织合适的抗体选择到组织合适的抗体费用最小而又能完费用最小而又能完全达到目的。全达到目的。病理医生须通过认真观察病理医生须通过认真观察HE切片并联系临床相切片并联系临床相关信息，准确地列出要鉴别的几种可能性诊断。关信息，准确地列出要鉴别的几种可能性诊断。l病理医生对病理医生对HE形态要熟练掌握，知识面广，既不能形态要熟练掌握，知识面广，既不能撒大网似的罗列出太多的诊断，使费用增加过多；也撒大网似的罗列

18、出太多的诊断，使费用增加过多；也不能遣漏可能的诊断，造成误诊或再选择抗体延迟报不能遣漏可能的诊断，造成误诊或再选择抗体延迟报告时间。告时间。 大细胞未分化癌？大细胞未分化癌？CKCK，EMAEMA恶黑？恶黑？S100S100，HMB45HMB45淋巴瘤？淋巴瘤？CD20CD20，CD3CD3CK+,EMA+,S100-, HMB45- CK+,EMA+,S100-, HMB45- CD20-,CD3-,CD20-,CD3-,诊断：大细胞未分化癌诊断：大细胞未分化癌ALCLALCL？CD30CD30，ALK1ALK1CD302. 2. 抗体的选择抗体的选择另一方面病理医生要对各种抗体的免疫反另一

19、方面病理医生要对各种抗体的免疫反应谱及交叉反应（应谱及交叉反应（更重要！更重要！）都十分熟）都十分熟悉：悉：l如如CK不仅表达于上皮还可表达于肌纤维母细胞，不仅表达于上皮还可表达于肌纤维母细胞，平滑肌细胞，间皮下细胞平滑肌细胞，间皮下细胞等。等。并熟知各种肿瘤的免疫表型（并熟知各种肿瘤的免疫表型（包括异常的包括异常的免疫组化表达免疫组化表达!）。）。 CKCD312. 2. 抗体的选择抗体的选择如何了解各种抗体的如何了解各种抗体的免疫反应谱及各种肿免疫反应谱及各种肿瘤的免疫表型？瘤的免疫表型？l产品目录产品目录 ？l专业书籍专业书籍 ？l新的文献新的文献 l专家咨询专家咨询 l网上检索网上检索

20、 2. 2. 抗体的选择抗体的选择至今无绝对特异的抗体！至今无绝对特异的抗体！无无100%病例或肿瘤细胞阳性的抗体！病例或肿瘤细胞阳性的抗体！选择选择一组一组抗体而不是一个抗体抗体而不是一个抗体“交叉阳性交叉阳性”的原则：如癌与恶性黑色素瘤鉴别：的原则：如癌与恶性黑色素瘤鉴别：l选一个或二个低分化癌表达阳性而恶黑阴性的抗体，选一个或二个低分化癌表达阳性而恶黑阴性的抗体，如如CK、EMA，l同时还要选一个或二个恶黑表达阳性而癌表达阴性的同时还要选一个或二个恶黑表达阳性而癌表达阴性的抗体，如抗体，如S100，Melan-A。l若染色结果与预期结果矛盾则应考虑其他的诊断或核若染色结果与预期结果矛盾则

21、应考虑其他的诊断或核查免疫组化染色是否有问题。查免疫组化染色是否有问题。 2. 2. 抗体的选择抗体的选择抗体选择不仅要选准，还要选足。抗体选择不仅要选准，还要选足。l一个可能的诊断要选一个可能的诊断要选2个或多个抗体，以防个或多个抗体，以防肿瘤异常免疫表达造成误诊。如淋巴瘤分类肿瘤异常免疫表达造成误诊。如淋巴瘤分类诊断时，一组抗体中至少要包括诊断时，一组抗体中至少要包括2个以上的个以上的T细胞及细胞及B细胞标志（细胞标志（CD3、CD43、CD20、CD79a/Pax-5等）。等）。 CD432. 2. 抗体的选择抗体的选择先采用一线抗体，先先采用一线抗体，先确定一定的范围，再确定一定的范围

22、，再应用二线抗体进一步应用二线抗体进一步明确诊断？明确诊断？l可能由于一线抗体选可能由于一线抗体选择太少，部分肿瘤有择太少，部分肿瘤有交叉反应而导致开始交叉反应而导致开始就犯导向性的错误，就犯导向性的错误，最终导致误诊。最终导致误诊。 EMAKappa 轻链轻链2. 2. 抗体的选择抗体的选择选择同一类抗体时还要考虑到各种抗体的敏感选择同一类抗体时还要考虑到各种抗体的敏感性及特异性。性及特异性。l首选当然要选敏感性及特异性都好的抗体，但有些首选当然要选敏感性及特异性都好的抗体，但有些特异性虽然不高但有很高敏感性的抗体在不少情况特异性虽然不高但有很高敏感性的抗体在不少情况下可能发挥更重要的作用。

23、如下可能发挥更重要的作用。如S100。l不同公司生产的同一类抗体可能敏感性及特异性有不同公司生产的同一类抗体可能敏感性及特异性有所不同，或要求的抗原修复方法等技术条件不同，所不同，或要求的抗原修复方法等技术条件不同，应根据本实验室预试验结果进行选择。应根据本实验室预试验结果进行选择。 3. 3. 结果的判断结果的判断免疫组化染色最终是否能得到正确的结免疫组化染色最终是否能得到正确的结论，关键还要看对染色结果如何评价论，关键还要看对染色结果如何评价（解释）。同一种染色结果可有不同的（解释）。同一种染色结果可有不同的病理诊断。病理诊断。应该首先核查一下染色反应是否成功应该首先核查一下染色反应是否成

24、功（这也是免疫组化室内质控的一个重要（这也是免疫组化室内质控的一个重要步骤）。步骤）。l评价染色反应是否成功最好比较同一张切片评价染色反应是否成功最好比较同一张切片中存在的正常组织，即所谓的内阳性对照。中存在的正常组织，即所谓的内阳性对照。 CKpanCD20SMA?CK-7!SMA CD3 CD203. 3. 结果的判断结果的判断有不少染色或病例缺乏内阳性对照，若有不少染色或病例缺乏内阳性对照，若对染色反应有疑问只能选用另外的阳性对染色反应有疑问只能选用另外的阳性对照片核实。对照片核实。若内（或外）阳性对照组织免疫反应阴若内（或外）阳性对照组织免疫反应阴性，瘤组织阳性则表明假阳性；瘤组织性，

25、瘤组织阳性则表明假阳性；瘤组织阴性则表明假阴性。阴性则表明假阴性。只有阳性对照染色阳性瘤组织反应才属只有阳性对照染色阳性瘤组织反应才属真实。真实。 3.3.结果的判断结果的判断除了内阳性对照，还要看内阴性对照是除了内阳性对照，还要看内阴性对照是否有非特异反应。否有非特异反应。内源性生物素造成的非特异染色（如在内源性生物素造成的非特异染色（如在肝、肾及富含线粒体的细胞等），常常肝、肾及富含线粒体的细胞等），常常表现为非特异的胞浆阳性。表现为非特异的胞浆阳性。总之，只有阳性对照染色阳性，阴性对总之，只有阳性对照染色阳性，阴性对照组织又基本阴性，这样的免疫组化染照组织又基本阴性，这样的免疫组化染色结

26、果才可信。色结果才可信。 desmindesminSMA3. 3. 结果的判断结果的判断 其次，要分析阳性染色的部位（细胞的微解剖其次，要分析阳性染色的部位（细胞的微解剖部位）是否正确部位）是否正确: l如许多淋巴细胞的标志（如许多淋巴细胞的标志（CD20，CD43，CD5，CD45RB，CD30，C-erbB2等）应为膜阳性，若胞等）应为膜阳性，若胞浆弥漫阳性间或细胞核阳性则为假阳性。浆弥漫阳性间或细胞核阳性则为假阳性。l反之，有的抗体染色应为核阳性（如反之，有的抗体染色应为核阳性（如ER，PR，TdT，Cyclin D1等），若胞浆或胞膜阳性也为假阳性。等），若胞浆或胞膜阳性也为假阳性。l

27、还有的抗体可表现为二种阳性反应类型，如还有的抗体可表现为二种阳性反应类型，如S100，ALK可为核阳性也可伴有胞浆阳性；可为核阳性也可伴有胞浆阳性；CD30，CD15即可表现为细胞膜阳性，也可表现为核旁高尔基区即可表现为细胞膜阳性，也可表现为核旁高尔基区阳性。阳性。 C-erbB-2 E-cadherinCD20 CD30 PR ER TDTTTF-1 P 53Ki-67 Me l-AMel-pan ALK-1ALK-1ALK-1ALK-1CD30 CD15CEACEA C-Kit/CD1173. 3. 结果的判断结果的判断随着对免疫反应靶分子部位的更深入了解，免随着对免疫反应靶分子部位的更深

28、入了解，免疫反应的形态也是重要的参考依据，疫反应的形态也是重要的参考依据，l如嗜铬蛋白如嗜铬蛋白A，细胞毒标志（粒酶，细胞毒标志（粒酶B，穿孔素，穿孔素，TIA1）等阳性反应在胞浆内应呈颗粒状，）等阳性反应在胞浆内应呈颗粒状，l而而CD79a等为胞浆弥漫阳性，等为胞浆弥漫阳性，l细胞角蛋白染色阳性应为胞浆细丝状，细胞角蛋白染色阳性应为胞浆细丝状，l若反应类型不符可能也要怀疑为假阳性。若反应类型不符可能也要怀疑为假阳性。但要精确观察到阳性反应的细微类型表现必须但要精确观察到阳性反应的细微类型表现必须切片薄，并采用高分辨率的显色系统。切片薄，并采用高分辨率的显色系统。 CD35 granzyme

29、B3. 3. 结果的判断结果的判断再者，确定免疫反应阳性的组织或细胞是否为再者，确定免疫反应阳性的组织或细胞是否为肿瘤或有意义的组织肿瘤或有意义的组织/细胞。细胞。若肿瘤成份较少，弥散存在，可能会将周围反若肿瘤成份较少，弥散存在，可能会将周围反应性成份或残余组织的阳性反应误认为肿瘤阳应性成份或残余组织的阳性反应误认为肿瘤阳性，导致错误的诊断。性，导致错误的诊断。l如伴有大量淋巴细胞浸润的未分化癌（鼻咽未分化如伴有大量淋巴细胞浸润的未分化癌（鼻咽未分化癌），富于癌），富于T细胞的大细胞的大B细胞淋巴瘤，瘤组织中残余细胞淋巴瘤，瘤组织中残余的横纹肌，脂肪组织等。的横纹肌，脂肪组织等。l还有的细胞（

30、如肥大细胞）可对多种抗体表达阳性还有的细胞（如肥大细胞）可对多种抗体表达阳性反应，应注意区别。反应，应注意区别。 3. 3. 结果的判断结果的判断免疫组化染色阳性结免疫组化染色阳性结果较阴性结果更有意果较阴性结果更有意义，义，l阴性结果：可能抗原阴性结果：可能抗原的确不存在，的确不存在，l或抗原含量低，组织或抗原含量低，组织处理时抗原丢失，染处理时抗原丢失，染色方法不敏感或操作色方法不敏感或操作有误。有误。 3. 3. 结果的判断结果的判断应用于鉴别诊断或证实诊断的免疫组化应用于鉴别诊断或证实诊断的免疫组化染色多为定性观察，定量没有太大的意染色多为定性观察，定量没有太大的意义。义。但用于预后，

31、增殖指数、激素受体等检但用于预后，增殖指数、激素受体等检测的免疫组化染色不仅要做定性观察，测的免疫组化染色不仅要做定性观察，还应该做定量的评价才对临床有价值。还应该做定量的评价才对临床有价值。 CK 滑膜肉瘤滑膜肉瘤3. 3. 结果的判断结果的判断遗憾的是目前由于实验遗憾的是目前由于实验室间未实现标准化，因室间未实现标准化，因此定量的标准（域值）此定量的标准（域值）尚无统一的认识，尚无统一的认识，l如如ER受体，有的实验室受体，有的实验室只要有阳性肿瘤细胞就视只要有阳性肿瘤细胞就视为阳性，而有的实验室要为阳性，而有的实验室要至少至少20细胞阳性才视为细胞阳性才视为阳性，阳性，l阳性标准往往是随

32、意确定阳性标准往往是随意确定的，未经临床病理研究证的，未经临床病理研究证实。实。3. 3. 结果的判断结果的判断单单免疫组化染色结果无任何诊断价值！单单免疫组化染色结果无任何诊断价值！ 免疫组化诊断时结合免疫组化诊断时结合HE形态十分重要：抗体形态十分重要：抗体的选择及结果的判断都要以的选择及结果的判断都要以HE形态为依据。形态为依据。免疫组化诊断的一个重要原则！免疫组化诊断的一个重要原则！当免疫组化最后结果出乎意料之外，与当免疫组化最后结果出乎意料之外，与HE预预期结果差别很大时首先要核查免疫组化染色期结果差别很大时首先要核查免疫组化染色中存在的问题；中存在的问题；若确实免疫组化染色无误，要

33、进一步核实若确实免疫组化染色无误，要进一步核实（查阅文献（查阅文献/上网上网, 专家，产品目录？）是否专家，产品目录？）是否有不了解的有不了解的交叉反应或异常表达交叉反应或异常表达! 3. 3. 结果的判断结果的判断如果免疫组化染色结果确定可信，则不能不考如果免疫组化染色结果确定可信，则不能不考虑另外的诊断，但要结合临床、影像学等检查虑另外的诊断，但要结合临床、影像学等检查结果综合分析后才能否定原来的结果综合分析后才能否定原来的HE诊断。诊断。出现这样的情况可能是新文献了解不全面，对出现这样的情况可能是新文献了解不全面，对某些肿瘤特殊的某些肿瘤特殊的HE形态表现尚未了解，形态表现尚未了解，或的

34、确或的确有新的特殊的形态表现有新的特殊的形态表现l如印戒细胞型滤泡淋巴瘤，小细胞型的大细胞间变如印戒细胞型滤泡淋巴瘤，小细胞型的大细胞间变型淋巴瘤，上皮样硬化性纤维肉瘤，肝脏血管平滑型淋巴瘤，上皮样硬化性纤维肉瘤，肝脏血管平滑肌脂肪瘤，酷似少枝胶质细胞瘤的中枢神经细胞瘤，肌脂肪瘤，酷似少枝胶质细胞瘤的中枢神经细胞瘤，脊索瘤样脑膜瘤等。脊索瘤样脑膜瘤等。免疫组化在病理诊断中的正确应用免疫组化在病理诊断中的正确应用观念要时时更新！观念要时时更新！ l及时更新抗体（组织细胞及时更新抗体（组织细胞标记，标记，myoglobin， vimentin，等），等）l新应用抗体（新应用抗体（p63，calpo

35、nin，B-Catenin, TTF-1, TFE3, Clusterin,et al)l新反应（新反应（CD10, CD34, CD99，et al)l新新pattern免疫组化在病理诊断中的正确应用免疫组化在病理诊断中的正确应用抗体的新反应：抗体的新反应：lCD10：粒细胞、淋巴细胞、部分腺癌、胰：粒细胞、淋巴细胞、部分腺癌、胰腺实性腺实性-假乳头性肿瘤、肝细胞癌、肾细胞癌、假乳头性肿瘤、肝细胞癌、肾细胞癌、子宫间质肉瘤子宫间质肉瘤lCD34：造血干细胞、血管、皮隆突、：造血干细胞、血管、皮隆突、SFT、GIST、部分脂肪肿瘤、上皮样肉瘤、部分脂肪肿瘤、上皮样肉瘤lCD99：PNET、滑膜

36、肉瘤、滑膜肉瘤、SFT、间叶性软、间叶性软骨肉瘤、小细胞性骨肉瘤、胸腺瘤、骨肉瘤、小细胞性骨肉瘤、胸腺瘤、NE癌、癌、淋巴母细胞性淋巴瘤、少数横纹肌肉瘤淋巴母细胞性淋巴瘤、少数横纹肌肉瘤CK20CD20TdT淋巴母细胞瘤？淋巴母细胞瘤？Merkel 细胞癌！细胞癌！CD20+ T-cell LymphomaAm J Surg Pathol 2008;32:1593Am J Surg Pathol 2008;32:1593160716072 mycosis fungoides; 1 enteropathy-type TCL), 6 peripheral TCL unspecified小结小结免疫

37、组化在病理诊断中的应用进入了一个新免疫组化在病理诊断中的应用进入了一个新的时代，将不再仅仅是病理诊断的一个辅助的时代，将不再仅仅是病理诊断的一个辅助手段，免疫组化结果将越来越成为疾病诊断手段，免疫组化结果将越来越成为疾病诊断依据或诊断标准的一部分重要内容。依据或诊断标准的一部分重要内容。成功的病理医生成功的病理医生 临床知识临床知识 + HE形态知识形态知识 + 免疫组化知识免疫组化知识但是，免疫组化技术也像任何其他一种诊断但是，免疫组化技术也像任何其他一种诊断技术一样也还存在着技术一样也还存在着不少的缺陷不少的缺陷!小结小结没有任何一种抗体是没有任何一种抗体是绝对特异和敏感的！绝对特异和敏感

38、的！意想不到的表型时有发生。选择抗体时，意想不到的表型时有发生。选择抗体时，应该选择包括预期阳性及阴性的应该选择包括预期阳性及阴性的一组抗体一组抗体l抗体选择过少，不如不做抗体选择过少，不如不做IHC！合理的抗体选择总是依赖于全面的临床病合理的抗体选择总是依赖于全面的临床病史、认真的大体检查和细致的显微镜检，史、认真的大体检查和细致的显微镜检，IHC只是只是支持和证实支持和证实常规常规HE诊断。诊断。l没有正确、全面的没有正确、全面的HE诊断，不可能有正确的诊断，不可能有正确的免疫组化结果！免疫组化结果！肯定的阳性结果也不一定都是真实的！肯定的阳性结果也不一定都是真实的！不要不要轻易地轻易地让免疫表型假象让免疫表型假象迷惑甚至迷惑甚至 动摇动摇常规病理诊断！常规病理诊断！金标准金标准临床临床常规形态！常规形态！ 免疫组化等！免疫组化等！