Agilent1100型高效液相色谱仪操作规程-共42页PPT资料课件.ppt

1、Agilent 1100Agilent 1100型高效液相色谱仪操作规程型高效液相色谱仪操作规程溶剂架溶剂架在线脱气在线脱气泵泵PurgePurge阀阀自动进样器自动进样器柱温箱柱温箱检测器检测器溶剂瓶溶剂瓶仪器各组件仪器各组件n泵泵 ：四元泵、二元泵：四元泵、二元泵n在线脱气器在线脱气器 n进样器：自动进样器及手动进样器进样器：自动进样器及手动进样器n柱温箱柱温箱n检测器：检测器： DADDAD检测器、检测器、UVUV检测器检测器Agilent1100Agilent1100在线脱气机在线脱气机Agilent1100Agilent1100在线脱气机工作原理在线脱气机工作原理何时需要使用何时需要

2、使用AgilentAgilent在线脱气机在线脱气机n如果在低如果在低UVUV波长段，用最高灵敏度进行检测波长段，用最高灵敏度进行检测n如果要求使用最佳进样精度如果要求使用最佳进样精度n如果要求保留时间重现性很高如果要求保留时间重现性很高（在（在0.50.5ml/minml/min流速以下）流速以下）n如果样品和检测对流动相中溶解氧敏感如果样品和检测对流动相中溶解氧敏感Agilent 1100Agilent 1100泵泵Agilent 1100Agilent 1100四元泵工作原理四元泵工作原理Agilent 1100Agilent 1100泵头结构泵头结构Agilent 1100Agilen

3、t 1100自动进样器结构自动进样器结构Agilent 1100Agilent 1100自动进样器工作原自动进样器工作原理理Agilent 1100柱温箱结构柱温箱流路连接开机开机n打开计算机打开计算机, ,进入进入Windows NT Windows NT 或或Windows Windows 2000 2000 画面画面, ,并运行并运行Bootp ServerBootp Server程序（点程序（点击左下方【击左下方【Bootp ServerBootp Server】图标）图标）n打开色谱仪各组件电源，待打开色谱仪各组件电源，待Bootp ServerBootp Server里显示已联上各

4、组件的信息及各模块自检里显示已联上各组件的信息及各模块自检完成后，双击完成后，双击Instrument 1 Online Instrument 1 Online ，图图标打开工作站。化学工作站自动与标打开工作站。化学工作站自动与11001100通通讯。进入的工作站画面如下所示讯。进入的工作站画面如下所示 排气排气n将流动相放入溶剂瓶中，打开将流动相放入溶剂瓶中，打开Purge Purge 阀，依次单击阀，依次单击【PumpPump】【Set up PumpSet up Pump】，】，设设FlowFlow为为2 2ml/minml/min，单单击击OK OK ，再依次单击【再依次单击【Pump

5、Pump】【controlcontrol】，】，选中选中onon，单击单击OKOK，则系统开始则系统开始PurgePurge至管路无气泡为止，切换管至管路无气泡为止，切换管路反复操作至所需管路均无气泡。路反复操作至所需管路均无气泡。n在【在【controlcontrol】选项中选选项中选offoff，关闭泵，关闭关闭泵，关闭Purge Purge 阀。阀。单击泵下面瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。单击泵下面瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。如图所示。如图所示。n打开打开1010异丙醇溶液控制阀，用针筒抽吸至管路中有异丙醇溶液控制阀，用针筒抽吸至管路中有液体流出。调节控制阀松紧，控制流量至

6、流出量约为液体流出。调节控制阀松紧，控制流量至流出量约为每分钟每分钟5 51515滴。滴。编辑分析方法编辑分析方法n新方法建立：点击【新方法建立：点击【MethodMethod】，】，点击点击【Edit entire methodEdit entire method】或【或【New New methodmethod】选项，进行方法编缉。选项，进行方法编缉。在在Method Comments Method Comments 中加入方法的信息如方法的中加入方法的信息如方法的用途等用途等泵参数设定泵参数设定在在Flow Flow 处输入流量处输入流量, , 在在Solvent ASolvent A、

7、B B、C C、D D 处输入比例，也可处输入比例，也可InsertInsert一一行行”TimetableTimetable” , ,编辑梯度，在编辑梯度，在Pressure Limits Max Pressure Limits Max 处输入柱子的最大耐高处输入柱子的最大耐高压。单击压。单击OkOk进入下一画面进入下一画面自动进样器参数设定自动进样器参数设定n选择合适的进样方式选择合适的进样方式n进样体积进样体积n洗瓶位置洗瓶位置n进样方式：进样方式：“Standard Injection”Standard Injection”只能输入只能输入进样体积进样体积“Injection with

8、 Needle Wash”Injection with Needle Wash”可可以输入进样体积和洗瓶位置此方式针从样品瓶以输入进样体积和洗瓶位置此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针抽完样品后会在洗瓶中洗针nUse injector program -Use injector program -可以点击可以点击Edit Edit 键键进行进样程序编辑进行进样程序编辑n 点击点击OkOk进入下一画面进入下一画面柱温箱参数设定柱温箱参数设定n在在”Temperature”Temperature”下面的方框内输下面的方框内输入所需温度入所需温度, ,并选中它并选中它, ,点点击击”more”m

9、ore”键键, ,选中选中“Same as Same as left”left”使柱温箱的温度左右一致使柱温箱的温度左右一致n点击点击okok进入下一画面进入下一画面检测器参数设定检测器参数设定UVUVn在在”Wavelength”Wavelength”下方的空白处输入所下方的空白处输入所需的检测波长需的检测波长, ,如如254254nm, nm, 在在“Peakwidth Peakwidth (Response time)”(Response time)”下方点击下拉式三角下方点击下拉式三角框框, ,选择合适的响应时间选择合适的响应时间, , 如如0.10.1min(2s)min(2s)n在

10、在Timetable Timetable 中可以中可以Insert Insert 一行输入随一行输入随时间切换的波长时间切换的波长n点击点击okok进入下一画面进入下一画面检测器参数设定检测器参数设定DADDADn样品波长样品波长-一般选择最大吸收处的波长一般选择最大吸收处的波长n样品带宽样品带宽BWBW一般选择最大吸收值一半处的整一般选择最大吸收值一半处的整个宽度个宽度n参比波长参比波长一般选择在靠近样品信号的无吸收一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域或低吸收区域n参比带宽参比带宽BWBW至少要与样品信号的带宽相等许至少要与样品信号的带宽相等许多情况下用多情况下用100100nmnm作

11、为缺省值作为缺省值nPeak width Response time Peak width Response time 其值尽可能接近其值尽可能接近要测的窄峰峰宽要测的窄峰峰宽n选中所用的灯点击选中所用的灯点击OkOk进入下一画面进入下一画面方法保存方法保存n单击单击Method Method 菜单选中菜单选中Save method as Save method as 输入一方法名，如输入一方法名，如test test n单击单击OkOk编辑分析方法编辑分析方法n选择已有方法：点击【选择已有方法：点击【MethodMethod】，】，点击点击【Load methodLoad method】选项

12、，选取已存的各种选项，选取已存的各种操作方法。操作方法。 样品分析与采集数据样品分析与采集数据n将样品放于样品盘中相应位置，所有的样品均将样品放于样品盘中相应位置，所有的样品均需澄清。需澄清。n待仪器显示待仪器显示ReadyReady，基线平稳，从【基线平稳，从【Run Run controlcontrol】菜单中选择【菜单中选择【Run MethodRun Method】，】，开始开始进样分析。进样分析。n数据处理：单击【数据处理：单击【ViewView】菜单，单击【菜单，单击【Data Data analysisanalysis】选项，进行数据分析。单击【选项，进行数据分析。单击【View

13、View】菜单，单击【菜单，单击【Method and Run controlMethod and Run control】选项，选项，回到样品分析界面。回到样品分析界面。数据分析方法编辑数据分析方法编辑n从从File File 菜单选择菜单选择Load signal Load signal 选中您的选中您的数据文件名数据文件名n单击单击OkOk积分积分n从从Integration Integration 中选择中选择“Auto integrate”,Auto integrate”,如积分结果不理想如积分结果不理想, ,再从菜单中选择再从菜单中选择Integration Events Inte

14、gration Events 选项选择合适的选项选择合适的Slope Slope sensitivity Peak width Area reject sensitivity Peak width Area reject Height rejectHeight rejectn从从Integration Integration 菜单中选择菜单中选择Integrate Integrate 选项则选项则数据被积分数据被积分n如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止满意为止n单击左边图标将积分参数存入方法单击左边图标将积分参数存入方法单击左边图标将积分参

15、数存入方法单击左边图标将积分参数存入方法关机关机n冲洗系统：反相柱用冲洗系统：反相柱用5 5的甲醇水冲洗系的甲醇水冲洗系统统3030分钟，再用纯甲醇冲洗系统分钟，再用纯甲醇冲洗系统2020分钟，分钟，然后关泵，正相柱先用合适溶剂冲洗，然后关泵，正相柱先用合适溶剂冲洗，后用柱保存液冲洗。后用柱保存液冲洗。n退出工作站，关闭计算机。退出工作站，关闭计算机。n关闭关闭1010异丙醇溶液控制阀。异丙醇溶液控制阀。n关闭仪器各组件关闭仪器各组件n关掉关掉Agilent 1100Agilent 1100电源开关电源开关注意事项注意事项n仪器运行时，仪器运行时，泵头必须用泵头必须用10%10%异丙醇水溶液虹

16、异丙醇水溶液虹吸冲洗吸冲洗，不能干涸。，不能干涸。n注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于最低限会自动停泵。容积低于最低限会自动停泵。n对于手动进样器当使用缓冲溶液时要用水冲洗对于手动进样器当使用缓冲溶液时要用水冲洗进样口同时搬动进样阀数次每次数毫升进样口同时搬动进样阀数次每次数毫升注意事项注意事项n溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用不可用超声洗涤，可用35%35%稀硝酸溶液浸泡后稀硝酸溶液浸泡后再洗

17、涤。再洗涤。n检测器的灯有使用寿命限制，一般在正式进样检测器的灯有使用寿命限制，一般在正式进样分析前分析前3030min min 左右开启左右开启D D灯或灯或W W灯，分析结束，灯，分析结束，立即关灯。立即关灯。n使用双泵时，使用双泵时，A A、B B、C C、D D四相中，若所用流动四相中，若所用流动相中有含盐流动相，则相中有含盐流动相，则A A、D D（进液口位于混合进液口位于混合器下方）放置含盐流动相，器下方）放置含盐流动相，B B、C C（进液口位于进液口位于混合器上方）放置不含盐流动相。混合器上方）放置不含盐流动相。泵的维护泵的维护n流动相使用前必须脱气过滤流动相使用前必须脱气过滤

18、n使用缓冲盐时要加在线使用缓冲盐时要加在线Seal-washSeal-wash选项选项n关机前反相色谱柱用关机前反相色谱柱用5%5%的甲醇水冲洗系统的甲醇水冲洗系统3030分分钟，然后用有机溶剂冲洗系统钟，然后用有机溶剂冲洗系统2020分钟，然后关分钟，然后关泵。正相色谱柱用适当的溶剂冲洗。泵。正相色谱柱用适当的溶剂冲洗。n及时更换及时更换Purge ValvePurge Valve内的过滤芯，当打开内的过滤芯，当打开Purge ValvePurge Valve时压力高于时压力高于1010bar bar 表明过滤芯已表明过滤芯已堵堵使用梯度比例时的注意事项使用梯度比例时的注意事项n当盐溶液与有

19、机溶剂溶液混合时盐溶液能与有机溶剂溶液完全混溶而不会出现沉淀。n由于在比例阀的混合点重力作用使盐颗粒沉淀下来通常阀A接水相/盐溶液D接有机溶剂此法连接可有效使盐回落到盐溶液中并被溶解若颠倒过来盐可能落在有机溶剂中出现问题n当使用缓冲盐溶液和有机溶剂时推荐将缓冲盐通道接在A通道上有机溶剂通道直接接在A通道的上方D通道上定期用水冲洗所有的通道以除去阀口上可能出现的盐沉淀泵的溶剂选择原则使用自动进样器注意事项使用自动进样器注意事项 使用自动洗针功能使用自动洗针功能 去掉洗涤瓶盖去掉洗涤瓶盖 为了获得最佳的分析结果，装有溶剂的洗涤瓶为了获得最佳的分析结果，装有溶剂的洗涤瓶是不加盖的，而且洗涤瓶中的是不加盖的，而且洗涤瓶中的 溶剂对样品组溶剂对样品组分有较好的溶解作用。如果洗涤瓶有盖将会有分有较好的溶解作用。如果洗涤瓶有盖将会有少量样品留在密少量样品留在密 封垫上，这样会把残留的样封垫上，这样会把残留的样品带到下一个样品中。品带到下一个样品中。 Thank you