1、12问题探讨：苏云金芽孢杆菌含有一种可以合成毒蛋白的基因。让细菌的毒蛋白基因在棉花细胞中表达，可培育出抵抗棉铃虫害的抗虫棉。苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌普通棉花抗虫棉普通棉花抗虫棉34限制酶的识别特点限制酶的识别特点 以中轴线两侧的双链以中轴线两侧的双链DNA上碱基呈反向对称，重复排上碱基呈反向对称，重复排列列 如：如：GAA TTC CCC GGG CTT AAG GGG CCC5粘性末端粘性末端特定的特定的核苷酸核苷酸序列序列(6) 特定的切特定的切点点EcoRI限制酶限制酶中轴线中轴线6特定的核苷特定的核苷酸序列酸序列(6) 特定的切特定的切点点平末端平末端平末端平末端Smal酶酶7黏性
2、末端和平末端8DNADNA分子分子切割切割DNADNA分子实质是分子实质是断开两个核苷酸之间的断开两个核苷酸之间的磷酸二酯键磷酸二酯键。9101112131415类型16DNA聚合酶DNA连接酶区别区别1 1区别区别2 2相同点相同点1)1)只能将只能将单个核苷酸单个核苷酸连连接到已有的核酸片段上，接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键形成磷酸二酯键形成形成磷酸二酯键磷酸二酯键1)1)在在两个两个DNADNA片段之片段之间间形成磷酸二酯键形成磷酸二酯键2)2)以以一条一条DNADNA链为模板链为模板，连接成一条互补连接成一条互补的的DNADNA链链2)2)将将DNADNA双链上的双链上的两两个缺
3、口同时连接个缺口同时连接起来，起来，不需要模板不需要模板Go onGo on17三、“分子运输车” 基因进入受体细胞的载体载体需要的条件：有1多个限制酶切点对受体细胞无害导入基因能在受体细胞中复制、表达有某些标记基因，便于筛选常用运载体： 细菌的质粒 噬菌体或某些动植物病毒假如目的基因导入受体细胞后不能复制或不能转录，转基因生物能有预想的效果吗？作为分子运输车载体，如果没有切割位点将会怎样？霍乱菌的质粒多个限制酶切点，你会用它来做分子运输车吗？目的基因有没有进入受体细胞，如何去发现？ 181920练习练习在基因工程中，切割运载体和含有目的基因在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的的DNA片段
4、，需使用（片段，需使用（ ）同种限制酶同种限制酶 B. 两种限制酶两种限制酶同种连接酶同种连接酶 D. 两种连接酶两种连接酶基因工程常用的受体细胞有（基因工程常用的受体细胞有（ ）(1)大肠杆菌大肠杆菌 （2）枯草杆菌）枯草杆菌（3）支原体）支原体 （4）动植物细胞）动植物细胞A. （3）（）（4） B. （1）（）（2）（）（4）C. （2）（）（3）（）（4） D. （1）（）（2）（）（3）21221 1、下列不适合用于基因工程的运载体、下列不适合用于基因工程的运载体是（是（ ） A A、质粒、质粒 B B、噬菌体、噬菌体 C C、细菌、细菌 D D、病毒、病毒选选我我C2、下列说法正确的是、下列说法正确的是：（：（ ） A、限制酶的切口一定是、限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列碱基序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、重组技术所用的工具酶是限制酶、重组技术所用的工具酶是限制酶、 连接酶、运载体连接酶、运载体 D、利用运载体在宿主细胞内对目的基因、利用运载体在宿主细胞内对目的基因 进行大量复制的过程可称为进行大量复制的过程可称为“克隆克隆”选选我我D审题审题231.1 DNA重组技术的基本工具重组技术的基本工具
