河豚毒素ppt课件.ppt

1、河豚毒素的中毒、检测及评价 小组成员：小组成员：2121徐永忠徐永忠2424李伏寿李伏寿2525李天明李天明2626郑西洲郑西洲2929温兆俞温兆俞指导老师：指导老师： 梁建功梁建功1Content1 1、河豚及河豚毒素的概述、河豚及河豚毒素的概述2 2、TTX的毒理作用的毒理作用3 3、TTX中毒症状中毒症状 4 4、TTX中毒的检测中毒的检测 5 5、 评价评价2 河豚河豚俗称俗称“气泡鱼气泡鱼”、“吹肚鱼吹肚鱼”、“河鲀鱼河鲀鱼”为暖温带及热带近海底层鱼类，少数种类进入淡水为暖温带及热带近海底层鱼类，少数种类进入淡水江河中，当遇到外敌，腹腔气囊则迅速膨胀，体内江河中，当遇到外敌，腹腔气囊

2、则迅速膨胀，体内有剧毒。有剧毒。3体内毒素浓度由高到低依次为：体内毒素浓度由高到低依次为： 卵巢、肝脏、脾脏、血筋、鳃、皮、精巢卵巢、肝脏、脾脏、血筋、鳃、皮、精巢而体内其他部位并无毒素，因此只要处理得当，去掉含有而体内其他部位并无毒素，因此只要处理得当，去掉含有毒素的部位便可以放心食用。所以也有毒素的部位便可以放心食用。所以也有“拼死吃河豚拼死吃河豚”一一话，可见这种毒物的美味是多么的诱人。话，可见这种毒物的美味是多么的诱人。4河豚毒素(tetrodotoxin) 河豚毒素河豚毒素, ,简称简称TTX ，是一种存在于河豚、蝾螈、斑，是一种存在于河豚、蝾螈、斑足蟾等动物中的海洋毒素。最早于足蟾

3、等动物中的海洋毒素。最早于 1909 1909 年在日本由田原年在日本由田原良纯从河豚鱼中提取并定名良纯从河豚鱼中提取并定名19721972年由年由 Kishi Kishi 等人工合成。等人工合成。TTXTTX为为氨基全氢化喹唑啉化合物氨基全氢化喹唑啉化合物，分子式为，分子式为 C C1111H H1717N N3 3O O8 8，结，结构如图，分子量为构如图，分子量为 319.27 319.27。 白色结晶，无白色结晶，无味微溶于水，不溶味微溶于水，不溶于有机溶剂；对酸于有机溶剂；对酸作用稳定；没有确作用稳定；没有确定熔点，定熔点，220以上以上炭化。炭化。5 TTX TTX是世界上最致命的

4、毒药之一。是世界上最致命的毒药之一。1gTTX1gTTX的毒的毒性是性是1g1g氰化物的氰化物的1 1万倍，是砒霜万倍，是砒霜12501250倍。倍。TTXTTX中毒中毒后麻痹症状出现在食后后麻痹症状出现在食后20min20min3h3h，致死时间最，致死时间最短为短为1.5h1.5h，最长约为，最长约为8h8h。TTXTTX是目前已知自然生是目前已知自然生态条件下毒力最强的生物性毒素之一，态条件下毒力最强的生物性毒素之一，0.5mg0.5mg足足以使一个体重以使一个体重70kg70kg的人致命，对人的致死量为的人致命，对人的致死量为6 67g /kg7g /kg。据报道日本每年食用河豚中毒死

5、亡人数占同期食据报道日本每年食用河豚中毒死亡人数占同期食物中毒死亡人数的物中毒死亡人数的70%70%以上。以上。6TTX 的毒理作用TTX TTX 是选择性极高的快速是选择性极高的快速NaNa+ +通道阻断剂，因而可通道阻断剂，因而可以阻止神经、肌肉产生兴奋活动，导致神经麻痹。以阻止神经、肌肉产生兴奋活动，导致神经麻痹。其机理是：其机理是：TTX TTX 通过分子内胍基与神经细胞膜钠离子通道上通过分子内胍基与神经细胞膜钠离子通道上的羧基的羧基(COO(COO- -) )相互吸引，相互吸引，阻止钠离子正常进入细阻止钠离子正常进入细胞，阻断神经传导胞，阻断神经传导；但；但 TTXTTX具有高度选择

6、性，具有高度选择性，K K+ +通道完全不受影响，因而导致细胞内的通道完全不受影响，因而导致细胞内的 K K+ +、NaNa+ + 数量失去平衡，从而严重影响细胞的正常功能。数量失去平衡，从而严重影响细胞的正常功能。7兴奋传递的过程兴奋传递的过程8 神经传导：静息电位神经传导：静息电位 动作电位动作电位 （外正内负）（外正内负）刺激刺激（外负内正）（外负内正） Na+内流内流 K+外流外流 细胞膜内高钾低钠细胞膜内高钾低钠 ，钾离子可随浓度差自由，钾离子可随浓度差自由出入而钠离子不能出入而钠离子不能 ，故静息电位时外正内负，故静息电位时外正内负 。当。当受到刺激时受到刺激时 Na+内流形成动作

7、电位，内流形成动作电位，K+外流使膜外流使膜内电位迅速下降，直到恢复静息时的电位水平。内电位迅速下降，直到恢复静息时的电位水平。中毒机理中毒机理9TTX中毒症状 胃肠症状胃肠症状：恶心、呕吐、腹痛或腹泻等。：恶心、呕吐、腹痛或腹泻等。神经麻痹症状神经麻痹症状：开始有口唇、舌尖、指端麻木；：开始有口唇、舌尖、指端麻木；继而全身麻木、眼睑下垂、四肢无力行走不稳、继而全身麻木、眼睑下垂、四肢无力行走不稳、共济失调，肌肉软瘫和腱反射消失。共济失调，肌肉软瘫和腱反射消失。呼吸、循环衰竭症状呼吸、循环衰竭症状：呼吸困难、急促表浅而不：呼吸困难、急促表浅而不规则紫绀，血压下降，瞳孔先缩小后散大或两侧规则紫绀

8、，血压下降，瞳孔先缩小后散大或两侧不对称，言语障碍，昏迷，最后死于呼吸、循环不对称，言语障碍，昏迷，最后死于呼吸、循环衰竭。衰竭。 10TTX 中毒的检测 1 1、TTX 的提取的提取 样品中样品中 TTX TTX 的提取目前大致可以分为的提取目前大致可以分为3 3种：种：（1 1）液液提取法）液液提取法（2 2）直接沉淀蛋白法）直接沉淀蛋白法（3 3）固相萃取法）固相萃取法 112 2、TTX 的检测的检测 河豚毒素的检测方法河豚毒素的检测方法种类繁多种类繁多,有生有生物物 测定法、理化检测方法、免疫化学测测定法、理化检测方法、免疫化学测定方法等几大类。其中小鼠生物法是现行定方法等几大类。其

9、中小鼠生物法是现行的标准检测法，该方法虽然灵敏度能满足的标准检测法，该方法虽然灵敏度能满足要求要求,但不能对毒素定性但不能对毒素定性,且小鼠个体差异且小鼠个体差异较大较大,检测检测结果误差大结果误差大 采用采用柱后衍生液相色谱检测法柱后衍生液相色谱检测法检测水检测水产品中河豚毒素就能很好的解决毒素的定产品中河豚毒素就能很好的解决毒素的定性和定量问题。性和定量问题。12样样品提取后经过品提取后经过C18固相固相萃取小柱净化萃取小柱净化用用C18柱分离柱分离过柱清液经0.45Lm滤膜过滤,进行液相色谱实验13总结、评价TTXTTX虽然是世界上最致命的毒药之一，但是也可以虽然是世界上最致命的毒药之一

10、，但是也可以用于用于镇痛镇痛。对癌症疼痛、外科手术后的疼痛、内科胃溃疡引对癌症疼痛、外科手术后的疼痛、内科胃溃疡引起的疼痛，起的疼痛，TTX TTX 制剂均有良好的止痛作用。使用制剂均有良好的止痛作用。使用河豚素的好处是用量极少（只需河豚素的好处是用量极少（只需 3 3 微克），止痛微克），止痛时间长，又没有成瘾性。特别是穴位注射，作用时间长，又没有成瘾性。特别是穴位注射，作用快、效果明显，可以作为成瘾性镇痛药吗啡和杜快、效果明显，可以作为成瘾性镇痛药吗啡和杜冷丁的良好替代品。冷丁的良好替代品。14 同时，随着同时，随着TTX TTX 分离和分析方法的进步及对分离和分析方法的进步及对其化学结构

11、、生物功能和与其他分子相互作用的其化学结构、生物功能和与其他分子相互作用的进一步研究，人们对进一步研究，人们对 TTX TTX 的结构、理化性质与的结构、理化性质与生物活性的关系和它的作用机制的了解将更加深生物活性的关系和它的作用机制的了解将更加深入。它也将会更加有力的运用于入。它也将会更加有力的运用于法医学鉴定法医学鉴定，以，以及司法检测等方面，为司法鉴定实践工作提供更及司法检测等方面，为司法鉴定实践工作提供更多更有效的技术支持和鉴定依据。多更有效的技术支持和鉴定依据。 总之，总之，TTX TTX 不再只是令人望而生畏的毒素，研究不再只是令人望而生畏的毒素，研究成果为法医鉴定、临床诊治以及食

12、品安全监测提成果为法医鉴定、临床诊治以及食品安全监测提供了有效地检测手段和科学依据。供了有效地检测手段和科学依据。15牛刀小试一、选择题一、选择题1、 TTXTTX在河豚体内含量最高的部位在河豚体内含量最高的部位（ ）A、精巢精巢 B、卵巢卵巢 C、肝脏肝脏 D、血筋血筋2 2、TTXTTX的中毒机理（的中毒机理（ ）A、 Na Na+ +通道阻断剂通道阻断剂 B B、 K K+ +通道阻断剂通道阻断剂C C、 ESTEST阻断剂阻断剂 D D、神经抑制剂、神经抑制剂BA16二、填空题二、填空题1 1、 TTX TTX 通过分子内通过分子内( ( ) )与神经细胞膜钠离子通与神经细胞膜钠离子通

13、道上的（道上的（ ）相互吸引，阻止）相互吸引，阻止( ( ) )正常进入正常进入细胞，阻断神经传导。细胞，阻断神经传导。2 2、样品中样品中 TTX TTX 的提取目前大致可以分为的提取目前大致可以分为3 3种：分别为种：分别为答案：答案： 胍基胍基 羧基羧基 钠离子钠离子 液液提取法、液液提取法、 直接沉淀蛋白法直接沉淀蛋白法 、 固相萃取法。固相萃取法。17三、简答题三、简答题1、简述TTX中毒机理。答：TTX 通过分子内胍基与神经细胞膜钠离子通道上的羧基(COO-)相互吸引，阻止钠离子正常进入细胞，阻断神经传导；但 TTX具有高度选择性，K+通道完全不受影响，因而导致细胞内的 K+、Na+ 数量失去平衡，从而严重影响细胞的正常功能。1819此课件下载可自行编辑修改，供参考！感谢您的支持，我们努力做得更好！20