第七章-芳香胺类药物的分析-PPT课件.ppt

1、第七章 胺类药物的分析第一节 芳胺类药物的分析常见的芳胺类药物 对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构COOR2NR1HH2NCOOCH2CH2N(C2H5)2 HCl盐酸普鲁卡因COOC2H5H2N苯佐卡因苯佐卡因COOCH2CH2N(C2H5)2CH3(CH2)3NHHCl盐酸丁卡因盐酸丁卡因CONHCH2CH2N(C2H5)2H2NHCl盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺酰胺类药物的基本结构酰胺类药物的基本结构NH C R2OR1R3R4HONHCOCH3NHCOCH3C2H5O非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）非那西丁（对乙酰氨基苯乙醚）对乙酰氨基酚（扑热息痛）对乙酰氨基酚（

2、扑热息痛）SOONHCOCH3CH3CONH醋氨苯砜醋氨苯砜NHCOCH2N(C2H5)2CH3CH3HCl盐酸利多卡因盐酸利多卡因NHCONC4H9CH3CH3HCl盐酸布比卡因盐酸布比卡因一、结构与性质一、结构与性质 （一） 具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。 （二） 酯键或酰胺键易水解 （三）具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。 （四）游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。 （六） UV （七） IR （五） 某些特征取代基（如酚羟基）的反应 二、鉴别试验 （一）重氮

3、化偶合反应 芳香第一胺类鉴别反应 ArNH2HClNaNO2重氮盐橙黄猩红色萘酚OH- 直接：盐酸普鲁卡因、对氨基水杨酸钠 、苯佐卡因、盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2000）鉴别鉴别 （1）本品显芳香第一胺类的鉴别）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录反应（附录） 取供试品约取供试品约50mg，加稀盐酸，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。黄到猩红色沉淀。 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚

4、 ChP（2000）鉴别鉴别 （2）取本品约）取本品约0.1g，加稀盐酸，加稀盐酸5m1，置水浴中加热，置水浴中加热40分钟，放冷；分钟，放冷；取取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇滴，摇匀，用水匀，用水3ml稀释后，加碱性稀释后，加碱性-萘酚试萘酚试液液2m1，振摇，即显红色。，振摇，即显红色。 对氨基酚对乙酰氨基酚、HCl （乳白色）盐酸丁卡因H2NaNO（二）三氯化铁反应 对乙酰氨基酚 （三）与重金属离子反应（三）与重金属离子反应 1. 与铜和钴离子反应与铜和钴离子反应 黄色蓝紫色硫酸铜盐酸利多卡因氯仿碳酸钠 亮绿色细小盐酸利多卡因H2CoCl棕黑色）暗棕色羟肟酸铁（

5、紫红色羟肟酸盐酸普鲁卡因胺322FeClOH2羟肟酸铁盐反应羟肟酸铁盐反应 黄色）（盐酸利多卡因、3HNO23NOHg红色或橙黄色）（对氨基苯甲酸酯类、3HNO23NOHg3与汞离子的反应与汞离子的反应 （四）水解产物的反应 1. 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2000）鉴别鉴别 （2）取本品约）取本品约0.1g，加水，加水2ml溶解溶解后，加后，加10氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液1ml，即生成白，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐为蓝色；热

6、至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。酸酸化，即析出白色沉淀。 ）对氨基苯甲酸（白色对氨基苯甲酸钠纸变兰色）（使湿润的红色石蕊试二乙氨基乙醇对氨基苯甲酸钠油状物普鲁卡因盐酸普鲁卡因HCl NaOH2. 苯佐卡因苯佐卡因 ChP（2000）鉴别鉴别 （2）取本品约）取本品约0.1g，加氢氧化钠，加氢氧化钠试液试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。的臭气。 ）（碘仿臭气，黄色乙醇乙醇苯佐卡因32CHINaOHINaOH （五）制备衍生物测熔点（五）制备衍生物测熔点1三硝基苯酚衍生

7、物三硝基苯酚衍生物 盐酸利多卡因盐酸利多卡因 ChP（2000）鉴别鉴别 取本品取本品0.2g，加水，加水20ml溶解。溶解。（1）取溶液）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录后，干燥，依法测定（附录C），熔点），熔点为为228232，熔融时同时分解。，熔融时同时分解。盐酸布比卡因盐酸布比卡因 ChP（2000）2. 硫氰酸盐衍生物硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因盐酸丁卡因 ChP（2000）鉴别鉴别 （1）取本品约）取本品约0.1g，加，加5%醋酸钠醋酸钠溶液溶液10ml溶解后，加溶解后，

8、加25%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在洗涤，在80干燥，依法测定（附录干燥，依法测定（附录C），熔点约为），熔点约为131。 盐酸布比卡因盐酸布比卡因 ChP（2000）鉴别鉴别 （2）取本品，精密称定，按干燥）取本品，精密称定，按干燥品计算，加品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每盐酸溶液制成每1ml中含中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录的溶液，照分光光度法（附录A）测定，在）测定，在263nm与与271nm的波长处有的波长处有最大吸收；其吸收度分别为最大吸收；其吸收度分别为0.530.58与与0.430.4

9、8。（六）（六）UV （七）（七）IR 盐酸布比卡因盐酸布比卡因 ChP（2000）鉴别鉴别 （3）本品的红外光吸收图谱与对）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集照的图谱（光谱集324图）一致。图）一致。三、杂质检查三、杂质检查（一）对乙酰氨基酚 1. 有关物质 杂质来源 中间体、副产物及分解产物 对氯乙酰苯胺对氯乙酰苯胺 杂质对照品法杂质对照品法 检查方法 TLC 其他杂质其他杂质 参比杂质对照品法参比杂质对照品法 2. 对氨基酚 杂质来源 中间体、水解产物 反应原理 兰色亚硝基铁氰化钠对氨基酚 OH检查方法 对照法 取本品取本品1.0g，加甲醇溶液（，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，

10、加碱性亚硝基铁氰化钠试液溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置，摇匀，放置30min；如显色，与对；如显色，与对乙酰氨基酚对照品乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚加对氨基酚50 g用用同一方法制成的对照液比较，不得更深同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005）。）。 %005. 0%1000 . 11050 %1006供试品量允许杂质存在的最大量L 2. 盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查 检查方法 TLC 杂质对照品法 杂质来源 水解产生 %2 . 1%100105 . 2101030 %1003供试品量允许杂质存在的最大量L（一）亚硝酸钠滴定法（一）亚硝酸钠滴定法 1

11、. 原理原理 具芳伯氨基的药物具芳伯氨基的药物Cl-+22+2+ArNH2 NaNO2 HCl ArNN NaCl H2O四、含量测定四、含量测定 NHCOR + H2ONH2 + RCOOHH+NO2 + 6HNH2 + 2H2O2. 主要测定条件主要测定条件（1）加入适量）加入适量KBr加速反应加速反应 KBr为催化剂为催化剂NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O 在盐酸存在下，重氮化反应的机在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：理为： NN+Cl-快N N OH快NNOH慢NO+Cl-NH2OHNOBr HBr HNO22OHNOCl HClHNO22（1）K1

12、（2）K2 K1 300 K2 加入加入KBr，可增大被测溶液中，可增大被测溶液中NO+的的浓度，所以能加快重氮化反应速度浓度，所以能加快重氮化反应速度（2）酸的种类及其浓度）酸的种类及其浓度在不同酸中重氮化反应的速度为：在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHCl H2SO4 HNO3盐酸盐酸 1:2.56； 加入盐酸：加入盐酸： 重氮化反应速度加快；重氮化反应速度加快； 重氮盐在酸性溶液中稳定；重氮盐在酸性溶液中稳定； 防止生成偶氮氨基化合物，而影防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果响测定结果NN+Cl- + H2NNN NH + HCl（3）室温条件下滴定）室温条件下滴定 1030（4）

13、滴定速度：先快后慢）滴定速度：先快后慢 滴定管尖端插入液面下滴定管尖端插入液面下2/3处，滴处，滴定液一次大部分放下，近终点时方定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定改为慢速滴定 3. 指示终点的方法指示终点的方法（1）永停滴定法）永停滴定法 ChP（2000）、）、BP（1998）永停滴定法（附录永停滴定法（附录A） 用作重氮化法的终点指示时，调节用作重氮化法的终点指示时，调节R1使加使加于电极上的电压约为于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（与盐酸溶液（12）15ml

14、，而后置电磁搅，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入，插入铂铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。点。（2）电位法）电位法

15、 USP（24）（3）外指示剂法）外指示剂法 KI淀粉糊剂或试纸淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl 2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O （4）内指示剂法）内指示剂法 中性红中性红 不可逆指示剂不可逆指示剂4. 测定方法测定方法 盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 ChP（2000） 取本品约取本品约0.6g，精密称定，照永停，精密称定，照永停滴定法（附录滴定法（附录A），在），在1525，用亚硝酸钠滴定液（用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。）滴定。每每1ml亚硝酸钠滴定液（亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于相当于27.28mg的的C13H20N2O2HCl（三）紫外分光

16、光度法（三）紫外分光光度法 对乙酰氨基酚在对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶氢氧化钠溶液中，于液中，于257nm波长处有最大吸收，波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。及其制剂的含量测定。 （二）非水溶液滴定法（二）非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性脂烃胺侧链，具弱碱性 对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 ChP（2000） 取本品约取本品约40mg，精密称定，置，精密称定，置25ml量瓶中，加量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取密量取5m1，置，置100ml量瓶中，加

17、量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，加水至刻度，摇匀，在摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，的波长处测定吸收度，按按C8H9NO2的吸收系数的吸收系数 为为715 计计算，即得算，即得。%11cmE原料药原料药 吸收系数法吸收系数法 %100100%11scmmVnlEA百分含量USP（24） 对照法对照法 （四）比色法（四）比色法 中性条件下的重氮化反应中性条件下的重氮化反应Anm处测定棕红色化合物，磺酸钠萘醌，盐酸普鲁卡因482 421max94pH（五）荧光法（五）荧光法荧光探针技术荧光探针技术 使荧光衍生化试剂与本身无荧光或使荧光衍生化试剂与本身无荧光或荧光

18、效率低的化合物反应，其产物具有强荧光效率低的化合物反应，其产物具有强荧光，从而使检测灵敏度大大提高。荧光，从而使检测灵敏度大大提高。荧光物荧胺盐酸普鲁卡因胺 pH7.5 ex400nm（激发波长）、（激发波长）、em485nm（发射波长）处测定荧光强度，（发射波长）处测定荧光强度，标准曲线法定量。标准曲线法定量。（六）（六）HPLC法法 盐酸普鲁卡因注射液盐酸普鲁卡因注射液 ChP（2000） 可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸物对氨基苯甲酸 离子抑制色谱法离子抑制色谱法 内标法定量内标法定量第二节第二节 苯乙胺类药物的分析苯乙胺类药物的分析 R1C

19、H CH NH R2OH R3苯乙胺类药物的基本结构苯乙胺类药物的基本结构*HOHOCOHHCH2NHCH3肾上腺素常见的苯乙胺类药物常见的苯乙胺类药物HOHOCOHHCH2NH2重酒石酸去甲肾上腺素CCCOOHCOOHOHHHHOHOCHOHCH2NHCH3 HCl盐酸去氧肾上腺素HOCHOHCH2NHCH(CH3)2 HClHO盐酸异丙肾上腺素ClH2NClCHOHCH2NH C(CH3)3HCl盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗H2SO42HOCH2OHCHOHCH2NH C(CH3)3硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇一、结构与性质一、结构与性质 1. 脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性 2.

20、酚羟基，易氧化变色，可发生酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应三氯化铁反应 3. 具手性碳原子，具旋光性具手性碳原子，具旋光性 4. 溶解性溶解性 游离碱难溶于水，易溶游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水于有机溶剂，其盐可溶于水 5. UV 6. IR 7. 取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化特罗可用重氮化偶合反应鉴别、偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。亚硝酸钠滴定法测定含量。 二、鉴别试验二、鉴别试验1. 三氯化铁反应三氯化铁反应2. 氧化反应氧化反应3. 与甲醛与甲醛硫酸反应硫酸反应4. UV与与IR 5. 与亚硝基铁氰化钠反应（与亚硝基铁

21、氰化钠反应（Rimini反反应）应） 脂肪族伯胺的专属反应脂肪族伯胺的专属反应红紫色丙酮亚硝基铁氰化钠重酒石酸间羟胺 NaHCO3HOCHOHCHCH3NH2CH(OH)COOHCH(OH)COOH三、杂质检查 杂质来源杂质来源 原料残存原料残存 检查方法检查方法 比较法（含量测定法）比较法（含量测定法） （一）酮体的检查 检查原理检查原理 利用酮体在利用酮体在310nm波长波长处有最大吸收，而药物本身在此波处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在溶液在310nm波长处的吸收度限制酮波长处的吸收度限制酮体的量。体的量。 （二）有关物质检查

22、（二）有关物质检查 盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物醇等药物 检查方法：检查方法：TLC中高低浓度对比法中高低浓度对比法 配制两种浓度对照溶液配制两种浓度对照溶液（三）盐酸苯乙双胍中有关双胍的检（三）盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查查 检查方法：检查方法：纸色谱法（纸色谱法（PC）分离）分离后，洗脱，照分光光度法于后，洗脱，照分光光度法于232nm波波长处测定吸收度，控制吸收度以控长处测定吸收度，控制吸收度以控制有关双胍的量制有关双胍的量 四、含量测定四、含量测定 （一）非水溶液滴定法（一）非水溶液滴定法 原料药原料药 脂烃胺基侧链，显弱碱性脂烃胺基侧链，显弱碱性

23、（二）溴量法（二）溴量法 盐酸去氧肾上腺素及盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺其注射液、重酒石酸间羟胺 反应摩尔比为反应摩尔比为1 6 HOCH CH2NHCH3OHBr2+3BrBrHOBrCH CH2NHCH3OH+3HBr（三）比色法（三）比色法 盐酸克仑特罗栓盐酸克仑特罗栓 具芳伯氨基，可发生重氮化具芳伯氨基，可发生重氮化偶合偶合反应反应AnmN测定盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗栓乙二胺萘基）（、盐酸氯仿500max1HNaNO2 对照法定量对照法定量 偶合剂偶合剂N-（1-萘基）萘基）-乙二胺遇亚乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所以硝酸也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，

24、应加氨基磺酸铵将剩余在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂N-（1-萘基）萘基）-乙二胺。乙二胺。 （四）提取酸碱滴定法（四）提取酸碱滴定法 硫酸苯丙胺及其制剂硫酸苯丙胺及其制剂盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂游离碱不溶于水，易溶于有机溶剂依据性质终点（过量）乙醚层（苯丙胺）苯丙胺硫酸苯丙胺滴定甲基红、低温蒸去乙醚定量过量的乙醚提取、NaOH42NaClNaOHSOH42SOH碱化碱化有机溶剂提取有机溶剂提取（五）荧光分光光度法（五）荧光分光光度法三羟基吲哚，甲基肾上腺红肾上腺素一定条件下653I2N ex410nm、em520nm处测定荧光

25、强度，处测定荧光强度，对照法定量。对照法定量。（六）（六）HPLC法法 重酒石酸去甲肾上腺素注射液重酒石酸去甲肾上腺素注射液 离子对反相高效液相色谱法离子对反相高效液相色谱法 内标法定量内标法定量 调节溶液调节溶液pH为为3.8，加入离子对试，加入离子对试剂十二烷基磺酸钠剂十二烷基磺酸钠第三节 氨基醚衍生物类药物的分析 CHO CH2CH2N(CH3)2 HCl盐酸苯海拉明CHO CH2CH2N(CH3)2NNOCH3CH3ONNClH茶苯海明茶苯海明一、结构与性质一、结构与性质1. 脂烃胺基侧链，显弱碱性2. UV和IR3. 茶苯海明含卤素 二、鉴别试验二、鉴别试验1. 与硫酸反应呈色与硫酸

26、反应呈色2. 制备三硝基苯酚衍生物测熔点制备三硝基苯酚衍生物测熔点2. 水解反应水解反应3. 与与AgNO3反应形成沉淀反应形成沉淀4. UV和和IR 三、含量测定三、含量测定（一）非水溶液滴定法（一）非水溶液滴定法 原料原料（二）银量法（二）银量法 茶苯海明中茶苯海明中8-氯茶碱的测定氯茶碱的测定间接银量法测定氯茶碱、 Cl8OHNH23（三）酸性染料比色法（三）酸性染料比色法 盐酸苯海拉明片剂及片剂溶出度盐酸苯海拉明片剂及片剂溶出度测定测定（四）阴离子表面活性剂滴定法（双（四）阴离子表面活性剂滴定法（双相滴定法）相滴定法） 盐酸苯海拉明注射液盐酸苯海拉明注射液1. 原理 滴定反应RX+MNaRM+NaX K1 （可溶于有机溶剂） 终点指示MNa+碱性染料有色物 K2 （可溶于有机溶剂）2. 测定对象 有机碱性药物 3. 测定条件 （1）酸性溶液 （3）滴定剂 阴离子表面活性剂 （4）指示剂 碱性染料 二甲基黄或二甲基黄+亚甲兰（混合指示剂可提高灵敏度） 标标标mVc样样标mVc标样标样VVmm（5）本法用对照法定量 因此虽用标准溶液，但标准溶液浓度不用标定。既解决了滴定液的标定问题，又可消除产生的滴定误差。 （五）（五）HPLC法法 茶苯海明片茶苯海明片 离子抑制色谱法离子抑制色谱法 内标法定量内标法定量