实验室生物安全-ppt课件.ppt

1、1ppt课件 中国中国CDC实验人员感染非典病毒事故实验人员感染非典病毒事故 2004年4月中国CDC病毒所腹泻病毒室两名研究生在做病毒实验 时感染sars 病毒。（后患者又引发北京与安徽各1人感染） 事故调查： 事故起因系该所实验人员多次违规将未完全灭活的 sars病毒从P3实验室带出至普通实验室操作而引起（时间与患者 发病相吻合）。 台湾实验人员感染非典病毒事故台湾实验人员感染非典病毒事故 2003年12月台湾一位实验人员在 P3 实验室做病毒实验时，因 清理废弃物操作疏忽，安全程序处理不当而感染病毒。2ppt课件主要内容 基本概念 生物安全实验室分级 安全设施-生物安全柜 个人防护设备

2、微生物学操作技术规范 排除污染的方法 实验室注意事项 化学品、火、电的安全3ppt课件为了避免微生物和医学实验室中有害或有潜在危害的生物因子对人、环境和社会造成的危害或潜在危害，而采取的防护措施（硬件）和管理措施（软件），达到对人、环境和社会的安全防护目的。 4ppt课件 危险生物材料危险生物材料: 存在、或产生于工作环境，可能导致群体或个人的健康危害的生 物介质或物质u 灵长类动物体液和可能传染的医用样品u 实验动物组织包括动物头屑u 微生物类包括细菌、病毒、真菌、立克次氏体和衣原体等u 寄生虫u 过敏原u 生物毒素（细菌、动物或植物） 实验室常用危险生物材料的两个主要来源实验室常用危险生物

3、材料的两个主要来源:u 微生物实验室试验用病原体u 用于化学分析的生物液体样品（如血浆、尿）5ppt课件接触途径接触途径主要为: 口 呼吸 皮肤划伤 皮肤渗透 结膜 带菌者（蚊子、跳蚤、虱子）传染途径中有65-75%是呼吸造成的实验操作中接触危险生物材料或潜在传染性材料时，了解其危害，采用适当技术防止不必要的接触十分关键6ppt课件乙肝的传播途径1.垂直传播:母婴传播2. 血液传播u医源性：因消毒不严格的医疗器械而传播，如多次使用的注射器、针头、针灸针、各种介入性穿刺、内镜检查、牙科治疗、手术等。，牙龈出血3. 性传播 我们的实验工作中,一定要防范这一传播途径，要戴口罩，戴手套，穿防护服进行个

4、人防护，注意实验过程中避免皮肤破损与划伤。7ppt课件肺结核的传播途径1、空气-呼吸道，这是结核病最主要的传染途径。病人大声讲话、咳嗽、打喷嚏，会释放出很多带结核杆菌的飞沫，若易感者吸入了这种飞沫，即可被感染。肺结核病人如果把痰吐在地上，痰液干燥后，结核杆菌与尘埃混在一起飞扬在空气中，被健康人吸入肺内也可引起传染。 我们的实验工作中,主要要防范感染性气溶胶传播，通过紫外照射消毒，实验分区，使用生物安全柜，乙醇消毒，戴纱布口罩与N95口罩等个人装备进行防护。8ppt课件存在形式存在形式气溶胶气溶胶 气溶胶：悬浮于气体介质中的固态或液态微小粒子（粒径一般为0.001-100m）形成的相对稳定的分散

5、体系微生物气溶胶：微粒中含有微生物。感染性气溶胶：微粒中含有致病微生物。 气溶胶粒子的大小不同，经呼吸道到达体内的深度和归宿不同气溶胶粒子的大小不同，经呼吸道到达体内的深度和归宿不同粒径 10m，一般被阻留在鼻腔内； 510m，可到达支气管； 5m，可进入细支气管和肺泡。 气溶胶粒子越小，进入的部位就越深： 1m的在肺泡内沉积率最高； 0.4m的粒子能较自由地进出肺泡并可随呼气排出体外，沉积较少。9ppt课件u 离心u 热的接种环放在菌液或菌苔上（推荐使用一次性接种环）u 液体从吸管掉落到工作台面上u 用移液管或移液器反复吹吸混合u 磨口瓶子打开瓶塞时（推荐使用螺口瓶）u 快速地脱实验服产生气

6、溶胶的主要操作产生气溶胶的主要操作10ppt课件11ppt课件 三项技术措施三项技术措施u 样品隔离技术，防止传染因子进入环境接触人u 定向流技术，防止传染因子扩散u 消毒灭菌技术，灭活传染因子 实验室生物安全防护的内容包括：实验室生物安全防护的内容包括：u 安全设备、个体防护装置和措施u 实验室的特殊设计和建设要求u 严格的管理制度和标准化的操作程序和规程等方面采取综合措施来达到： 确保实验室工作人员不受实验对象侵染， 确保周围环境不受其污染的目的 。12ppt课件 一级屏障（primary barrier）是操作者和被操作对象之间的隔离，也称一级隔离.如: u生物安全柜u个体防护装备 二级

7、屏障(secondary barrier) 生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离.如: u实验室的设施结构u通风空调系统 u给水排水系统u电气和控制系统二级隔离的防护能力取决于实验室分区和定向气流 一般按照实验因子污染的概率把实验室分为洁净、半污染和污染三个区13ppt课件主要内容 基本概念 生物安全实验室分级 安全设施-生物安全柜 个人防护设备 微生物学操作技术规范 排除污染的方法 实验室注意事项 化学品、火、电的安全14ppt课件 根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将实验室生物安全防护水平（biosafety level，BSL）分为4级，I级防护水平最低，IV级防护

8、水平最高 以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平 15ppt课件16ppt课件u 无需特殊设备或操作u 标准的设计合理的实验动物、实验设备及满足基本安全试验操作u 必须提供洗手池u 必须合理使用消毒剂17ppt课件u 在生物安全柜中进行可能发生气溶胶的操作。门保持关闭并贴上适当的危险标志。潜在被污染的废弃物同普通废弃物隔开。u 实验设施包括高压灭菌锅、 高效空气过滤器、一级或二级生物安全柜u 所有污染材料须经净化18ppt课件u 双道门和淋浴u 缓冲间或气锁室。 u 密封u 呈负压 u 高效空气过滤器系统u 二级生物安全柜u 自动控制的洗手池19ppt

9、课件u 最高级别屏蔽u 设立一个设备齐全的隔离单元，完全能够独立操作u 设备专门设计，由空气锁控制出入u 二级或三级生物安全柜，正压通风u 为全面控制污染物，采用单独的通风系统20ppt课件主要内容 基本概念 生物安全实验室分级 安全设施-生物安全柜 个人防护设备 微生物学操作技术规范 排除污染的方法 实验室注意事项 化学品、火、电的安全21ppt课件一级生物安全柜示意图u类似化学实验室的通风橱，排出的气体要通过高效空气过滤器u常常用于放置离心机和天平A：前开口；B：窗口；C：排风HEPA 过滤器；D：压力排风系统22ppt课件u 提供气流向下的经高效空气过滤器净化的空气，保护产品u 进一步基

10、于排气/再循环空气比值进行细化为A、B1、B2和B3型二级生物安全柜A：前开口；B：窗口；C：排风HEPA 过滤器；D：后面的压力排风系统；E：供风HEPA 过滤器；F：风机23ppt课件u 密闭单元- “手套箱”u 排气须经过双层的高效空气过滤器或其它处理方法（如空气焚烧），阻止危险度四级的微生物进入环境三级生物安全柜24ppt课件如何使用生物安全柜u打开生物安全柜后,调节好适当的风速,再用纸条放在前开口检查是否呈负压。u尽量少放置器材或标本。u所有工作必须在工作台面的中后部进行。u操作者不应反复移出和伸进手臂以免干扰气流。u不要使实验记录本移液管以及其他物品阻挡空气格栅。u工作完成后以及每

11、天下班前，应使用适当的消毒剂对生物安全柜的表面进行擦拭。u在安全柜内的工作开始前和结束后，安全柜的风机应至少运行10min,紫外照射15min。25ppt课件主要内容 基本概念 生物安全实验室分级 安全设施-生物安全柜 个人防护设备 微生物学操作技术规范 排除污染的方法 实验室注意事项 化学品、火、电的安全26ppt课件个人防护装备个人防护装备 定义：定义：是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子伤 害的器材和用品。 作用：作用：在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人员 免于暴露于生物危害物质（气溶胶、喷濺物以及意外接种等 危险的一种物理屏障。 所涉及的防护部位所涉及的防

12、护部位 ： 眼睛、头面部、躯体、手、足、耳（听力）、呼吸道 装备包括：装备包括： 1、眼镜（安全镜、护目镜） 2、口罩、面罩、防毒面具 3、帽子 4、防护衣 ( 实验服、隔离衣、连体衣、 围裙) 5、手套 6、鞋套 7、听力保护器等。27ppt课件1、安全眼镜和护目镜 大多数情况，佩戴侧面带有护罩的安全眼镜能够保护工作人员避免受到大部分实验室操作所带来的损害。只有在进行有可能发生化学和生物污染物质溅出的实验时，必须佩戴护目镜。2、洗眼装置b 、安全护目镜、安全护目镜（一）眼睛防护装备（一）眼睛防护装备a 、 安全镜安全镜建议：建议：工作人员在生物安全实验室工作时不配戴隐型眼镜工作人员在生物安全

13、实验室工作时不配戴隐型眼镜 不得戴眼镜防护装备离开实验室区域不得戴眼镜防护装备离开实验室区域 ！28ppt课件（二）头面部防护装备（二）头面部防护装备口口 罩罩 防防 护护 帽帽要求： 工作人员在实验操作时应佩带防护帽 a.普通口罩b. n95口罩29ppt课件（三）呼吸防护装备（三）呼吸防护装备-防护面具防护面具防护面具防护面具30ppt课件使用中的全罩式防护面具使用中的全罩式防护面具（三）呼吸防护装备（三）呼吸防护装备-全罩式防护面具全罩式防护面具31ppt课件正压面罩正压面罩（三）呼吸防护装备（三）呼吸防护装备-正压面罩正压面罩32ppt课件实验服 隔离衣 连体防护 （四）身体防护装备（

14、四）身体防护装备33ppt课件1、在、在接触感染性物质接触感染性物质 （血液、体液、分泌液、渗出液、以及接触粘膜（血液、体液、分泌液、渗出液、以及接触粘膜和非完整皮肤时），和非完整皮肤时），必须使用合适的手套以保护工作人员避免受到必须使用合适的手套以保护工作人员避免受到污染物溅出或生物污染的事故所造成的损害。污染物溅出或生物污染的事故所造成的损害。 2、手套被污染，、手套被污染，应该尽可能早的脱下，消毒后丢弃。应该尽可能早的脱下，消毒后丢弃。 乳胶手套 聚脂手套 （五）手部防护装备（五）手部防护装备聚氯乙烯手套34ppt课件手套的使用 手套的使用u 检查手套的完整性。u一般情况下，佩戴一副手套

15、即可（BSL-1和BSL-2实验室) 。u若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-3实验室）应 佩戴两副手套。 u在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃 在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验。u戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服衣袖。 避免手套“触摸污染” u戴手套的手避免触摸鼻子、面部和避免触摸或调整其他个人防护装备（如眼镜等）。u避免触摸不必要的物体表面如灯开关、门或把手等。u注意尽量不去触摸工作台面和其他物品。u如果手套撕破应该脱去，在换戴新手套前应清洗手部35ppt课件洗手洗手1.掌心对掌心搓擦 2.手指交错掌心对手背搓擦 3.手

16、指交错掌心对掌心搓擦4.两手互握互搓指背 5.拇指在长中转动搓擦 6.指尖在掌心中摩擦 标准的洗手方法 36ppt课件（六）足部防护装置（六）足部防护装置当实验室中存在物理、化学和生物危险因子的情况下，穿合适的鞋子和鞋套或靴套。 BSL-2和BSL-3实验室要坚持穿鞋套或靴套。BSL-3和BSL-4实验室要求使用专用鞋。 禁止在生物安全实验室中穿凉鞋、拖鞋、露趾的鞋。37ppt课件穿戴脱卸个人防护装备的顺序穿戴脱卸个人防护装备的顺序 穿戴个人防护装备的顺序穿戴个人防护装备的顺序戴口罩戴帽子穿防护服戴防护眼镜穿鞋套戴手套 脱卸个人防护装备的顺序脱卸个人防护装备的顺序外层手套防护眼镜隔离衣口罩和防

17、护帽鞋套内层手套38ppt课件主要内容 基本概念 生物安全实验室分级 安全设施-生物安全柜 个人防护设备 微生物学操作技术规范 排除污染的方法 实验室注意事项 化学品、火、电的安全39ppt课件 标本容器标本容器标本容器可以是玻璃的，但最好使用塑料制品。应密封无泄漏。在容器外部不能有残留物。容器上应当正确地粘贴标签以便于识别。标本的要求或说明书要和样品分开放置，最好放置在防水的袋子里。 标本在设施内的传递标本在设施内的传递应当使用盒子等二级容器，并将标本的容器保持直立。二级容器可以是金属或塑料制品，应该可以耐高压灭菌或耐受化学消毒剂的作用。密封口最好有一个垫圈，要定期清除污染。 标本接收标本接

18、收需要接收大量标本的实验室应当安排专门的房间或空间。 打开包装打开包装接收和打开标本的人员应当了解标本对身体健康的潜在危害，并接受过如何采用标准防护方法的培训，尤其是处理破碎或泄漏的容器时更应如此。标本的内层容器要在生物安全柜内打开，并准备好消毒剂。标本的安全操作标本的安全操作40ppt课件1、只有经过严格培训的人员才能进行这项工作。2、操作时应戴手套以及眼睛的保护装置。3、血液和血清应当小心吸取，而不能倾倒。严禁用口吸液。4、移液管使用后应完全浸入适当的消毒液中。移液管应在消毒液中浸泡适当的时间，然后再丢弃或灭菌清洗后重复使用。5、带有血凝块等的废弃标本管，在加盖后应当放在适当的防漏容器内高

19、压灭菌和或焚烧。6、应备有适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出标本。血清的分离血清的分离41ppt课件避免感染性物质的食入以及与皮肤和眼睛的接触避免感染性物质的食入以及与皮肤和眼睛的接触1、微生物操作中释放的较大粒子和液滴（直径大于5m）会迅速沉降到工作台面和操作者的手上。实验室人员在操作时应戴一次性手套，并避免触摸口、眼及面部。2、不能在实验室内饮食和储存食品。3、在实验室里时，嘴里不应有东西钢笔、铅笔、口香糖。4、不应在实验室化妆。5、在所有可能产生潜在感染性物质喷溅的操作过程中，操作人员应将面部、口和眼遮住或采取其他防护措施。42ppt课件1、通过认真练习和仔细操作，可以避免破损玻璃器皿的刺伤所

20、引起的接种感染。应尽可能用塑料制品代替玻璃制品。2、锐器损伤（如通过皮下注射针头、吸管以及破碎的玻璃）可能引起意外注入感染性物质。3、以下两点可以减少针刺损伤：（a）减少使用注射器和针头。（b）在必须使用注射器和针头时，采用锐器安全装置。4、不要重新给用过的注射器针头戴护套。一次性物品应丢弃在防耐穿透的带盖容器中。5、应当用塑料吸管代替玻璃吸管。避免感染性物质的注入避免感染性物质的注入43ppt课件1、为了避免被接种物洒落，微生物接种环的直径应为23mm 并完全封闭，柄的长度应小于6cm 以减小抖动。2、最好使用不需要再进行消毒的一次性接种环。3、干燥痰液标本时要注意避免生成气溶胶。4、准备高

21、压灭菌和或将被处理的废弃标本和培养物应当放置在防漏的容器内（如实验室废弃物袋）。在丢弃到废弃物盛器中以前，顶部要固定好（如采用高压灭菌胶带）。5、在每一阶段工作结束后，必须采用适当的消毒剂清除工作区的污染。避免感染性物质的扩散避免感染性物质的扩散44ppt课件潜在危害性气溶胶的释放潜在危害性气溶胶的释放（在生物安全柜以外）u所有人员必须立即撤离相关区域，任何暴露人员都应接受医学咨询。应当立即通知实验室负责人和生物安全官员。为了使气溶胶排出和使较大的粒子沉降，在一定时间内（例如1 h 内）严禁人员入内。如果实验室没有中央通风系统，则应推迟进入实验室（例如24 h）。u应张贴“禁止进入”的标志。过

22、了相应时间后，在生物安全官员的指导下来清除污染。应穿戴适当的防护服和呼吸保护装备。45ppt课件主要内容 基本概念 生物安全实验室分级 安全设施-生物安全柜 个人防护设备 微生物学操作技术规范 排除污染的方法 实验室注意事项 化学品、火、电的安全46ppt课件排除污染的方法排除污染的方法排除污染的方法：杀菌和消毒 感染性废弃物处理 黄色耐高压袋装固体垃圾，器皿（可耐高压）盛放液体垃圾，器皿内装有消毒液，放在指定的地点。然后由清洁人员进行高压灭菌处理。 容器破碎及感染性物质的溢出处理u 应当立即用布或纸巾覆盖受感染性物质污染或受感染性物质溢洒的破碎物品。然后在上面倒上消毒剂，并使其作用适当时间。

23、然后将布、纸巾以及破碎物品清理掉；玻璃碎片应用镊子清理。然后再用消毒剂擦拭污染区域。如果用簸箕清理破碎物，应当对他们进行高压灭菌或放在有效的消毒液内浸泡。用于清理的布、纸巾和抹布等应当放在盛放污染性废弃物的容器内。在所有这些操作过程中都应戴手套。u 如果实验表格或其他打印或手写材料被污染，应将这些信息复制，并将原件置于盛放污染性废弃物的容器内。47ppt课件结核实验室人员安全防护结核实验室人员安全防护 1u 严格遵守实验室安全操作规程，实验室的技术人员必须经过生物安全培训后方可上岗。u 严格遵守实验室安全操作规程，警惕分支杆菌气溶胶的产生。u 实验室应严格限制非实验室人员进入，减少实验室内外交

24、叉生物污染。u 进入实验室，尽量避免携带非必需物品。实验台上不放任何与实验无关的物件或私人用品。u 工作人员进入实验室，应穿工作服并注意着装整齐，操作时应戴口罩、帽子和手套，长发者须将头发装束在帽子内。u 实验室内应保持肃静，实验过程中禁止一切与实验无关的活动，以保证集中精力完成实验操作。48ppt课件u 实验室内禁止吸烟、饮食及用嘴湿润铅笔或标签等，也不要以手抚摩头面部等。u 实验前须开启紫外线灯对实验室和操作区进行照射消毒1小时以上；实验结束后，开启紫外灯对操作区的实验室进行照射消毒2小时以上。u 实验室中的生物危险物要根据检查项目和性质的不同，局限在相应的实验室或实验区域内，不得随意将其

25、带到其它区域进行。u 每次实验操作终止后，必须清理好实验台,所有物品归位并用70%-75%酒精等有效消毒剂擦洗实验台和地面。u实验结束后，操作人员要用清洁剂（或肥皂）和清水充分洗净双手。结核实验室人员安全防护结核实验室人员安全防护 249ppt课件结核实验室污物消毒与处理结核实验室污物消毒与处理1、痰标本、被污染的一次性用品及实验室垃圾应经高压灭菌后丢弃，或者使用专用的焚烧炉对垃圾进行焚烧。2、实验过程中，如标本被打翻污染了操作台或地面，应以大于污染面积的纱布或卫生纸吸满70%-75%酒精，覆盖污染区，30分钟后方可移去，再经紫外线近距离照射。50ppt课件主要内容 基本概念 生物安全实验室分

26、级 安全设施-生物安全柜 个人防护设备 微生物学操作技术规范 排除污染的方法 实验室注意事项 化学品、火、电的安全51ppt课件 以下情况需特别关注：1、气溶胶的形成。2、处理大容量和或高浓度微生物。3、仪器设备过度拥挤和过多。4、未经允许人员进入实验室。5、工作流程：一些特殊标本和试剂的使用。 经常遇到的高危操作1、吸入危险（气溶胶产物），如使用接种环、划线接种琼脂平板、移液、制作涂片、打开培养物、采集血液血清标本、离心等。2、食入危险，如处理标本、涂片以及培养物。3、在使用注射器和针头时刺伤皮肤的危险。4、处理动物时被咬伤、抓伤。5、接触血液以及其他有潜在病理学危害的材料。6、感染性材料的

27、污染清除和处理。实验工作中注意事项实验工作中注意事项52ppt课件主要内容 基本概念 生物安全实验室分级 安全设施-生物安全柜 个人防护设备 微生物学操作技术规范 排除污染的方法 实验室注意事项 化学品、火、电的安全53ppt课件注意注意:化学品的储存关于不相容化学品化学品的毒性作用爆炸性化学品化学品溢出电的危害噪声电离辐射化学品、火和电的安全化学品、火和电的安全54ppt课件在实验室中引起火灾的通常原因包括：在实验室中引起火灾的通常原因包括：1、超负荷用电2、电器保养不良，例如电缆的绝缘层破旧或损坏3、供气管或电线过长4、仪器设备在不使用时未关闭电源5、使用不是专为实验室环境设计的仪器设备6、明火7、供气管老化锈蚀8、易燃、易爆品处理、保存不当9、不相容化学品没有正确隔离10、在易燃物品和蒸气附近有能产生火花的设备11、通风系统不当或不充分。化学品、火和电的安全化学品、火和电的安全55ppt课件56ppt课件