微生物检验PPT课件.ppt

1、12345二、二、 微生物特性微生物特性 炭疽芽胞杆菌 亚甲基蓝染色 1000 革兰染色 100067培养特性：需氧或兼性厌氧，生长条件不严格，最适温 度3035普通培养基扁平、粗糙、不透明、灰白色、 无光泽，边缘不整齐的菌落，低倍镜下菌落边 缘呈卷发状8炭疽杆菌在血琼脂平板中菌落炭疽杆菌在血琼脂平板中菌落 9101112荚膜多肽抗原： -与毒力有关，有抗吞噬作用，有利于细 菌生长和扩散 -荚膜肿胀试验，对本菌鉴定有意义芽胞抗原： 有免疫原性和血清学诊断价值131415-芽胞对化学消毒剂抵抗力不一，对碘和氧化 剂较敏感，常用以下方法杀菌： 1：2500碘 10min、 3%H2O2 1h、 4

2、%高锰酸钾 15min、 0.5%过氧乙酸 10min -对磺胺、青霉素、链霉素、四环素、红霉素、 氯酶素均敏感16三、微生物学检验三、微生物学检验1718无杂菌污染标本：直接接种肉汤增菌或固体培养基污染杂菌固体标本：加10倍量生理盐水充分浸泡，振 荡1015min 、静置10min，取悬液65水浴30min或 855min杀死杂菌，保留芽胞活性，再增菌和培养污染杂菌液体标本：离心 ，弃上清液后，加0.5%洗涤 剂振荡1015min ，离心取沉淀物增菌和分离培养 19生化反应噬菌体裂解青霉素抑制毒力试验检验程序皮毛、腐败脏器等血液Ascoli试验以NG制成悬液经加温或饱和尿素处理肉汤增菌培养B

3、AP或戊烷脒平板2%兔血清肉汤4-8hG染色镜检菌落特征动力观察串珠试验确定报告荚膜肿胀试验20痰、呕吐物、CSF及炎症分泌物2%兔血清肉汤快速增菌374h荚膜肿胀试验直接涂片荚膜染色 G染色初步报告0.2ml注射小白鼠腹腔，8h后解剖涂片G染色、荚膜染色初步报告212223青霉素抑制试验：接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板，3724h 生长 受抑制不生长 串珠和青霉素抑制联合试验：兔血琼脂平板抑菌环青霉素纸片24 噬菌体裂解试验：AP631炭疽噬菌体 NaHCO3毒力试验： 接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板， 10%CO2、37、2448h 有毒株形成荚膜黏液型菌

4、落 无毒株不形成荚膜粗糙型菌落 动物试验： 小鼠、家兔或豚鼠皮下接种25植物凝集素试验：Ascoli热沉淀试验：可作追溯性诊断2627282930培养特性：培养特性：需氧或兼性厌氧营养要求不高最适温度3035普通琼脂平板：菌落较大， 灰白色，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状，有 蜡样光泽3132生化反应：能分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、水杨素、糊 精，产酸不产气能胨化牛乳，液化明胶，VP（+）、卵磷脂 酶（+） 多次传代后生化特性常可改变 33抵抗力：耐热，肉汤中细菌需10020min才能杀死，食物中毒菌株的游离芽胞耐受10030min、干热12060min才能杀死对氯霉素、红霉素、庆大霉素敏感，对青霉

5、素、磺胺、呋喃类耐药343536检验程序呕吐物、残留食物等活菌计数 接种 普通琼脂平板、BAP 、卵黄平板3718-24h纯培养动物试验（肠毒素测定）生化反应血清凝集（分型）报告结果直接涂片染色镜检37检验方法：直接镜检分离培养与活菌计数 普通琼脂平板、BAP、卵黄平板鉴定与分型： 根据菌落特点、形态染色、生化反应等初步鉴定 生化分型、血清分型、噬菌体分型，肠毒素检测383940414243孕妇李斯特菌病新生儿李斯特菌病成人李斯特菌病局部感染4445 2025形成周鞭毛，有动力；37时鞭毛 很少或无 细菌接种半固体培养基，置室温，由于动力 强，细菌自穿刺线向四周弥漫生长，在离琼 脂表面数毫米处

6、出现一个倒伞形的生长，是 本菌特征之一46474849505152鉴定：形态特征、菌落特点、动力及生化反应作出 鉴定 可疑菌落用已知李斯特菌1型、4型或多价抗 血清做玻片凝集试验进行鉴定与其他G+菌鉴别53 触酶 动力 马尿酸盐水解产单核李斯 + + -B群链球菌 - - +本菌有耐碱耐盐的特点，可用触酶试验与 肠球菌鉴别54本菌隶属于丹毒丝菌属555657红斑丹毒丝菌红斑丹毒丝菌 革兰染色革兰染色 100058培养特性:厌氧或微需氧、初次分离需在厌氧环境，传代后有氧环境也能生长，最适温度30-35。在含葡萄糖或血清培养基生长旺盛 59BAP：3524h可形成两种菌落光滑型：菌落细小、透明突起

7、、发亮、边缘整 齐、质软易于悬于液体中，毒力较强粗糙型：菌落较大，颗粒状、扁平、边缘不齐 可呈卷发状，无毒力BAP上新分离的菌株有轻微的溶血，培养时间延长溶血现象明显，传代后溶血特性常消失60 在半固体表层下数mm处发育最好，常呈带状 含碲盐的培养基黑色菌落 61 葡萄糖肉汤：培养24h后，呈轻微混 浊，不 形成菌膜，室温静置23天后，管底有少量 灰色沉淀；粗糙型沉淀较多。 S-R变异同时毒力、抗原性也发生变异，但 遗传学上不稳定，常出现互变。 6263鉴定依据： G+、H2S +、无动力、触酶 -、吲哚 -、VP -与产单核细胞李斯特菌鉴别（表11-2）新霉素敏感试验：红斑丹毒丝菌R 产单核

8、李斯特菌S 动物毒力试验：对小鼠、大鼠、兔、鸽均有致病性，0.2ml的24天培养物注入小鼠腹腔，4-5天后，败血症而死，心血培养（+）64属于加特纳菌属此菌属只有本菌一个种65666768生化反应：氧化酶 -、触酶 -、尿素酶 -发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖等产酸不产气水解马尿酸钠和淀粉，吲哚 -、明胶液化 -、甘露醇分解 -抵抗力：对氨苄青霉素、羟氨苄青霉素、苯唑青霉素、青霉素、万古霉素、甲硝哒唑敏感，对萘啶酸、新霉素、多粘菌素和磺胺嘧啶耐药。6970涂片染色镜检：观察线索细胞，了解阴道菌群状况，常见大量小的G-和染色不定的杆菌和球杆菌，而无大的G+杆菌（乳酸杆菌）pH测定：pH4.5，提示细菌性阴道病胺试验：滴加10%KOH即发出鱼腥嗅为“+”71分离培养： 5%人血琼脂平板、35、5%CO2环境48h鉴定： 菌落、涂片染色、氧化酶 -、触酶 -、 糖发酵及其他生化反应 72分泌物（阴道、宫颈）新鲜湿片（找线索细胞）涂片染色镜检分离培养（5%人血平板）溶血菌落纯培养（5%人血平板）触酶（-）氧化酶（-）GV的主要鉴定试验初步报告最后报告73