对乙酰氨基酚课件.ppt

1、第六章第六章 芳酸类非甾体抗炎药物分析芳酸类非甾体抗炎药物分析Analysis of Aromatic carboxylic acids药分分析教研室药分分析教研室vChemical structure & featurevIdentificationvDetection of specific impurities in Aspirin,Sodium aminosalicylate & ClofibratevAssay第一节 典型药物的结构与性质v苯甲酸类苯甲酸类v水杨酸类水杨酸类v其他芳酸类其他芳酸类一、苯甲酸类一、苯甲酸类苯甲酸（pKa4.20）COOHCOOHSO2(CH3CH2CH2

2、)2N甲芬那酸甲芬那酸 mefenamic acidCOOHNH HCH3CH3丙磺舒（丙磺舒（pKa3.4）代表药物代表药物苯甲酸（pKa4.20）COOHCOOHSO2(CH3CH2CH2)2N甲芬那酸甲芬那酸 mefenamic acidCOOHNH HCH3CH3丙磺舒（丙磺舒（pKa3.4）性质性质v酸性酸性 含量测定含量测定v+ FeCl3赭色赭色(鉴别鉴别)v紫外吸收紫外吸收 (鉴别、含量测定鉴别、含量测定)二、水杨酸类COOHOR二、水杨酸类代表药物代表药物COOHOH水杨酸 （pKa2.98）COOHOCOCH3阿司匹林（pKa3.49）二、水杨酸类代表药物代表药物双水杨酯C

3、OOHOOOH二、水杨酸类代表药物代表药物OCOCH3COONHCOCH3贝诺酯贝诺酯二、水杨酸类性质性质1、酸性、酸性：水杨酸类基本结构为邻羟基苯甲酸，水杨酸类基本结构为邻羟基苯甲酸，易形成分子内氢键，增强羧基中氧氢键的极易形成分子内氢键，增强羧基中氧氢键的极性，酸性强于苯甲酸。含量测定性，酸性强于苯甲酸。含量测定2、吸收光谱特征、吸收光谱特征：苯环及特征取代基：苯环及特征取代基 鉴别鉴别 含量测定含量测定二、水杨酸类性质性质3、与、与Fe 3+反应：反应：特征鉴别反应特征鉴别反应具有酚羟基结构，弱酸环境与具有酚羟基结构，弱酸环境与Fe 3+ 生成紫色配位化生成紫色配位化合物。合物。4、水解

4、反应、水解反应：杂质检查杂质检查水解水解水杨酸酯类水杨酸酯类游离水杨酸游离水杨酸三、其他芳酸类布洛芬布洛芬 ibuprofenCHCH2CHCH3CH3COOHCH3酰胺基酰胺基:水解后芳伯氨基特性水解后芳伯氨基特性酚羟基酚羟基:与与FeCl3显色显色水解产物反应水解产物反应 较弱酸性较弱酸性紫外、红外吸收紫外、红外吸收HONHCOCH3对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 (paracetamol)第二节第二节 鉴别试验鉴别试验鉴鉴 别别 反反 应应与铁盐反应与铁盐反应重氮化重氮化-偶合反应偶合反应氧化反应氧化反应水解反应水解反应UVIRTLCHPLCOCOO23FeFe紫堇色紫堇色COO-OHT.S.

5、FeCl3pH46一、一、与铁盐反应与铁盐反应3+FeCl3NHCOCH3OHNHCOCH3O3Fe+3HCl（蓝紫色）（蓝紫色）芳香第一胺类鉴别反应芳香第一胺类鉴别反应具芳伯具芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物氨基或潜在芳伯氨基的药物 ArNH2HClNaNO2重氮盐橙黄猩红色萘酚OH-二、重氮化偶合反应NH2NHCOCH3HO 盐酸或硫酸加热水解盐酸或硫酸加热水解 NaNO2/HCl 碱性碱性-萘酚萘酚 有色偶氮染料（红色有色偶氮染料（红色)对乙酰氨基酚：潜在芳伯氨基对乙酰氨基酚：潜在芳伯氨基二、重氮化偶合反应二、重氮化偶合反应甲芬那酸甲芬那酸H2SO4深蓝色深蓝色(O)K2Cr2O7甲芬那酸甲

6、芬那酸H2SO4深蓝色深蓝色(O)K2Cr2O7随即变为棕绿色棕绿色三、三、氧化反应氧化反应醋酸臭气）水杨酸（白色醋酸钠水杨酸钠阿司匹林硫酸 CONa32四、四、水解反应水解反应可溶于醋酸铵（测定熔点），水杨酸白色双水杨酯稀盐酸NaOH六、紫外分光光度法六、紫外分光光度法药物药物溶剂溶剂 max/ minE值值A值值A1/A2贝诺酯贝诺酯无水乙醇无水乙醇240730-760羟苯乙酯羟苯乙酯乙醇乙醇(5 (5 g/ml)g/ml)2590.48丙磺舒丙磺舒盐酸盐酸- -乙醇乙醇(20(20 g/ml)g/ml)225,2490.67布洛芬布洛芬0.4%0.4%NaOHNaOH( (0.250.2

7、5mg/ml)mg/ml)265,273;245,271甲芬那酸甲芬那酸盐酸盐酸- -乙醇乙醇(20(20 g/ml)g/ml)279,3500.69-0.74,0.59-0.601.15-1.30对氨基水对氨基水杨酸钠杨酸钠磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液265,2991.50-1.56七、红外分光光度法七、红外分光光度法峰位（峰位（cmcm-1-1）峰强度峰强度归属基团或化学键归属基团或化学键3750375030003000强强O-HO-H、N-H N-H (胺基胺基,羟基羟基)3000300027002700弱强弱强C-HC-H（烷基）、烷基）、- -CHOCHO3300330030003000

8、弱中等弱中等CHCH、=CH=CH、ArAr-H-H2400240021002100弱中等弱中等CNCN1900190016501650强强C=O(C=O(醛醛, ,酮酮, ,羧酸及衍生物羧酸及衍生物) )1670167015001500中等强中等强C=CC=C、C=NC=N、N-HN-H1300130010001000强强C-OC-O（醇醇,酚酚,醚醚, ,酯酯, ,羧酸）羧酸）10001000650650中等强中等强不同取代形式双键、苯环不同取代形式双键、苯环八、薄层色谱法八、薄层色谱法制剂鉴别：辅料干扰，分离后鉴别制剂鉴别：辅料干扰，分离后鉴别 比移值相同比移值相同九、高效液相色谱法九、

9、高效液相色谱法保留时间相同保留时间相同第三节第三节 特殊杂质检查特殊杂质检查v阿司匹林中特殊杂质的检查阿司匹林中特殊杂质的检查v对乙酰氨基酚特殊杂质的检查对乙酰氨基酚特殊杂质的检查v甲芬那酸中特殊杂质的检查甲芬那酸中特殊杂质的检查v二氟尼柳中特殊杂质的检查二氟尼柳中特殊杂质的检查（一）合成工艺（一）合成工艺ONaCOOHOHCOOHOCOCH3CO2ONaCOONaH+ （CH3CO）2O+ CH3COOH一一 、阿司匹林中特殊杂质检查、阿司匹林中特殊杂质检查一一 、阿司匹林中特殊杂质检查、阿司匹林中特殊杂质检查（二）检查（二）检查 v水杨酸水杨酸v有关物质有关物质COOHOCOCH3COOH

10、OHCOOHOHOHOOCOOHOOCOOHHOOOCOOHHOCOOHHOOOCOOH淡黄、红棕、深棕色l为合成中间体和水解产物为合成中间体和水解产物（二）检查（二）检查 -水杨酸水杨酸方法方法：高效液相色谱法高效液相色谱法 应用范围应用范围：原料、片剂、肠溶片、肠溶胶囊等原料、片剂、肠溶片、肠溶胶囊等 （二）检查（二）检查 -水杨酸水杨酸OH酚COOOH水杨酸苯酯CH3COO乙酸苯酯COOOCOCH3乙酰水杨酸苯酯COOHOCOCH3v 检查检查酚、苯酯类杂质。酚、苯酯类杂质。v 方法方法高效液相色谱法高效液相色谱法(梯度洗脱梯度洗脱)。 （二）检查（二）检查 -有关物质有关物质新疆医科大

11、学新疆医科大学 药物分析教研室药物分析教研室NO2ClNaOH 水解NO2OHFe, HClNH2OHC2H5OH, 乙酰化对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚特殊杂质：特殊杂质：中间体、副产物及分解产物（例：中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚对氨基酚、对氯苯乙酰胺对氯苯乙酰胺、O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等）乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等）对氨基酚的检查对氨基酚的检查二、二、对乙酰氨基酚中的特殊杂质对乙酰氨基酚中的特殊杂质（一）合成工艺（一）合成工艺新疆医科大学新疆医科大学 药物分析教研室药物分析教研室1、对氨基酚及有关物质、对氨基酚及有关物质乙酰

12、化不完全或贮藏不当引起水解毒性较大并有色泽乙酰化不完全或贮藏不当引起水解毒性较大并有色泽 高效液相色谱法。高效液相色谱法。注：对氨基酚对照溶液不稳定，应临用前新鲜配制。注：对氨基酚对照溶液不稳定，应临用前新鲜配制。二、二、对乙酰氨基酚中的特殊杂质对乙酰氨基酚中的特殊杂质2、对氯苯乙酰胺、对氯苯乙酰胺以对氯苯乙酰胺为对照品，以对氯苯乙酰胺为对照品，HPLC限度检查。限度检查。（二）检查（二）检查 （一）合成工艺（一）合成工艺ClCOOH+CH3CH3NH2CuCOOHNHCH3CH3邻邻- -氯苯氯苯甲酸甲酸2 2，3-3-二二甲基苯胺甲基苯胺甲芬那酸甲芬那酸三、甲芬那酸中特殊杂质的检查三、甲芬

13、那酸中特殊杂质的检查（二）检查（二）检查2,3-二甲基苯胺的检查方法：高效液相色谱法方法：高效液相色谱法FFNH3+偶合偶合CuFF乙酰化乙酰化(CH3CO)2O,AlCl3FFCOCH3FFOCOCH3氧化氧化H2O2水解水解OH-/H+FFOH羧化羧化CO2,CH3ONaFFOHCOOH（一）合成工艺（一）合成工艺四、二氟尼柳中特殊杂质的检查四、二氟尼柳中特殊杂质的检查（二）检查（二）检查v 正相正相TLC检查有关物质检查有关物质A：q 供试品溶液：本品供试品溶液：本品+ +甲醇甲醇1010mg/mlmg/mlq 对照溶液：对照溶液：5050gg/ml/ml甲醇溶液甲醇溶液q 方法：照薄层

14、色谱法试验，吸取上述两种溶液各方法：照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 5ll，分别点于同一硅胶分别点于同一硅胶GFGF254254薄层板上，以正己烷薄层板上，以正己烷- -二氧六环二氧六环- -冰醋酸冰醋酸(85:10:5)(85:10:5)为展开剂，展开，晾为展开剂，展开，晾干，置紫外光灯干，置紫外光灯(254(254nm)nm)下检视，供试品溶液如显下检视，供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。 v 反相反相HPLC检查有关物质检查有关物质Bq 供试品溶液与对照溶液：有关物质供试品溶液与对照溶液：有关物质A项项q 色谱条

15、件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水水-甲醇甲醇-乙腈乙腈-冰醋酸冰醋酸(55:23:30:2)为流动相；检测为流动相；检测波长为波长为254nm。理论板数按二氟尼柳峰计算不低于理论板数按二氟尼柳峰计算不低于2000。1) 精密量取对照溶液精密量取对照溶液20l注入液相色谱仪，调节检测注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20252) 精密量取供试品溶液与对照溶液各精密量取供试品溶液与对照溶液各20l，分别注入分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的液相色谱仪，记录色谱图至主成分

16、峰保留时间的2倍倍3) 供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大积的和不得大于对照溶液主峰面积。于对照溶液主峰面积。 第四节第四节 含量测定含量测定酸碱滴定法酸碱滴定法（以阿司匹林为例）（以阿司匹林为例）双相滴定法双相滴定法( (以苯甲酸钠为例以苯甲酸钠为例)紫外分光光度法紫外分光光度法(以对乙酰氨基酚为例以对乙酰氨基酚为例)HPLCHPLC法法( (阿司匹林栓剂阿司匹林栓剂)（以阿司匹林为例）（以阿司匹林为例）v直接滴定法直接滴定法v水解后剩余滴定法（水解后剩余滴定法（USPUSP）v两步滴定法两步滴定法一、酸碱滴定法一、酸碱滴定法q溶

17、剂：中性乙醇溶剂：中性乙醇乙醇：溶解乙醇：溶解ASA；防止防止ASA在水溶液中滴定过程水解在水溶液中滴定过程水解中性乙醇：对指示剂中性乙醇：对指示剂(酚酞酚酞)而言为中性，可消除滴定误差而言为中性，可消除滴定误差q指示剂：酚酞指示剂：酚酞q用用NaOHNaOH标准溶液直接滴定。标准溶液直接滴定。v直接滴定法直接滴定法COOHOCOCH3+ NaOHCOONaOCOCH3原理原理ChPChP用于阿司匹林原料药的测定用于阿司匹林原料药的测定q优点优点：简便、快速：简便、快速q缺点缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定） 酸性杂质干扰（如水杨酸）酸性杂质干扰（如水

18、杨酸）q适用条件适用条件：不能用于：不能用于含水杨酸过高或制剂分析含水杨酸过高或制剂分析， 只能用于只能用于合格原料药合格原料药的含量测定的含量测定q应用范围应用范围：水杨酸、双水杨酯、丙磺舒、布洛芬等：水杨酸、双水杨酯、丙磺舒、布洛芬等v直接滴定法直接滴定法COOHOCOCH3+ 2NaOHCOONaOH + CH3COONa2NaOH + H2SO4Na2SO4利用阿司匹林分子中的酯键，先加过量定量的NaOH溶液使之水解，然后用H2SO4滴定剩余的NaOH，同时做空白。v水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法（USPUSP）过量定量过量定量原理原理USP29方法：取本品约方法：取本品约1.5g，

19、精密称定，精密精密称定，精密加入加入NaOH滴定液滴定液(0.5mol/L)50.0ml，水浴上煮水浴上煮沸沸10min，放冷，以酚酞为指示剂，用放冷，以酚酞为指示剂，用H2SO4液液(0.25mol/L)滴定剩余的滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用并将滴定结果用空白试验校正。每空白试验校正。每1ml的的NaOH液液(0.5ml/L)相当相当于于45.04mg的的C9H9O4v水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法（USPUSP）v水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法（USPUSP）q计算公式计算公式 q特点特点 优点：消除了酯键水解的干扰优点：消除了酯键水解的干扰缺点：酸性杂质干扰缺点：酸性杂质干扰

20、ChPChP用于阿司匹林片剂的含量测定用于阿司匹林片剂的含量测定v两步滴定法两步滴定法阿司匹林片剂中加稳定剂：酒石酸、枸橼酸阿司匹林片剂中加稳定剂：酒石酸、枸橼酸制剂过程产生水解产物制剂过程产生水解产物 ：水杨酸、醋酸：水杨酸、醋酸消耗消耗NaOH测定结果偏高测定结果偏高采用两步滴定法测定片剂中阿司匹林含量采用两步滴定法测定片剂中阿司匹林含量第2步水解与测定，采用剩余滴定法COONaOCOCH3+ NaOHCOONaOH + CH3COONa2NaOH + H2SO4Na2SO4第1步：NaOH中和所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc放冷后，用放冷后，用H2SO4滴定液滴定剩余的滴定液滴

21、定剩余的NaOH V； 空白滴定消耗空白滴定消耗H2SO4 V0 ；v两步滴定法两步滴定法Ch.PCh.P. . 阿司匹林片阿司匹林片取本品取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量片，精密称定，研细，精密称取适量(约约相当于阿司匹林相当于阿司匹林0.3g)，置锥形瓶中，加置锥形瓶中，加中性乙醇中性乙醇(对酚酞指示剂显中性对酚酞指示剂显中性)20ml，振摇使振摇使ASA溶解，溶解，加酚酞指示液加酚酞指示液3滴，滴加滴，滴加NaOH液液(0.1mol/L)至显粉至显粉红色，再精密加红色，再精密加NaOH液液(0.1mol/L)40ml，置置水浴水浴上加热上加热15min，并时时振摇，并时时振摇，

22、迅速放冷迅速放冷至室温，用至室温，用H2SO4液液(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用滴定，并将滴定的结果用空白空白试验试验校正校正每每1ml的的NaOH液液(0.1mol/L)相当于相当于18.02mg的的C9H8O4v两步滴定法两步滴定法%100%0标示量平均片重）（标示量smFVVTq特点特点 消除了酸性杂质的干扰消除了酸性杂质的干扰 降低了酯键水解的干扰降低了酯键水解的干扰q计算公式计算公式v两步滴定法两步滴定法片粉重 0.5312g标示量 0.1g V 3.02ml V0 20.18ml%100WWF)V-V(T%ASA0标示量为标示量称样片重%7 .108%1001 . 0

23、5312. 005. 01824. 005120. 0)02. 318.20(01802. 0-例例：称取10片重 1.8240g CNaOH 0.1032mol/LC 0.05120mol/LH2SO4直接滴定法直接滴定法水解后水解后剩余滴定法剩余滴定法 两步两步 滴定法滴定法 优优点点 操作简便操作简便 无水解干扰无水解干扰 结果准确，避免结果准确，避免了游离酸及片剂了游离酸及片剂中稳定剂的干扰中稳定剂的干扰 缺缺点点游离酸不合格时结游离酸不合格时结果偏高果偏高不能完全排除不能完全排除游离酸干扰游离酸干扰Ch.P 氯贝丁酯的氯贝丁酯的Assay采用两步滴定法采用两步滴定法 酸碱滴定法小结酸

24、碱滴定法小结q苯甲酸钠的测定苯甲酸钠的测定q有机酸碱金属盐类的常用测定方法，在水和与水不相混溶的有机溶剂（乙醚）中用标准酸进行滴定。二、双相滴定法二、双相滴定法q滴定过程析出的苯甲酸微溶于水，使溶液浑浊，与滴定过程析出的苯甲酸微溶于水，使溶液浑浊，与苯甲酸钠构成缓冲对使终点苯甲酸钠构成缓冲对使终点pH突跃不明显，干扰终突跃不明显，干扰终点的正确判断。点的正确判断。q因此，利用因此，利用的性质，采用双的性质，采用双相滴定法相滴定法二、双相滴定法二、双相滴定法C O O N a+ H C lC O O H水水-乙醚乙醚原理原理二、双相滴定法二、双相滴定法水层水层(苯甲酸钠苯甲酸钠)苯甲酸钠苯甲酸钠

25、置分液漏斗置分液漏斗水水25m1乙醚乙醚50ml甲基指示液甲基指示液2滴滴水层呈橙黄色水层呈橙黄色HCl 0.5mol/L乙醚层乙醚层(苯甲酸苯甲酸)盐酸滴定液滴定盐酸滴定液滴定随滴随振摇随滴随振摇水层显橙红色水层显橙红色分出分出H2O层层乙醚层用乙醚层用H2O 5ml洗涤，洗液合并洗涤，洗液合并水层加乙醚水层加乙醚20ml，HCl继续滴定继续滴定至水层显持续的橙红色至水层显持续的橙红色直接紫外分光光度法直接紫外分光光度法柱分配色谱柱分配色谱-紫外分光光度法紫外分光光度法三、紫外分光光度法三、紫外分光光度法吸收系数法：对乙酰氨基酚吸收系数法：对乙酰氨基酚标准对照法：二氟尼柳胶囊标准对照法：二氟

26、尼柳胶囊三、紫外分光光度法三、紫外分光光度法直接紫外分光光度法【含量测定含量测定】 取本品约取本品约40mg，精密称定，置，精密称定，置250ml量瓶中，加量瓶中，加0.4%氢氢氧化钠溶液氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，至，至100ml量瓶中，加量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照紫外可，加水至刻度，摇匀，照紫外可见分光光度法（药典见分光光度法（药典Chp2005版附录版附录A），在），在257nm的波长处测定吸的波长处测定吸光度，按光度，按C8H9NO2的吸收系数（的吸收系数（ ）为）为715计

27、算，即得。计算，即得。%11cmE对乙酰氨基酚在对乙酰氨基酚在257nm波长处有最大吸收，中国药典采用百分吸收波长处有最大吸收，中国药典采用百分吸收系数（系数（ ）法，）法，测定对乙酰氨基酚的含量。测定对乙酰氨基酚的含量。例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂%11cmE吸收系数法吸收系数法阿司匹林胶囊的含量测定阿司匹林胶囊的含量测定上样：样品的氯仿溶液上样：样品的氯仿溶液冲洗：氯仿（弃去）冲洗：氯仿（弃去）洗脱：冰洗脱：冰HAc-CHCl3测定测定 ：280nm计算：对照品比较法计算：对照品比较法碳酸氢钠的作用：使

28、碳酸氢钠的作用：使阿司匹林和水杨酸均阿司匹林和水杨酸均成钠盐保留在柱上。成钠盐保留在柱上。冰冰HAC作用：解吸作用：解吸硅藻土硅藻土碳酸氢钠碳酸氢钠柱分配色谱柱分配色谱- -紫外分光光度法紫外分光光度法柱分配色谱柱分配色谱- -紫外分光光度法紫外分光光度法水杨酸的限量测定水杨酸的限量测定硅藻土硅藻土磷酸磷酸硅藻土硅藻土三氯化铁三氯化铁尿素尿素样品的样品的氯仿溶氯仿溶液液冲洗：氯仿分次洗（阿司匹林）冲洗：氯仿分次洗（阿司匹林）洗脱：冰洗脱：冰HAcHAc+ +乙醚（解吸）乙醚（解吸）洗脱：氯仿（水杨酸）洗脱：氯仿（水杨酸）测定：测定：306306nmnm，A A样样 A A对对限量：以阿司匹林标

29、示量计，限量：以阿司匹林标示量计，允许水杨酸的量为允许水杨酸的量为0.75%0.75%对照溶液对照溶液75 g 10ml/50ml,样品液样品液100mg/50ml若有少量若有少量FeClFeCl3 3被冲洗下来，被冲洗下来，色带变黄，影响结果，磷酸可色带变黄，影响结果，磷酸可与与FeFe3+3+形成不溶性磷酸铁而避形成不溶性磷酸铁而避免干扰。免干扰。与水杨酸形成紫色配位物，与水杨酸形成紫色配位物，使水杨酸保留在柱上。使水杨酸保留在柱上。高浓度尿素的存在可使配位高浓度尿素的存在可使配位物在柱上的移动变慢，谱带物在柱上的移动变慢，谱带较窄较窄n阿司匹林栓剂采用阿司匹林栓剂采用HPLC HPLC

30、法测定含量法测定含量n色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶（色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶（ODSODS）n流动相：乙腈流动相：乙腈- -四氢呋喃四氢呋喃- -冰醋酸冰醋酸- -水（水（20:5:5:7020:5:5:70）n检测波长：检测波长：2 276nm76nmn系统适用性试验：系统适用性试验：nn n按阿司匹林应不低于按阿司匹林应不低于30003000，nR R阿司匹林、水杨酸的分离度应大于阿司匹林、水杨酸的分离度应大于1.5.1.5.四、四、 HPLC法法C样=（A样/A标）C标 溶液配制：溶液配制：对照品溶液：阿司匹林适量对照品溶液：阿司匹林适量，用用1%1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解冰醋酸无水

31、甲醇溶液溶解并稀释制成每并稀释制成每mlml约含约含0.1mg0.1mg的溶液的溶液. .供试品溶液：取供试品适量，精密称定，（相当于阿司匹林供试品溶液：取供试品适量，精密称定，（相当于阿司匹林0.10.1g g），），置置50ml50ml量瓶中，加量瓶中，加1%1%冰醋酸无水甲醇溶液溶解并冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释至刻度，取其续滤液稀释至刻度，取其续滤液5 5mlml，置置100100mlml量瓶中，用量瓶中，用1%1%冰醋冰醋酸无水甲醇溶液溶解并稀释至刻度，取酸无水甲醇溶液溶解并稀释至刻度，取1010微升注入高效液相微升注入高效液相色谱仪色谱仪。C样稀释倍数平均粒重称样量标示量 100%

32、B%=对氨基水杨酸钠的法定方法对氨基水杨酸钠的法定方法- -重氮化法重氮化法五、重氮化法五、重氮化法思考题1. 根据阿司匹林的合成工艺及化学结构，说明阿司匹林特殊杂质检查项目的制订依据与检查原理。2. 中国药典对乙酰水杨酸片含量测定为什么采用两步滴定法？3. 试述柱分配层析法检查阿司匹林片剂中游离水杨酸的方法和原理。4. 用化学法区别乙酰水杨酸、水杨酸、苯甲酸？例例1155A A两步酸碱滴定法两步酸碱滴定法 B B直接酸碱滴定法直接酸碱滴定法C C两者皆是两者皆是 D D两者皆不是两者皆不是1. 苯甲酸钠的测定2. 氯贝丁酯的测定3. 盐酸的测定4. 酸碱滴定法5. 阿司匹林片的测定DABCA

33、例例6. 采用直接酸碱滴定法测定阿司匹林的含量时，采用直接酸碱滴定法测定阿司匹林的含量时，已知阿司匹林的分子量为已知阿司匹林的分子量为180.2，所用氢氧化，所用氢氧化钠滴定溶液的浓度为钠滴定溶液的浓度为0.1mol/L，请问请问1ml氢氧氢氧化钠滴定溶液相当于阿司匹林的量应是化钠滴定溶液相当于阿司匹林的量应是A. 180.2mg B. 180.2gC. 18.02 mg D. 1.802mg E. 9.01mg （C）例例7. 阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加阿司匹林加碳酸钠试液加热后，再加稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是稀硫酸酸化，此时产生的白色沉淀应是A. 苯酚苯酚 B. 乙酰水杨酸乙

34、酰水杨酸C. 水杨酸水杨酸 D. 醋酸钠醋酸钠 E. 醋酸苯酯醋酸苯酯 （C）例例8. 8. 水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物水杨酸与三氯化铁试液生成紫堇色产物的反应，要求溶液的的反应，要求溶液的pHpH值是值是A)10.0 B)2.0 C)7A)10.0 B)2.0 C)78 D)48 D)46 E)2.06 E)2.00.1 0.1 （D）例例9. 两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是肠溶片时，第一步滴定反应的作用是A. 测定阿司匹林含量测定阿司匹林含量B. 消除共存酸性物质的干扰消除共存酸性物质的干扰C. 使阿司匹林反应完

35、全使阿司匹林反应完全D. 便于观测终点便于观测终点E. 有利于第二步滴定有利于第二步滴定 （B）例例10.对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是 A. 水杨酸水杨酸 B. 间氨基酚间氨基酚 C. 氨基酚氨基酚 D. 苯酚苯酚 E. 苯胺苯胺 例例11. 能用与能用与FeC13试液反应产生现象鉴别试液反应产生现象鉴别的药物有的药物有A苯甲酸钠苯甲酸钠 B水杨酸水杨酸 C丙酸睾酮丙酸睾酮 D对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚 E氢化可的松氢化可的松（B）（ABD）例例12. 采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，采用双相滴定法测定苯甲酸钠含量时，加入乙醚的目的是加入乙醚的目的是 A. 防止反应

36、产物的干扰防止反应产物的干扰 B. 乙醚层在水上面，防止样品被氧化乙醚层在水上面，防止样品被氧化 C. 消除酸碱性杂质的干扰消除酸碱性杂质的干扰 D. 防止样品水解防止样品水解 E. 以上都不对以上都不对 （A）例例13. 采用两步滴定法测定阿司匹林制剂含量采用两步滴定法测定阿司匹林制剂含量时，被测组分与标准溶液的反应摩尔比为时，被测组分与标准溶液的反应摩尔比为A)2:1 B)1:2 C)1:1 D)3:1 E)以上都不对以上都不对 例例14. 阿司匹林中含量最高的杂质为阿司匹林中含量最高的杂质为A. 乙酰水杨酸酐乙酰水杨酸酐 B. 乙酰水杨酸水杨酸乙酰水杨酸水杨酸C. 水杨酸水杨酸 D. 水

37、杨酰水杨酸水杨酰水杨酸E. 以上都不对以上都不对 （C）（C）例例15. 区别水杨酸和苯甲酸钠最常用的试液是区别水杨酸和苯甲酸钠最常用的试液是A. 碘化钾碘化钾 B. 碘化汞钾碘化汞钾 C. 三氯化铁三氯化铁 D. 硫酸亚铁硫酸亚铁 E. 亚铁氰化钾亚铁氰化钾 例例16. 在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，在中性条件下，可与三氯化铁试液反应，生成赭色沉淀的药物是生成赭色沉淀的药物是A. 水杨酸钠水杨酸钠 B. 对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠C. 乙酰水杨酸乙酰水杨酸 D. 苯甲酸钠苯甲酸钠E. 扑热息痛扑热息痛 （C）（D）例例18. 用直接滴定法测定阿司匹林含量用直接滴定法测定阿司匹林含量 A. 反应摩尔比为反应摩尔比为1：1 B. 在中性乙醇溶液中滴定在中性乙醇溶液中滴定 C. 用盐酸滴定液滴定用盐酸滴定液滴定 D. 以中性红为指示剂以中性红为指示剂 E. 滴定时应在不断振摇下稍快进行滴定时应在不断振摇下稍快进行 （ABE）含量测定方法为含量测定方法为A. 直接中和滴定法直接中和滴定法 B. 两步滴定法两步滴定法C. 两者均可两者均可 D. 两者均不可两者均不可7.阿司匹林片阿司匹林片8.阿司匹林原料药阿司匹林原料药9.对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠10.阿司匹林栓剂阿司匹林栓剂11.阿司匹林肠溶片剂阿司匹林肠溶片剂 BADDB