hiv检测实验室生物安全及质量控制课件.ppt

1、2 2Laboratory Biosafety Manual1st edition1983199320032004第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重非常严重疾疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。 第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重严重疾病，疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。播的微生物。 第三类病原微生物，是指能够引起人类

2、或者动物疾病，但一第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害不构成严重危害，传播风险有限，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。施的微生物。 第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。物疾病的微生物。 第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物组织组织 对象对象 低低病原微生物病原微生物高高WH

3、OWHO病原微生物病原微生物 1 1 2 2 3 3 4 4美国美国 病原微生物病原微生物 1 1 2 2 3 3 4 4 日本日本微生物病毒微生物病毒 1 12a2a2b2b3a3a3b3b4a4a4b4b英国英国 病原微生物病原微生物 C C B B A A中国中国 病原微生物病原微生物 4 4 3 3 2 2 生物安全实验室慨念生物安全实验室慨念 1 1、通过规范的实验室设计建造、实验设备的配置、个、通过规范的实验室设计建造、实验设备的配置、个 人防护装备的使用（硬件）。人防护装备的使用（硬件）。 2 2、严格遵从标准化的操作程序和管理规程等（软件）、严格遵从标准化的操作程序和管理规程等

4、（软件） 3 3、确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤、确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤 害，确保周围环境不受其污染害，确保周围环境不受其污染, ,确保实验因子保持原有本性所确保实验因子保持原有本性所 采取综合措施的实验室。（目的）采取综合措施的实验室。（目的） 分级分级根据实验室所处理对象的生物危害程度和采根据实验室所处理对象的生物危害程度和采取的防护措施，把生物安全实验室分为四级，其中取的防护措施，把生物安全实验室分为四级，其中一级对生物安全隔离的要求最低，四级最高。一般一级对生物安全隔离的要求最低，四级最高。一般以以BSLBSL1 1、BSLBSL2 2、BSLB

5、SL3 3、BSLBSL4 4表示实验表示实验室相应的生物安全防护水平。室相应的生物安全防护水平。 目的目的1 1、确保操作生物危险因子的工作人员不受实、确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤害验对象的伤害-人人 2 2、确保周围环境不受其污染、确保周围环境不受其污染-环境环境 3 3、确保实验因子保持原有本性（不受污、确保实验因子保持原有本性（不受污染）染）-物物 三道屏障：三道屏障：1 1、生物安全设备和个体防护装置；、生物安全设备和个体防护装置； 2 2、实验室设施，实验室特殊设计和建设要求；、实验室设施，实验室特殊设计和建设要求； 3 3、实验室管理制度（软件部分）。包括标准、

6、实验室管理制度（软件部分）。包括标准 化操作程序和严格实验室管理。化操作程序和严格实验室管理。 实验室所在机构应设立生物安全委员会，实验室安全负责人是安全委实验室所在机构应设立生物安全委员会，实验室安全负责人是安全委员会委员，该实验室管理层有责任确保安全检查的执行。每年应对工员会委员，该实验室管理层有责任确保安全检查的执行。每年应对工作场所进行不定期抽查，例行检查每年至少一次。检查内容包括：作场所进行不定期抽查，例行检查每年至少一次。检查内容包括： 1 1、应急装备、警报体系和撤离程序功能及状态正常。、应急装备、警报体系和撤离程序功能及状态正常。 2 2、用于危险物质漏出控制的程序和物品状态正

7、常。、用于危险物质漏出控制的程序和物品状态正常。 3 3、对可燃易燃性、可传染性、放射性和有毒物质的存放进行适当防护、对可燃易燃性、可传染性、放射性和有毒物质的存放进行适当防护和控制；污染和废弃物处理程序的状态。和控制；污染和废弃物处理程序的状态。 4 4、实验室设施、设备、人员的状态正常、实验室设施、设备、人员的状态正常 5 5、实验室各项操作规程与管理制度正确实施。、实验室各项操作规程与管理制度正确实施。 实验室负责人为实验室安全第一责任人，可任命一名实验室负责人为实验室安全第一责任人，可任命一名有适当资质和经验的实验室安全负责人来协助管理安全有适当资质和经验的实验室安全负责人来协助管理安

8、全事宜。实验室负责人对所有实验室员工和实验室来访者事宜。实验室负责人对所有实验室员工和实验室来访者的安全负责。的安全负责。 实验室安全负责人应对实验室以及实验人员进行日常实验室安全负责人应对实验室以及实验人员进行日常管理监督。管理监督。 信息安全及保密制度：与信息安全及保密制度：与HIV/AIDSHIV/AIDS检测相关的所有资检测相关的所有资料均应严格保密，包括送检单、检测记录、样品登记、料均应严格保密，包括送检单、检测记录、样品登记、报告单及工作人员年度检测结果等，不得对无关人员透报告单及工作人员年度检测结果等，不得对无关人员透露检测结果。露检测结果。（五）制定、维护和监督有效的实验室安全

9、计划。该安全计划应包括（五）制定、维护和监督有效的实验室安全计划。该安全计划应包括教育及培训、审核及评估、促进实验室安全行为的程序。教育及培训、审核及评估、促进实验室安全行为的程序。（六）有权阻止不安全的活动。实验室负责人应制定规定和程序确保（六）有权阻止不安全的活动。实验室负责人应制定规定和程序确保实验室设施、设备、个人防护设备、材料等符合国家有关安全要求，实验室设施、设备、个人防护设备、材料等符合国家有关安全要求，定期检查、维护、更新，确保不降低其设计性能。定期检查、维护、更新，确保不降低其设计性能。（七）确保提供实验室人员适当的实验室安全方面（如潜在危害性，（七）确保提供实验室人员适当的

10、实验室安全方面（如潜在危害性，保护暴露者必要的注意事项以及暴露评估程序）的培训。实验室人保护暴露者必要的注意事项以及暴露评估程序）的培训。实验室人员必须接受年度最新的补充培训以了解操作规程和政策的变化。员必须接受年度最新的补充培训以了解操作规程和政策的变化。（八）定期或不定期组织进行实验室安全自查，对于自查情况应有记（八）定期或不定期组织进行实验室安全自查，对于自查情况应有记录，对重大生物安全隐患或发现问题应立即向上级生物安全委员会录，对重大生物安全隐患或发现问题应立即向上级生物安全委员会汇报，对发现问题应有整改与复查措施。汇报，对发现问题应有整改与复查措施。 实验室所在单位人事部门、生物安全

11、委员会负责：实验室所在单位人事部门、生物安全委员会负责：实验室人员的组织管理、上岗资格认定、培训、实验室人员的组织管理、上岗资格认定、培训、岗位制定和准入标准。岗位制定和准入标准。 负责成立实验室人员考核工作组，制定分类的负责成立实验室人员考核工作组，制定分类的 考核标准，定期对实验室人员基本知识、操作技考核标准，定期对实验室人员基本知识、操作技 能、生物安全进行考核与评价。能、生物安全进行考核与评价。化学品安全应符合以下要求：化学品安全应符合以下要求： 在实验室中，对化学品的存放、处理、使用及处置在实验室中，对化学品的存放、处理、使用及处置的规定和程序均应符合良好的规定和程序均应符合良好化学

12、实验室化学实验室行为标准。应按行为标准。应按照相关标准在每个储存容器上标明每个产品的危害性和照相关标准在每个储存容器上标明每个产品的危害性和风险性，还应在风险性，还应在“使用中使用中”材料的器上清楚标明。材料的器上清楚标明。 对化学、物理及火灾危害应有足够可行的控制措施。对化学、物理及火灾危害应有足够可行的控制措施。应定期对这些措施进行监督以确保其有效可用。应保存应定期对这些措施进行监督以确保其有效可用。应保存监督结果记录。监督结果记录。 实验室负责人负责制定应对涉及本科室及工作的意外实验室负责人负责制定应对涉及本科室及工作的意外事故应急处理程序和预案，报生物安全委员会备案；并事故应急处理程序

13、和预案，报生物安全委员会备案；并制定专人负责应对意外事故应急处理所需的设备材料的制定专人负责应对意外事故应急处理所需的设备材料的保管和维护。实验室人员应熟记紧急情况下的正确应对保管和维护。实验室人员应熟记紧急情况下的正确应对措施。措施。 实验中发现异常情况应及时向实验室负责人报告，并实验中发现异常情况应及时向实验室负责人报告，并立即采取控制措施；同时做好详细的记录。实验室发生立即采取控制措施；同时做好详细的记录。实验室发生安全事故时，应视事故类型等不同情况，进行紧急处理，安全事故时，应视事故类型等不同情况，进行紧急处理，并详细记录事故经过，按规定报告生物安全委员会。并详细记录事故经过，按规定报

14、告生物安全委员会。 应制定紧急撤离的行动方案。该方案应考虑应制定紧急撤离的行动方案。该方案应考虑到生物性、化学性、失火和其他紧急情况。到生物性、化学性、失火和其他紧急情况。应包括所采取的使留下的建筑物处于尽可能应包括所采取的使留下的建筑物处于尽可能安全状态的措施。所有实验室人员都应了解安全状态的措施。所有实验室人员都应了解紧急撤离的行动方案、撤离路线和紧急撤离紧急撤离的行动方案、撤离路线和紧急撤离的集合地点。每年至少一次演习。的集合地点。每年至少一次演习。 实验室负责人应备有用于急救的物品储备实验室负责人应备有用于急救的物品储备（如急救药箱，包括普通和特殊的解毒剂等。（如急救药箱，包括普通和特

15、殊的解毒剂等。（Biosafety Cabinet, BSC)Biosafety Cabinet, BSC)负压过滤排风柜：在生物因子操作过程中用来负压过滤排风柜：在生物因子操作过程中用来保护操作人员、环境和（或）实验物品，防止其暴保护操作人员、环境和（或）实验物品，防止其暴露于实验中（可能）产生的危险性或潜在危险性生露于实验中（可能）产生的危险性或潜在危险性生物气溶胶或溅出物。是病原微生物实验室的重要设物气溶胶或溅出物。是病原微生物实验室的重要设备，是备，是“病原体操作的一级安全隔离屏障病原体操作的一级安全隔离屏障”，关系，关系生命安全和环境安全，要求非常严格。生命安全和环境安全，要求非常严

16、格。2424保护类型及生物安全柜的选择保护类型保护类型生物安全柜的选择生物安全柜的选择个体防护，针对危险度个体防护，针对危险度1 13 3 级微生物级微生物级、级、级、级、级生物安全柜级生物安全柜个体防护，针对危险度个体防护，针对危险度4 4 级微生物，级微生物，手套箱型实验室手套箱型实验室级生物安全柜级生物安全柜个体防护，针对危险度个体防护，针对危险度4 4 级微生物，级微生物，防护服型实验室防护服型实验室级、级、级生物安全柜级生物安全柜实验对象保护实验对象保护级生物安全柜，柜内气流是层级生物安全柜，柜内气流是层流的流的级生物安全柜级生物安全柜少量挥发性放射性核素少量挥发性放射性核素化学品的

17、防化学品的防护护级级B1 B1 型生物安全柜，外排风式型生物安全柜，外排风式级级A2A2型生物安全柜型生物安全柜挥发性放射性核素挥发性放射性核素化学品的防护化学品的防护级、级、级级B2 B2 型、型、级生物安全级生物安全柜柜 生物安全柜摆放位置生物安全柜摆放位置 1 1、与其它操作区域相分离；、与其它操作区域相分离； 2 2、远离主要通道；、远离主要通道； 3 3、与气道有一定距离；、与气道有一定距离； 4 4、与实验室入口保持一定距离。、与实验室入口保持一定距离。 安装检验 1 1、下降气流流速、流入气流流速、气流模、下降气流流速、流入气流流速、气流模式过滤器泄漏警报和联锁功能式过滤器泄漏警

18、报和联锁功能 2 2、排气系统性能（负压排气压力和排气罩、排气系统性能（负压排气压力和排气罩 性能）性能） 3 3、照度、噪声、振动、漏电流、接地电阻、照度、噪声、振动、漏电流、接地电阻 维护检验维护检验 1 1、更换过滤器和安全柜内部维修、更换过滤器和安全柜内部维修 2 2、使用的安全柜每年进行验证、使用的安全柜每年进行验证 3 3、检验项目与安装检验相同、检验项目与安装检验相同 检测周期检测周期 1 1、实验室施工时，、实验室施工时，级生物安全柜搬放到指级生物安全柜搬放到指定位置后。定位置后。 2 2、 级生物安全柜被移动位置后。级生物安全柜被移动位置后。 3 3、 对对级生物安全柜进行检

19、修后。级生物安全柜进行检修后。 4 4、 级生物安全柜更换高效过滤器后。级生物安全柜更换高效过滤器后。 5 5、 级生物安全柜一年一度的常规现场级生物安全柜一年一度的常规现场 检测。检测。 1 1、工作台内不应存放过多器具，当使用旋转、震荡或加、工作台内不应存放过多器具，当使用旋转、震荡或加热器具时，应尽可能把这些器具置于操作区的后端，这样就热器具时，应尽可能把这些器具置于操作区的后端，这样就可以减少通道口的湍流现象；可以减少通道口的湍流现象； 2 2、不可随便改变鼓风机的风速，除非通过检测空气速度、不可随便改变鼓风机的风速，除非通过检测空气速度确实降低了方可进行；确实降低了方可进行； 3 3

20、、切勿用操作台来储藏设备或实验室器具；、切勿用操作台来储藏设备或实验室器具； 4 4、不要阻塞空气入口格网；、不要阻塞空气入口格网； 5 5、不要在操作台内使用有毒、易燃或易爆等高度危物；、不要在操作台内使用有毒、易燃或易爆等高度危物； 6 6、操作前后应对台面进行消毒；、操作前后应对台面进行消毒； 7 7、应对安全柜定期进行检查、维修。、应对安全柜定期进行检查、维修。1 1、当发生少量溢洒时，应用吸收纸巾立即处理，并立、当发生少量溢洒时，应用吸收纸巾立即处理，并立即用浸满消毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所即用浸满消毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所有物品进行擦洗。工作面消毒后应

21、更换手套，不论是摘下有物品进行擦洗。工作面消毒后应更换手套，不论是摘下手套还是更换手套都要洗手。手套还是更换手套都要洗手。 2 2、若发生大量溢洒，液体会通过生物安全柜前面或后、若发生大量溢洒，液体会通过生物安全柜前面或后面的格栅流到下面去，生物安全柜内所有的物品都应该进面的格栅流到下面去，生物安全柜内所有的物品都应该进行表面消毒并拿出生物安全柜，在确保生物安全柜的排水行表面消毒并拿出生物安全柜，在确保生物安全柜的排水阀被关闭后，可将消毒液倒在工作台面上，使液体通过格阀被关闭后，可将消毒液倒在工作台面上，使液体通过格栅流到排水盘上。所有接触溢出物品的材料都要进行消毒栅流到排水盘上。所有接触溢出

22、物品的材料都要进行消毒和和/ /或高压灭菌处理。或高压灭菌处理。表面消毒表面消毒 1 1、工作完成时，所有的容器和设备应该、工作完成时，所有的容器和设备应该进行表面消毒并拿出安全柜。在每天工作结束时，进行表面消毒并拿出安全柜。在每天工作结束时，应该对安全柜进行最后的表面消毒，包括工作台应该对安全柜进行最后的表面消毒，包括工作台面、安全柜的边壁、后壁和观察窗玻璃内部的擦面、安全柜的边壁、后壁和观察窗玻璃内部的擦拭。如果必要，安全柜也应该进行放射性检测并拭。如果必要，安全柜也应该进行放射性检测并进行必要的消毒。进行必要的消毒。 2 2、作为安全的微生物学操作的最后步骤，、作为安全的微生物学操作的最

23、后步骤，操作者应该摘下手套、脱下工作服并且洗手。操作者应该摘下手套、脱下工作服并且洗手。 气体消毒气体消毒 在更换在更换HEPAHEPA过滤器或进行内部维修之前要过滤器或进行内部维修之前要对生物安全柜必须进行消毒。对生物安全柜必须进行消毒。1.1.定期清洁操作台面和前窗玻璃定期清洁操作台面和前窗玻璃 2.2.保持实验室内空气质量保持实验室内空气质量, ,延长高效过滤器的延长高效过滤器的使用寿命使用寿命 3.3.定期检测紫外灯的照射强度定期检测紫外灯的照射强度, ,及时更换灯管及时更换灯管 4.4.长期不用应定期进行维护性运行高效过滤长期不用应定期进行维护性运行高效过滤器应定期检测器应定期检测,

24、 ,及时更换及时更换. . 5. 5.做好使用和维护记录做好使用和维护记录. . 1 1、生物安全危害评估是指实验室工作人员处理致病微生物及其毒素时，对可能、生物安全危害评估是指实验室工作人员处理致病微生物及其毒素时，对可能给人或环境带来的危害所进行的评估，包括对微生物危险性和防护屏障的评估。给人或环境带来的危害所进行的评估，包括对微生物危险性和防护屏障的评估。 2 2、生物危害评估原则和依据是根据生物因子的种类、来源、传染性、致病性、生物危害评估原则和依据是根据生物因子的种类、来源、传染性、致病性、传播途径、在环境中的稳定性、感染剂量、浓度、动物实验数据有效的预防和治传播途径、在环境中的稳定

25、性、感染剂量、浓度、动物实验数据有效的预防和治疗方法等诸因素进行生物危害评估。疗方法等诸因素进行生物危害评估。 3 3、危害评估是为了确定某种微生物实验过程中的危险所在，危险性大小，以及、危害评估是为了确定某种微生物实验过程中的危险所在，危险性大小，以及如何避免和防护危险的发生，达到保护人、物和环境的目的。如何避免和防护危险的发生，达到保护人、物和环境的目的。 4 4、根据卫生部病原微生物危害等级分类，艾滋病毒属第二类高致病性病原微生、根据卫生部病原微生物危害等级分类，艾滋病毒属第二类高致病性病原微生物（国际危险程度为物（国际危险程度为级）级） 5 5、根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实

26、验室管理制度和紧急事故处理、根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制度和紧急事故处理办法，必须形成书面文件并严格遵守执行。在新增加实验内容时应对该实验进行办法，必须形成书面文件并严格遵守执行。在新增加实验内容时应对该实验进行危险度评估；及时收集与危险程度相关的新资料以及来自科学文献的其他相关的危险度评估；及时收集与危险程度相关的新资料以及来自科学文献的其他相关的新信息，以便必要时对危险度评估结果进行定期检查和修订。新信息，以便必要时对危险度评估结果进行定期检查和修订。 艾滋病毒在艾滋病毒在 卫生部卫生部名录名录中的分类中的分类 （“卫生部关于印发卫生部关于印发人间传染的病原微生物名录

27、人间传染的病原微生物名录的通知的通知”卫科教发卫科教发200615200615号）号）( (一一)HIV)HIV抗体检测（包括筛查和确证实验）、抗抗体检测（包括筛查和确证实验）、抗原检测和相关的免疫学检测应在符合原检测和相关的免疫学检测应在符合级生物级生物安全实验室（安全实验室（BSL-2BSL-2）要求的艾滋病检测实验室）要求的艾滋病检测实验室中进行。中进行。 （二）（二）HIVHIV分离培养、浓缩、中和试验、细胞培分离培养、浓缩、中和试验、细胞培养及研究工作及其它需要应用活病毒的研究工养及研究工作及其它需要应用活病毒的研究工作，应在作，应在级生物安全实验室（级生物安全实验室（BSL-3BS

28、L-3）中进行。）中进行。（三）（三）HIVHIV核酸提取和检测均应在符合核酸提取和检测均应在符合级生物安级生物安全实验室（全实验室（BSL-2BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进）要求的艾滋病检测实验室中进行。行。（四）（四）HIVHIV病毒株应保存在符合病毒株应保存在符合级生物安全实验级生物安全实验室（室（BSL-3BSL-3）要求的艾滋病实验室；）要求的艾滋病实验室；HIVHIV阳性样品，阳性样品，包括全血、血清、血浆和其他组织（液）、核酸包括全血、血清、血浆和其他组织（液）、核酸提取物应保存在符合提取物应保存在符合BSL-2BSL-2要求的艾滋病实验室。要求的艾滋病实验室。nHIVH

29、IV检测实验室的类型检测实验室的类型 （一）艾滋病检测确证实验室（一）艾滋病检测确证实验室 1、艾滋病确证中心实验室、艾滋病确证中心实验室 2、艾滋病确证实验室、艾滋病确证实验室 （二）艾滋病检测筛查实验室（二）艾滋病检测筛查实验室 1、艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查中心实验室 2、艾滋病筛查实验室、艾滋病筛查实验室 3、艾滋病检测点、艾滋病检测点nHIVHIV筛查实验室检测方法筛查实验室检测方法 1、酶联免疫试验（、酶联免疫试验（ELISA） 2、快速检测（、快速检测（RT）及其它检测：包括明）及其它检测：包括明胶颗粒凝集试验（胶颗粒凝集试验（PA）、斑点）、斑点EIA或称斑或称斑点点EL

30、ISA、斑点免疫胶体金（或胶体硒）、斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验、艾滋病唾液检测卡、家庭快速试验、艾滋病唾液检测卡、家庭HIV检测。检测。 3、尿液、尿液HIV抗体检测抗体检测nHIVHIV确证实验室检测方法确证实验室检测方法 包括免疫印迹试验（包括免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验）、条带免疫试验（LIATEK HIV）、放射免疫沉淀试验（）、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（及免疫荧光试验（IFA）。）。 国内常用的确认试验方法是国内常用的确认试验方法是WB。nHIVHIV检测其他辅助方法检测其他辅助方法 1 1、HIVHIV核酸定性检测核酸定性检测 2 2、HIV RNA

31、HIV RNA定量检测定量检测 3 3、CD4CD4+ + 和和CD8 CD8 + + T T淋巴细胞检测淋巴细胞检测 4 4、HIV P24HIV P24抗原检测抗原检测 5 5、HIV RNAHIV RNA定量测定：包括逆转录定量测定：包括逆转录PCRPCR试试验（验（RT-PCRRT-PCR）、核酸序列扩增试验）、核酸序列扩增试验（NASBANASBA）、分支）、分支DNADNA杂交试验（杂交试验（bDNAbDNA）nHIVHIV实验室质量体系概述实验室质量体系概述 ISO9001ISO9001定义为：在质量方面指挥和控制组定义为：在质量方面指挥和控制组 织的管理体系，它具备了保证产品质

32、量的人织的管理体系，它具备了保证产品质量的人 力、物力，还要明确有关部门和人员的职责和力、物力，还要明确有关部门和人员的职责和 权力，以及规定完成任务所必须的各项程序和权力，以及规定完成任务所必须的各项程序和 活动。活动。行业标准行业标准: 艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准 WS298-2008技术规范技术规范: 全国艾滋病检测技术规范全国艾滋病检测技术规范 （2009年修订版）年修订版）n影响质量的七大因素：人机料法环信控影响质量的七大因素：人机料法环信控 1 1、人员：是指实验室负责人和血液检测技术人员。、人员：是指实验室负责人和血液检测技术人员。 实验室负责人

33、对实验室运行和行政管理全面负责，确保血液检实验室负责人对实验室运行和行政管理全面负责，确保血液检测量测量 血液检测人员需经过职业道德培训保证血液检测结果的真实性、血液检测人员需经过职业道德培训保证血液检测结果的真实性、可靠性和保密性可靠性和保密性 检测人员需接受血液检测岗位职责相关文件的培训和实践技能检测人员需接受血液检测岗位职责相关文件的培训和实践技能的培训，并有相应的培训记录；还必须经过签名和相关法律的培训；的培训，并有相应的培训记录；还必须经过签名和相关法律的培训；检测人员必须登记和保存签名并定期更新和存档；制定实验室全员会检测人员必须登记和保存签名并定期更新和存档；制定实验室全员会议制

34、定议制定 有专人负责职业健康和安全卫生；有专人负责职业健康和安全卫生； 实验室负责人和血液检测技术人员都应具有相应的学历要求；实验室负责人和血液检测技术人员都应具有相应的学历要求；新增的技术人员要经过满足岗位需求的培训和考核，合格后方能上岗。新增的技术人员要经过满足岗位需求的培训和考核，合格后方能上岗。 n影响质量的七大因素：人机料法环信控影响质量的七大因素：人机料法环信控 2 2、设备：、设备：设备的配置应能满足血液检测业务工作的需要并与其功能设备的配置应能满足血液检测业务工作的需要并与其功能 相适应相适应 设备在投入使用前或维修后均应确认设备在投入使用前或维修后均应确认 设备在使用时应有使

35、用和维护记录设备在使用时应有使用和维护记录 大型关键设备应具有唯一性标识并明确维护校准周期，大型关键设备应具有唯一性标识并明确维护校准周期， 档案应由人管理有使用维护和校准记录，停用或维修的设备也档案应由人管理有使用维护和校准记录，停用或维修的设备也 应有明显的标志应有明显的标志 关键设备在检测过程中有不间断电力供应和应急预案。关键设备在检测过程中有不间断电力供应和应急预案。 使用的仪器应符合国家相关标准使用的仪器应符合国家相关标准 建立和实施仪器设备的评估、确认、维护、校准、和持建立和实施仪器设备的评估、确认、维护、校准、和持 续监控等管理制度，以保证仪器设备符合预期使用要求。续监控等管理制

36、度，以保证仪器设备符合预期使用要求。 n影响质量的七大因素影响质量的七大因素：人机料法环信控人机料法环信控 3 3、物料：、物料：建立和实施血液检测试剂与材料管理程建立和实施血液检测试剂与材料管理程 序，包括试剂与材料的生产商和供应商的资质评估序，包括试剂与材料的生产商和供应商的资质评估 建立试剂与材料的评估、选购、确认、保建立试剂与材料的评估、选购、确认、保 存、使用、监控以及库存管理程序存、使用、监控以及库存管理程序 物料物料须是经国家食品药品监督管理局注册须是经国家食品药品监督管理局注册 批准、在有效期内的试剂，其中酶联免疫试剂应批批批准、在有效期内的试剂，其中酶联免疫试剂应批批 检合格

37、。推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的检合格。推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的 试剂试剂 建立和实施试剂的确认和库存管理程序建立和实施试剂的确认和库存管理程序 n影响质量的七大因素影响质量的七大因素：人机料法环信控人机料法环信控 4 4、方法：是指实验室的检查项目均应有相、方法：是指实验室的检查项目均应有相 适应的检测方法，这些检测方法必须符合相关适应的检测方法，这些检测方法必须符合相关 法律、法规和文件规定并在体系内受控。法律、法规和文件规定并在体系内受控。 n影响质量的七大因素影响质量的七大因素：人机料法环信控人机料法环信控 5 5、环境：、环境：分区：清洁区、半污染区和污染区分开

38、；实验分区：清洁区、半污染区和污染区分开；实验 区和工作区分开，实验室内禁止进食、饮水、化妆等区和工作区分开，实验室内禁止进食、饮水、化妆等 实验室温湿度要符合要求实验室温湿度要符合要求 具有具有BSL-2BSL-2级实验室应有的相应配备和要求。如级实验室应有的相应配备和要求。如 防蚊蝇、防水、具有密闭性、配备灭火器报警器、有冲防蚊蝇、防水、具有密闭性、配备灭火器报警器、有冲 淋设施和洗眼器和职业暴露相关的药品等。淋设施和洗眼器和职业暴露相关的药品等。 具有国际通用的生物危害标识、危险级别标识、具有国际通用的生物危害标识、危险级别标识、 授权人员方可进入标识等。授权人员方可进入标识等。 HIV

39、HIV实验室应有实验室应有HIVHIV检测相应资质标志。检测相应资质标志。n影响质量的七大因素：人机料法环信控影响质量的七大因素：人机料法环信控 6 6、信息管理系统：、信息管理系统：建立和使用血液检测计算机信息管建立和使用血液检测计算机信息管 理系统，对从标本接收到检测报告发出整个血液检测过程实理系统，对从标本接收到检测报告发出整个血液检测过程实 行计算机管理程序行计算机管理程序严格控制非授权人员进入计算机系统，严格控制非授权人员进入计算机系统， 非法查询、录入和更改数据或检测程序非法查询、录入和更改数据或检测程序血液检测计算机管血液检测计算机管 理软件供应商应具备国家规定资质应建立和实施计

40、算机管理软件供应商应具备国家规定资质应建立和实施计算机管 理系统使用的风险分析、培训、确认和使用及使用后的评估理系统使用的风险分析、培训、确认和使用及使用后的评估 程序建立和实施发生意外事件的应急预案和恢复程序，确程序建立和实施发生意外事件的应急预案和恢复程序，确 保血液检测正常进行。保血液检测正常进行。 n影响质量的七大因素影响质量的七大因素：人机料法环信控人机料法环信控 7 7、受控：指从标本接收开始到报告的发放、受控：指从标本接收开始到报告的发放 整个过程受控，每一份标本都具有可溯源性，整个过程受控，每一份标本都具有可溯源性，确保所有血液检测可以追溯到相应标本采集、确保所有血液检测可以追

41、溯到相应标本采集、运送、接收、检测方法和过程、检测结果、检运送、接收、检测方法和过程、检测结果、检测报告与追踪的整个过程。测报告与追踪的整个过程。nHIVHIV检测过程管理检测过程管理 （一）标本的采集、保存和运送（一）标本的采集、保存和运送 1 1、采集：可采用血清、血浆、滤纸干血斑、唾液和、采集：可采用血清、血浆、滤纸干血斑、唾液和尿液样品。尿液样品。 2 2、保存：、保存： 用于抗体检测的血清或血浆样品，应用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于存放于-20-20以下，短期（以下，短期（1 1周）内进行检测的样品可存放周）内进行检测的样品可存放于于2-82-8。 用于抗原和核酸检测的血浆和

42、血细胞样品应用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于冻存于-20-20以下，进行病毒以下，进行病毒RNARNA检测的样品如需保存检测的样品如需保存3 3个个月以上应置于月以上应置于-80-80用于用于CD4+/CD8+TCD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过品不能长期保存，样品采集时间超过48h48h则不可检测。则不可检测。 nHIVHIV检测过程管理检测过程管理3 3、运送、运送：实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送 全血。全血。 应采用应采用WHOWHO提出的三级包

43、装系统：第一层容器：装样品，要求防渗提出的三级包装系统：第一层容器：装样品，要求防渗 漏。样品应置于带盖的试管内；试管上应有明显的标记，标明样品的编漏。样品应置于带盖的试管内；试管上应有明显的标记，标明样品的编 号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材 料，以免碰碎。料，以免碰碎。 随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。第二随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。第二 层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干 个第一层容器

44、。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒 处理。第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三处理。第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三 层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。 血清和血浆样品应在血清和血浆样品应在2-82-8条件下由专人运送。用于条件下由专人运送。用于CD4+/CD8+TCD4+/CD8+T淋淋 巴细胞测定的样品应在室温下运送。每一包装的体积以不超过巴细胞测定的样品应在室温下运送。每一包装的体积以不超过50ml50ml为宜。为宜。 运

45、送感染性材料必须有记录。如分离血浆仍有困难，可直接将抗运送感染性材料必须有记录。如分离血浆仍有困难，可直接将抗 凝血凝血-20-20以下冻存，采用冰壶冷藏运输，避免冻融。以下冻存，采用冰壶冷藏运输，避免冻融。 nHIVHIV检测过程管理检测过程管理 （二）室内质控（二）室内质控 1 1、实施室内质控应遵循的原则：、实施室内质控应遵循的原则： 选择选择S/COS/CO值为值为1.5-41.5-4的弱阳性质控品的弱阳性质控品 常规精密性控制在常规精密性控制在CV20%CV2s2s范围的变化时，系统范围的变化时，系统 处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要处于告警状态，应予注意，是否可以继续检

46、测需要 进一步观察。进一步观察。2 2、出现下列情况时，应暂停检测查、出现下列情况时，应暂停检测查 找原因：出现一次找原因：出现一次3s3s范围的变化、连续两次出现范围的变化、连续两次出现 同一方向同一方向2s2s范围的变化、连续四次出现同一方向的范围的变化、连续四次出现同一方向的 1s 1s范围的变化、连续范围的变化、连续1010次结果都在次结果都在1s1s范围内，但落范围内，但落 在均值线的同一侧。在均值线的同一侧。nHIVHIV检测过程管理检测过程管理 （二）室内质控（二）室内质控 3 3、“即刻法即刻法”质控质控 “ “即刻法即刻法”质控方法的实质是一种统计质控方法的实质是一种统计 学

47、方法，只要有学方法，只要有3 3个以上的数据即可决定是否个以上的数据即可决定是否 有异常值得存在。有异常值得存在。nHIVHIV检测过程管理检测过程管理( (三三) )检测前的管理检测前的管理1 1、试剂的确认和平衡、试剂的确认和平衡2 2、设备运行状态的确认、设备运行状态的确认3 3、实验环境的确认、实验环境的确认4 4、标本的采集、运输、交接、标识、处理是、标本的采集、运输、交接、标识、处理是否符合检测要求否符合检测要求nHIVHIV检测过程管理检测过程管理( (四四) )检测中的管理检测中的管理1 1、实验过程关键控制点的记录、实验过程关键控制点的记录2 2、严格按照标准操作规程进行操作

48、、严格按照标准操作规程进行操作nHIVHIV检测过程管理检测过程管理 （五）检测报告的发布和（五）检测报告的发布和HIVHIV初筛阳性结果的上报初筛阳性结果的上报 报告发布前要对标本的检验过程和关键控报告发布前要对标本的检验过程和关键控 制点进行检查以及实验的阴阳性对照结果和室内制点进行检查以及实验的阴阳性对照结果和室内 质控结果是否在控，在控双人复核无误后签署姓质控结果是否在控，在控双人复核无误后签署姓 名和时间才能发放；检测报告应完整清晰。初筛名和时间才能发放；检测报告应完整清晰。初筛 实验呈阳性反应样品的转送如需送上级实验室进实验呈阳性反应样品的转送如需送上级实验室进 行复核，需要核对身

49、份，补充个人信息（如姓名行复核，需要核对身份，补充个人信息（如姓名 和身份证号码），必要时采集第二份血样，持和身份证号码），必要时采集第二份血样，持HIVHIV 抗体筛查报告，送当地艾滋病筛查中心实验室或抗体筛查报告，送当地艾滋病筛查中心实验室或 直接送确证实验室复检。直接送确证实验室复检。n体系文件的编写和管理体系文件的编写和管理 概述概述 质量体系文件是描述质量体系的一整套质量体系文件是描述质量体系的一整套文件，是建立并保持质量管理和质量保证的重文件，是建立并保持质量管理和质量保证的重要基础。建立并完善质量体系文件是为了进一要基础。建立并完善质量体系文件是为了进一步明确职责与权限，协调各部

50、门之间的关系时步明确职责与权限，协调各部门之间的关系时各项质量活动能够顺利有效的实施。它在很大各项质量活动能够顺利有效的实施。它在很大程度上时通过文件化的形式表现出来的，是规程度上时通过文件化的形式表现出来的，是规范实验室检验达到质量目标的质量依据。范实验室检验达到质量目标的质量依据。n体系文件的编写和管理体系文件的编写和管理 特点特点 1 1、法规性：一旦批准实施，就必须认真执行；、法规性：一旦批准实施，就必须认真执行； 文件如需修改，需按规定的程序执行。文件如需修改，需按规定的程序执行。 2 2、唯一性：一个实验室只能有唯一的质量体系、唯一性：一个实验室只能有唯一的质量体系 文件系统。文件