孙怡群-厌氧菌的实验室检查课件.ppt

1、1.什么是厌氧菌什么是厌氧菌 2.根据对氧的耐受性分类根据对氧的耐受性分类3.厌氧机理厌氧机理4.厌氧菌分类的变迁和检索厌氧菌分类的变迁和检索5.正常菌群中的厌氧菌正常菌群中的厌氧菌专性厌氧菌专性厌氧菌微需氧菌微需氧菌厌氧菌厌氧菌绝对厌氧菌绝对厌氧菌中等厌氧菌中等厌氧菌耐氧厌氧菌耐氧厌氧菌微需氧菌微需氧菌一般以有机物为终末电子受体，只有在低氧分压（绝对无氧一般以有机物为终末电子受体，只有在低氧分压（绝对无氧环境）、低氧化还原电势（环境）、低氧化还原电势（Eh）中才能生长的细菌，它）中才能生长的细菌，它包括两大类：包括两大类：绝对厌氧菌：绝对厌氧菌：（对氧极端敏感的厌氧菌（对氧极端敏感的厌氧菌E

2、osA)只能在只能在0.5%氧分压下生长或暴露在空气中氧分压下生长或暴露在空气中10分钟左右立即死分钟左右立即死亡的细菌，如齿垢密螺旋体（亡的细菌，如齿垢密螺旋体（T.denticola)，月形单胞，月形单胞菌（菌（Selenomonas)中等厌氧菌：中等厌氧菌： 指能在指能在2%-8%氧分压中生长，或暴露在空氧分压中生长，或暴露在空气中气中60-90分钟仍能存活的厌氧菌。临床上多见，如脆分钟仍能存活的厌氧菌。临床上多见，如脆弱类杆菌弱类杆菌（B.frgilis)、产气荚膜梭菌、产气荚膜梭菌（C.perfringens)、普氏消化链球菌普氏消化链球菌（P.prevola)以及双歧杆菌属中许多种

3、都以及双歧杆菌属中许多种都属于此类菌。属于此类菌。（2）微需氧菌）微需氧菌在含在含10%左右氧分压能生存，一般只有在左右氧分压能生存，一般只有在含含5%-10% CO2条件中才能生长的细条件中才能生长的细菌如弯曲菌属（菌如弯曲菌属（Campylobacter）、乳乳杆菌属（杆菌属（Lactobacillus）、丙酸杆菌属等、丙酸杆菌属等细菌多属于此类细菌，它包括细菌多属于此类细菌，它包括两大类两大类耐氧厌氧菌耐氧厌氧菌 ：10%氧分压能存活氧分压能存活微微 需需 氧氧 菌菌 ：5-10% CO2中能存活中能存活兼性厌氧菌兼性厌氧菌厌氧菌为什么不能在有氧条件下生长繁殖？厌氧菌为什么不能在有氧条件

4、下生长繁殖？(1) 细胞色素和氧化酶学说细胞色素和氧化酶学说1) 分子氧干扰厌氧菌的繁殖分子氧干扰厌氧菌的繁殖2)分子氧干扰分子氧干扰 RNA的合成的合成3) 一般厌氧菌在一般厌氧菌在 -100mv - 250mv才能生长才能生长, Eh比游离氧更重要比游离氧更重要, 产气荚膜梭菌只要低产气荚膜梭菌只要低Eh, 即使环境中即使环境中有少量氧也生长有少量氧也生长.(一一)革兰氏阴性无芽孢厌氧杆菌革兰氏阴性无芽孢厌氧杆菌类杆菌属类杆菌属（Baeteroides)最初分为最初分为3大群大群3.B. porphyromonas（产黑色素类杆菌）产黑色素类杆菌）类杆菌属类杆菌属包括包括25个菌种个菌种普

5、雷沃氏菌属普雷沃氏菌属包括包括17个菌种个菌种卟啉单胞菌属卟啉单胞菌属包括包括9个菌种个菌种新增加新增加来自动物口腔来自动物口腔 4个个菌种（菌种（p.cangingiralis)(p.macacae)猕猴卟啉单胞菌猕猴卟啉单胞菌(p.macacae)犬齿龈卟啉单胞菌犬齿龈卟啉单胞菌(p.cangingiralis)利氏卟啉单胞菌利氏卟啉单胞菌(P.levii)卡氏卟啉单胞菌（卡氏卟啉单胞菌（P.cafoniae)沟迹梭杆菌（沟迹梭杆菌（F.sulci)溃疡梭杆菌（溃疡梭杆菌（F.ulcerans)具核梭杆菌文森氏亚种、多形亚种、动具核梭杆菌文森氏亚种、多形亚种、动物亚种（物亚种（F.nucl

6、.sub.polymorphum多形多形Sub.vincentii 文森氏文森氏, Sub.animalis 动物）动物）溶血二氧化碳嗜纤维菌溶血二氧化碳嗜纤维菌（C.heamolytica)颗粒二氧化碳嗜纤维菌属颗粒二氧化碳嗜纤维菌属（C.granuluca) 有害月形单胞菌有害月形单胞菌佛路格氏月形单胞菌（佛路格氏月形单胞菌（S.flueggei)致伤月形单胞菌致伤月形单胞菌（S.infelix)戴安娜月形单胞菌戴安娜月形单胞菌（S.dianae)阿特米斯月形单胞菌（阿特米斯月形单胞菌（S.artemidis)嗜酸血月形单胞菌嗜酸血月形单胞菌（S.aidaminophila)乳酸月形单胞菌

7、乳酸月形单胞菌（S.lacticifex) 新增加新增加一个菌属称为嗜胆菌属（一个菌属称为嗜胆菌属（Bilophila)包括一包括一个菌种个菌种:沃氏嗜胆菌沃氏嗜胆菌(B.wadworthia)其中其中两歧双歧杆菌两歧双歧杆菌有有a,b两个亚种两个亚种;嗜热双歧杆菌嗜热双歧杆菌有有a,b,c,d 4个亚种个亚种;婴儿双歧杆菌婴儿双歧杆菌有有a,b两个亚种两个亚种,亚种亚种中还有中还有游离型游离型和和乳酸型乳酸型两个亚型两个亚型;青春双歧杆菌青春双歧杆菌有有a,b,c,d 4个亚种个亚种;假长双歧杆菌假长双歧杆菌有有a,b,c,d 4个亚种个亚种.长双歧杆菌长双歧杆菌也有也有a,b两个亚种两个亚

8、种.包括包括50个菌种个菌种7个亚种个亚种4.龈沟乳杆菌龈沟乳杆菌(L.rimae)3.龈乳杆菌龈乳杆菌(L.wli)5.约汉森乳杆菌约汉森乳杆菌(L.johmsonu)6.类植物乳杆菌类植物乳杆菌(L.paraplantarum)2.阴道乳杆菌阴道乳杆菌(L.vaginalis)1.口乳杆菌口乳杆菌(L.oris)3. 丙酸杆菌属丙酸杆菌属 包括两大群共包括两大群共9个种个种,其中皮肤群其中皮肤群3个菌种。个菌种。原蛛网菌属取消，已归于丙酸杆菌属原蛛网菌属取消，已归于丙酸杆菌属, 原丙酸蛛网菌被称为丙酸丙酸杆菌原丙酸蛛网菌被称为丙酸丙酸杆菌(P.propionica).3.链球菌属链球菌属4

9、.瘤胃球菌属瘤胃球菌属5.葡萄球菌属葡萄球菌属 包括包括85个菌种和亚种个菌种和亚种主主 要要 菌菌 属属呼吸道呼吸道口腔口腔肠道肠道尿道尿道阴道阴道皮肤皮肤类杆菌属+0梭杆菌属+0纤毛菌属+000二氧化碳噬纤维菌属0+0000 荣氏菌属韦0+0+0双歧杆菌菌属0-+000乳杆菌属0+0丙酸杆菌属 0+0+放线菌属+000优杆菌属0+0消化球菌属00+0消化链球菌属00+0梭菌属00+00链球菌属+普氏菌属+-+0注：注：0表示无或很少，表示无或很少，+表示常有；表示常有；+表示大量存在；表示大量存在；+表示不规则。表示不规则。厌氧培养皿厌氧培养皿 酶系统（琼脂内）酶系统（琼脂内）+自动厌氧器

10、。自动厌氧器。5. N 2HO (CH2)2N S N(CH3)2 还原酶3.Cu+H2SO4 CuSO4+H22. O2消耗消耗 2H2+O2 钯 2 H2ONa(K)BH4+2H2O NaBO2+4H2 C6H8O7+3NaHCO3 Na3(C6H5O7)+3CO2 +3H2O60%硫酸铜溶液 ,吐温-80 2%,加入2N H2SO4 1000ml4 CrSO4+2H2SO4+O2 2Cr2(SO4)3+3H2O可拧开的瓶帽可拧开的瓶帽2001/10/5 - page 12h:marcoindustrytrain2H He em mo ol li in ne eH He em mo ol

11、li in ne e P Pe er rf fo or rm ma an nc ce e P Pe er rf fo or rm ma an nc ce e A An na ae er ro ob bi ie eA An na ae er ro ob bi ie e ( ( ( (厌厌氧氧瓶瓶厌厌氧氧瓶瓶) ) ) )预预还还原原培培养养基基( (半半胱胱氨氨酸酸）氧氧化化还还原原电电势势：- -2 20 00 0m mV V肉肉汤汤清清亮亮，易易观观察察1 10 00 0m ml l改改良良W W- -C C肉肉汤汤+ +0 0. .0 02 25 5% %S SP PS S抗抗凝凝剂剂刻刻

12、度度标标记记( (5 5- -1 10 0m ml l) )半半负负压压( (7 70 00 0m mb ba ar r) )并并增增加加C CO O2 2浓浓度度 : : 利利 於於 加加 样样 并并 促促 进进厌厌氧氧菌菌生生长长。可可拧拧开开的的瓶瓶帽帽2001/10/5 - page 14h:marcoindustrytrain2HemolineHemolineHemolineHemoline Performance Performance Performance Performance AnaerobieAnaerobieAnaerobieAnaerobie ( ( ( (厌氧瓶厌氧

13、瓶厌氧瓶厌氧瓶) ) ) )采用采用Wolkins ChalgrenWolkins Chalgren培养基：更适合血培养培养基：更适合血培养增加特殊生长因子增加特殊生长因子: : - - 维生素维生素B6 B6 促进促进“营养缺陷型链球菌营养缺陷型链球菌”的生长；的生长；- - 氯化血红素氯化血红素- -碳酸氢盐碳酸氢盐类杆菌生长的促进因子；类杆菌生长的促进因子；- - L L精氨酸精氨酸为迟缓真杆菌生长所必需；为迟缓真杆菌生长所必需；- - 丙酮酸盐丙酮酸盐促进韦荣球菌的快速生长；促进韦荣球菌的快速生长；- - 甲荼醌甲荼醌 ( (维生素维生素K K3 3) ) 产黑色素类杆菌生长所必需。产

14、黑色素类杆菌生长所必需。在在临临床床常常见见疾疾病病与与厌厌氧氧菌菌感感染染 部部位位 疾疾病病种种类类 感感染染率率 感感染染情情况况 主主要要感感染染的的厌厌氧氧菌菌 全全 身身 及及心心 血血 管管感感染染 菌 血 症 或 败 血 症 心 内膜炎（以放线菌、脆弱类杆菌梭杆菌为主） 20%25% 10%20% 混合感染 类 杆菌尤 其是 脆弱类杆菌、梭菌、消化链球菌、优杆菌及梭杆菌 中中 枢枢 神神经经系系统统 脑脓肿 硬脑膜积脓 脑膜炎 89% 10%20% 29氯林可霉素氯林可霉素214红霉素红霉素1015162122林可霉素林可霉素152101815919266151024271625青霉素青霉素G10u1213262-7四环素四环素3017182930万古霉素万古霉素3014152020羧苄青霉素羧苄青霉素10012132223头孢菌素头孢菌素3010112223强力霉素强力霉素3012132425甲硝唑甲硝唑5882122