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1、第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 第六章 尿液分析仪检验 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 尿分析仪检验质量控制 尿有形成分分析仪 尿干化学分析仪 本 章 内 容 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 第一节 干化学尿液分析仪检验 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 干化学尿液分析的发展史 法国Maumene采用羊毛纤维作为试带，检测尿液中葡萄糖。 1850 美国人用单试纸条检测尿蛋白和葡萄糖，开创了干化学法。 1956 干化学尿液分析仪已能在1条试带上同时测定8-14个项目，检测更迅速，结果更准确。 目前 第六章 尿液分析仪检验 5 干化学尿液分析的自动化程

2、度干化学尿液分析的自动化程度 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 干化学尿液分析仪组成 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 将待检的试带传送到检测区，仪器检测后将试带传送到废料盒内或手动取下试带 机械系统机械系统 第六章 尿液分析仪检验 8 图7-1-1 光电系统检测原理图示意图 光线照射到试带反应 物表面产生反射光 反射光的强度与反应颜色成反比 不同强度的反射光再经光电转换器件转化为电信号进行处理 光源 单色处理 光电转换 光学系统 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 图7-1-2 电路系统工作简图 将光信号转换成电信号放大，经模 /数转换，再用电脑进行数据分析，打印

3、结果 电路系统电路系统 第六章 尿液分析仪检验 干化学尿液分析仪试带结构干化学尿液分析仪试带结构 图7-1-3 干化学尿液分析仪试带结构图 单项试带 发展初期基本形式 多项试带 含同一试带上多种检测项目的试剂模块，可同时检测多个项目。 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 膜结构 主要作用 尼龙膜层 保护作用，防止大分子物质污染反应 绒制层 包括试剂层和碘酸盐层。试剂层含有试剂成分，主要与尿液中的化学物质发生反应，产生颜色变化。碘酸盐层可防止维生素C等物质的干扰 吸水层 使尿液均匀快速渗入，并抑制尿液渗透到相邻反应区 支持层 支持作用，由尿液不浸润的塑料片制成 尿液干化学法试带多层膜结构

4、组成及主要作用尿液干化学法试带多层膜结构组成及主要作用 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 干化学尿液分析仪检测原理 图7-1-3 干化学尿液分析仪试带结构图 试带中各试剂模块与尿液中相应成分进行独立反应，显示不同的颜色。 颜色的深浅与尿液样本中的各种成分的浓度成正比。 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 影响 + 试带上的 各检测试剂块 尿液中 相应成分 产生颜色 发生 化学反应 颜色深浅 与光的吸收与反射相关 尿液中相应的 被检测成分成比例关系 + 吸收光值越大,反射光值越小, 被检成分的浓度越高 尿液本身的颜色 空白试剂 (补偿垫) 采用球面积分仪接受双波长双波长反射光的

5、方式测定试带上的颜色变化进行半定量测定。 双波长的作用：消除背景光 和杂散光 测定波长：被测试剂块 的灵敏特征波长 620nm：蛋白质、葡萄糖、 pH、维生素C、隐血 550nm：胆红素、尿胆原、 亚硝酸盐、酮体 参考波长：被测试剂块不敏感的波长，用于消除背景光和其他杂散光的影响,720nm 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 将测定的每种试剂区反射光的光亮值与空白块的反射光量值进行比较，通过计算求出反射率 仪器根据反射率确定尿液中生化成份的含量 1 2 ?R反射率； ?Tm试剂块对检测波长的反射强度； ?Ts试剂块对参考波长的反射强度； CmTsCsTm=%R）（反射率计算公式如下：

6、 ?Cm空白块对检测波长的反射强度； ?Cs空白块对参考波长的反射强度。 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 干化学尿液分析仪检测参数及原理 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 参数 英文缩写 反应原理 参考区间 pH pH 酸碱指示剂法 随机尿：pH 4.58.0 比重 SG 多聚电解质离子解聚法 1.0151.025 蛋白质 PRO pH指示剂蛋白质误差法 阴性 葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶 -过氧化物酶法 阴性 胆红素 BIL 偶氮反应法 阴性 尿胆原 URO 醛反应、重氮反应法 阴性或弱阳性 酮体 KET 亚硝酸基铁氰化钾法 阴性 亚硝酸盐亚硝酸盐 NIT 亚硝酸盐还原

7、法 阴性 隐血或红细胞 BLD 血红蛋白亚铁血红素类过氧化物酶法 阴性 白细胞 LEU 酯酶法 阴性 维生素C VitC 吲哚酶法 阴性 尿液干化学分析仪主要检测参数及原理 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 尿液干化学分析仪试带及结果判断 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 干化学尿液分析法方法学评价 优点 标本用量较少 适用于大批量标本的筛检 速度快，项目多，重复性好， 准确性较高 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 局限性：局限性： 与含硝酸盐还原酶的某些细菌反应，对于假单胞菌属和革兰氏阳性菌等无反应，易出现尿道感染漏诊。 NIT NIT 尿蛋白尿蛋白 只对白蛋白

8、敏感，对球蛋白不敏感，对本周蛋白不反应；易造成对IG型肾病、骨髓瘤漏诊； RBC 对完整RBC及HGB均有反应；不稳定酶、肌红蛋白、菌尿会引起假阳性；高渗性红细胞易漏检。 WBC 只测脂酶，对中性粒细胞有反应，对淋巴细胞无反应；容易漏诊肾移植早期排异反应。 不能代替病理性尿液标本的显微镜检查，对白细胞、管型和结晶的检测属于间接检测。 形态检查 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 Vit C : GLU、ERY假阴性； 青霉素：LEU 、PRO假阴性。 药物影响 SG 比重膜块只能反映尿中阳离子多少与比重计结果不一；对婴儿等低比重尿则不敏感。 BIL UBG 胆红素及尿胆原膜块灵敏度比H

9、arrison手工法低得多。 KET 酮体膜块对乙酰乙酸最敏感，丙酮次之对-羟丁酸不反应。 GLU 只对葡萄糖产生反应,对乳糖、半乳糖、果糖及蔗糖不反应。 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 只做尿干化学分析可能造成： 我们是仪器做的，你的尿检正常 昨天在另家医院手工做说有问题？ RBC、WBC易出现假阳性或假阴性 有病理意义的尿有形成分漏检 前后结果不一致 结果不可通用性 尿干化学应 为初筛试验！ 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 参数 假阳性 假阴性 比重 尿蛋白 尿素10g/L、尿液pH6.5 蛋白质 喹宁、嘧啶、聚乙烯、吡咯酮、氯已定、磷酸盐、季铵类消毒剂、尿液pH9

10、.0， 大量青霉素尿、尿液pH500mg/L）、氟化钠、高比重尿、尿酮体（0.4g/L） 胆红素 吩噻嗪类或吩嗪类药物 维生素C（500mg/L）、亚硝酸盐、光照 尿胆原 吲哚、吩噻嗪类、维生素K、磺胺药 亚硝酸盐、光照、重氮药物、对氨基水杨酸 尿液干化学分析仪检测假阳性、假阴性常见的原因 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 参数 假阳性 假阴性 酮体 酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物 试带受潮、陈旧尿液 亚硝酸盐 陈旧尿液、亚硝酸盐或偶氮剂污染、含硝酸盐丰富的食物 尿胆原、尿液pH6.0、维生素C、尿量过多、食物含硝酸盐过低、尿液在膀胱中贮存100mg/L） 白细胞 甲醛、毛滴虫、氧化剂、

11、高浓度胆红素、呋喃妥因 蛋白质、维生素C、葡萄糖、头孢氨苄 尿液干化学分析仪检测假阳性、假阴性常见的原因 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 第二节 尿液有形成分分析仪检验 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 尿液有形成分分析发展史 1983年 美国一家公司推出以电视摄像模式获取尿中有形成分图像并进行分析的尿液有形成分检查工作站 1995年 日本将流式细胞术和电阻抗技术结合起来，研制了新一代全自动尿液有形成分分析仪 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 尿液有形成分分析发展史 2000年 尿液有形成分数字影像拍摄系统则开启了数字图像尿液有形成分分析的先例 现 今 全自动尿

12、液有形成分分析仪已普遍用于临床，且大多数可连接或合并干化学分析仪 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 尿液有形成分分析仪分类 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 （一）流式细胞技术尿液有形成分分析仪 流式细胞技术尿液有形成分分析仪 结合半导体激光技术、鞘流技术和核酸荧光染色技术以及电阻抗原理为一体 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 流式细胞通道前向散射信号放大器荧光信号放大器电极氩离子激光尿液标本电导率感应器鞘流液试剂电阻抗信号电阻抗检测电导率荧光电阻抗信号电阻FlwFlFscwFsc体积染色部位长度染色敏感度长度大小散点图尿液电导率染色稀释RBCWBC上皮细胞管型细

13、菌类酵母细胞精子，结晶，小圆上皮细胞，病理管型Fac 直方图RBC-MFscRBC-MFl 等WBG-MFsc检测器流式细胞技术尿液有形成分分析流程 第六章 尿液分析仪检验 光学检测 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 信号检测信号检测 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 信号处理信号处理 2019/9/5 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 核酸荧光染色染料核酸荧光染色染料 菲啶 核酸成分染色 羧花氰 与细胞膜 核膜和线粒体的脂层成分结合 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 流式细胞技术尿液有形成分分析仪的检测参数流式细胞技术尿液有形成分分析仪的检测参数 分类

14、 参数 分析参数 红细胞（RBC)、白细胞（WBC）、上皮细胞（EC）、管型（CAST）、细菌（BACT） 标记参数 病理性管型（P-CAST）、小圆上皮细胞（SRC）、类酵母细胞（YLC）、结晶（CRYSTAL）、精子 其他参数 红细胞信息和红细胞分析参数、白细胞分析参数、电导率、散点图、直方图等 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 散点图S1 散点图S2 散点图散点图 第六章 尿液分析仪检验 散点图S3 散点图B1 散点图 FLW FSCW 第六章 尿液分析仪检验 RBC-Fsc WBC-Fsc 直方图 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 红细胞 信息 RBC-P70Fsc

15、 100ch，且RBC-Fsc-DW50ch，提示为非肾小球性血尿 70chRBC- P70Fsc100ch，且RBC-Fsc-DW50ch，为混合性红细胞 红细胞信息主要提示红细胞的均一性，对鉴别血尿来源有一定过筛作用 70%RBC-P70Fsc 70ch，且RBC-Fsc-DW 50ch，提示为 肾小球性血尿 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 （二）流动式数字影像拍摄技术分析仪 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 分析仪工作原理分析仪工作原理 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 高速频闪光源和显微摄像的光学系统每标本摄取500个视野的图片 电脑处理将每一个画面中的

16、单独的微粒的图像分割开 自动颗粒识别分析技术（ APRTM） 对单个有形成分图像归类 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 自动颗粒识别分析技术（APRAPRTMTM） 根据颗粒的大小、对比度、形状、质地四个条件对其进行分析，得到一系列描述该粒子特征的相应数值。 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 27项可进一步分类参数 结晶体、病理管型、上皮细胞、酵母及毛滴虫、脂肪滴、异性红细胞等 12项自动分类参数 红细胞、白细胞、白细胞团、鳞状上皮细胞、非鳞状上皮细胞、透明管型、病理管型等 APRAPRTM识别的有形成分 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 （三）静止式数字影像拍摄

17、技术分析仪 第六章 尿液分析仪检验 参 数 红细胞 白细胞 上皮细胞 管型 结晶 粘液丝等 电导率 第六章 尿液分析仪检验 （三）方法评价 显微镜检查是尿液有形成分检查的金标准。 2019/9/5 第六章 尿液分析仪检验 第三节 尿液分析仪检验的质量控制 第六章 尿液分析仪检验 质量控制 分析中质量控制 分析后质量控制 分析前质量控制 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 ? 患者告知 ? 非正确采集方法对检验结果的影响 ? 尿液样本必须新鲜 指从医生工作站申请至将尿液送到检验科的质量控制，包括标本的采集运送和保存等环节 （一）分析前质量控制 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验

18、52 尿液标本放置过久对尿液干化学分析仪检验结果的影响尿液标本放置过久对尿液干化学分析仪检验结果的影响 项目 结果 原因 pH 升高 细菌繁殖产氨 葡萄糖 降低 细菌繁殖分解利用糖 酮体 假阴性 酮体挥发 胆红素、尿胆原 假阴性 胆红素阳光照射变为胆绿素； 尿胆原氧化成尿胆素 亚硝酸盐 假阳性 体外细菌繁殖 蛋白质 假阳性或假阴性 尿液pH改变时尿液过碱或过酸 隐血 假阴性， 尿试带阳性而镜检阴性 过氧化物酶活性减弱 红细胞破坏 细胞 假阴性， 尿试带阳性而镜检阴性 白细胞酯酶失活 粒细胞破坏，特异性酯酶释放入尿液 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 （二）分析中质量控制 第六章第六章

19、 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 1. 性能评价 评价指标： 符合率 精密度 线性 携带 污染率 相关性 生物参考区间验证 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 2. 结果验证和显微镜复检 泌尿系统疾病患者、糖尿病患者、应用免疫抑制剂患者及妊娠妇女等 医生提出显微镜检查要求 尿液有形成分分析仪结果异常或仪器报警等情况 显微镜 复检原则 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 尿液有形成分分析仪结果异常或仪器报警 尿干化学与有形成分分析仪结果不相符合或者RBC、WBC的结果相差量级2级以上时 尿有形成分分析仪各项结果有报警信息时 应分析结果之间的关联性，注意临床诊断和检查结果的符合性 第

20、六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 显微镜复核注意事项 以镜检结果为诊断依据或观察疗效时不宜使用干化学过筛 要结合临床表现判断结果，绝对不可只看干化学结果，忽略镜检结果 当尿液外观异常时，应注意显微镜检查 干化学试带的质量、稳定性及质量控制与过筛的准确性密切相关 每个检测系统都应建立自己的筛选标准，筛选规则使用之前，必须经过验证 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 参数 干化学 显微镜显微镜 镜检法 原因 白细胞 + 尿液在膀胱中贮存时间过长，致白细胞破坏、粒细胞酯酶释放 + 尿液以淋巴细胞或单核细胞为主，见于肾移植患者 红细胞 + 尿液红细胞被破坏，释放Hb，尿液中含易热性触媒

21、，肌红蛋白尿（将尿液煮沸冷却后再检测可以排除酶的影响） + 少见，见于维生素C100mg/L或试带失效时 干化学尿液分析仪法和显微镜镜检不符合情况与原因干化学尿液分析仪法和显微镜镜检不符合情况与原因 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 3. 室内质控 每工作日至少检测 1次，任意一个试剂块的检测结果与 “靶值”偏差不超过 1个等级 每天用质控物尿液进行质量控制监测 超过或结果在“正常”与“异常”之间波动均视为失控 第六章 尿液分析仪检验 干化学尿液分析仪室内质控 第六章 尿液分析仪检验 尿有形成分分析仪室内质控 参照临床实验室定量测定室内质量控制指南进行； 应至少使用2个浓度水平（正常

22、和异常水平）的质控物 每检测日至少检测1次，应至少使用1-3s、2-2s失控规则。 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 4. 室间质评 通过阅读有形成分图片的方式进行，卫生部临检中心通过提供尿液有形成分图片考核实验室的形态学水平，一年 2 2次 第六章第六章 尿液分析仪检验尿液分析仪检验 与其他实验室比对的方式确定检验结果的可接受性时，应满足如下要求： 规定比对实验室的选择原则 样品数量：至少5份，包括正常和异常水平 频率：至少每年2次 判定标准：应有 80%结果符合要求 第六章 尿液分析仪检验 包括系统性的评审、规范格式和解释、授权发布、结果的报告与传递、检验样品的储存等 （三）分析后质量控制（三）分析后质量控制 对于结果的报告与审核，实验室应做好人员培训工作 正确分析检测结果之间的关联性 ；形态学检验项目应只报告筛查后的最终唯一结果 注意临床诊断和检验结果的符合性，如有明显矛盾应及时联系临床医师共同探讨原因 2019/9/5 总总 结结 1. 尿液干化学分析仪检测原理及优缺点 2. 尿液干化学试剂带结构及各层膜作用 3. 干化学试剂带检测参数 缩写及原理 4. 尿液有形成分分析仪分类 5. 尿液有形成分分析仪检测局限性 6. 显微镜复检原则