干化学技术简介.课件.ppt

1、干片技术VITROS MicroSlide (干片)技术 介绍三种干片介绍三种干片 定义干片定义干片 分层分层, 功能功能, 和测量技术和测量技术 叙述叙述 VITROS 干片干片 在操作中与在操作中与常规方法常规方法相相比的优势比的优势 1970 1970 年：化学干片技术起源于年：化学干片技术起源于1970年的伊斯特年的伊斯特 曼曼-柯达公司柯达公司 1971 1971年年：借鉴普通临床生化反应序列借鉴普通临床生化反应序列 生产出葡萄生产出葡萄糖分析干片糖分析干片 19761976年：干片获得专利年：干片获得专利 1978 1978年：推出专利的干片生化技术年：推出专利的干片生化技术 19

2、801980年：年：FDAFDA批准五个分析产品可以进入市场批准五个分析产品可以进入市场 1995 1995年：推出一些免疫产品年：推出一些免疫产品干片的历史干片分类干片分类比色比色/速率法干片速率法干片 电极法干片电极法干片 免疫免疫-速率法干片速率法干片 比色比色/ /速率法干片速率法干片 通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度 终点法、双波长终点法、双波长 测定法，固定时间法、测定法，固定时间法、 速率法速率法 终点法应用终点法进行测试的项目白蛋白干片（ALB） 血氨干片（AMON)钙离子干片（Ca) 胆固醇干片（CHOL)葡萄糖干片（GLU) 高密度脂

3、蛋白胆固醇干（HDLC)镁离子干片（Mg) 磷离子干片（PHOS)总蛋白干片（TP) 甘油三酯干片（TRIG)尿素氮干片（BUN/UREA) 尿酸干片（URIC)双波长 测定法应用双波长 测定法进行测试的项目总胆红素（TBIL)消除可形成的光谱干扰非结合胆红素和结合胆红素（BUBC)摩尔吸收值相近 两不同波长处的读数可以用来确定BU和BC的浓度固定时间法（两点法）应用固定时间法进行测试的项目淀粉酶干片（AMYL) 脂肪酶干片（LIPA)肌酐干片（CREA)铁离子干片（FE)茶碱干片（THEO)速率法（多点法）应用速率法进行测试的项目谷丙转氨酶干片（ALT) 碱性磷酸酶干片（ALKP)谷草转氨酶

4、干片（AST) 肌酸激酶干片（CK)肌酸激酶同工酶干片（CK-MB) 谷氨酰转肽酶干片（GGT)乳酸脱氢酶干片（LDH) 胆碱酯酶干片（CHE) 均匀分布标本均匀分布标本 过滤大分子过滤大分子 标本预处理标本预处理 提供反射测定的背景提供反射测定的背景试剂层试剂层试剂层试剂层 包含干性试剂包含干性试剂 多层试剂，控制反应顺序多层试剂，控制反应顺序指示剂层指示剂层指示剂层指示剂层包含染料以产生显色复合物包含染料以产生显色复合物驱使反应完成驱使反应完成支持层支持层 提供反应支持基垫提供反应支持基垫 允许光路自由通过允许光路自由通过均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布

5、标本标本进入扩散层标本进入扩散层均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本标本迅速向四周扩散标本迅速向四周扩散均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本标本均匀向下层渗透标本均匀向下层渗透均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本标本与试剂反应标本与试剂反应均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本均匀分布标本反应物在指示剂层被固定反应物在指示剂层被固定反射光的测定反射光的测定反射光的测定反射光的测定干扰物质干扰物质反光背景反光背景指示剂层指示剂层生成纯净的反射光生成纯净的反射光光源光源滤光片滤光片接收器接收器低浓度低浓度高浓度高浓度湿化学湿化学 ：n 采用透射光度法采用透射光度法

6、n 遵循朗勃比尔定律遵循朗勃比尔定律干化学干化学 ：n 采用反射光度法采用反射光度法n 遵循遵循Williams Clapper定律定律吸光度吸光度浓度浓度反射光反射光浓度浓度透射与反射透射与反射透射与反射透射与反射检测检测检测检测光线经过干扰物质光线经过干扰物质受影响受影响光线不经过干扰物质光线不经过干扰物质不受影响不受影响湿化学湿化学 ：n 仪器相对开放，试剂选购方便仪器相对开放，试剂选购方便,但是质量控制是隐患但是质量控制是隐患n 由使用者监控仪器状态和结果的可信度由使用者监控仪器状态和结果的可信度n 频繁的日常仪器校验，繁琐且工作量大频繁的日常仪器校验，繁琐且工作量大干化学干化学 ：n

7、 仪器相对封闭，采用固定的试剂及耗材来保证结果仪器相对封闭，采用固定的试剂及耗材来保证结果n 长期稳定的定标曲线，大大减少了日常工作量长期稳定的定标曲线，大大减少了日常工作量电极法干片电极法干片离子选择电极技术离子选择电极技术 直接法测定两电极间电势不同直接法测定两电极间电势不同 K、Na、ClISEISE干片结构干片结构干片结构干片结构Electrometer干片在接触点被穿透干片在接触点被穿透测量电压读数测量电压读数通过电压读数计算出分析通过电压读数计算出分析物的浓度物的浓度测量技术测量技术盐桥盐桥S2S1S3S4aIar离子载体膜离子载体膜M+ ClAgCl Ag离子载体膜离子载体膜M+

8、 ClAgClAgaIarVV干片干片常规常规已知浓度液体已知浓度液体(参比液参比液)待测液体待测液体(标本标本)离子选择电极离子选择电极(ISE)盐桥盐桥arVITROS干化学检测电解质与常规方法比较干化学检测电解质与常规方法比较常规法（间接法）常规法（间接法） 干片法（直接法）干片法（直接法）电极与电极膜重复使用电极与电极膜重复使用 稳定性差稳定性差 独立电极独立电极 / 测试测试单一采样针、进样通道单一采样针、进样通道 交叉污染交叉污染 一次性一次性Tip头头大量蠕动泵、电磁阀大量蠕动泵、电磁阀 维修保养复杂维修保养复杂 无无 众多管道、多种液体众多管道、多种液体 易腐蚀、老化易腐蚀、老

9、化 无管道无管道 频繁定标与冲洗保养频繁定标与冲洗保养 耗时、不环保耗时、不环保 定标周期长、环保定标周期长、环保电解质排斥效应电解质排斥效应 有有 没有没有ISE间接法电解质排斥效应间接法电解质排斥效应 标本标本10微升，非水相微升，非水相5，水相，水相9.5微升微升 稀释稀释100倍，加入稀释液倍，加入稀释液990微升，水相微升，水相999.5微升微升 实际稀释倍数实际稀释倍数999.59.5105.211 如果标本中含如果标本中含K 3.50 mmol/L; Na 140 mmol/L 间接法实测值为：间接法实测值为：3.50105.2111003.33 mmol/L 140105.21

10、1100133.0 mmol/L 直接法没有电解质排斥效应直接法没有电解质排斥效应一次性电极一次性电极没有基质效应没有基质效应没有电解质排斥效应没有电解质排斥效应没有繁琐的日长保养没有繁琐的日长保养性能优势性能优势免疫速率法干片免疫速率法干片竞争性与非竞争性免疫速率反应模式竞争性与非竞争性免疫速率反应模式 需要液体反应底物需要液体反应底物 地高辛、苯妥因、苯巴比妥、地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRP、 卡马西平卡马西平免疫速率法干片免疫速率法干片酶抗体酶标抗原胶乳试剂扩散层扩散层受体层受体层胶乳层胶乳层聚酯支持层聚酯支持层酶标抗原抗体胶乳试剂病人标本病人标本免疫速率法干片免疫速率法干片胶乳试剂免

11、疫速率法干片免疫速率法干片酶标抗原 标本中抗原抗体免疫速率法干片免疫速率法干片竞争法结合竞争法结合结合抗原 + 游离抗原免疫速率法干片免疫速率法干片加入液体反应底物洗去未结合物质加入液体反应底物洗去未结合物质免疫速率法干片免疫速率法干片竞争法结果竞争法结果 高浓度 低浓度VITROS VITROS 干化学技术在干化学技术在抗干扰方面抗干扰方面具有突出优势具有突出优势去除干扰的干片原理去除干扰的干片原理 I I缓冲液缓冲液 蜡染料衍生物蜡染料衍生物 u清道夫层清道夫层使用氧化酶或特异性结合物去除干扰物使用氧化酶或特异性结合物去除干扰物以以镁离子干片镁离子干片为例为例Mg+2+ Ca +2 Mg +2 + Ca +2 螯合剂螯合剂 复合物复合物Mg+2 + 甲蜡染料衍生物甲蜡染料衍生物 Mg +2 染料复合物染料复合物去除干扰的干片原理去除干扰的干片原理 IIIIu选择性半透膜选择性半透膜增强结果特异性；去除干扰物增强结果特异性；去除干扰物 以以尿素氮干片尿素氮干片为例为例NH3 + 氨指示剂氨指示剂 呈色呈色 氨指示剂 尿素酶 缓冲液 pH7.8H2 NCONH2 + H2O 2NH3 + CO2 多层涂膜干片技术多层涂膜干片技术 优异的抗干扰能力优异的抗干扰能力 稳定的定标曲线稳定的定标曲线 所有元素尽在其中所有元素尽在其中VITROS VITROS 干化学技术特点干化学技术特点