1、白细胞计数-Neubauer(牛鲍)板计数法长治市第二人民医院检验科：薛彬彬1ppt课件2ppt课件 1、目的：掌握显微镜法白细胞计数的原理 及方法。 2、原理：用白细胞稀释液将血液稀释一定 倍数，同时破坏溶解红细胞。将稀释的血 液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。 3ppt课件 3、器材：显微镜、改良牛鲍计数板、试管、吸管、微量吸管、吸头等。 4、试剂：白细胞稀释液：2%冰乙酸2ml, 10g/L结晶紫（或亚甲蓝）3滴，加蒸馏水到100ml。 5、标本：新鲜 全血或末梢血。4ppt课件 改良的牛鲍 计数板。 5ppt课件 6ppt课件操
2、作步骤 1、加稀释液：用吸管吸取白细胞稀释液 0.38ml于小试管中。 2、吸取血液：用微量吸管吸取新鲜全血或 末梢血20ul，擦去管尖外部 余血。将吸管插入试管中白 细胞稀释液的底部，轻轻放 出血液，并吸取上层白细胞 稀释液清洗吸管2-3次。7ppt课件 3、混匀：将试管中血液与稀释液混匀，待 细胞悬液完全变为棕褐色。 4、充池：再次将小试管中的细胞悬液混 匀，用微量吸管吸取7ul左右充 入改良牛鲍计数板的计数池中， 室温静置2-3分钟，待白细胞完 全下沉。8ppt课件 5、计数：在低倍镜下计数四角4 个大方格的白细胞总数。 6、计算: WBC=N/41020106=N/20109 其中N为
3、4个大方格的白细胞总数。9ppt课件7、细胞计数原则、细胞计数原则 大方格四边压大方格四边压线细胞数左不线细胞数左不数右，数上不数右，数上不数下，数下， 弓形移动弓形移动10ppt课件8、考核评价、考核评价 a. 常规考核标准常规考核标准 （RCS）RCS= 100%评价：评价： 白细胞白细胞 4.0109/L者，者， RCS30% 白细胞在（白细胞在（4.1-14.9）109/L者者 RCS20% 白细胞白细胞15.0 109/L者者 RCS15% 超过上述标准者为不合格超过上述标准者为不合格 b. 其他方法其他方法四大格所见白细胞最大值四大格所见白细胞最大值最小值最小值四大格所见白细胞数平
4、均值四大格所见白细胞数平均值11ppt课件注意事项注意事项(1).稀释液密封保存，防止污染，小试管、计稀释液密封保存，防止污染，小试管、计数板、盖片均须清洁，以免杂质、微粒等数板、盖片均须清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。被误认为细胞。(2).采血时针刺深度必须适当，不能过度挤压，采血时针刺深度必须适当，不能过度挤压，防止组织液渗入或采血时间太长引起血液防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。凝固。(3).稀释液和采血量要准确，充分混匀，充液稀释液和采血量要准确，充分混匀，充液适量，无不足、外溢和气泡，细胞分布均适量，无不足、外溢和气泡，细胞分布均匀。匀。12ppt课件 (4).白细胞总数
5、在参考范围内，大方格间白细胞总数在参考范围内，大方格间的细胞数不得相差的细胞数不得相差10个以上，两次重复计个以上，两次重复计数误差不得超过数误差不得超过10。 (5).白细胞数量过高时，可加大稀释倍数，白细胞数量过高时，可加大稀释倍数，白细胞数量过低时，可计数白细胞数量过低时，可计数8个大方格的白个大方格的白细胞数或取双倍血量。细胞数或取双倍血量。13ppt课件 (6).一些贫血患者血液中有核红细胞增多，一些贫血患者血液中有核红细胞增多，会计数在白细胞总数内，应校正。会计数在白细胞总数内，应校正。 校正公式：白细胞校正数校正公式：白细胞校正数/L=M（100/100+N） M为未校正前白细胞数，为未校正前白细胞数，N为在白细胞分为在白细胞分类时，计数类时，计数100个白细胞的同时计数到的有个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。核红细胞数。14ppt课件 谢谢大家！谢谢大家！ 15ppt课件
