1、主要内容主要内容物品准备物品准备标本处理标本处理涂片染色涂片染色显微镜观察显微镜观察报告结果报告结果一、物品准备一、物品准备准备干净的玻片、推片准备干净的玻片、推片瑞氏染液、瑞氏染液、待检待检EDTAEDTA抗凝全血抗凝全血计时器计时器显微镜显微镜计数器计数器二、样本处理二、样本处理血涂片的制备：血涂片的制备：1、制作血涂片的载玻片要求清洁、干燥、中性、无油腻；2、距载玻片一端约1cm处滴EDTA抗凝全血30ul；3、将推片放置于血滴的前端，紧挨血滴，使其顺推片边缘散开；4、调整好推片与载玻片的夹角，使其约呈30度角，均匀向前推片。影响涂片厚薄的因素有：血滴大小、推片与载玻片间的夹角，推片速度
2、、血细胞比容。制备涂片时，血滴越大、角度越大、推片速度越快，血膜越厚，反之越薄。血细胞比容增高、血液粘度较高时，应采用小血滴、小角度、慢推，可得满意结果；血细胞比容减低、血液较稀时，应采用大血滴、大角度、快推。血涂片的好坏直接影响到细胞的鉴别。一张良好的血涂片，要求厚薄适宜、头体尾明显、细胞分布均匀、血膜边缘整齐、两端和两边留有一定空隙。三、涂片染色三、涂片染色 1、滴入瑞氏染液I液数滴盖满标本，30秒；2、再加入瑞氏染液II液与I液比例为1:1，染13分钟；3、用流水冲洗涂片。注意事项：注意事项：1、血涂片干透后火焰固定，否则细胞在染色过程中容易脱落。2、冲洗时应以流水冲洗，不能先倒掉染液，
3、以防燃料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久，以防脱色。如血涂片上有燃料颗粒沉积，可滴加甲醇，然后立即用流水冲洗。3、染色过淡可以复染，复染时应先加缓冲液然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡，也可用甲醇脱色。4、染色的深浅与血涂片中细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、PH值密切相关，可根据情况适当纠正。四、显微镜观察四、显微镜观察由于各种白细胞体积大小不等，在血涂片中分布很不均匀，一般体积较小的淋巴细胞在头、体部分布较多，而尾部和两侧以中性粒细胞核单核细胞较多，异常大的细胞常在片尾末端出现。一般认为细胞分布在片头至片尾的3/4区域比较均匀，因此分类时最好选择在体尾交界处，且必须按一定方式有规
4、律地移动视野。需在油镜下观察。先调粗螺旋找到视野，再调动细螺旋慢慢找到较为清晰的视野。在病毒或过敏原等因素刺激下，外周血淋巴细胞增生并发生异常形态变化，称异型淋巴细胞或“Downey”细胞。已知此种细胞属T淋巴细胞，其形态的变异是因增生亢进，甚至发生母细胞化的结果。根据细胞形态可分为三型。2 I I型型空泡型空泡型IIIIII型型幼稚型幼稚型 II II型型不规则型不规则型分型分型细胞中等大小，细胞 多呈圆形或部分不规则 形或阿米巴型，胞质嗜 碱性强，呈深蓝色，含 有大小不等的空泡或呈 泡沫状，无颗粒或有少 数颗粒，胞核偏位，呈 椭圆形，肾形或分叶形，染色质粗糙，呈粗网状 或成堆排列。I I型
5、（泡沫型或浆细胞型）型（泡沫型或浆细胞型）细胞胞体较I型大，形态不规则，胞质量 多，呈浅灰蓝色，但 靠胞膜边缘处较深染 且不整齐，无空泡，可有少数天青胺蓝颗 粒，胞核呈圆形、椭 圆型或不规则形，染 色质较I型细致，亦呈 网状。型（不规则型或单核细胞样型）型（不规则型或单核细胞样型）细胞直径 15um18um，形态不规则，胞质呈蓝色，可有分布较均匀的小空泡，一般无颗粒，胞核圆形或卵圆形，可见核仁1个2个，染色质细致、均匀，呈网状排列，无浓集现象。型（幼稚型或幼淋巴细胞样型）型（幼稚型或幼淋巴细胞样型）异型淋巴细胞除I、II、III型三个类型外，有时也可见到少数组织细胞样的难以归类的异型淋巴细胞。异型淋巴细胞异型淋巴细胞 异型淋巴细胞增多主要见于传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、流行性出血热、湿疹等病毒性疾病和过敏性疾病。正常人血片中可偶见此种细胞。一般病毒感染异型淋巴细胞 10%，因此二者可依据异性淋巴细胞的多少来鉴别诊断。五、报告结果计数1000个白细胞中异型淋巴细胞数为N;（1）未找到异型淋巴细胞；（2）计算异型淋巴细胞占白细胞的百分比。
