1、一一.实验原理:实验原理:.还原性糖的鉴定:还原性糖的鉴定:还原性糖还原性糖+.脂肪的鉴定:脂肪的鉴定:脂肪脂肪+脂肪脂肪+.蛋白质的鉴定:蛋白质的鉴定:蛋白质蛋白质+斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀苏丹苏丹橘黄色橘黄色苏丹苏丹红色红色双缩脲试剂双缩脲试剂紫色紫色二二.目的要求:目的要求:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质脂肪和蛋白质1 1、还原糖的检测和观察:、还原糖的检测和观察:选材选材 应该选择含应该选择含 量高量高.颜色颜色 为为 的植物组织的植物组织 以以苹果苹果.梨梨为最好。为最好。还原糖还原糖白色或近于白色白色或近于白色制备组织样
2、液:制备组织样液:制浆制浆 过滤过滤 取液取液 三三.实验过程实验过程:用一层纱布用一层纱布可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,程中生成砖红色沉淀,说明植物组织说明植物组织样液中含有还原糖。样液中含有还原糖。注入注入2mL2mL苹果组苹果组织样液织样液注入注入1mL1mL刚配制好的刚配制好的斐林试剂斐林试剂水浴加热约水浴加热约2min2min呈色反应呈色反应变成变成砖红色砖红色50-650C的温水的温水结论:结论:甲乙液等量混匀甲乙液等量混匀振荡、混振荡、混合摇匀合摇匀呈呈现蓝色现蓝色 还原糖有还原糖有 。试剂:试剂:.(甲液:(甲液:0.1g/
3、ml 的的 ,乙液:乙液:0.05g/ml的的 .)甲乙液必须甲乙液必须 后再加入样后再加入样 液中,液中,。必须必须 。葡萄糖,果糖,麦芽糖葡萄糖,果糖,麦芽糖用水浴加热用水浴加热斐林试剂斐林试剂NaOHCuSO4等量混合均匀等量混合均匀现配现用现配现用注意事项:注意事项:颜色变化:颜色变化:浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色2 2、脂肪的检测和观察:、脂肪的检测和观察:圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。取材:取材:花生种子花生种子(浸泡浸泡3 34h4h),将子叶削成薄片),将子叶削成薄片制片制片取最理想的薄片取最理想的薄片在薄片上滴在薄片上滴2-32-
4、3滴苏丹滴苏丹染液染液3min3min去浮色(用去浮色(用5050酒精)酒精)制成临时装片制成临时装片观察观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察然后用高倍镜观察结论:结论:注意事项:注意事项:切片要薄,切片要薄,如厚薄不均就会导致观察如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。时有的地方清晰有的地方模糊。酒精的作用是:酒精的作用是:。需需使用显微镜观察使用显微镜观察 使用不同的染色剂染色时间不同使用不同的染色剂染色时间不同颜色变化:颜色变化:。洗去浮色洗去浮色橘黄色或红色橘黄色或红色3 3、蛋白质的检测和观察:、蛋白质的检测和观察:选材选
5、材 应应该选择含该选择含 丰丰富的富的豆浆豆浆或或鸡鸡 蛋蛋清清溶液。(避免材料自身的颜色对溶液。(避免材料自身的颜色对 实验变化颜色的掩盖)实验变化颜色的掩盖)蛋白质蛋白质黄豆浆滤液或蛋清稀释液黄豆浆滤液或蛋清稀释液制备组织样液制备组织样液呈色反应呈色反应组织组织样液样液2mL2mL双缩脲试双缩脲试剂剂A A液液1mL1mL双缩脲试双缩脲试剂剂B B液液4 4滴滴摇匀后变摇匀后变成紫色成紫色结论:结论:说明组织样液中存在蛋白质。说明组织样液中存在蛋白质。(3 3)注意事项:)注意事项:试剂:试剂:A液:液:0.1g/ml的的 ;B液:液:0.01g/ml的的 )先加先加 ,再加,再加 。B液
6、要求量适中,否则液要求量适中,否则多余多余 的的B液液将会将会与与A液液发生反应生发生反应生 成成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色显色而遮盖原有的颜色。鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比双缩脲试剂双缩脲试剂A A液液1ml1mlB B液液4 4滴滴NaOHCuSO4蛋白质的检测结果 用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免 实实验后粘住试管壁,不易洗刷验后粘住试管壁,不易洗刷斐林试剂与双缩脲试剂的比较:斐林试剂与双缩脲试剂的比较:A A液液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOHB B液液:0.010.01g/mLCu
7、SOg/mLCuSO4 4甲液甲液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOH乙液乙液:0.050.05g/mLCuSOg/mLCuSO4 4紫色物质生成紫色物质生成砖红色沉淀砖红色沉淀先加先加A A液液,再加再加B B液液,不不需加热需加热甲液与乙液甲液与乙液先混再用先混再用,且,且现配现用现配现用,需,需加加热热蛋白质蛋白质还原性糖还原性糖试剂试剂组成组成检验检验结果结果试剂试剂用法用法检测检测对象对象双缩脲试剂双缩脲试剂斐林试剂斐林试剂4 4、淀粉的检测和观察:、淀粉的检测和观察:取材:取材:马铃薯匀浆马铃薯匀浆检测检测组织组织样液样液2mL2mL碘液碘液2 2滴滴结论:结论:说明组
8、织样液中存在淀粉。说明组织样液中存在淀粉。注意:注意:常用材料:马铃薯常用材料:马铃薯 试剂:试剂:。颜色变化:。颜色变化:。碘液碘液变蓝变蓝摇匀后变摇匀后变成蓝色成蓝色思考感悟思考感悟2检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质时检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质时,对于材料的选择有何统一要求?,对于材料的选择有何统一要求?【提示】【提示】选择颜色较浅的且相应物质含量选择颜色较浅的且相应物质含量较高的生物组织,避免材料自身颜色对实验较高的生物组织,避免材料自身颜色对实验颜色变化的遮盖。颜色变化的遮盖。特别提醒特别提醒实验用的花生种子需提前浸泡实验用的花生种子需提前浸泡34 h,浸泡,浸泡时间太短,不
9、易切片;浸泡时间太长,则组时间太短,不易切片;浸泡时间太长,则组织太软,切下的薄片不易成形。织太软,切下的薄片不易成形。(3)蛋白质的检测和观察蛋白质的检测和观察选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液选材与制备:鲜肝提取液或黄豆浆滤液实验探究创新实验探究创新验证性实验和探究性实验验证性实验和探究性实验(1)验证性实验:是指实验者针对已知的实验验证性实验:是指实验者针对已知的实验结果而进行的以验证实验结果、巩固和加强有结果而进行的以验证实验结果、巩固和加强有关知识内容、培养实验操作能力为目的的重复关知识内容、培养实验操作能力为目的的重复性实验。性实验。(2)探究性实验:是指实验者在不知晓实验结探究性实验:是指实验者在不知晓实验结果的前提下,通过自己实验、探索、分析、研果的前提下,通过自己实验、探索、分析、研究得出结论,从而形成科学概念的一种认识活究得出结论,从而形成科学概念的一种认识活动。动。(3)验证性实验的实验结果通常是已知的,探验证性实验的实验结果通常是已知的,探究性实验的实验结果是未知的,这是两类实究性实验的实验结果是未知的,这是两类实验的最大区别。验的最大区别。
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