藻类活动抑制试验课件.pptx

1、项目四 水体污染的毒性试验任务三 藻类生长抑制试验01020304试验藻种的选择试验程序质量保证与质量控制数据与报告藻类毒性生长抑制：是在加有不同浓度毒物或废水的藻类培养液中，接种数量相等的藻种，在藻类生长最适宜的环境条件下（如温度、光照等），定时（每隔24h）测定藻类生长情况，然后根据各浓度组与对照组的生长情况比较，求出抑制藻类生长一半的毒物浓度，即半数有效浓度（EC50）。试验时间应不少于96h。藻类毒性生长抑制试验藻种的选择种PART 01S e l e n a s t r u m capricormutumScenedesmus obliquusChtorella VulgarisCh

2、lorella pyrenoidosa羊角月芽藻斜生栅藻普通小球藻蛋白核小球藻受试生物种常用的种类任务目标:（1）了解网页中常用的图像格式及特点；（2）掌握在网页中添加图像及图像对象的方法；（3）掌握设置图像属性，以及用CSS设置图像样式的方法。任务5.2 在网页中插入图像5.2.1网页中常用的图像格式网页中使用的图像通常有三种，即GIF、JPEG和PNG。GIF（图形交换格式）：GIF文件最多使用256种颜色，适合显示色调不连续或具有大面积单一颜色的图像，如导航条、按钮、图标、徽标或其他具有统一色彩和色调的图像。GIF文件的扩展名为.gif。JPEG（联合图像专家组）：JPEG文件格式是用于

3、摄影或连续色调图像的较好格式，包含数百万种颜色。可以通过压缩JPEG文件在图像品质和文件大小之间达到较好的平衡。JPEG文件的扩展名为.jpg或.jpeg。PNG（可移植网络图形）：PNG文件可保留所有原始层、矢量、颜色和效果信息（例如阴影），所有元素都是可以完全编辑的。PNG文件的扩展名为.png。任务5.2 在网页中插入图像5.2.2在网页中添加图像元素在HTML中添加图像元素应用的是标签，需要预先准备好图像文件，然后将光标定位于网页文档需要插入图像的位置，按以下方法之一插入图像。选择“插入”“Image”菜单命令。单击“插入”面板“HTML”选项卡中的【Image】按钮。使用组合键。在“

4、文件”或“资源”面板中选择所需图像文件，直接拖动图像文件到文档窗口中。前三种方法均可打开“选择图像源文件”对话框，选择要插入的图像，单击【确定】按钮即可插入图像。任务5.2 在网页中插入图像将图像插入已保存过的网页文档时，图像文 件 也 应 存 放 在 当 前 站 点 中，否 则，Dreamweaver会弹出消息框询问是否要将图像文件复制到当前站点中。任务5.2 在网页中插入图像提示：Dreamweaver会自动生成所选图像文件的路径，如果是在未保存过的网页中添加图像文件，Dreamweaver将使用“file:/”开头的路径；如果网页文件是已保存过的文档，则Dreamweaver将自动转换为

5、相对于该文档的相对路径，也可以选择相对于“站点根目录”的路径。5.2.3设置网页图像属性在网页中插入图像后，可以通过图像“属性”面板对其进行设置，例如，调整图像的大小、设置替换文本、优化图像等，这些设置将分别对应图像标签中的各属性。任务5.2 在网页中插入图像图像“属性”面板中各项参数含义如下。ID：指定图像的名称。Src：指定插入图像文件的路径。：目标规则列表，显示或更改当前应用于图像的CSS样式。宽、高：指定图像被载入浏览器时所显示的宽度、高度，对应width和height属性，单位默认是px，也可以选择相对于原始图像的百分比。在页面中插入图像时，Dreamweaver会自动在这两个文本框

6、中填充图像的原始尺寸，要调整显示尺寸可以直接在文本框中输入像素值或百分比值，也可以用鼠标直接拖动图像四周的控制点。任务5.2 在网页中插入图像替换：指定图像无法正常显示时替代图像显示的替换文本，对应alt属性。标题：用于指定图像的提示信息，对应title属性。编辑按钮，可以快速打开外部图像处理软件对选定图像进行编辑。该按钮显示图片会因所用计算机安装的外部图像处理软件不同而不同，如安装Photoshop软件时，将显示为 。：编辑图像设置按钮，可以打开“图像优化”对话框，对图像做优化操作，所做操作会即时在文档窗口中显示。：从源文件更新按钮，在Photoshop中对原始图像进行更改操作后，可以通过该

7、按钮在Dreamweaver中对智能对象进行更新。任务5.2 在网页中插入图像 ：裁剪按钮，可以对图像进行裁切，删除不需要的区域。：重新取样按钮，可以对已调整大小的图像进行重新取样，提高图片在新尺寸下的品质。：亮度和对比度按钮，可以调整图像的亮度和对比度。：锐化按钮，可以调整图像的锐度。链接、目标、图像地图及热点工具：指定对图像进行的超链接设置。原始：指定Dreamweaver创建智能对象时，所对应的原始Photoshop图像的路径。任务5.2 在网页中插入图像5.2.4用CSS设置网页图像样式1用CSS调整图像显示尺寸用CSS调整图像的显示尺寸也需要设置图像对象的width和height属性

8、，但是，在CSS规则中不仅可以使用px为单位，还可以使用%、cm、in等单位。用CSS调整图像显示尺寸，参考代码如下。任务5.2 在网页中插入图像.image1 height:200px;/*图像高200px*/width:50%;/*图像宽占窗口的50%*/2用CSS设置图像边距使用CSS可以从上、下、左、右四个方向设置图像与其他元素间的边距值。在CSS规则中设置margin属性集合，选择设置“top”“right”“bottom”“left”属性的值与单位，参考代码如下。任务5.2 在网页中插入图像.image2 margin-top:50px;/*上边距为50px*/margin-rig

9、ht:50px;/*右边距为50px*/margin-left:100px;/*左边距为100px*/3用CSS设置图像边框使用CSS可以为图像的四边分别设置边框的样式、粗细和颜色。任务5.2 在网页中插入图像.image3 border-top-width:medium;/*上边框粗细为medium（中）*/border-right-width:thick;/*右边框粗细为thick（粗）*/border-bottom-width:4px;/*下边框粗细为4px*/border-left-width:4px;/*左边框粗细为4px*/border-top-style:dotted;/*上边框

10、样式为点划线*/border-right-style:dashed;/*右边框样式为虚线*/border-bottom-style:solid;/*下边框样式为实线*/border-left-style:double;/*左边框样式为双线*/border-top-color:#F00;/*上边框颜色为#F00（红色），其他边相同*/border-right-color:#F00;border-bottom-color:#F00;border-left-color:#F00;5.2.5用CSS设置网页的背景图像利用CSS可以设置背景图像的附着和定位。用CSS设置网页背景图像的方法：为 标 签 新

11、 建 C S S 规 则，设 置“background”系列属性，具体包括以下属性：background-color：设置背景颜色；background-image：设置背景图像的路径；background-repeat：设置背景图像的重 复 方 式，如“r e p e a t”、“n o-repeat”、“repeat-x”、“repeat-y”；background-attachment：设置背景图像的附着性，如“fixed”和“scroll”；任务5.2 在网页中插入图像background-position：设置背景图像的位置，从水平方向和垂直方向来确定，如“top”“center”“

12、bottom”，或输入数值并选择单位。任务5.2 在网页中插入图像body background-image:url(images/hb.png);/*背景图像的路径*/background-repeat:no-repeat;/*背景图像不重复*/background-attachment:fixed;/*背景图像为固定的*/background-position:center center;/*背景图像的位置为水平居中，垂直居中*/5.2.6插入鼠标经过图像鼠标经过图像是一种在浏览器中当鼠标指针经过它时会发生变化的图像，它必须由两副图像组成，一幅是首次加载页面时显示的图像，即主图像；另一幅是

13、鼠标指针移过主图像时显示的图像，即次图像。主、次图像应该大小尺寸相等；如果这两幅图像大小不同，浏览器将调整第二幅图像的大小来与第一幅图像匹配。插入鼠标经过图像的方法：将光标定位在要插入鼠标经过图像的位置，选择“插入”“HTML”“鼠标经过图像”菜单命令，或单击“插入”面板“HTML”选项卡中的【鼠标经过图像】图标按钮，打开“插入鼠标经过图像”对话框。任务5.2 在网页中插入图像“插入鼠标经过图像”对话框中各选项的含义如下。图像名称：鼠标经过图像的名称。原始图像：即页面加载时显示的主图像。任务5.2 在网页中插入图像图5-23“插入鼠标经过图像”对话框鼠标经过图像：即鼠标经过主图像时显示的次图像

14、。预载鼠标经过图像：选中该选项时，次图像将被预先加载到浏览器的缓存中，以便在显示次图像时不会发生延迟。替换文本：用于在无法正常显示图像时显示替换文本。按下时，前往的URL：鼠标经过图像时设置的超链接目标地址。设置各选项后，单击【确定】按钮完成鼠标经过图像的插入。可以在浏览器中浏览鼠标经过图像的效果。任务5.2 在网页中插入图像5.2.7图文混排设计制作电影介绍网站页面当网页中既包含文本，又包含图像时，可以通过定义CSS的float属性进行图文的简单编排。任务5.2 在网页中插入图像float属性可以取值为left、right或none，分别设置图像与文本左对齐、右对齐或基线对齐。下面通过设计制

15、作电影介绍网站页面介绍简单图文混排的具体操作方法。请在Dreamweaver中完成案例操作。试验程序PART 02培养基的配制配制培养基时可将营养盐类按所需浓度直接加入无菌的蒸馏水或去离子水中。应按顺序逐一加入，待一种盐类完全溶解后再加另一种。储备培养预培养设定平行和对照自贮备培养物中取出一定量的藻液，接种到新鲜的无菌培养基中，接种藻细胞浓度大约为104个/mL。在试验要求和相同条件下培养。应使藻类在23d内达到对数生长，然后再次转接到新鲜培养基中。如此反复转接培养23次，经检查藻类生长健壮并正处于对数生长期时即可用来制备试验中需要的藻试验液。藻种可在试管内固体培养基斜面上保存。在培养基中加入

16、1.5%2%的琼脂，灭菌后倒入试管，冷却成斜面，然后接种藻类，棉塞封闭，在较低的光照和温度条件下可保存较长时间。正式试验中每个测试浓度至少要设置三个平行样，每一系列设两个对照样。当使用助溶剂增加受试物的溶解度时，对照组中助溶剂应与测试液中助溶剂浓度最高时一致。试验程序试验准备预实验注 意为确定正式试验中受试物的浓度范围，可以先进行一次预试验。预试验的浓度可按对数间距排布，最低浓度应为受试物的检测下限，最高浓度应为饱和浓度。无需设平行样。如果预试验中在最高浓度测点，藻的生长抑制低于50%，或者在最低浓度测点中藻的生长抑制高于50%，可不必再进行正式试验。试验程序试验操作预试验先配储备液，然后用此

17、贮备液稀释配制成一系列不同浓度的受试物试验液；试验浓度可按等对数间距设计。预培养后，镜检七细胞浓度，用培养基稀释至藻细胞浓度为2104个/mL，即成为可用于试验接种的藻试验液。是正式用于测试的，含有藻试验液和受试物试验液的液体。先在每个三角瓶中加入50mL藻试验液，然后再添加50mL受试物试验液；对照组瓶中只加50mL培养基试验开始后，每隔24h，即在24、48、72h时，从每个瓶子取样进行生长测定。测定项目包括藻类细胞浓度、光密度或叶绿素受试物试验液藻试验液测试液藻类生长状况的测定试验程序试验操作易溶于水的化学物质的正式试验用溶剂制备受试物的贮备液，其浓度应是测试时所需最高浓度的104倍。溶

18、剂在试验溶液中的含量最高不得超过100mg/L。要设置助溶剂对照用培养基将经过预培养的藻培养物配制藻试验液，使细胞浓度为104个/mL。每个三角瓶中加入100mL藻种液，再添加10L溶剂。其他步骤同易水溶性化学品。试验程序试验操作有限水溶性化学物质的正式试验废水或环境水源的正式试验水样必须密封、低温存放（04）。样品瓶中应充满水样不留空气。测试废水样品或环境水样之前要预先振摇。可直接用水样作为毒物试验液，如果水样毒性过大，也可使用稀释水配成适当浓度的试验液，对于含有难溶性毒物的水样，同样可以使用助溶剂或乳化剂。试验程序试验操作废水或环境水样的正式试验废水的稀释液浓度可用体积百分比表示藻类生长测

19、定方法细胞计数光密度叶绿素用0.1mL计数框或血球数板对藻细胞的数量计数；每一样品至少计数两次，如计数结果相差大于15%，应予重新计数。取一定量的测试液在分光光度计上测定其光密度，波长可选用650、663nm或其他波长，亦可用荧光光度计测定。样品经离心或过滤后，用丙酮、乙醇或其他溶剂萃取，进行分光测定，亦可用荧光光度计测定。试验程序试验操作藻类生长测定方法质量保证与质量控制PART 03本方法适用于水溶性且在试验条件下能保留在水中的物质。如需助溶剂，该助溶剂在水中的浓度不得超过100mg/L，使用乳化剂或分散剂时，其浓度应不影响光透性。试验开始的3d内，对照组藻细胞浓度至少应增加16倍浓度设置

20、应做到，在某一浓度下试验组与对照组相比，生长率没有显著下降，而且另一浓度时，96h的生长抑制应高于50%。在试验时最好使用推荐的藻种，以利于提高试验结果的可比性和可重复性。若选其他种类应在实验报告中写明方法和说明理由。质量保证与质量控制质量保证与质量控制数据与报告PART 04数据处理将测试液和对照组中细胞浓度与受试物浓度、测试时间一起制表。绘制每个受试物浓度和对照组的细胞浓度平均值与时间关系的生长曲线。浓度效应关系见下一页。结果评价96h EC50（mg/L）100毒性分级 极高毒 高毒 中毒 低毒编写报告报告应包括：试验名称、目的、试验原理、试验的准确起止日期，以及：（1）受试物；(2)受

21、试生物；(3)试验条件；(4)试验结果；（5）结果讨论数据与报告数据与报告 浓度的换算 把显微镜视野计数结果换算为细胞浓度N：A=r2 N-每瓶试样中藻的浓度(个/mL)；A-r 2(视野面积)；r-测量的视野半径值(mm)；F-视野数；C-F个视野藻细胞数累加值；D视野的深度，mm 生长曲线下面所包围面积的比较 生长曲线以下的面积可以按下式计算：数据与报告IA-每一受试物浓度细胞生长抑制的百分率Ac-对照组生长曲线下所包围的面积-At-每个受试物浓度生长曲线下面所包围的面积在半对数坐标纸上或半对数概率纸上，绘制IA与相应浓度之间的关系曲线，在IA=50%的点画一条过回归线且与横轴平行的直线，

22、该线与回归线的交点所对浓度值为EC50值，此方法用EbC50（0h72h）表示。生长率比较（）用每一受试物浓度与对照组相比所得到的生长率下降百分数对数浓度作图，可直接从图上读出EC50，此方法用ErC50(24h48h)表示。数据处理将测试液和对照组中细胞浓度与受试物浓度、测试时间一起制表。绘制每个受试物浓度和对照组的细胞浓度平均值与时间关系的生长曲线。浓度效应关系见下一页。结果评价96h EC50（mg/L）100毒性分级 极高毒 高毒 中毒 低毒编写报告报告应包括：试验名称、目的、试验原理、试验的准确起止日期，以及：（1）受试物；(2)受试生物；(3)试验条件；(4)试验结果；（5）结果讨论数据与报告藻类生长测定方法有哪些？复习与思考谢谢聆听！敬请批评指正