1、“十二五”职业教育国家规划教材编写组 食品理化检验技术(第二版)子情境三 酸度的测定学习情境二学习情境二 学习目标知识目标:1.了解食品总酸度、有效酸度、挥发性酸度的概念及其测定意义。2.掌握总酸度、有效酸度、挥发性酸度测定的原理及操作要点。技能目标:1.会用酸碱滴定法测定食品的总酸度。2能熟练使用酸度计测定溶液的pH。子情境三 酸度的测定 一、酸在食品中的作用学习情境二学习情境二 1、显味剂 酸味物质:是食品重要的显味剂,对食品的风味有很大的影响。其中大多数的有机酸具有很浓的水果香味,能刺激食欲,促进消化,有机酸在维持人体体液酸碱平衡方面起着重要的作用。2、保持颜色稳定 食品中的酸味物质的存
2、在,即pH值的高低,对保持食品的颜色的稳定性,也起着一定的作用。3、防腐作用 酸味物质在食品中还能起到一定的防腐作用。总酸度:指食品中所有酸性成分的总量。它包括未离解的酸的浓度和已离解的酸的浓度。其大小可用标准碱滴定来测定,故又称“可滴定酸度”有效酸度:指被测溶液中H+的浓度。准确地说应是溶液中H+的活度,反映的是已离解的酸的浓度。常用pH值表示,其大小由酸度计(即pH计)测定挥发酸:指食品中易挥发的有机酸,如甲酸、醋酸及丁酸等低碳链的直链脂肪酸,包含游离的和结合的两部分。其含量可通过蒸馏法分离,再借标准碱滴定测定二、食品中酸度的表示方法学习情境二学习情境二 牛乳酸度外表酸度(固有酸度):指刚
3、挤出来的新鲜牛乳本身所具有的酸度。主要来源于鲜牛乳中酪蛋白、白蛋白、柠檬酸盐及磷酸盐等酸性成分。新鲜牛乳中的外表酸度约为0.150.18(以乳酸计)。真实酸度(发酵酸度):指牛乳放置过程中,在乳酸菌作用下乳糖发酵产生了乳酸而升高的那部分酸度。若牛乳的含酸量超过了0.150.20,即认为有乳酸存在。牛乳总酸度:外表酸度与真实酸度之和(新鲜牛奶总酸度即为外表酸度),一般通过标准碱滴定来测定。学习情境二学习情境二 牛乳酸度的表示法乳酸含量:以滴定结果折算成乳酸的质量百分含量计滴定酸度:指滴定 100 ml 牛乳样品,消耗0.1 mol/L NaOH 溶液的 mL数,以T为单位,新鲜牛乳的酸度一般为1
4、6 18T学习情境二学习情境二 三、酸度测定的意义学习情境二学习情境二 1、测定酸度可判断果蔬的成熟程度 不同种类的水果和蔬菜,酸的含量因成熟度、生长条件而异,一般成熟度越高,酸的含量越低。故通过对酸度的测定可判断原料的成熟度。2、可判断食品的新鲜程度3、酸度反映了食品的质量指标 酸的测定对微生物发酵过程具有一定的指导意义。食品中的酸包括:有机酸:常见的有柠檬酸、苹果酸、酒石酸、草酸、琥珀酸、乳酸及醋酸等,是食品酸度的主要来源。存在形式主要有游离状态酸式盐状态 无机酸:含量很少,主要有盐酸、磷酸等,主要以中性盐形式存在 果蔬中有机酸的含量取决于品种、成熟度以及产地气候条件等因素,其它食品中有机
5、酸的含量取决其原料种类、产品配方等。四、食品中有机酸的种类与含量学习情境二学习情境二 检测依据 GB/T 12456-2008五、酸度的测定方法总酸度的测定学习情境二学习情境二 食品中总酸的测定 根据酸碱中和原理,用碱液滴定试液中的酸,以酚酞为指示剂确定滴定终点。按碱液的消耗量计算食品中的总酸含量。RCOOH+NaOH CROONa +H2O 本法适用于果蔬制品、饮料、乳制品、饮料酒、蜂产品、淀粉制品、谷物制品和调味品等食品中总酸的测定,不适用于有颜色或浑浊不透明的试液。测定原理学习情境二学习情境二 适用范围试剂 0.1 molL NaOH标准溶液,(可按GB 601配制)注意:正确配制、准确
6、标定、妥善保存。1%酚酞指示剂:称取酚酞1g溶解于100 ml 95%乙醇中。变色范围pH(8.210.0)。仪器一、相关仪器设备及试剂的准备学习情境二学习情境二 滴定管 二、总酸度的测定试样制备试样试液制备标准溶液滴定,记录NaOH的体积空白试验结果计算学习情境二学习情境二 1、试样的制备(1)液体试样不含二氧化碳的试样:充分混合均匀,置于密闭玻璃容器内。含二氧化碳的试样:至少取200g试样于500mL烧杯中,置于电炉上,边加热边搅拌至微沸,保持2min,称量,用煮沸过的水补充至煮沸前的质量,置于密闭玻璃容器内。(2)固体试样取有代表性的试样至少200g,置于研钵或组织捣碎机中,加入与试样等
7、量的煮沸过的水,用研钵研碎,或用组织捣碎机捣碎,混匀后置于密闭玻璃容器内。(3)固、液体试样 按试样的固、液体比例至少取200g,用研钵研碎或用组织捣碎机捣碎,混匀后置于密闭玻璃容器内。学习情境二学习情境二 2、试液的制备(1)总酸含量小于或等于4g/kg的试样将试样用快速滤纸过滤,收集滤液,用于测定。(2)总酸含量大于4g/kg的试样称取10g50g试样,精确至0.001g,置于100mL烧杯中。用约80煮沸过的水将烧杯中的内容物转移到250mL容量瓶中(总体积约150 mL)。置于沸水浴中煮沸30min(摇动2次3次,使试样中的有机酸全部溶解于溶液中),取出,冷却至室温(约20),用煮沸过
8、的水定容至250mL。用快速滤纸过滤。收集滤液,用于测定。学习情境二学习情境二 3、测定(1)称取25.00g50.00g试液,使之含0.035g0.070g酸,置于250mL三角瓶中。加40mL60mL水及0.2mL 1酚酞指示剂,用0.1mol/L氢氧化钠标准滴定溶液(如样品酸度较低,可用0.01mol/L或0.05mol/L氢氧化钠标准滴定溶液)滴定至微红色30s不褪色。记录消耗0.1mol/L氢氧化钠标准滴定溶液的体积的数值(V1)。同一被测样品应测定两次。(2)空白试验:用水代替试液。按(1)操作。记录消耗0.1mol/L氢氧化钠标准滴定溶液的体积的数值(V2)。学习情境二学习情境二
9、 学习情境二学习情境二 三、结果记录并分析处理 计算公式 式中:X食品中总酸的含量,g/kg;c氢氧化钠标准滴定溶液的准确浓度,mol/L;V1滴定试液时消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积,mL;V2空白试验时消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积,mL;K酸的换算系数:苹果酸,0.067;乙酸,0.060;酒石酸,0.075;柠檬酸,0.064(含一分子结晶水);乳酸,0.090;盐酸,0.036;磷酸,0.049;F试液的稀释倍数;m试样的质量,g。学习情境二学习情境二 有效数字:计算结果表示到小数点后两位。精密度:同一样品,两次测定结果之差不得超过两次测定平均值的2%。12 1000cVVKFXm(
10、)因食品中含有多种有机酸,总酸度的测定结果通常以试样中含量最多的那种酸表示,要在结果中注明以哪种酸计。例如一般分析葡萄及其制品时,用酒石酸表示;分析柑橘类果实及其制品时,用柠檬酸表示;分析苹果及其制品时,用苹果酸表示;分析乳品、肉类、水产品及其制品时,用乳酸表示;分析酒类、调味品时,用乙酸表示。若样液有颜色,则在滴定前用与样液同体积的不含CO2的蒸馏水稀释之或采用试验滴定法。若样液颜色过深或浑浊,则宜用电位滴定法。把坩埚放入高温炉或从炉中取出时,要放在炉口停留片刻,使坩埚预热或冷却。技术提示学习情境二学习情境二 试样经适当处理后,加适量磷酸使结合态挥发性酸游离出来,用水蒸气蒸馏分离出挥发性酸,
11、经冷凝收集后,可用标准碱液滴定。适用于各类饮料、果蔬及其制品、发酵制品、酒等总挥发酸含量的测定。测定原理学习情境二学习情境二 适用范围五、酸度的测定方法挥发性酸度的测定主要仪器 0.1molLNaOH标准溶液。1%酚酞乙醇溶液,配法同前。10%磷酸溶液,称取10.0g磷酸,用少许无CO2水溶解,并稀释至100ml。试剂学习情境二学习情境二 操作方法 1.样品处理 一般果蔬及饮料可直接取样分析。含CO2的液体试样应先除去CO2后再测。方法是将试样在40水浴上加热30min除去CO2,冷却后备用。固体试样(如干鲜果蔬及其制品)及冷冻、粘稠等制品先取可食部分加入一定量无CO2的蒸馏水,用高速组织捣碎
12、机捣成浆状,再称取处理过的试样10g,加无CO2蒸馏水溶解并稀释至25mL,制得样液。2.测定 样品蒸馏:取样、加水、H3PO4溶液等蒸馏 滴定:馏出液用NaOH标准溶液滴定。学习情境二学习情境二 式中:X试样中挥发性酸的质量分数(以醋酸计),;c氢氧化钠标准滴定溶液的浓度,mol/L;V1试样滴定消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积,mL;V2空白试验消耗氢氧化钠标准滴定溶液的体积,mL;m试样质量或体积,g或mL;0.06换算为醋酸的系数。结果计算12 0.06 100cVVXm()学习情境二学习情境二 样品中挥发酸如采用直接蒸馏法比较困难。因挥发酸与水构成有一定百分比的混溶体,并有固定的沸点。
13、水蒸气蒸馏中,挥发酸和水蒸气分压成比例地自溶液中一起蒸馏出来,加速蒸馏速度。在蒸馏前应先将水蒸气发生器中的水煮沸10min,或在其中加入两滴酚酞指示剂并加NaOH至呈浅红色,以排除其中的CO2,并用蒸汽冲洗整个装置。溶液中总挥发酸包括游离态与结合态2种。而结合态挥发酸又不容易挥发出来,所以要加少许磷酸,使结合态挥发酸挥发出来。在整个蒸馏装置中,蒸馏瓶内液面要保持恒定,不然会影响测定结果,另外,整个装置连接要密封良好,防止挥发酸泄露。技术提示挥发酸的测定挥发酸的测定学习情境二学习情境二 将电极电位随溶液氢离子活度变化而变化的玻璃电极(指示电极)和电极电位不变的甘汞电极(参比电极)插入被测溶液中组
14、成一个电池,该电池电动势大小与溶液pH呈直线关系。利用酸度计测量电池电动势,并直接以pH表示在表头上。本方法适用于各种饮料、果蔬及其制品,以及肉、蛋类等食品中pH值的测定。测定值可准确到0.01pH单位。测定原理学习情境二学习情境二 适用范围五、酸度的测定方法有效酸度的测定 电磁搅拌器(带磁性搅拌棒)酸度计复合电极主要仪器学习情境二学习情境二 试剂 pH=1.675(20)标准缓冲溶液:将12.61g KHC2O4.H2C2O4.2H2O转移到1L的容量瓶中,用无CO2蒸馏水溶解并稀释到刻度,充分混合。每二个月重新配制。pH=3.999(20)标准缓冲溶液:称取10.12g于110干燥2小时并
15、以冷却的邻苯二甲酸氢钾,用无CO2蒸馏水溶解并稀释到1L。pH=6.878(20)标准缓冲溶液:称取110130下干 燥 2 小 时 并 已 冷 却 的 K H2P O43.3 8 7 g 和NaHPO43.533g,用无CO2蒸馏水溶解并稀释到1L。PH=9.227(20)标准缓冲溶液:称取3.80g硼砂Na2B4O7.10H2O,用无CO2蒸馏水溶解并稀释到1L。学习情境二学习情境二 操作方法 样 品 制备酸度计的校正样液PH值的测定学习情境二学习情境二 样品制备:一般液体样品摇匀后可直接取样测定。含CO2的液体样品,除CO2后再测,方法同总酸。果蔬样品:榨汁后,取汁液直接测pH.果蔬干制品:取适量样品加数倍的无 CO2水,于水浴上加热30分钟,捣碎,过滤,取滤液测定。肉类制品:称取 10 克已除去油脂并捣碎的样品,加入 100 ml 无CO2蒸馏水,浸泡 15 分钟,随时摇动,取滤液测定。制备好的样品不宜久存,马上测定。学习情境二学习情境二 正常的牛乳的酸度在16T18T之间,乳酸含量为0.15%0.20%。如果牛乳放置时间过长,则会因细菌的繁殖使酸度明显增高。当鲜乳的酸度超过18T,或乳酸含量超过0.20%,则可认为是不新鲜的牛乳。正确测定乳粉总酸度,并判断乳粉酸度是否合格。学习情境二学习情境二
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