1、宫颈细胞学涂片制作及染色技术宫颈细胞学涂片制作及染色技术标本采集标本采集 采集到宫颈外口粘膜细胞和宫颈管区域成份是宫颈普查采集到宫颈外口粘膜细胞和宫颈管区域成份是宫颈普查成功的第一步。成功的第一步。l1 工具选择：小角板、压舌板、木质刮板、双取器、宫工具选择：小角板、压舌板、木质刮板、双取器、宫颈刷等颈刷等l2 取材方法：保证宫颈外口、移行区或颈管成份的取样。取材方法：保证宫颈外口、移行区或颈管成份的取样。要点要点 分泌物的处理分泌物的处理 出血的处理出血的处理 制片制片玻片标记清楚玻片标记清楚轻轻均匀将标本涂抹于玻片的轻轻均匀将标本涂抹于玻片的2/3区域内区域内固定固定 目的目的 细胞内蛋白
2、质凝固，细胞内蛋白质凝固，细胞结构长久保存细胞结构长久保存种类种类 湿固定湿固定 潮干固定潮干固定 干固定干固定固定液固定液 95%酒精酒精 15-30分钟分钟 注意事项注意事项 固定液浓度固定液浓度 固定液使用后一定要过滤后方可重复使用，固定液使用后一定要过滤后方可重复使用，不同病人标本应分开固定不同病人标本应分开固定染色染色：传统巴氏染色法：传统巴氏染色法l1染液配制染液配制：Harris 苏木精苏木精 (1000 ml)苏木精苏木精 5 g 95%酒精酒精 50 ml 硫酸铝氨硫酸铝氨 100g 蒸馏水加至蒸馏水加至 1000 ml 黄色氧化汞黄色氧化汞 2.5g 桔黄桔黄G6：l 桔黄
3、桔黄 2.5gl 蒸馏水蒸馏水 25 mll 纯酒精纯酒精 500 mll 磷钨酸磷钨酸 0.075 g EA50：l 3%淡绿：淡绿：3g淡绿淡绿 100 ml纯酒精纯酒精l 20%伊红：伊红：20g伊红伊红 100 ml纯酒精纯酒精l 配配500 500 ml EA50ml EA50：l 3%淡绿淡绿 5 mll 20%伊红伊红 10 mll 纯甲醇纯甲醇 125 mll 冰醋酸冰醋酸 10 mll 磷钨酸磷钨酸 1 gl 95%乙醇乙醇 350 ml 染色步骤 (1)回浸自来水中 (2)Harris苏木素液3-5分钟 (3)水洗 (4)0.25%稀盐酸水分化 (5)水洗 (6)稀碳酸锂液
4、还原(100ml蒸馏水加饱和碳酸锂1-2 滴)(7)水洗 (8)95%酒精l (9)桔黄桔黄G6液液5-10 秒秒l (10)95%酒精洗酒精洗2-3遍遍l (11)EA50液液3-5分分l (12)95%酒精洗酒精洗5-7遍遍l (13)二甲苯透明二甲苯透明l (14)树胶封片树胶封片染色注意事项染色注意事项仔细认真负责仔细认真负责染色液的及时添加及更换染色液的及时添加及更换染色时间的把握染色时间的把握苏木素液的过滤苏木素液的过滤三三 TBSTBS诊断标本质量评估诊断标本质量评估l满意满意 临床资料：姓名、年龄、取材日期、末次月经临床资料：姓名、年龄、取材日期、末次月经l 细胞成份：细胞成份
5、：细胞数量、移行区成份、颈管成份细胞数量、移行区成份、颈管成份l 基本满意：基本满意：l 临床资料不全临床资料不全l 细胞模糊细胞模糊50 75%、缺乏移行区或颈管成份、缺乏移行区或颈管成份l不满意：病人主要标记缺乏不满意：病人主要标记缺乏l 细胞模糊达细胞模糊达75%l新新TBS：满意满意l 不满意不满意影响诊断的技术因素影响诊断的技术因素l病史病史 年龄年龄 月经史月经史 治疗史治疗史 不清不全不清不全l取材取材 细胞量过少细胞量过少 血多血多 影响细胞量影响细胞量 模糊细胞结构模糊细胞结构 白带多白带多 细胞少细胞少 炎症重假像炎症重假像 制片因素制片因素l涂片太薄涂片太薄 细胞量少细胞量少l涂片太厚涂片太厚 易脱片易脱片 细胞结构不清细胞结构不清固定不当固定不当l固定不及时固定不及时l固定液量不够固定液量不够l固定液浓度不够固定液浓度不够l固定时间不够固定时间不够染色因素染色因素l染色过浅染色过浅 易漏病变细胞易漏病变细胞l染色过深染色过深 易误诊易误诊
