应用微生物第三章-第二讲-现代微生物肥料课件.ppt

1、微生物肥料的概念：是一类含有活的微生物活的微生物的特定制品，应用于农业生产中，能够获得特定的肥料效应，能增加植物产量或提高产品质量的微生物制剂。在这种效应的生产中，制品中的活的微生物起关键作用关键作用，符合上述定义的制品均应归入微生物肥料。陈华癸教授，华中农业大学 或者：微生物肥料微生物肥料是指一类含有活的微生物并在使用后能获得特定肥料效应，从大气中固氮，增加铁、磷等矿质元素吸收或合成植物激素，直接促进植物生长的微生物制剂。首先，化肥使用量逐年增加，化肥利用率和增产效益下降；我国单位面积施用化肥量是日本的2倍，美国的2.4倍，加拿大的4.4倍，澳大利亚的8.2倍，俄罗斯的9.0倍！化肥利用率仅

2、为30%！应用化肥引起水质和环境污染。第二，土壤肥力下降，土壤退化荒漠化逐渐加剧；第三，土壤生态环境恶化，土壤生态功能下降；第四，中国化学肥料资源严重不足，这对农业的可持续发展构成了严重的挑战。土壤肥力的改良；节约能源，保护环境：1、提高化肥的利用率，即提高了能源利用率；2、本身无毒害作用，不污染环境；3、减少土壤营养流失和富营养化的产生。4、可以此实现固体废弃物资源化_堆肥。可持续发展的要求。我国自50 年代从国外引进自生固氮菌、磷细菌和硅酸盐细菌制剂。从豆科植物上应用根瘤菌接种剂开始的，起初只有大豆和花生根瘤菌剂。60 年代推广使用放线菌制成的“5406”抗生菌肥料和固氮蓝绿藻肥。7080

3、 年代中期，开始研究VA 菌根，以改善植物磷素营养条件和提高水分利用率。80 年代中期90 年代，农业生产中又相继应用联合固氮菌和生物钾肥作为拌种剂。微生物肥料研制单位相继推出联合固氮菌肥、硅酸盐菌剂、光合细菌菌剂、PGPR 制剂和有机物料(秸秆)腐熟剂等适应农业发展需求的新品种。一、增加土壤肥力，促进植物对营养元素的吸收一、增加土壤肥力，促进植物对营养元素的吸收1、氮磷钾大量元素营养：根瘤菌、自生和联合固氮菌；硅酸盐细菌的解钾作用。2、土壤中大量微生物的活动使土壤有机质转化土壤有机质转化形成腐殖质形成腐殖质，促进土壤团粒结构的形成促进土壤团粒结构的形成，提高土壤肥力，改善土壤理化形状，增强土

4、壤保肥、保水能力，从而提高作物的产量和品质。二、分泌多种生理活性物质刺激调节植物生长：二、分泌多种生理活性物质刺激调节植物生长：大量研究表明，微生物活动产生的植物生长调节物质以及维生素都不同程度地刺激和调节植物的生长。1、分泌植物激素生长素、赤霉素、脱落酸、乙烯和酚类物质；2、酸类物质的产生：有机酸的作用。三、对有害微生物起到生物防治作用：三、对有害微生物起到生物防治作用：通过在植物根际大量生长繁殖成为作物根际的优势菌，与病原微生物争夺营养物质，在空间上限制其它病原微生物的繁殖机会，对病原微生物起到挤压、抑制作用，从而减轻病害。这类微生物也叫做根圈促生细菌（PGPR）。四、产生抗病和抗逆作用，

5、间接促进植物生长：四、产生抗病和抗逆作用，间接促进植物生长：1、产生多种抗病物质：、产生多种抗病物质：抗生素2、提高植物的抗逆性：、提高植物的抗逆性：由于微生物肥料的施用，其所含的菌种能诱导作物产生超氧化物歧化菌种能诱导作物产生超氧化物歧化酶酶，在植物受到病害、虫害、干旱、衰老等逆境时，消除因逆境而产生的自由基来提高作物的抗逆性，减轻病害。微生物肥料按作用机理分：微生物肥料按作用机理分：u固氮菌类肥料（根瘤菌肥料、自生固氮菌肥、固氮固氮菌类肥料（根瘤菌肥料、自生固氮菌肥、固氮蓝藻等）蓝藻等）解磷菌类肥料解磷菌类肥料解钾菌类肥料解钾菌类肥料（硅酸盐细菌硅酸盐细菌）促植物生长菌剂（铁载体、抗生素、

6、促生长素）促植物生长菌剂（铁载体、抗生素、促生长素）堆肥菌剂和发酵菌剂堆肥菌剂和发酵菌剂u复合微生物肥料复合微生物肥料根瘤菌是含有大量根瘤菌活菌体的生物制剂，接种根瘤菌是含有大量根瘤菌活菌体的生物制剂，接种于于豆科植物豆科植物种子上，在土壤条件适宜情况下，根瘤种子上，在土壤条件适宜情况下，根瘤菌能在豆科植物根际进行活跃的生命活动，并侵入菌能在豆科植物根际进行活跃的生命活动，并侵入豆科植物根部结瘤，固定空气中的氮素为豆科植物根部结瘤，固定空气中的氮素为NH3或或NH4+。根瘤菌肥料是用人工选育出来的高效根瘤菌株经大根瘤菌肥料是用人工选育出来的高效根瘤菌株经大量繁殖用载体吸附制成的，是迄今为此世界

7、上研究量繁殖用载体吸附制成的，是迄今为此世界上研究最早、应用时间最长、生产量最多、应用最广泛和最早、应用时间最长、生产量最多、应用最广泛和效果最稳定的微生物肥料之一。效果最稳定的微生物肥料之一。根瘤菌与豆科植物间的共生根瘤菌与豆科植物间的共生-形成根瘤共生体形成根瘤共生体t 根瘤菌固定大气中的气态氮为植物提供氮素根瘤菌固定大气中的气态氮为植物提供氮素 养料；养料；t 豆科植物的根的分泌物能刺激根瘤菌的生长，豆科植物的根的分泌物能刺激根瘤菌的生长，同时，还为根瘤菌提供保护和稳定的生长条件。同时，还为根瘤菌提供保护和稳定的生长条件。大气中的大气中的N N2 2尿素及动尿素及动植物遗体植物遗体NON

8、O3 3-土壤中的微生物土壤中的微生物NHNH3 3NONO3 3-氮素化肥氮素化肥Soybean root nodulesUnnodulated soybeanNodulated soybean根瘤固氮菌一般生理特性：根瘤固氮菌一般生理特性：化能有机营养型能：化能有机营养型能：利用利用NO3-、NH4+，但，但培养基中含植物性氮素物质（豆芽汁、酵母汁培养基中含植物性氮素物质（豆芽汁、酵母汁等）时大多数根瘤菌生活得更好。需要多种灰等）时大多数根瘤菌生活得更好。需要多种灰分元素：分元素：P素的要求尤其高；铁是合成豆血红素的要求尤其高；铁是合成豆血红蛋白和铁蛋白的必要元素。钼是固氮酶的成分。蛋白和

9、铁蛋白的必要元素。钼是固氮酶的成分。适合中性和微碱性条件，适合的适合中性和微碱性条件，适合的pH在在6.5-7.5，适合的温度适合的温度25-30。根瘤菌与宿主的共生特性：根瘤菌与宿主的共生特性：侵染性侵染性：根瘤菌能进入豆科植物根内，在其中繁殖，并形成根瘤。专一性专一性：每一种根瘤菌只与其有专一性对应的几种豆科植物建立共生关系形成根瘤。K.pneumoniae（Nif+）固氮相关基因）固氮相关基因 20个基因，分为个基因，分为8个独立的操纵子，分布在约个独立的操纵子，分布在约24kb大小的区域内大小的区域内 K.pneumoniae nif操纵子结构示意图操纵子结构示意图 固氮基因及其编码的

10、蛋白固氮基因及其编码的蛋白 基因名称基因名称 编码蛋白的功能编码蛋白的功能 nifD、nifK 固氮酶组分固氮酶组分 nifH 固氮酶组分固氮酶组分 nif F 黄素氧还蛋白黄素氧还蛋白 nifG 丙酮酸黄素氧还蛋白氧化还原酶丙酮酸黄素氧还蛋白氧化还原酶 nifQ.B.N.E.V 铁钼辅助因子的合成铁钼辅助因子的合成 nifM 氮气还原酶的加工和折叠氮气还原酶的加工和折叠 nifS 固氮酶组分固氮酶组分的翻译后加工的翻译后加工 nifA 正调节因子正调节因子 nifL 负调节因子负调节因子 nifW.Z.TY.U.X 功能目前尚不清楚功能目前尚不清楚nif Q B A L F M Z W V

11、S U X N E Y T R D H T 8个独立操纵子，共编码个独立操纵子，共编码20种不同蛋白质。大部分蛋白是对固氮酶组种不同蛋白质。大部分蛋白是对固氮酶组分分的辅助性蛋白或电子传递蛋白的辅助性蛋白或电子传递蛋白 nif基因的严格控制：（1）孤单过程消耗大量能量；（2）细胞内含氧量，NH3浓度是调节固氮反应的主要因素；nifA是正调控基因：（1）编码正调控蛋白NifA；（2）NifA和其它操纵子的特定序列结合，促进表达nifL，是正调控基因：nifL是负调控基因：（1）编码负调控蛋白NifL；（2）在有氧和有固定氮源情况下，NifL作为NifA的拮抗物，阻遏固氮基因表达。固氮基因的基因工

12、程固氮基因的基因工程 为提高固氮效率进行基因工程研究：1、调控基因基因工程研究 2、氢化酶基因工程研究 3、结瘤基因基因工程研究1、固氮正调控基因、固氮正调控基因nif A的基因工程的基因工程plasmid导入多拷贝nifA接种苜蓿长得大Rhizobium meliloti 苜蓿根瘤菌nifAnifA2、氢化酶及氢化酶基因工程、氢化酶及氢化酶基因工程 1、氢化酶（、氢化酶（Hydrogenase)的发现的发现 20世纪70年代中期发现，大豆慢生根瘤菌Bradyrhizobium japonicum的某些菌株，在低氧条件下用氢气作能源生长，这些菌株内发现氢化酶。H2 H+e ATP 有氢化酶菌株

13、（Hup+）无氢化酶菌株（Hup）2、氢化酶与固氮的关系、氢化酶与固氮的关系 发现大豆植株（接种Hup+）生物量大豆植株（Hup）大豆根瘤菌利用氢气的菌株在共生固氮的同时，提高了促进大豆植 株的生长能力。为什么？为什么？氢化酶电子传递链 自然界中Rhizobium和Bradyrhizobium大多数菌株是Hup。Hup菌株不能利用固氮时放出的H2，而降低固氮效率。现在用的固氮Rhizobium菌肥多是Hup，如何用基因工程改造为Hup+？菌株 Hup所占比例Rhizobium Leguminosarum 9.3（豌豆根瘤菌）Rhizobium melioti 21（苜蓿根瘤菌）Rhizobiu

14、m trifolii 0（三叶草根瘤菌）Bradyrhizobium japomicum 21（检测1400个菌株）hup 导入 豌豆根瘤菌（Hup）Hup工程菌 Hup+工程菌株接种豆科植物Hup菌株，使得豆科植物长得更高大，氮含量更高。引入hup基因的根瘤菌对植物固氮能力影响 hup基因工程操作尚存很多困难，但应用潜力和前景巨大。菌株 氢化酶活性 共生植物最后干重 共生植物含氮量Hup 0.01 1.00 1.00Hup 1.00 1.35 1.52结瘤微生物之间的竞争 商品化的固氮根瘤菌是突变株：固氮能力强，结瘤能力弱。土壤中野生型菌株：结瘤能力强，固氮能力弱。基因工程株的方向 保持高固

15、氮能力的同时，增强结瘤能力。R.meliloti的结瘤基因（nodulation gene）整个结瘤过程需1520个基因共同作用和调控。结瘤基因分三类：非特异性结瘤基因：nodA，B，C等，不同种的根瘤基因相同。特异性结瘤基因：有根瘤种的特异性。调控基因：nodD。每种豆科植物根分泌自己特定的某一种类黄酮分子Nod D（蛋白）共生植物类黄酮分子复合物调控基因 nodD组成型 NodD 蛋白特异识别结合类黄酮分子（flavonoid）植物芳香族化合物CCC 豆科植物根 分泌nod D P nod ABC P nod EFGHIJKLMNOPQ编码蛋白共生植物根毛尖端肿大、卷曲根瘤菌侵染植物根部开

16、始Nod D类黄酮编码蛋白Nod HNod QNod P修饰植物细菌共合成一种寡糖因子Nod Rm1共生植物根卷曲等系列反应其它nod基因产物、植物蛋白根瘤（共生固氮装置）拌种剂和复合肥料。拌种剂：粉状、液体、冻干粉。复合肥料：同一根瘤菌属的不同菌株复合，或与其他微生物合用以增强结瘤能力。生产过程：菌种培养固体扩大收集菌泥制菌粉装瓶液体扩大吸附剂拌种装袋。单独生活时能固定空气中的氮的一类微生物称为自生固氮菌，分为光合细菌和非光合细菌。主要类群：蓝细菌、圆褐固氮菌、假单胞菌、多黏芽孢杆菌等。固氮能力比共生固氮差。自生自生固氮微生物：蓝细菌固氮微生物：蓝细菌能与其它生物共生固氮的蓝细菌主要分布在鱼

17、腥藻属和念珠藻属，这两个属的蓝细菌可以与真菌、苔藓、蕨类植物及高等植物共生固氮。蓝细菌与水生蕨类植物共生固氮的现象在农业生产中也常有利用，例如蓝细菌可以与红萍共生后形成一种很好的绿肥。与鱼腥藻共生的红萍可以在稻田中生长，不仅能通过其固氮作用给水稻提供氮源，提高稻田土壤的肥力，还可以抑制稻田中其他杂草的生长。自生自生固氮微生物：圆褐固氮菌固氮微生物：圆褐固氮菌圆褐固氮菌代谢圆褐固氮菌代谢类型是？类型是？异养需氧型异养需氧型圆褐固氮菌能产生圆褐固氮菌能产生生长素生长素，促进植株，促进植株生长生长和果实的和果实的发育发育。（1）、弗氏放线菌弗氏放线菌Frankia属，它可以与多种木本植物共生，并与之

18、共生的植物根部产生根瘤。这种菌一般利用简单的有机酸作为碳源，而不能利用糖类物质。绝大部分都可利用氮气作为唯一氮源，且其固氮酶对氧气的耐受性略高于根瘤菌的固氮酶。目前，已经有用弗氏放线菌提高了杨树林、杞木的生长能力的报道。（2）、具有联合固氮作用的细菌有些具有固氮能力的细菌聚居在植物的根际、根表或根层细胞间，但是又不形成象根瘤这样的共生结构，这种情况下的固氮作用称为联合固氮作用。联合固氮作用的效率很低，仅为共生固氮的1/10。磷素是作物生长发育所必需的营养元素之磷素是作物生长发育所必需的营养元素之一。一。虽然土壤中磷含量很高，但能被植物虽然土壤中磷含量很高，但能被植物吸收利用的有效态无机磷却很低

19、，土壤中吸收利用的有效态无机磷却很低，土壤中绝大部分磷为无效磷。绝大部分磷为无效磷。磷是许多发展中国家农业生产重要的限制磷是许多发展中国家农业生产重要的限制因素，提高土壤中磷的利用效率将具有战因素，提高土壤中磷的利用效率将具有战略性意义。略性意义。解磷微生物菌剂解磷微生物菌剂 能分解土壤中难溶态磷的细菌制成的能分解土壤中难溶态磷的细菌制成的解磷细菌肥料，使解磷细菌在作物根际形解磷细菌肥料，使解磷细菌在作物根际形成一个磷素供应较为充分的微区。成一个磷素供应较为充分的微区。解磷微生物溶解难溶性磷化物的机制可归结为以下几类：(1)分泌有机酸起作用：这些酸既能降低pH 值，又可与铁、铝、钙等离子结合，

20、从而使难溶性磷酸盐溶解；通过代谢活动产生有机酸(细菌一般分泌乳酸、氨基酸、草酸、延胡索酸和柠檬酸等，真菌主要分泌草酸、丙二酸和乳酸等)，这些酸一方面直接溶解土壤中难溶性磷酸盐。一方面直接溶解土壤中难溶性磷酸盐。(2)有机酸另一方面则是通过鳌合作用释放出土壤磷素：腐解植物残体而产生胡敏酸和富里酸。这两种酸能与复合磷酸盐中的钙、铁鳌合，从而释放出磷酸根，与铁、铝及磷酸盐形成稳定的可溶性复合物，可以被植物吸收利用。(3)生物矿化作用。即通过分泌植酸酶、核酸酶和磷酸脂酶植酸酶、核酸酶和磷酸脂酶等物质，分别将植酸、核酸和磷酸脂植酸、核酸和磷酸脂等有机磷降解。1.菌体形态特征：此菌的菌体实在粗大，因而拉丁

21、文学名称菌体形态特征：此菌的菌体实在粗大，因而拉丁文学名称其为为巨大芽孢杆菌。其为为巨大芽孢杆菌。2.芽孢形态特征：芽孢形态特征：有大芽孢，椭圆形偏端或中位；孢囊多有大芽孢，椭圆形偏端或中位；孢囊多为背端生，芽孢内不着色，无色；成熟孢囊不膨大。为背端生，芽孢内不着色，无色；成熟孢囊不膨大。3.菌落形态特征：在专用培养基上菌落圆形，有同心圈，表菌落形态特征：在专用培养基上菌落圆形，有同心圈，表面光滑；菌落不透明，由灰白色变棕黄色，边缘整齐；菌落面光滑；菌落不透明，由灰白色变棕黄色，边缘整齐；菌落扁平，微隆起微绉折。扁平，微隆起微绉折。4.生理生化特征：革兰氏染色阳性；在肉汤培养基中生长很生理生化

22、特征：革兰氏染色阳性；在肉汤培养基中生长很快，有较强分解快，有较强分解核酸和卵磷脂核酸和卵磷脂的能力，也能从难溶的无机磷的能力，也能从难溶的无机磷灰石中释放出正磷酸盐。灰石中释放出正磷酸盐。解磷能力是表征解磷微生物作用的重要指标，可采用定性法和定量法两种方法测定。定性法定性法一般指的是平板溶磷圈法;平板溶菌圈法：将溶磷菌株在含有难溶性磷酸盐或有机磷的固体平板培养基上培养，测定周围菌落产生透明圈的大小。无机磷平板一般采用磷酸钙盐固体培养基磷酸钙盐固体培养基，接种菌株培养数天后，以磷酸钙盐平板上菌落周围出现透明圈的视为有解无机磷能力的菌株。有机磷平板一般采用卵黄平卵黄平板培养基板培养基，以卵黄平板

23、上菌落周围出现混浊圈的视为有解有机磷能力(卵磷脂被水解形成脂肪和磷酸)。解磷微生物的种类解磷微生物的种类解磷细菌：解磷细菌：l芽孢杆菌属(Bacillus)l欧文氏菌属(Erwinia)l假单孢菌属(Pseudomonas)l土壤杆菌属(Agrobacterium)l沙雷氏菌属(Serratia)l黄杆菌属(Flavobacterium)l肠细菌属(Enterbacter)解磷真菌：解磷真菌：青霉属(Penicillium)、曲霉属(Aspergillus)、根霉属(Rhizopus)、镰刀菌属(Fusarium)、AM 菌根菌菌根菌解钾细菌，又称硅酸盐细菌。解钾细菌，又称硅酸盐细菌。解钾细菌

24、，又称硅酸盐细菌。解钾细菌，又称硅酸盐细菌。硅酸盐钾硅酸盐钾可溶性钾可溶性钾解钾细菌具有荚膜，为多糖类物质，促进土解钾细菌具有荚膜，为多糖类物质，促进土壤微团聚体的形成；壤微团聚体的形成；解钾细菌还能将土壤中的无效率转化为有效解钾细菌还能将土壤中的无效率转化为有效磷；并有微弱的固氮能力。磷；并有微弱的固氮能力。胶质芽孢杆菌胶质芽孢杆菌一、促植物生长的有益细菌促植物生长的三种方式：（一）分泌铁载体（siderophores）1、荧光假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）分泌铁载体，在这种铁载体的一个荧光生色团上连接有由L和D型氨基酸交替组成的六肽。CH3NH2CO（CH2）2C

25、ONHNNOOFe(III)C=ONH(CH2)4OOHC C=O NH2-CH-CONH-CH-CONH-CH-CONH-CH-CONH-CH-COHO-CHCH3CH3NH2CHCH2O=CO-NCH2CH2荧光生色基团荧光生色基团连接六肽 假单胞菌素（Pseudobactin）就是这样一个铁载体，它有极强的铁亲和力，亲和常数可达到1025L/mol。2、铁载体的功能、铁载体的功能 在缺铁条件下，假单胞菌分泌铁载体，与环境中的Fe3形成铁载体Fe3供假单胞菌重新吸收。降低了植物根系附近的Fe含量，导致植物病原菌和有害微生物“铁饥饿”而被抑制，间接促进植物生长。植物也可直接利用与铁载体结合的

26、Fe3，直接促进植物生长。恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）获得28个铁载体合成缺陷突变株（sid）。P.Putida sid鉴定特征：.U.V.照射下菌株细胞不产生荧光 .含有2，2联吡啶环境中不生长（二）分泌抗生素（Antibiotc）或杀真菌剂（fungicide），抑制植物病原菌，间接促植物生长。5406 菌肥，又称放线菌肥料，是在放线菌肥料研制之初以“5406”号放线菌为主要菌种加入到载体之中制成，所以称为5406 菌肥，简称“5406”。5406 泾阳链霉菌的生物学特性：泾阳链霉菌的生物学特性：菌落圆形、凸起，开始生长时浅黄色至淡红色。气生菌丝粉白色，上面生满成串

27、孢子呈粉红色。最适生长温度为2632。（三）分泌植物生长激素植物生长激素，直接促植物生长 赤霉素（gibberellin）是从藤仓赤霉（Gibberella fujikuroi）的无性世代串珠镰刀菌中发现的。次生代谢产物 赤霉素除赤霉酸外，还有其它相似组分 赤霉酸分子结构：COOHOHCH2OHO OCCH3植物生长激素 水稻被赤霉菌侵染，在赤霉素促生长作用下，快速生长。发酵生产，溶剂分离纯化，制备赤霉素产品。1 1、抗生菌肥、抗生菌肥54065406分泌抗生素，分泌抗生素，对植物病原真菌、寄生细菌对植物病原真菌、寄生细菌有很好的拮抗作用。抑制有害微生物，增加了根际微生物的有很好的拮抗作用。抑

28、制有害微生物，增加了根际微生物的生理活性。生理活性。2 2、刺激与调节作物生长：、刺激与调节作物生长：分泌多种不同类型的刺激素。分泌多种不同类型的刺激素。3 3、转化土壤和肥料的营养元素：、转化土壤和肥料的营养元素：将不能吸收利用的将不能吸收利用的N、P、K转化为可利用状态，可提高水解转化为可利用状态，可提高水解N、速效、速效P和速效和速效K的含量。的含量。4 4、促进农作物对养分的吸收、促进农作物对养分的吸收，提高对纤维素的分解能力，提高对纤维素的分解能力，加强对有机质的分解；改善土壤物理性能；施用后，加强对有机质的分解；改善土壤物理性能；施用后，P提高提高60%70%；土壤团粒结构增加，通

29、气性好。；土壤团粒结构增加，通气性好。(1)微生物肥料产业初具规模，已成为我国农业生物产业的重要组成部分。国内现有微生物肥料生产企业500 个以上，年产量约为500 万t，在肥料家族中所占的比例逐年增加，应用面积累计近亿亩。(2)产品种类不断增加,使用菌种不断扩大。在农业部登记的产品分为菌剂类和菌肥类二个大类，共有11 个品种。9 个菌剂类品种分别是根瘤菌剂、固氮菌剂、硅酸盐菌剂、溶磷菌根瘤菌剂、固氮菌剂、硅酸盐菌剂、溶磷菌剂、光合菌剂、有机物料腐熟剂、产气菌剂、复合菌剂和土剂、光合菌剂、有机物料腐熟剂、产气菌剂、复合菌剂和土壤修复菌剂壤修复菌剂；2 个菌肥类产品是复合生物肥料和生物有机肥复合生物肥料和生物有机肥。(3)使用效果逐渐被使用者认可，应用范围不断拓宽。基础研究力度不够、科研人员相对不足；生产工艺参差不齐，产品质量不稳；对微生物肥料缺乏正确的认识，存在随意复合现象；缺少统一的质量标准和规范的行业管理。1、什么叫微生物肥料，分为哪几种？2、为提高根瘤菌固氮效率当前正进行哪几类基因工程的改造？3、荧光假单胞菌分泌的铁载体为什么称为微生物肥料？