几种类型的小鼠缺氧实验课件.ppt

1、缺缺 氧氧几种类型的小鼠缺氧实验实验目的和要求通过在动物身上复制乏氧性、血通过在动物身上复制乏氧性、血液性和组织中毒性等缺氧模型，观察液性和组织中毒性等缺氧模型，观察缺氧时动物的活动、呼吸、血液和粘缺氧时动物的活动、呼吸、血液和粘膜颜色等指标的改变以及动物的存活膜颜色等指标的改变以及动物的存活时间，加深理解各类缺氧的发病原因时间，加深理解各类缺氧的发病原因和机制。和机制。实验动物n每组取成年小鼠每组取成年小鼠7 7只，新生小鼠只，新生小鼠1 1只。只。n成年鼠称重、成年鼠称重、编号编号。n选出两对体重相等或最相近（误差在选出两对体重相等或最相近（误差在1g1g以以内）的成年小鼠备用。内）的成年

2、小鼠备用。实验一：乏氧性缺氧1.1.取体重相等或相近的小鼠取体重相等或相近的小鼠2 2只，同时密只，同时密闭并计时；闭并计时；2.2.观察小鼠的活动、呼吸和皮肤粘膜颜观察小鼠的活动、呼吸和皮肤粘膜颜色的改变，死亡时记录存活时间。色的改变，死亡时记录存活时间。3.3.测死亡时瓶内氧浓度（同时测尚存活测死亡时瓶内氧浓度（同时测尚存活鼠的瓶内氧浓度）。鼠的瓶内氧浓度）。4.4.死后立即开胸取心血，观察血液颜色。死后立即开胸取心血，观察血液颜色。实验二：一氧化碳中毒性缺氧1.1.取小鼠取小鼠1 1只，放入指定装置，调只，放入指定装置，调节煤气流量（节煤气流量（6060个左右气泡个左右气泡/min/mi

3、n）吸入吸入COCO。2.2.观察指标、方法同实验一的观察指标、方法同实验一的2 2、4 4项。项。实验三：亚硝酸钠中毒性缺氧1.1.取体重相等或相近的小鼠取体重相等或相近的小鼠2 2只；只；2.2.腹腔注射给药腹腔注射给药：0.15ml/10g0.15ml/10g体重体重3.3.观察指标与方法同实验一的观察指标与方法同实验一的2 2、4 4项。项。鼠鼠1 1鼠鼠2 25 5亚硝酸钠溶液亚硝酸钠溶液1 1美蓝溶液美蓝溶液生理盐水生理盐水实验四：氰化钾中毒1.1.取健康小鼠取健康小鼠1 1只，称重；只，称重；2.2.腹腔注射腹腔注射0.20.2氰化钾（按氰化钾（按0.15ml0.15ml10g1

4、0g体重注射）；体重注射）；3.3.观察指标同实验观察指标同实验一的一的2 2、4 4项。项。实验五：年龄因素的影响1.1.取成年鼠和新生幼鼠各取成年鼠和新生幼鼠各1 1只；只；2.2.新生鼠置入青霉素小瓶中，瓶口盖新生鼠置入青霉素小瓶中，瓶口盖棉花；与成年鼠共同置入广口瓶并棉花；与成年鼠共同置入广口瓶并密闭。密闭。3.3.观察活动、呼吸情况和存活时间。观察活动、呼吸情况和存活时间。注意事项 1.1.所用广口瓶须密闭不漏气，且各瓶容量应一致。所用广口瓶须密闭不漏气，且各瓶容量应一致。2.2.动物死亡后要立即取血，血液要充分与抗凝剂混合，动物死亡后要立即取血，血液要充分与抗凝剂混合，量要准（即液

5、滴大小相同），各管血滴数要一致，量要准（即液滴大小相同），各管血滴数要一致，否则对比性差。试管应事先编号，以免搞错。否则对比性差。试管应事先编号，以免搞错。3.3.记录时间要准确，以一只表为准。记录时间要准确，以一只表为准。4.4.氰化钾有剧毒，勿沾染皮肤、粘膜，尤其是破损处。氰化钾有剧毒，勿沾染皮肤、粘膜，尤其是破损处。5.5.要认真仔细观察小鼠活动情况，呼吸深度和尾、耳、要认真仔细观察小鼠活动情况，呼吸深度和尾、耳、口颜色的变化。口颜色的变化。实验结果几种类型缺氧指标的改变乏氧性乏氧性血液性血液性组织组织年龄年龄玻璃珠玻璃珠 钠石灰钠石灰CONaNO2+NSNaNO2+美蓝美蓝KCN成年成

6、年新生新生存活时间存活时间（minmin）血液颜色血液颜色呼吸变化呼吸变化FiOFiO2 2()分组讨论题1.1.各组缺氧存活时间不同及死亡的原因和机各组缺氧存活时间不同及死亡的原因和机制是什么？制是什么？2.2.各组血液颜色生成的原因；美蓝的作用是各组血液颜色生成的原因；美蓝的作用是什么？什么？3.3.各组的呼吸变化有何不同，为什么？各组的呼吸变化有何不同，为什么？4.4.实验一实验一FiOFiO2 2变化的原因、机制是什么？变化的原因、机制是什么？（完）（完）分组讨论题1.1.各组缺氧存活时间不同及死亡的原因和机制是各组缺氧存活时间不同及死亡的原因和机制是什么？什么？2.2.各组血液颜色生

7、成的原因；美蓝的作用是什么？各组血液颜色生成的原因；美蓝的作用是什么？3.3.各组的呼吸变化有何不同，为什么？各组的呼吸变化有何不同，为什么？4.4.年龄差异对缺氧耐受有何不同，为什么？年龄差异对缺氧耐受有何不同，为什么？5.5.实验一缺氧装置的原理是什么？其中实验一缺氧装置的原理是什么？其中FiOFiO2 2变化变化的原因、机制是什么？的原因、机制是什么？（完）（完）分组讨论题1.1.存活时间，死存活时间，死亡原因和机制亡原因和机制2.2.血液颜色血液颜色3.3.呼吸变化呼吸变化4.4.FiOFiO2 2变化变化5.5.年龄差异年龄差异6.6.美蓝的作用美蓝的作用7.7.实验一装置的实验一装

8、置的原理原理（完）（完）CO中毒死因结合速率=解离速率=亲和力=吸入气钟中CO达0.1，血中HBCO可达50 HBCO使氧曲线左移，血液向组织释放氧减少抑制RBC糖酵解，2,3-DPG减少，氧离曲线左移22HBOOHBHBCOCOHB10122OHBHBOCOHBHBCO22HBOOHBHBCOCOHB210011300200亚硝酸钠中毒高铁血红蛋白血症（methemoglobinemia)nHB-Fe2+NaNO2 HB-Fe3+NaNOn正常人MHB含量占HB总量的0.070.38%，相当于0.03g%左右nNaNO2中毒时MHB含量占HB总量的10%以上，相当于1.5g%以上nHB-Fe

9、3+美蓝 HB-Fe2+氧化还原2KCN中毒 Cyt aa3-Fe3+CN Cyt aa3-Fe3+-CN幼鼠耐受缺氧的原因：1.1.中枢方面：中枢方面：神经系统发育不完善，对氧需求量少；神经系统发育不完善，对氧需求量少；脑无氧酵解能力强；脑无氧酵解能力强；ATPATP利用率为成年的利用率为成年的1/101/10；2.2.心脏方面：心肌糖元含量高，新生心脏方面：心肌糖元含量高，新生30mg/g30mg/g组织，成年组织，成年2 24mg/g4mg/g组织；组织；3.3.血液方面：血液方面：RBCRBC多；多；4.4.细胞方面：线粒体呼吸功能强；细胞方面：线粒体呼吸功能强；5.5.全身：体积小，活动少，耗能少。全身：体积小，活动少，耗能少。