体液中酶的生物化学检验-精品医学课件.ppt

1、BBMC第十一章第十一章体液中酶的生物化学检验体液中酶的生物化学检验生化与分子生物学教研室生化与分子生物学教研室武文娟武文娟2022-7-311BBMC目标22022-7-31v掌握掌握血清酶的分类，血清酶活性改变的病理机制血清酶的分类，血清酶活性改变的病理机制、ALT、AST、CK、LD、GGT、AMY、ChE检测检测的标本要求、临床意义，同工酶检测的临床意义。的标本要求、临床意义，同工酶检测的临床意义。v熟悉熟悉血清酶的变化机制、影响血清酶变化的生理血清酶的变化机制、影响血清酶变化的生理因素。因素。v了解了解临床诊断中常用的酶及同工酶的检测原理、临床诊断中常用的酶及同工酶的检测原理、方法学

2、评价、参考区间。方法学评价、参考区间。BBMC血清酶的分类血清酶的分类一一血清酶变化机制血清酶变化机制二二影响血清酶的因素影响血清酶的因素三三3第一节第一节 概述概述BBMC血清酶血清酶指存在于血清中的酶，而非血清特异产生的酶。指存在于血清中的酶，而非血清特异产生的酶。临床检测多用血清标本。临床检测多用血清标本。4BBMC5 根据酶的来源及其在血浆中发挥催化根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况，将其分为：功能的情况，将其分为：P172一般代谢酶一般代谢酶组织专一酶组织专一酶血浆特异酶血浆特异酶非血浆特异酶非血浆特异酶 外分泌酶外分泌酶细胞酶细胞酶一般代谢酶一般代谢酶组织专一酶组织专一酶血

3、浆特异酶血浆特异酶非血浆特异酶非血浆特异酶 外分泌酶外分泌酶细胞酶细胞酶血血 清清 酶酶一、血清酶的分类一、血清酶的分类BBMC 名称名称 血浆特异酶血浆特异酶 非非血浆特异酶血浆特异酶 外分泌外分泌酶酶细胞酶细胞酶一般代谢酶一般代谢酶 组织专一酶组织专一酶来源来源肝肝消化腺或其它消化腺或其它外分泌腺外分泌腺 各组织器官各组织器官（无器官专一（无器官专一性）性）肝肝（有器官（有器官专一性）专一性）种类种类凝血酶原、凝血酶原、因因子、子、因子、纤因子、纤溶酶原、溶酶原、ChEChE、CERCER、LCATLCAT、脂蛋、脂蛋白脂肪酶等白脂肪酶等 胰淀粉酶、胰胰淀粉酶、胰脂肪酶、胰蛋脂肪酶、胰蛋白

4、酶、白酶、ACP等等LDH、AST、ALT、CK、MDH等等 OCT等等 一、血清酶的分类一、血清酶的分类6BBMC二、血清酶的变化机制二、血清酶的变化机制v 正常情况下，组织细胞内发挥催化作用的酶在血正常情况下，组织细胞内发挥催化作用的酶在血清中含量甚微。清中含量甚微。v组织器官受损造成细胞破坏或细胞膜通透性增高组织器官受损造成细胞破坏或细胞膜通透性增高时，细胞内的某些酶大量释放入血；时，细胞内的某些酶大量释放入血；v细胞的转换率增高或细胞的增殖加快，其特异的细胞的转换率增高或细胞的增殖加快，其特异的标志酶可释放入血；标志酶可释放入血；v细胞内酶的合成或诱导增强或酶的清除受阻也可细胞内酶的合

5、成或诱导增强或酶的清除受阻也可引起血清酶活性升高引起血清酶活性升高BBMC二、血清酶的变化机制二、血清酶的变化机制v血清中酶的清除方式与其他血浆蛋白质类似血清中酶的清除方式与其他血浆蛋白质类似v血清酶的半寿期是指酶失活至原来活性一半时所血清酶的半寿期是指酶失活至原来活性一半时所需时间（需时间（T1/2），可以表示酶从血中清除的快慢。），可以表示酶从血中清除的快慢。v不同血清酶甚至血清酶的同工酶之间半寿期差别不同血清酶甚至血清酶的同工酶之间半寿期差别很大。这些有助于了解同一疾病不同酶升高持续很大。这些有助于了解同一疾病不同酶升高持续时间的差异时间的差异BBMC二、血清酶的变化机制二、血清酶的变化

6、机制酶半寿期（h）相对分子质量ALT3757110 000AST1222 ASTs约14120 000 ASTm约6100 000CK约15 CK1(CK-BB)约388 000 CK2(CK-MB)约1087 000 CK3(CK-MM)约2085 000LDH LDH15317313 500 LDH581213 500常见的几种血清酶的半寿期与分子量常见的几种血清酶的半寿期与分子量BBMC1.1.性性 别别多数酶无差异，少数有差异多数酶无差异，少数有差异男性高于女性：男性高于女性：CKCK、ALPALP、-GT、AST女性高于男性：女性高于男性：LDH1LDH1（青年妇女）（青年妇女）2.

7、2.年年 龄龄 最明显的例子是最明显的例子是ALPALP，新生儿血清中，新生儿血清中ALPALP略略高于成人，高于成人，1 15 5岁增至成人的岁增至成人的2 23 3倍，然后逐倍，然后逐渐下降，到渐下降，到10101515岁，岁，ALPALP又明显升高，可达又明显升高，可达成人的成人的3 35 5倍，倍，2020岁后降至成人值。岁后降至成人值。3.3.饮饮 食食 血清中大多数酶不受进食影响，故测定酶血清中大多数酶不受进食影响，故测定酶活性不一定需要空腹采血。活性不一定需要空腹采血。4.4.运运 动动 激烈的肌肉运动可使血清中多种酶，如激烈的肌肉运动可使血清中多种酶，如CKCK、LDLD、AS

8、TAST、ALDALD、ALTALT等活性升高。等活性升高。5.5.妊妊 娠娠三、影响血清酶的因素三、影响血清酶的因素10（一）（一）生理变异生理变异BBMCv1.酶合成异常 v2.酶释放增加v3.酶清除异常（二）血清酶变化的病理机制（二）血清酶变化的病理机制11BBMC1.合成异常合成异常合成减少合成减少合成增多合成增多肝损害导致合成酶的能力受损肝损害导致合成酶的能力受损（ChE、LCAT）酶基因变异引起酶合成减少酶基因变异引起酶合成减少（铜氧化酶）（铜氧化酶）增生性疾病（骨骼疾病，增生性疾病（骨骼疾病，ALP)恶性肿瘤（前列腺癌，恶性肿瘤（前列腺癌，ACP)酶的诱导作用（乙醇，酶的诱导作用

9、（乙醇，-GT）（二）血清酶变化的病理机制（二）血清酶变化的病理机制12BBMC2.释放增加（大多数血清酶增高的主要机制）释放增加（大多数血清酶增高的主要机制）细胞内外酶浓度的差异细胞内外酶浓度的差异 对于非血浆特异酶，细胞内外浓度差可在对于非血浆特异酶，细胞内外浓度差可在千倍以上，只要有少量细胞坏死或病变，血中千倍以上，只要有少量细胞坏死或病变，血中酶浓度明显升高。对血浆特异酶，细胞病变很酶浓度明显升高。对血浆特异酶，细胞病变很少引起血中酶浓度明显升高。少引起血中酶浓度明显升高。酶的相对分子量（影响细胞内释出的关键）酶的相对分子量（影响细胞内释出的关键）酶从细胞内释出的速度与酶的相对分子量酶

10、从细胞内释出的速度与酶的相对分子量成反比。如成反比。如AMI时，血中最先升高的是时，血中最先升高的是CK（MW：85kD)，LD（MW：125kD)出现升高出现升高明显延迟。明显延迟。酶的组织分布酶的组织分布 含酶量高且血流丰富的组织器官，其细胞含酶量高且血流丰富的组织器官，其细胞内酶进入血流的可能性大；除少数组织专一性内酶进入血流的可能性大；除少数组织专一性酶以外，大多数血清酶不能特异反映某个特定酶以外，大多数血清酶不能特异反映某个特定组织的病变。但同工酶的发现大大提高酶检测组织的病变。但同工酶的发现大大提高酶检测的组织的特异性。的组织的特异性。酶在细胞内的定位及存在形式酶在细胞内的定位及存

11、在形式 线粒体酶不易从细胞中释出，如线粒体酶不易从细胞中释出，如ASTm的的检测往往反映肝细胞的损伤程度，且是检测往往反映肝细胞的损伤程度，且是AMI中中最后升高的酶，用于判断预后；有些酶在细胞最后升高的酶，用于判断预后；有些酶在细胞内与结构蛋白结合，较难释放。内与结构蛋白结合，较难释放。三、血清酶变化的病理机制三、血清酶变化的病理机制13BBMC3.排出异常排出异常肾功能减退，血清肾功能减退，血清AMY活性升高可能因酶排活性升高可能因酶排泄障碍而在血液中滞留。泄障碍而在血液中滞留。胆胆道梗阻，血清道梗阻，血清ALP升高的原因是梗阻区升高的原因是梗阻区ALP合成加强，合成加强，ALP排泄受阻而

12、逆流入血。排泄受阻而逆流入血。大多数酶，不存在以上的清除机制。大多数酶，不存在以上的清除机制。三、血清酶变化的病理机制三、血清酶变化的病理机制14BBMC15第二节第二节 临床诊断中常用的酶与同工酶临床诊断中常用的酶与同工酶BBMC一、转氨酶（一、转氨酶（Aminotransferases）及其同工酶）及其同工酶丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferases，ALT)/谷丙转氨酶谷丙转氨酶 GPT天冬氨酸氨基转移酶天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferases，AST/谷草转氨酶谷草转氨酶 GOT催化反应催化反应L-丙氨酸丙氨酸

13、-酮戊二酸酮戊二酸 -丙酮酸丙酮酸 L-谷氨酸谷氨酸L-天冬氨酸天冬氨酸-酮戊二酸酮戊二酸 -草酰乙酸草酰乙酸 L-谷氨酸谷氨酸ALTAST 两种酶均需要磷酸吡哆醛（两种酶均需要磷酸吡哆醛（VitB6）为辅基，不含）为辅基，不含磷酸吡哆醛的酶蛋白为脱辅基酶蛋白，无催化活性。磷酸吡哆醛的酶蛋白为脱辅基酶蛋白，无催化活性。16BBMC组织分布组织分布 ALT大量存在于肝组织大量存在于肝组织，其次为肾、心、骨骼，其次为肾、心、骨骼肌等。其有两种活性同工酶，肌等。其有两种活性同工酶，(ALTs)、(ALTm)，分别存在细胞质及线粒体中。肝细胞中分别存在细胞质及线粒体中。肝细胞中ALT大多存大多存在细胞

14、质，少量在线粒体，肝细胞损伤时血清中以在细胞质，少量在线粒体，肝细胞损伤时血清中以ALTs为主。为主。AST存在多种器官，按含量多少为心存在多种器官，按含量多少为心、肝、肝、骨骼肌和肾。其有两种同工酶骨骼肌和肾。其有两种同工酶ASTs、ASTm，分别，分别存在细胞质（约存在细胞质（约30%）及线粒体（约）及线粒体（约70%）中。细）中。细胞轻度损伤胞轻度损伤ASTs显著升高，而严重损伤时显著升高，而严重损伤时ASTm 大量出现于血清中。血中大量出现于血清中。血中AST升高多来自心脏或肝升高多来自心脏或肝脏损伤。脏损伤。17BBMC标本标本 溶血标本不能用于检测：溶血标本不能用于检测：RBC中中

15、ALT是血清中的是血清中的3-5倍倍 宜用血清，宜用血清，4 冰箱中可贮存冰箱中可贮存1星期，活性无明显改变。星期，活性无明显改变。ALT 检测的临床意义检测的临床意义1.血清血清ALT活性增高活性增高（）（）ALT是反映肝损伤的一个灵敏指标是反映肝损伤的一个灵敏指标 急性肝炎早期升高，急性肝炎早期升高，ALTAST；急性肝炎恢复指标急性肝炎恢复指标 Deritis比值可用于肝炎诊断、鉴别诊断及判断转归比值可用于肝炎诊断、鉴别诊断及判断转归 酶胆分离是肝细胞坏死先兆酶胆分离是肝细胞坏死先兆18BBMC19（）心血管疾病（）心血管疾病 心肌梗死、心肌炎、心力心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时肝淤血和脑

16、出血等。衰竭时肝淤血和脑出血等。（3）药物和毒物）药物和毒物 氯丙嗪、异烟肼、水杨酸氯丙嗪、异烟肼、水杨酸制剂及乙醇、铅、汞或有机磷等引起制剂及乙醇、铅、汞或有机磷等引起ALT活活性增。性增。2.血清血清ALT活性降低活性降低 磷酸吡哆醛缺乏症磷酸吡哆醛缺乏症BBMCAST检测的临床意义检测的临床意义 AST主要用于心脏疾病、肝脏疾病的诊断主要用于心脏疾病、肝脏疾病的诊断 AMI发病发病6-12h即升高，即升高，48达高峰，达高峰，3-5d恢恢复正常。由于复正常。由于AST在在AMI时升高迟于时升高迟于CK，恢，恢复早于复早于LD，故目前诊断，故目前诊断AMI价值不大。价值不大。急性肝炎，急性

17、肝炎，AST升高程度不及升高程度不及ALT；慢性；慢性肝炎，特别肝硬化、慢性活动性肝炎时，肝炎，特别肝硬化、慢性活动性肝炎时，AST升高程度超过升高程度超过ALT。20BBMC21疾病疾病ALTASTAST/ALT肌肉损伤肌肉损伤正常或轻度升高正常或轻度升高急性期可轻度升高急性期可轻度升高1.0心肌梗死心肌梗死轻度升高轻度升高明显升高，与明显升高，与CK和和LD比较，比较，无优点无优点1.0梗阻性黄疸梗阻性黄疸 轻度升高轻度升高同同ALT常常1.0溶血性黄疸溶血性黄疸 无变化无变化无变化无变化-病毒性肝炎病毒性肝炎 明显升高，随病情而异。可明显升高，随病情而异。可达正常上限的达正常上限的101

18、00倍倍同同ALT，较，较ALT轻且恢复早轻且恢复早1.0肝硬化肝硬化常轻度升高常轻度升高升高超过升高超过ALT1.0常见疾病常见疾病ALT和和AST及同工酶的变化及同工酶的变化BBMC二、二、-谷氨酰转移酶及其同工酶谷氨酰转移酶及其同工酶-谷氨酰转移酶谷氨酰转移酶（-glutamyl transpeptid,-GT/GGT）又称：又称：-谷氨酰转肽酶谷氨酰转肽酶（-GTP/GGTP)催化反应催化反应 一种含巯基的线粒体酶一种含巯基的线粒体酶，可催化，可催化-谷氨酰基从谷氨酰基从GSH或其或其它含它含-谷氨酰基化合物中转移至另一肽或氨基酸分子上。谷氨酰基化合物中转移至另一肽或氨基酸分子上。GS

19、H氨基酸氨基酸 -谷氨酰氨基酸半胱氨酰甘氨酸谷氨酰氨基酸半胱氨酰甘氨酸GGT22BBMC 组织分布组织分布 肾脏中含量最多，其次为胰、肺、肝等。肾脏中含量最多，其次为胰、肺、肝等。血血清中的清中的GGT主要来自肝胆。主要来自肝胆。标本标本 GGT较稳定，室温下可放置较稳定，室温下可放置2d，4可可存放存放1w1w，-20可储存可储存1y1y；RBCRBC中几乎无中几乎无GGTGGT，因此溶血标本可以检测。因此溶血标本可以检测。23BBMC 临床意义临床意义 有助肝胆疾病的鉴别诊断有助肝胆疾病的鉴别诊断 与与ALP联合进行肝脏疾病检测联合进行肝脏疾病检测用于判断恶性肿瘤有无肝转移：用于判断恶性肿

20、瘤有无肝转移：胆道疾病，胆道疾病，GGT阳性率高，阳性率高，而且升高明显，可高达而且升高明显，可高达5-30ULN，肝实质疾病是，肝实质疾病是GGT一一般只是中度升高，可达般只是中度升高，可达2-5ULN。若若ALP升高而升高而GGT正正常，则完全排除常，则完全排除ALP的肝的肝来源，若来源，若ALP和和GGT都增都增加，则应先排除肝外引起加，则应先排除肝外引起GGT增加的原因，一旦排增加的原因，一旦排除，则除，则GGT增高为肝病所增高为肝病所致。致。肝胆疾病肝胆疾病 乙醇、巴比妥类药物、避孕药等可诱导乙醇、巴比妥类药物、避孕药等可诱导GGT的升高的升高。24原发性肝癌、胰腺癌和乏特壶原发性肝

21、癌、胰腺癌和乏特壶腹癌时，血清腹癌时，血清GGT活性显著升活性显著升高，特别是在诊断恶性肿瘤患高，特别是在诊断恶性肿瘤患者有无肝转移和肝癌术后有无者有无肝转移和肝癌术后有无复发时，阳性率可达复发时，阳性率可达90%。GGT同工酶同工酶与与AFP联合检测联合检测可使原发性肝癌可使原发性肝癌AFP检测的阳检测的阳性率明显提高性率明显提高肾脏疾病肾脏疾病测定尿中测定尿中GGT活性有助于诊断肾小管疾病活性有助于诊断肾小管疾病BBMC疾病疾病GGT活性变化活性变化肝胆疾病（胆石症、炎症）肝胆疾病（胆石症、炎症）明显增高，可达正常上限的明显增高，可达正常上限的530倍，阳性率在倍，阳性率在80%以上以上肝

22、实质性疾病（肝炎、肝硬化）肝实质性疾病（肝炎、肝硬化）轻度升高，达正常上限的轻度升高，达正常上限的25倍倍肝癌肝癌明显升高，且阳性率高明显升高，且阳性率高诱导作用（乙醇、苯巴比妥、诱导作用（乙醇、苯巴比妥、抗抑郁或癫痫药物）抗抑郁或癫痫药物）轻度升高，停药后正常轻度升高，停药后正常常见疾病常见疾病GGT活性的变化活性的变化BBMC三、三、肌酸激酶及其同工酶和亚型肌酸激酶及其同工酶和亚型肌酸激酶肌酸激酶（creatine kinase，CK）催化反应催化反应 CK催化肌酸和催化肌酸和ATP或磷酸肌酸和或磷酸肌酸和ADP之间的磷之间的磷酸转移的可逆性反应，酸转移的可逆性反应，所产生的磷酸肌酸含高能

23、磷所产生的磷酸肌酸含高能磷酸键，是肌肉收缩时能量的直接来源。酸键，是肌肉收缩时能量的直接来源。磷酸肌酸磷酸肌酸ADP 肌酸肌酸ATPCK26BBMC 组织分布组织分布 广泛分布于全身，在骨骼肌含量最高，其次是心肌和脑。广泛分布于全身，在骨骼肌含量最高，其次是心肌和脑。CK由两种不同亚基（由两种不同亚基（M，B）组成的二聚体，细胞质中存在）组成的二聚体，细胞质中存在三种同工酶：三种同工酶：CK-BB(CK1)、CK-MB(CK2)、CK-MM(CK3)。CK-MM主要存在于骨骼肌中，平滑肌以主要存在于骨骼肌中，平滑肌以CK-BB含量相对含量相对较高，较高，CK-BB在脑中的含量明显高于其他组织，

24、心肌是在脑中的含量明显高于其他组织，心肌是CK-MB含量丰富的唯一器官。当这些组织器官受损伤时，血清含量丰富的唯一器官。当这些组织器官受损伤时，血清中中CK的含量升高。的含量升高。标本标本 不得用溶血标本不得用溶血标本，RBC中含有中含有AK，可干扰测定，可干扰测定，引起测定值偏高；测定样品宜用血清或肝素抗凝血浆，引起测定值偏高；测定样品宜用血清或肝素抗凝血浆，其它抗凝剂都抑制其它抗凝剂都抑制CK活性。活性。27BBMC 临床意义临床意义 CK及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶之一，主要用于心肌、骨骼肌和脑疾患的诊断。酶之一，主要用于心肌、骨

25、骼肌和脑疾患的诊断。28u血清血清CK主要用于心肌梗死的诊断。心肌梗死发生后主要用于心肌梗死的诊断。心肌梗死发生后48h，CK开始升高，开始升高，1248h达最高峰，可达正常上限的达最高峰，可达正常上限的1012倍，倍，在在24d降至正常水平。降至正常水平。CK-MB是目前公认的诊断是目前公认的诊断AMI较有较有价值的生化指标。价值的生化指标。u病毒性心肌炎时，病毒性心肌炎时，CK也会升。也会升。u皮肌炎、肌营养不良、骨骼肌损伤等也会使皮肌炎、肌营养不良、骨骼肌损伤等也会使CK升。升。u脑膜炎、脑血管意外、甲状腺功能低下等疾病及一些非疾脑膜炎、脑血管意外、甲状腺功能低下等疾病及一些非疾病因素如

26、剧烈运动、肌肉注射氯丙嗪和抗生素、各种插管及病因素如剧烈运动、肌肉注射氯丙嗪和抗生素、各种插管及手术也可引起手术也可引起CK活性增。活性增。u甲亢，长期卧床者总甲亢，长期卧床者总CK（主要为（主要为CK-MM）可下降。）可下降。BBMC疾病疾病总总CKCK同工酶同工酶急性心肌梗死急性心肌梗死常用酶中升高最早（常用酶中升高最早（48h），），24小时达到峰值，小时达到峰值，23天恢复正天恢复正常，中度升高。常，中度升高。确诊确诊AMI的实验指标的实验指标之一，大于总之一，大于总CK的的6%有意义，有意义，23d恢恢复正常复正常心肌炎、肌肉损伤心肌炎、肌肉损伤（挫伤、手术、肌注、（挫伤、手术、肌注

27、、剧烈运动等）剧烈运动等）急性期轻度升高，可达急性期轻度升高，可达5倍正常倍正常上限。升高程度和损伤程度相关，上限。升高程度和损伤程度相关，严重者可达严重者可达10 000U/L以上。肌以上。肌注仅轻度升高，注仅轻度升高，1d内恢复正常。内恢复正常。C K-M B 可 增 高，可 增 高，CK-MM升高为主，升高为主，CK-MB/CK活性比活性比 LD1 LD3 LD4 LD5，部分正常儿童血中可见，部分正常儿童血中可见LD1 LD2。P169 32BBMC33乳酸脱氢酶同工酶乳酸脱氢酶同工酶BBMC 标本标本 一般用血清，用血浆需离心去除血小板（血小一般用血清，用血浆需离心去除血小板（血小板

28、中含有大量的板中含有大量的LD），采血后迅速分离血清；因），采血后迅速分离血清；因RBC中中LD含量比血清高含量比血清高100倍以上，倍以上，不宜用溶血标不宜用溶血标本。本。LD4、LD5宜冷变性宜冷变性，不应放在冰箱中，如果，不应放在冰箱中，如果血清放置在血清放置在-20过夜，过夜，LD4和和LD5活性将全部丧失；活性将全部丧失；25 放放2-3d，LD活性变化不大。活性变化不大。如果要长期保存，如果要长期保存，应加应加NAD+(10 mg/mL_)或谷胱甘肽或谷胱甘肽(3.1 mg/mL_)后后保存在保存在4，可以减缓，可以减缓LD4和和LD5的失活。的失活。34BBMC 临床意义临床意义

29、 亚急性心肌梗死诊断有一定价值，但其特异性差；亚急性心肌梗死诊断有一定价值，但其特异性差；诊断心脏疾病诊断心脏疾病 心肌梗死和心肌炎时以心肌梗死和心肌炎时以LD1和和LD2升高为主，大多升高为主，大多数数AMI患者血中会出现患者血中会出现“反转比率反转比率”，即，即LD1LD2；诊断肝脏疾病诊断肝脏疾病 肝细胞损伤时常出现肝细胞损伤时常出现LD5LD4;急性肝炎时急性肝炎时LD1LD2相对下降，相对下降，LD5升高；慢性肝升高；慢性肝炎时炎时LD5升高，且升高，且LD1LD3；诊断骨骼肌疾病诊断骨骼肌疾病 骨骼肌损伤时常出现骨骼肌损伤时常出现LD5LD4;35BBMC36疾病疾病LD总酶总酶L

30、D同工酶同工酶心肌梗死心肌梗死升高最慢（升高最慢（810d），），升高时间长（升高时间长（510d），），可高于正常上限的可高于正常上限的10倍倍LD1LD2，可持续，可持续14d充血性心衰、心肌炎充血性心衰、心肌炎可高于正常上限的可高于正常上限的5倍倍LD1LD2病毒性肝炎病毒性肝炎部分患者可高于正常上限部分患者可高于正常上限的的5倍倍LD5LD4肝硬化肝硬化轻度升高轻度升高LD明显升高，明显升高，LD5LD4原发性肝癌原发性肝癌部分病例升高部分病例升高同上同上梗阻性黄疸梗阻性黄疸不定不定常是常是LD4LD5肌肉损伤肌肉损伤视损伤程度而异视损伤程度而异以以LD5升高为主升高为主恶性肿瘤恶性肿

31、瘤可升高可升高以以LD3为主，为主，LD3LD1常见疾病血清常见疾病血清LD及同工酶的变化及同工酶的变化BBMC五、碱性磷酸酶及其同工酶五、碱性磷酸酶及其同工酶碱性磷酸酶碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP/AKP）催化反应催化反应 一种含锌的糖蛋白，在碱性环境中（一种含锌的糖蛋白，在碱性环境中（pH10.0）可以水解各种天然及人工合成的磷酸单酯化合物。可以水解各种天然及人工合成的磷酸单酯化合物。组织分布组织分布 ALP广泛存在于各组织器官中，但以骨广泛存在于各组织器官中，但以骨骼、牙齿、肝脏、肾脏含量较多。骼、牙齿、肝脏、肾脏含量较多。血清中的血清中的ALP主要来自肝

32、脏和骨骼。主要来自肝脏和骨骼。生长期儿童血清内生长期儿童血清内ALP主要来自成骨母主要来自成骨母细胞和生长中的骨软骨细胞，少量来自肝。细胞和生长中的骨软骨细胞，少量来自肝。37BBMC ALP不是单一的酶，而是一组同工酶。ALP同工酶分为四型生殖细胞型（GCAP）、胎盘型（PALP）、肠型（IAP）和非特异组织型（TUAP）非特异组织型是在酶蛋白合成后，经过不同形式的修饰和加工，形成的肝型、胆型、肾型、骨骼型等酶的多种形式。在病理条件下还可能出现高分子ALP，以及一些和肿瘤有关的变异ALP碱性磷酸酶同工酶碱性磷酸酶同工酶BBMC 标本标本 空腹采血，避免脂肪餐的影响；样品用血清，空腹采血，避免

33、脂肪餐的影响；样品用血清，不能用不能用明显溶血标本；明显溶血标本；在室温或冰箱放置，活性逐渐升高，可增在室温或冰箱放置，活性逐渐升高，可增加加5-10，应在采血当日测定。，应在采血当日测定。临床意义临床意义 很多骨骼疾病如变形性骨炎等患者血中很多骨骼疾病如变形性骨炎等患者血中ALP升高，我升高，我国常用于早期诊断佝偻病和软骨病。国常用于早期诊断佝偻病和软骨病。诊断骨骼性疾病诊断骨骼性疾病 诊断肝胆系统疾病，尤其是黄疸诊断肝胆系统疾病，尤其是黄疸 急性肝炎时急性肝炎时ALP增高达增高达2-5ULN，肝硬化、胆石症和，肝硬化、胆石症和肿瘤引起的胆汁淤积，肿瘤引起的胆汁淤积，ALP增高达增高达5-2

34、0ULN。90以上以上肝外胆道阻塞患者血清肝外胆道阻塞患者血清ALP升高，升高程度和阻塞程度、升高，升高程度和阻塞程度、病变程度成正比。病变程度成正比。39u药物药物 很多药物也可使血清很多药物也可使血清ALP增高，如巴比妥类、抗生素增高，如巴比妥类、抗生素（红霉素、庆大霉素、氯霉素、卡那霉素、氨苄青霉素等）（红霉素、庆大霉素、氯霉素、卡那霉素、氨苄青霉素等）BBMC疾病疾病ALP活性变化活性变化变形性骨炎变形性骨炎极度上升，可达正常上限的极度上升，可达正常上限的50倍倍骨肿瘤骨肿瘤中度上升中度上升佝偻病（软骨病）佝偻病（软骨病）可达正常上限的可达正常上限的13倍倍梗阻性黄疸梗阻性黄疸明显升高

35、，可达正常上限的明显升高，可达正常上限的1015倍倍肝实质性疾病（肝肝实质性疾病（肝炎、肝硬化）炎、肝硬化）轻度上升，很少超过正常上限轻度上升，很少超过正常上限3倍倍肝癌肝癌常明显上升，无黄疸而有血清常明显上升，无黄疸而有血清ALP活性上升应考虑活性上升应考虑肝占位性病变肝占位性病变常见疾病血清常见疾病血清ALPALP活性变化活性变化血清血清ALP活性减低活性减低 较少见，主要见于呆小症、磷酸酶过少症、维生素较少见，主要见于呆小症、磷酸酶过少症、维生素C缺缺乏症。慢性肾炎、乳糜泻、恶性贫血、恶病质、甲状腺功能不全或减退、营乏症。慢性肾炎、乳糜泻、恶性贫血、恶病质、甲状腺功能不全或减退、营养不良

36、等均可引起养不良等均可引起ALP活性减低活性减低BBMC六、酸性磷酸酶及其同工酶六、酸性磷酸酶及其同工酶酸性磷酸酶酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）催化反应催化反应 作用类似作用类似ALP的磷酸酶（最适的磷酸酶（最适pH在在4.5-7.0）组织分布组织分布 ACP存在于人体不同组织，如前列腺、红细胞、血小存在于人体不同组织，如前列腺、红细胞、血小板、肾脏、肝脏、脾脏、胃、肌肉及骨髓中，以板、肾脏、肝脏、脾脏、胃、肌肉及骨髓中，以前列腺前列腺含含量最多。正常男性血清中量最多。正常男性血清中ACP约有约有1/3-1/2来自前列腺。女来自前列腺。女性血中性血中ACP可能来自血小板

37、或破骨细胞。可能来自血小板或破骨细胞。标本标本 血清或肝素抗凝血浆，血清或肝素抗凝血浆，37 或偏碱时灭活很快，或偏碱时灭活很快，pH降降至至6.5以下，酶比较稳定。应及时分离血清（浆）尽早测定。以下，酶比较稳定。应及时分离血清（浆）尽早测定。41BBMC 临床意义临床意义 主要用于诊断前列腺癌，主要用于诊断前列腺癌，血清血清ACP显著上升，显著上升，转移性癌患者可达转移性癌患者可达40-50ULN。由于。由于ACP不稳定，不稳定，测定困难，目前正被其它前列腺标志物如测定困难，目前正被其它前列腺标志物如PSA所所取代。取代。溶血性疾病、急性尿潴留、变形性骨炎或者溶血性疾病、急性尿潴留、变形性骨

38、炎或者近期做过直肠检查者，近期做过直肠检查者，ACP也可轻度升高。也可轻度升高。42BBMC七、淀粉酶及其同工酶七、淀粉酶及其同工酶淀粉酶淀粉酶（amylase，AMY/AMS）催化反应催化反应 将多种糖化合物，如淀粉、肝糖原等水解成糊精、麦将多种糖化合物，如淀粉、肝糖原等水解成糊精、麦芽糖和少量葡萄糖等产物的一组酶。芽糖和少量葡萄糖等产物的一组酶。组织分布组织分布 人体胰腺含人体胰腺含AMY最多，唾液腺也分泌大量最多，唾液腺也分泌大量AMY入口入口腔，还见于卵巢、肺、睾丸、横纹肌和脂肪组织中。腔，还见于卵巢、肺、睾丸、横纹肌和脂肪组织中。AMY是一种需钙金属酶是一种需钙金属酶，其最适，其最适

39、pH在在6.5-7.5之间，之间，卤素和其它阴离子有激活作用。卤素和其它阴离子有激活作用。AMY主要存在于胰腺和唾液腺中。主要存在于胰腺和唾液腺中。AMY有两种同工有两种同工酶，即唾液型（酶，即唾液型（S-AMY）和胰腺型（）和胰腺型（P-AMY）。）。淀粉酶淀粉酶相对分子量小，可从肾小球滤过出现在尿液中。相对分子量小，可从肾小球滤过出现在尿液中。AMY是唯一能在正常时出现于尿液中的血清酶。是唯一能在正常时出现于尿液中的血清酶。43BBMC 标本标本 多用血清或肝素抗凝血浆，其它抗凝剂都有抑制作用，多用血清或肝素抗凝血浆，其它抗凝剂都有抑制作用，不宜用去钙血浆测定不宜用去钙血浆测定AMY。临床

40、意义临床意义 评价胰腺外分泌功能的一种辅助诊断指标。评价胰腺外分泌功能的一种辅助诊断指标。急性胰腺炎早期检测血急性胰腺炎早期检测血AMY，在后期测定尿，在后期测定尿AMY更更有价值。流行性腮腺炎时，有价值。流行性腮腺炎时，AMY升高。升高。AMY诊断胰腺炎其增幅与病情不成比例时，常预示诊断胰腺炎其增幅与病情不成比例时，常预示坏死性胰腺炎。坏死性胰腺炎。急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后等均可引起血清等均可引起血清AMY增高，但一般低于增高，但一般低于500ULN。44BBMC八、脂肪酶八、脂肪酶脂肪酶脂肪酶（li

41、pase，LPS/LIP）胰腺外分泌酶，血清中胰腺外分泌酶，血清中LPS主要来自胰腺，少量来自主要来自胰腺，少量来自胃肠粘膜。胃肠粘膜。LPS可由肾小球滤过，并被肾小管全部回吸收，可由肾小球滤过，并被肾小管全部回吸收，所以尿液中测不到脂肪酶活性。所以尿液中测不到脂肪酶活性。45正常人血浆中正常人血浆中LPS含量极少，但在胰腺受损或病变时，含量极少，但在胰腺受损或病变时，血清血清LPS显著升高。脂肪酶可被显著升高。脂肪酶可被Ca2+、胆汁酸、巯基化、胆汁酸、巯基化合物及辅脂肪酶（合物及辅脂肪酶（colipase）等激活剂激活，而被重金）等激活剂激活，而被重金属、丝氨酸抑制。属、丝氨酸抑制。BBM

42、C46临床意义临床意义 血液中的血液中的LPS主要用于急性胰腺炎的诊断，主要用于急性胰腺炎的诊断，其灵敏度高达其灵敏度高达80%100%，在急性胰腺炎时，血液中的，在急性胰腺炎时，血液中的LPS 48h开开始升高，始升高，24h出现峰值，可达出现峰值，可达10ULN,甚至甚至5060ULN，至至4872h可恢复正常，但随后又可以持续升高可恢复正常，但随后又可以持续升高714d。由于血液由于血液LPS在急性胰腺炎时活性升高时间早，上升幅度在急性胰腺炎时活性升高时间早，上升幅度大，持续时间长，故其诊断价值优于大，持续时间长，故其诊断价值优于AMY。在酗酒、乙醇性胰腺炎、慢性胰腺炎、胰腺癌以及肝胆疾

43、在酗酒、乙醇性胰腺炎、慢性胰腺炎、胰腺癌以及肝胆疾病等血液中的病等血液中的LPS可有不同程度的升高。可有不同程度的升高。LPS在急性胰腺炎时活性升高的时间早，上升的幅度在急性胰腺炎时活性升高的时间早，上升的幅度大，持续的时间长，其诊断价值高于大，持续的时间长，其诊断价值高于AMY。临床发现，凡血清临床发现，凡血清AMY升高的病例，其升高的病例，其LPS均升高；均升高；而而LPS升高者升高者AMY不一定升高。不一定升高。BBMC九、胆碱酯酶九、胆碱酯酶胆碱酯酶胆碱酯酶（choline esterase，ChE）47胆碱酯酶（胆碱酯酶（cholinesterase，ChE）是一类催化酰基）是一类催

44、化酰基胆碱水解酶。胆碱酯酶蛋白分子表面的活性中心有两个胆碱水解酶。胆碱酯酶蛋白分子表面的活性中心有两个能与乙酰胆碱结合的部位，即带负电荷的阴离子部位和能与乙酰胆碱结合的部位，即带负电荷的阴离子部位和酯解部位。酯解部位含有一个由丝氨酸的羟基构成的酸酯解部位。酯解部位含有一个由丝氨酸的羟基构成的酸性作用点和一个由组氨酸咪唑环构成的碱性作用点，两性作用点和一个由组氨酸咪唑环构成的碱性作用点，两者通过氢键结合，增强了丝氨酸羟基的亲核活性，使之者通过氢键结合，增强了丝氨酸羟基的亲核活性，使之易于与乙酰胆碱结合。易于与乙酰胆碱结合。BBMCv人体内主要存在两类胆碱酯酶人体内主要存在两类胆碱酯酶 一是一是假

45、性胆碱酯酶假性胆碱酯酶（pseudocholinesterase，PChE）又称）又称血清胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶或胆碱酯酶血清胆碱酯酶、丁酰胆碱酯酶或胆碱酯酶，临床常规检查临床常规检查的即为此酶，通常称为的即为此酶，通常称为ChE；二是存在于神经突触处的乙酰胆碱酯酶二是存在于神经突触处的乙酰胆碱酯酶（cetylcholinesterase，AChE），又称真性胆碱酯酶或胆），又称真性胆碱酯酶或胆碱酯酶碱酯酶。临床上测定的胆碱酯酶主要是由肝细胞合成临床上测定的胆碱酯酶主要是由肝细胞合成，当肝脏受损或，当肝脏受损或病变时（如：肝细胞变性坏死，间质炎性细胞浸润，纤维组病变时（如：肝细胞变性坏死，间质

46、炎性细胞浸润，纤维组织和结缔组织增生），导致血清白蛋白和胆碱酯酶合成减少，织和结缔组织增生），导致血清白蛋白和胆碱酯酶合成减少，胆碱酯酶释放入血胆碱酯酶释放入血减少减少。此外，含有机磷的杀虫剂能抑制红。此外，含有机磷的杀虫剂能抑制红细胞内真性胆碱酯酶和血清中假性胆碱酯酶。细胞内真性胆碱酯酶和血清中假性胆碱酯酶。胆碱酯酶胆碱酯酶BBMC 临床上检测血清胆碱酯酶活性是协助诊断有机磷中毒和评估肝实质细胞损害的重要手段。1.有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂中毒时，血清ChE活性明显降低，并与临床症状相一致。血清中AChE含量甚微，故临床上可检测红细胞中的AChE用于有机磷中毒的诊断。动态监测对判断急性中毒的

47、预后有一定的帮助。临床意义临床意义BBMC 2.由于由于ChE在肝脏合成后立即释放到血浆中，故评价在肝脏合成后立即释放到血浆中，故评价肝肝细胞合成功能的灵敏指标。细胞合成功能的灵敏指标。各种慢性肝病，如肝炎各种慢性肝病，如肝炎（包括阿米巴肝炎、病毒性肝炎）、肝脓肿和肝硬化（包括阿米巴肝炎、病毒性肝炎）、肝脓肿和肝硬化患者中，约有患者中，约有50%患者患者ChE活性降低。活性降低。3.羊水中乙酰胆碱酯酶的测定可以用于神经管缺陷的产羊水中乙酰胆碱酯酶的测定可以用于神经管缺陷的产前诊断。前诊断。临床意义临床意义BBMC十、十、5-核苷酸酶核苷酸酶p5-核苷酸酶（5-nucleotidase,5-NT

48、）是一种对底物特异性不高的水解酶，可作用于多种核苷酸，如：次黄嘌呤核苷酸。p5-NT在人体的运动、细胞生长发育、纤维蛋白合成、提高表皮或内皮屏障功能、神经传递及淋巴细胞的再循环及黏附、免疫应答等方面均发挥重要的作用 5-NT在人体组织中广泛存在，如肝、胆、肠、脑、心、胰在人体组织中广泛存在，如肝、胆、肠、脑、心、胰等。定位于细胞质膜上，在肝内此酶主要存在于胆小管和等。定位于细胞质膜上，在肝内此酶主要存在于胆小管和窦状隙膜内，而窦状隙膜内，而5-NT要释放入血必须要经肝胆系统内的高要释放入血必须要经肝胆系统内的高浓度胆汁酸去垢处理，因此患者一旦患有肝胆疾病，血清浓度胆汁酸去垢处理，因此患者一旦患

49、有肝胆疾病，血清中的中的5-NT水平就会出现异常水平就会出现异常BBMC1.血清血清5-NT活性升高主要见于肝胆系统疾病活性升高主要见于肝胆系统疾病，如阻，如阻塞性黄疸、肝癌、肝炎等，其活性变化与塞性黄疸、肝癌、肝炎等，其活性变化与ALP一一致。致。2.骨骼系统疾病，骨骼系统疾病，如肿瘤转移、畸形性骨炎、佝偻如肿瘤转移、畸形性骨炎、佝偻病、甲状旁腺功能亢进等，病、甲状旁腺功能亢进等，通常通常ALP活性升高，活性升高，而而5-NT正常正常。因此。因此ALP和和5-NT同时测定有助于同时测定有助于肝胆和骨骼系统疾病的鉴别诊断。肝胆和骨骼系统疾病的鉴别诊断。临床意义临床意义BBMC十十一一、髓过氧化

50、物酶、髓过氧化物酶 髓过氧化物酶又称过氧化物酶，是一种重要的含铁蛋髓过氧化物酶又称过氧化物酶，是一种重要的含铁蛋白酶，是由中性粒细胞、单核细胞和某些组织的巨噬白酶，是由中性粒细胞、单核细胞和某些组织的巨噬细胞分泌的含血红素辅基的血红素蛋白酶，是血红素细胞分泌的含血红素辅基的血红素蛋白酶，是血红素过氧化物酶超家族成员之一。过氧化物酶超家族成员之一。v 它的主要功能是在吞噬细胞内杀灭微生物，利用过氧化氢它的主要功能是在吞噬细胞内杀灭微生物，利用过氧化氢和氯离子产生次氯酸盐，并形成具有氧化能力的自由基。和氯离子产生次氯酸盐，并形成具有氧化能力的自由基。v MPO存在于髓系细胞的嗜天青颗粒中，存在于髓