NSCLC驱动基因检测组织标本替代品的评价课件.pptx

1、NSCLC驱动基因检测组织标本替代品的评价2015年年CSCO年会厦门年会厦门 NSCLC驱动基因检测标本类型u肿瘤组织标本肿瘤组织标本 u细胞学标本细胞学标本u血液标本血液标本u尿液、唾液标本尿液、唾液标本 评价组织标本替代品u病理诊断方面u驱动基因检测方面u替代品检测后靶向治疗疗效方面肺癌细胞学标本分类u胸水、腹水细胞学u心包积液u支气管肺泡灌洗液u痰液uFNA（体表肿物穿刺、TBNA、EBUS穿刺标本）u脑脊液病例1u患者，男性，66岁u职业：教师u单侧胸腔积液u影像学左下肺门增大u胸水500ml送检HE染色免疫组化染色CK7BerP4病理诊断结果1.（胸水）中找到癌细胞（腺癌），考虑来

2、源于肺。2.免疫细胞化学结果：CK7(+),CK5(-),WT-1(-),D2-40(-),CR(-),MC(+),MOC-31(+),BerP4(+),TTF-1(+),NapsinA(+),EMA(+)。3.后临床支气管镜下粘膜充血水肿，未见明确肿块，但活检证实腺癌诊断。4.胸腔镜证实肺腺癌，胸膜转移。病例2u患者，37岁，男性u职业：厨师u胸腔积液u临床不能除外间皮瘤可能u收集200ml送检病理诊断结果1.(胸水)找到恶性肿瘤细胞，结合免疫细胞化学结果，符合恶性间皮瘤。2.免疫细胞化学结果：CK7(+),CK5(+),WT-1(+),D2-40(+),CR(+),MC(+),MOC-31

3、(-),BerP4(-),TTF-1(-),NapsinA(-),Desmin(-)。3.胸膜活检证实细胞学诊断。高肿瘤含量胸水携带丰富的肿瘤信息高肿瘤含量胸水携带丰富的肿瘤信息胸水进行肺腺癌组织学类型诊断在胸水中进行ALK融合状态检测根据胸水检测ALK蛋白表达与临床治疗关系No.aAgeSexIHC-ALKFISH-ALKResponseECOG PSTherapyMonthsDiscontinuation of crizotinibP547M+PD1First-line 2YesP882M+CR1First-line10NoP966F+SD1First-line 3YesP1360F+PR

4、1First-line13NoP1652M+PR0Second-line13NoP2045M+SD1First-line16NoP2150M+SD1Third-line 6NoP2251F+SD3First-line 4NoP2421F+PR3First-line 2NoP2648F+CR1First-line 6NoP2731F+PR1First-line 1No客观缓解率（客观缓解率（ORR）：）：54.5%(6/11)疾病控制率（疾病控制率（DCR）：）：90.9%(10/11)细胞学标本替代组织学标本总结u 在病理诊断方面，细胞学标本制作细胞学蜡块后，通过免疫组化染色，能够实现准确的病

5、理诊断，可以成为组织学标本良好的替代品；u 在病理质控及采用正确前期处理方法的前提下，所有基因、且一种基因蛋白水平、DNA、RNA改变的分子检测均可在细胞学标本上进行，突变率与组织学检查突变率相当；u 疗效随访结果证实，与根据组织学标本所获的疗效一致。血液标本正常人血液中可能出现驱动基因改变NC：50例未患肿瘤正常人对照Log2(2mL血浆中突变片段)正常人血液中可能出现异常细胞Diagnostic value of circulating free DNA for the detection of EGFR mutation status in NSCLC:a systematic revi

6、ew and meta-analysisAccuracy of cfDNA for EGFR mutationIndicating cfDNA had high diagnostic accuracy：u Compared with NSCLC tumor tissues,the pooled sensitivity and specificity of cfDNA for the detection of EGFR mutation status were 0.674(95%CI:0.5170.800)and 0.935(95%CI:0.8880.963),respectively;u Th

7、e PLR and NLR of cfDNA were 10.307(95%CI:6.16717.227)and 0.348(95%CI:0.2260.537),respectively;u The DOR was 29.582(95%CI:4.58260.012),SROC with AUC of 0.93 (95%CI:0.900.95);u Sub-group:sample size,countries,detection methods,and TNM stages were consistent across different sub-groups.cSMART EGFR L858

8、R血液检测cSMART组织样本组织样本ARMS检测检测合计合计阳性（阳性（+）阴性（阴性（-）阳性（+）24024阴性（-）17879合计257810396.0%灵敏度/阳性符合率100%特异性/阴性符合率99.0%总符合率97.3%Kappa值4mL血浆检测样本编号样本编号第一次第一次2mL血浆检测血浆检测第二次第二次2mL血浆检测血浆检测基因基因突变突变突变片段突变片段/总片段总片段比例比例基因基因突变突变突变片段突变片段/总片段总片段比例比例C150134EGFRL858R0/28710%EGFRL858R2/39570.051%C150219EGFRL858R0/27060%EGFRL

9、858R1/25020.040%C150300EGFRL858R0/10950%EGFRL858R0/13370%增加血浆量能够提高对低比例突变检测的灵敏度。cSMART EGFR 19del血液检测cSMART组织样本组织样本ARMS检测检测合计合计阳性（阳性（+）阴性（阴性（-）阳性（+）20020阴性（-）57883合计257810380.0%灵敏度/阳性符合率100%特异性/阴性符合率95.2%总符合率85.8%Kappa值2mL血浆检测NC：50例未患肿瘤正常人对照Log2(2mL血浆中突变片段)cSMART KRAS血液检测cSMART组织样本组织样本ARMS检测检测合计合计阳性（

10、阳性（+）阴性（阴性（-）阳性（+）10010阴性（-）78693合计178610358.8%灵敏度/阳性符合率100%特异性/阴性符合率93.2%总符合率70.5%Kappa值2mL血浆检测NC：50例未患肿瘤正常人对照Log2(2mL血浆中突变片段)片段化 低比例样本编号样本编号cSMART检测结果检测结果ARMS-qPCR检测结果检测结果突变位点突变位点突变片段突变片段/总片段总片段比例比例C150087Q61H22/27440.80%阴性阴性C150128A146T3/3050 0.10%阴性阴性C150359A146P2/19180.10%阴性阴性超出超出ARMS检测检测范围的范围的

11、KRAS突突变变cSMART ALK血液检测cSMART组织样本组织样本ARMS检测检测合计合计阳性（阳性（+）阴性（阴性（-）阳性（+）303阴性（-）397100合计69710350.0%灵敏度/阳性符合率100%特异性/阴性符合率97.1%总符合率48.5%Kappa值2mL血浆检测突变比例与靶向药物疗效相关性分析59.9%42.4%32.5%22.7%14.9%11.3%1.6%1.4%1.3%0.6%0.2%0.2%0.1%0.1%0.1%-10%0%10%20%30%40%50%60%70%PRSD or PD突变比例6例样本ctDNA突变比例高于10%的患者，靶向治疗疗效评价均为

12、PR9例样本ctDNA突变比例低于5%的患者，靶向治疗疗效评价仅1例为PR，其余均为SD或PD血液标本作为组织学标本替代品评价1.目前不能应用血液标本作为病理诊断方面的替代品。2.驱动基因检测方面，检测准确性患者临床分期依赖、检测方法依赖、基因依赖，只能为无法获取组织或细胞学样本时的替代标本。3.应用NGS方法检测血浆驱动基因改变，灵敏度及特异性高，且一次检测数种基因改变，采用NGS方法血液标本有望在肿瘤治疗过程中，驱动基因检测替代组织标本。其他体液（尿液）DETECTION OF EGFR T790M MUTATION IN URINARY Ct DNA FROM METASTATIC NS

13、CLC PATIENTS Urine samples were obtained from metastatic NSCLC patients who progressed on treatment with erlotinib;All patients were confirmed to have EGFR T790M mutation by a tumor biopsy CLIA test.EGFR status was analyzed using a PCR method that amplifies short target DNA fragments using kinetical

14、ly-favorable binding conditions for a wild type blocking oligonucleotide,followed by massively parallel deep sequencing using MiSeq;Annals of Oncology 26(Supplement 1):i10i14,2015DETECTION OF EGFR T790M MUTATION IN URINARY Ct DNA FROM METASTATIC NSCLCPATIENTS The average amount of total amplifiable

15、ctDNA in urine of mNSCLC patients was 0.4 g(range,0.04 to 2.4 g);Detected T790M mutation in urine samples of 6 out of 6 confirmed EGFR T790M-positive patients;that this methodology successfully detects EGFR T790M mutation load in urinary ctDNA,potentially enabling dynamic monitoring of anti-EGFR therapy response from a completely non-invasive urine sample.总结u细胞学标本为很好的组织学标本替代品；u血液标本中，检测准确性患者临床分期依赖、检测方法依赖、基因依赖，只能为无法获取组织或细胞学样本时的替代品u其他体液，尚处于一种待丰富及发展的阶段Thank You！