肝功能检查ppt课件77页PPT.ppt

1、第十三章第十三章 肝功能检验肝功能检验n本章内容概要：本章内容概要：n本章教学要求：本章教学要求：第二节第二节 肝功能试验肝功能试验第一节第一节 概述概述 掌握掌握:黄疸的发生机理和各型黄疸的代谢特点及实验室鉴别诊断要点；肝黄疸的发生机理和各型黄疸的代谢特点及实验室鉴别诊断要点；肝功能实验生化检查指标的种类和重点项目的测定方法及评价。功能实验生化检查指标的种类和重点项目的测定方法及评价。熟悉熟悉:肝脏的生物化学功能，胆红素代谢；各测定项目的临床意义肝脏的生物化学功能，胆红素代谢；各测定项目的临床意义 了解了解：肝脏的基本机构；肝功能实验项目选择的原则。肝脏的基本机构；肝功能实验项目选择的原则。

2、第三节第三节 肝功能试验选择原则肝功能试验选择原则第一节第一节 概概 述述n肝脏结构n肝脏的生化功能n肝脏疾病的生化改变一、肝脏结构一、肝脏结构（一（一）解剖学特点）解剖学特点双重血液供应双重血液供应 腹主动脉的分枝腹主动脉的分枝-肝动脉肝动脉 氧氧 门静脉门静脉 营养营养 双重输出管道双重输出管道 肝静脉肝静脉 代谢降解物代谢降解物 下腔静脉下腔静脉 胆道系统胆道系统 脂溶性物质及其代谢产物脂溶性物质及其代谢产物 体外体外 （二（二）肝脏的显微结构特点）肝脏的显微结构特点1 1、组织结构、组织结构2 2、亚细胞结构、亚细胞结构（三（三）细胞的再生）细胞的再生二、肝脏的生物化学功能二、肝脏的生

3、物化学功能排泄功能排泄功能物质代谢功能物质代谢功能生物转化生物转化重要生化功能重要生化功能生物转化定义：生物转化定义：机体将一些机体将一些内源性和外源性非营养物质内源性和外源性非营养物质进行代谢进行代谢转化，增加其转化，增加其极性或水溶性极性或水溶性，有利于随尿或胆汁排出，同，有利于随尿或胆汁排出，同时也改变了它们的毒性或药理作用。通常将这些物质在体时也改变了它们的毒性或药理作用。通常将这些物质在体内的代谢转变过程称为内的代谢转变过程称为生物转化作用生物转化作用（biotransformation）。（一）排泄功能（一）排泄功能主要排泄对象：胆汁酸、胆红素、氨主要排泄对象：胆汁酸、胆红素、氨1

4、 1、胆汁酸代谢、胆汁酸代谢（1 1）胆汁的分泌：）胆汁的分泌：胆汁功能：促进脂类的消化吸收，同时能将体内某些代谢产物及生物转化胆汁功能：促进脂类的消化吸收，同时能将体内某些代谢产物及生物转化产物不断地排入肠道随粪便排出体外。产物不断地排入肠道随粪便排出体外。胆汁的来源：胆汁的来源：肝胆汁肝胆汁 胆囊胆汁胆囊胆汁 十二指肠十二指肠胆汁的成分：胆汁的成分：胆汁酸（含量最多）、卵磷脂、蛋白质、脂肪酸和胆固醇胆汁酸（含量最多）、卵磷脂、蛋白质、脂肪酸和胆固醇（2 2）胆汁酸生成及种类：）胆汁酸生成及种类：初级胆汁酸（肝细胞）初级胆汁酸（肝细胞）次级胆汁酸（肠道）次级胆汁酸（肠道）（3 3）胆汁酸肝肠

5、循环：）胆汁酸肝肠循环：（4 4）胆汁酸的功能：）胆汁酸的功能：促进脂类消化促进脂类消化促进脂类吸收促进脂类吸收抑制胆固醇从胆汁中析出沉淀抑制胆固醇从胆汁中析出沉淀2 2、胆红素代谢、胆红素代谢胆色素胆色素 尿胆素原尿胆素原 粪胆素原粪胆素原尿胆素尿胆素粪胆素粪胆素胆绿素胆绿素胆红素胆红素未结合胆红素未结合胆红素(单核吞噬细胞系统如骨髓、脾脏单核吞噬细胞系统如骨髓、脾脏)结合胆红素（肝脏）结合胆红素（肝脏）胆素原胆素原胆色素胆色素(bile pigment)是体内铁卟啉化合物的主要是体内铁卟啉化合物的主要分解代谢产物，包括胆红素、胆绿素、胆素原和分解代谢产物，包括胆红素、胆绿素、胆素原和胆素等

6、胆素等。胆红素的来源：衰老红细胞：80一85，非血红蛋白的血红素蛋白质1)无效造血（一）胆红素的正常代谢：（一）胆红素的正常代谢：胆红素代谢示意图胆红素代谢示意图生成过程生成过程 部位部位肝、脾、骨髓单核巨噬细胞系统肝、脾、骨髓单核巨噬细胞系统细胞微粒体与胞液中细胞微粒体与胞液中 过程过程血红蛋白血红蛋白血红素珠蛋白血红素珠蛋白氨基酸氨基酸胆红素胆红素 游离游离胆红素的性质胆红素的性质亲脂疏水，对大脑具有毒性作用亲脂疏水，对大脑具有毒性作用 胆红素在血液的转胆红素在血液的转运运 意义意义增加胆红素在血浆中的溶解度，限增加胆红素在血浆中的溶解度，限制胆红素自由通过生物膜产生毒性作用。制胆红素自由

7、通过生物膜产生毒性作用。竞争结合剂竞争结合剂如磺胺药，水杨酸，胆汁酸等如磺胺药，水杨酸，胆汁酸等 运输形式运输形式胆红素清蛋白复合体（未结合胆红素）胆红素清蛋白复合体（未结合胆红素）胆红素在肝中的胆红素在肝中的转变转变摄取摄取胆红素可以自由双向通透肝血胆红素可以自由双向通透肝血窦肝细胞膜表面进入肝细胞窦肝细胞膜表面进入肝细胞转运转运内质网内质网在胞浆与配体蛋白结在胞浆与配体蛋白结合合转化转化 部位：部位：滑面内网质滑面内网质 反应：反应：结合反应（主要为结合物为结合反应（主要为结合物为UDPUDP葡萄糖醛酸，葡萄糖醛酸，UDPGAUDPGA）酶：酶：葡萄糖醛酸基转移酶葡萄糖醛酸基转移酶 产物：

8、产物：主要为双葡萄糖醛酸胆红素，另有少量单主要为双葡萄糖醛酸胆红素，另有少量单葡萄糖醛酸胆红素、硫酸胆红素，统称为葡萄糖醛酸胆红素、硫酸胆红素，统称为结合胆结合胆红素红素胆红素在肝中的转变胆红素在肝中的转变胆红素葡糖醛酸一酯胆红素葡糖醛酸一酯 +UDP-葡糖醛酸葡糖醛酸UDP-葡糖醛葡糖醛酸基转移酶酸基转移酶胆红素葡糖醛酸二酯胆红素葡糖醛酸二酯 +UDP 胆红素胆红素 +UDP-葡糖醛酸葡糖醛酸胆红素葡糖醛酸一酯胆红素葡糖醛酸一酯 +UDPUDP-葡糖醛葡糖醛酸基转移酶酸基转移酶 葡糖醛酸胆红素的生成葡糖醛酸胆红素的生成排泄排泄结合胆红素从肝细胞毛细胆管排泄入胆汁结合胆红素从肝细胞毛细胆管排泄

9、入胆汁中，再随胆汁排入肠道。中，再随胆汁排入肠道。胆红素在肝中的转变胆红素在肝中的转变胆红素在肠道中的变化胆红素在肠道中的变化和胆素原的肠肝循环和胆素原的肠肝循环 结合胆 红素胆素原胆素原肠肠 菌菌葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸还原还原胆素胆素氧化氧化过程过程胆素原：中胆素原，粪胆素原，胆素原：中胆素原，粪胆素原，d-d-尿胆素原尿胆素原胆胆 素：素：i-i-尿胆素，粪胆素，尿胆素，粪胆素，d-d-尿胆素尿胆素游离胆红素游离胆红素胆素原的肠肝循环：在小肠下段生成的胆素原约有在小肠下段生成的胆素原约有10102020可被肠粘膜重吸收，再经肝门静脉入可被肠粘膜重吸收，再经肝门静脉入肝，重吸收入肝的胆素原大部

10、分以原形再排入肝，重吸收入肝的胆素原大部分以原形再排入胆道，构成肠肝循环，小部分胆道，构成肠肝循环，小部分(每日每日0.4mg0.4mg4.0mg)4.0mg)经体循环随尿排出。经体循环随尿排出。血清胆红素血清胆红素结合胆红素：结合胆红素：与葡萄糖醛酸结合的胆红素称为结合与葡萄糖醛酸结合的胆红素称为结合胆红素，又称直接胆红素。胆红素，又称直接胆红素。未结合胆红素：未结合胆红素：未与葡萄糖醛酸结合的胆红素称为未与葡萄糖醛酸结合的胆红素称为未结合胆红素，又称间接胆红素。未结合胆红素，又称间接胆红素。两种胆红素两种胆红素正常血清胆红素浓度正常血清胆红素浓度116 mol/l (0.1 1mg/dl)

11、4/5为未结合为未结合胆红素，其余为结合胆红素胆红素，其余为结合胆红素 项项 目目 未结合胆红素未结合胆红素 结合胆红素结合胆红素 别别 名名间接胆红素，间接胆红素，血胆红素血胆红素直接胆红素，直接胆红素，肝胆红素肝胆红素与葡萄糖醛酸结合与葡萄糖醛酸结合未结合未结合 结合结合与重氮试剂反应与重氮试剂反应慢或间接反应慢或间接反应迅速直接反应迅速直接反应水中溶解度水中溶解度小小大大经肾随尿排出经肾随尿排出不能不能能能通透细胞膜对脑的毒性通透细胞膜对脑的毒性作用作用大大无无 两种胆红素的区别两种胆红素的区别3 3、血氨代谢、血氨代谢药物及体内含氮物质药物及体内含氮物质（如嘌呤、嘧啶等）（如嘌呤、嘧啶

12、等）来源来源去路相对平衡相对平衡（二）物质代谢功能（二）物质代谢功能1 1、营养物质代谢、营养物质代谢2 2、激素及维生素代谢、激素及维生素代谢 (1)(1)在蛋白质代谢中的作用在蛋白质代谢中的作用 (2)(2)在氨基酸代谢中的作用在氨基酸代谢中的作用 (3)(3)在糖代谢中的作用在糖代谢中的作用 (4)(4)在脂代谢中的作用在脂代谢中的作用激素的灭活主要在肝脏进行激素的灭活主要在肝脏进行 多种维生素能在肝细胞内储存并进行转化多种维生素能在肝细胞内储存并进行转化 分分 类类肝脏正常物质代谢功能肝脏正常物质代谢功能糖代谢糖代谢 糖原合成糖原合成 糖原分解糖原分解 糖异生作用糖异生作用脂类代谢脂类

13、代谢 促进脂类的消化与吸收。促进脂类的消化与吸收。合成甘油三酯、磷脂、胆固醇及脂蛋白合成甘油三酯、磷脂、胆固醇及脂蛋白 甘油三酯、磷脂、胆固醇及脂蛋白的代谢场所甘油三酯、磷脂、胆固醇及脂蛋白的代谢场所 产生酮体产生酮体蛋白质代谢蛋白质代谢合成与分泌血浆蛋白质（除合成与分泌血浆蛋白质（除-球蛋白）。球蛋白）。清除血浆蛋白（除清蛋白）。清除血浆蛋白（除清蛋白）。分解苯丙氨酸、酪氨酸及色氨酸等芳香族氨基酸分解苯丙氨酸、酪氨酸及色氨酸等芳香族氨基酸合成尿素合成尿素激素代谢激素代谢激素在肝脏中灭活激素在肝脏中灭活维生素代谢维生素代谢 维生素维生素A,E,KA,E,K和和B B1212的主要储存场所的主要

14、储存场所 维生素维生素K K参与肝细胞内凝血酶原及凝血因子的合成。参与肝细胞内凝血酶原及凝血因子的合成。将维生素将维生素D D转化为转化为25-25-羟维生素羟维生素D D（三）肝脏的生物转化（三）肝脏的生物转化n定义：定义：生物转化生物转化:机体对许多外源性或内源性非营养物质进行化学转变，机体对许多外源性或内源性非营养物质进行化学转变，增加其水溶性增加其水溶性(或极性或极性)，使其易随胆汁、尿排出，这种体内变化过程称，使其易随胆汁、尿排出，这种体内变化过程称生物转化生物转化(biotransformation)(biotransformation)。n转化对象：转化对象：n转化特点：转化特点

15、：n生理意义：生理意义：保护机体保护机体,致癌、致畸致癌、致畸内源性非营养物内源性非营养物:氨、胺、胆色素、激素氨、胺、胆色素、激素 外源性非营养物外源性非营养物:药物、毒物、食品防腐剂、色素药物、毒物、食品防腐剂、色素 连续性，连续性，多样性，多样性，失活与活化双重性失活与活化双重性三、肝脏疾病的生化改变三、肝脏疾病的生化改变（一）胆红素代谢障碍（黄疸）（一）胆红素代谢障碍（黄疸）n定义定义:n黄疸分类黄疸分类:黄疸黄疸和阻塞性黄疸和阻塞性黄疸 溶血性黄疸溶血性黄疸肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸高胆红素血症高胆红素血症1 1、黄疸的概念：、黄疸的概念：指高胆红素血症引起皮肤、巩膜和粘指高胆红素血症

16、引起皮肤、巩膜和粘膜等组织黄染的现象。膜等组织黄染的现象。正常人血清胆红素小于正常人血清胆红素小于17.1 mol/L17.1 mol/L（lmglmgd1d1），其中未结合胆红素占），其中未结合胆红素占8080。当胆红素超过正常范围，但又在当胆红素超过正常范围，但又在34.2mol/L 34.2mol/L(2mg/dl(2mg/dl）以内，肉眼难于察觉，称为隐性黄疸。）以内，肉眼难于察觉，称为隐性黄疸。如胆红素超过如胆红素超过2mg2mgd1d1即为显性黄疸。即为显性黄疸。血清胆红素定量（血清胆红素定量（mol/L）尿尿 液液粪粪 便便总胆红总胆红素素非结合胆非结合胆红素红素结合胆红结合胆红

17、素素尿胆原尿胆原尿胆红素尿胆红素颜色颜色粪胆原粪胆原健康健康人人3.4-1711.7-10.20-6.81:20(一一)(一一)黄褐色黄褐色正常正常溶血溶血性黄性黄疸疸轻度轻度或或正常正常强（强（+）（一）（一）加加 深深增加增加阻塞阻塞性黄性黄疸疸轻度轻度或或正常正常（一）（一）（+）变浅或灰变浅或灰白色白色或消失或消失肝细肝细胞性胞性黄疸黄疸（+）或）或（-）（+）变浅或正变浅或正常常或正常或正常三种黄疸的鉴别三种黄疸的鉴别胆红素代谢过程（复习）溶血性黄疸时胆红素代谢溶血性黄疸时胆红素代谢溶血性黄疸发生机制示意图 肝性黄疸时胆红素代谢肝性黄疸时胆红素代谢肝细胞性黄疸发生机制示意图 梗阻性黄

18、疸时胆红素代谢梗阻性黄疸时胆红素代谢胆汁淤滞性黄疸发生机制示意图（二）胆汁酸代谢障碍（二）胆汁酸代谢障碍1 1、胆汁酸合成障碍、胆汁酸合成障碍2 2、胆汁酸向肠道排出障碍、胆汁酸向肠道排出障碍3 3胆汁酸肠肝循环紊乱胆汁酸肠肝循环紊乱4 4胆汁瘀积病变时胆汁酸代谢紊乱胆汁瘀积病变时胆汁酸代谢紊乱 总胆汁酸（酶法）总胆汁酸（酶法）0-10 0-10 umolumol/L/L 作空腹或餐后2h测定，后者更灵敏。胆汁酸是胆汁酸是唯一能同时反映唯一能同时反映肝合成代谢、分泌肝合成代谢、分泌状态状态及及肝细胞损伤肝细胞损伤三个方面的血清学指标。三个方面的血清学指标。对肝胆系统疾病诊断的对肝胆系统疾病诊断

19、的灵敏度和特异性高于灵敏度和特异性高于其他指标。其他指标。肝细胞损害肝细胞损害：急性肝炎、慢性活动性肝炎、中：急性肝炎、慢性活动性肝炎、中毒性肝病、肝硬化、和肝癌时毒性肝病、肝硬化、和肝癌时TBATBA显著升高，显著升高，尤其肝硬化时，尤其肝硬化时，TBATBA阳性率高于其他指标。阳性率高于其他指标。(摄摄取障碍）取障碍）胆道梗阻胆道梗阻：肝内、外梗阻：肝内、外梗阻（分泌障碍）（分泌障碍）进食后一过性增高进食后一过性增高（三）血浆酶异常（三）血浆酶异常1 1肝脏合成酶类肝脏合成酶类:胆碱脂酶、凝血因子、铜蓝蛋白；胆碱脂酶、凝血因子、铜蓝蛋白；2.2.肝细胞内酶肝细胞内酶:ALT、AST 3 3

20、肝脏阻塞性疾病酶活性改变：肝脏阻塞性疾病酶活性改变：ALP、GGT4 4肝硬化疾病酶活性改变：肝硬化疾病酶活性改变：单胺氧化酶（单胺氧化酶（MAOMAO）（四）血浆蛋白异常（四）血浆蛋白异常 第二节第二节 肝功能试验肝功能试验n血清（浆）蛋白血清（浆）蛋白n测定血清酶测定测定血清酶测定n血清胆红素测定血清胆红素测定n血清胆汁酸测定血清胆汁酸测定n血氨测定血氨测定一、血清（浆）蛋白测定一、血清（浆）蛋白测定（一）总蛋白、白蛋白、及白蛋白（一）总蛋白、白蛋白、及白蛋白/球蛋白（球蛋白（A/GA/G）比值测定）比值测定 1 1总蛋白测定总蛋白测定 化学法化学法(双缩脲法双缩脲法 )、物理法、染料结合

21、法、电泳法物理法、染料结合法、电泳法 染料结合法染料结合法(BCG(BCG、BCPBCP）、沉淀法、沉淀法 2.2.白蛋白测定白蛋白测定 3 3A/GA/G比值比值 【参考范围】总蛋白总蛋白 606080g/L 80g/L 白蛋白白蛋白 353555g/L 55g/L 球蛋白：球蛋白：151532g/L A/G32g/L A/G比值：比值：1.51.52.0/12.0/1【临床意义】严重肝病时，肝脏合成分子量小的蛋白质能力降低，血中严重肝病时，肝脏合成分子量小的蛋白质能力降低，血中白蛋白浓度减少；而免疫系统、单核巨噬细胞合成球蛋白增加，白蛋白浓度减少；而免疫系统、单核巨噬细胞合成球蛋白增加，导

22、致导致A/GA/G比值减少。严重则会出现比值减少。严重则会出现A/GA/G比值小于比值小于1 1，称为，称为A/GA/G比值比值倒置，表示肝功能损害严重。倒置，表示肝功能损害严重。（二）纤维蛋白原测定（二）纤维蛋白原测定 （凝血因子（凝血因子）测定方法：测定方法：分为三大类分为三大类 根据纤维蛋白原的生物学特性测定方法根据纤维蛋白原的生物学特性测定方法 根据纤维蛋白原理化性质而建立的测定方法。根据纤维蛋白原理化性质而建立的测定方法。根据纤维蛋白原免疫学特点而建立的测定方法。根据纤维蛋白原免疫学特点而建立的测定方法。【参考范围】2.224.22g/L(热沉淀比浊法)【临床意义】(1)(1)纤维蛋

23、白原增加：纤维蛋白原增加：感染；感染；无菌炎症；无菌炎症；其它。其它。(2)(2)纤维蛋白原减少纤维蛋白原减少:严重的肝脏疾病；严重的肝脏疾病；其它疾病引起纤维蛋白原减少的疾病。其它疾病引起纤维蛋白原减少的疾病。（三）甲胎蛋白（三）甲胎蛋白（1-fetoprotein1-fetoprotein，AFPAFP）测定）测定 测定方法：测定方法：【参考范围】成人成人 1030g/L 400g/L作为肝癌诊断标准作为肝癌诊断标准【临床意义】酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、斑点免疫结合法、火箭电泳放酶联免疫吸附法、放射免疫分析法、斑点免疫结合法、火箭电泳放射自显影法、酶联火箭电泳法等射自显影法、酶联火箭

24、电泳法等 (1)(1)原发性肝细胞肝癌的诊断标准：血清原发性肝细胞肝癌的诊断标准：血清AFPAFP测定值超过测定值超过400g/L(400ng/ml)400g/L(400ng/ml)；(2)(2)活动性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的诊断活动性急、慢性肝炎、肝硬化或其它肝病病人的诊断（四）其它（四）其它【临床意义临床意义】肝豆状核变性（肝豆状核变性（WilsonWilson病）和遗传性色素沉积症病）和遗传性色素沉积症1.1.铜蓝蛋白测定铜蓝蛋白测定 【参考范围参考范围】52.952.9167.7 IU/L167.7 IU/L【临床意义临床意义】遗传性血色素沉积症铁沉积遗传性血色素沉积症铁沉

25、积2 2转铁蛋白转铁蛋白【原理原理】双联吡啶法双联吡啶法 【原理原理】铜蓝蛋白具有氧化酶活性铜蓝蛋白具有氧化酶活性【参考范围参考范围】TIBC TIBC 男男 505077mol/L 77mol/L 女女545477mol/L77mol/L 转铁蛋白饱和度为转铁蛋白饱和度为33.0%33.0%35.0%35.0%二、血清酶测定二、血清酶测定（一）氨基转移酶测定（一）氨基转移酶测定1 1赖氏法测定赖氏法测定ALTALT（）原理：（）原理：ALTALT催化催化丙氨酸丙氨酸(alamine)(alamine)与与-酮戊二酸酮戊二酸(-oxoglutarate)(-oxoglutarate)之间的氨之

26、间的氨基转移反应，生成基转移反应，生成丙酮酸丙酮酸(pyruvate)(pyruvate)和谷氨酸和谷氨酸(glutamate)(glutamate)。在在3737及及pH7.4pH7.4条件下反应条件下反应30min30min，以，以2 2，4-4-二硝基苯肼二硝基苯肼终止反应，并与底物终止反应，并与底物-酮戊酮戊二酸和产物二酸和产物-丙酮酸的羰基生成丙酮酸的羰基生成2 2，4-4-二硝基苯腙二硝基苯腙，苯腙在碱性条件下生，苯腙在碱性条件下生成红棕色，与成红棕色，与505nm505nm波长处读取吸光度后计算活性。波长处读取吸光度后计算活性。（）（）方法评价：方法评价：赖氏法的实验结果需与赖氏

27、法的实验结果需与卡门分光法的结果卡门分光法的结果对比后求出；对比后求出；NaOHNaOH的浓度的浓度对显色有影响；对显色有影响；该法的该法的重复性差重复性差。卡门氏单位卡门氏单位：1.0ml1.0ml血清在血清在2525，340nm340nm，反应体积，反应体积3.0ml,3.0ml,光径光径1.0cm1.0cm时每分钟测时每分钟测定吸光度下降定吸光度下降0.0010.001，即消耗，即消耗4.82 4.82 10 10-4-4mol NADHmol NADH为一个卡门氏单位为一个卡门氏单位【参考范围参考范围】5 52525卡门氏单位卡门氏单位 【临床意义临床意义】(2)(2)慢性活动性肝炎或

28、脂肪肝：慢性活动性肝炎或脂肪肝：(1)(1)肝细胞损伤的灵敏指标肝细胞损伤的灵敏指标:ALT轻度增高轻度增高(100200IU),或属正常范围或属正常范围,3.3.赖氏法测定赖氏法测定ASTAST（）原理：（）原理：血清中的血清中的ASTAST可催化可催化门冬氨酸门冬氨酸(aspartate)(aspartate)与与-酮戊二酸间酮戊二酸间的氨基移换，的氨基移换，生成生成草酸乙酸草酸乙酸(oxaloacetate)(oxaloacetate)和和L-L-谷氨酸谷氨酸。草酸草酸乙酸自行脱羧转变成为丙酮酸乙酸自行脱羧转变成为丙酮酸。反应。反应6060分钟后，加入分钟后，加入2 2，4-4-二硝二硝

29、基苯肼终止反应基苯肼终止反应，并与，并与酮酸生反应生成两种酮酸生反应生成两种2 2，4-4-二硝基苯腙二硝基苯腙。在碱性条件下在碱性条件下,两种苯腙的吸收光谱曲线有差别，在两种苯腙的吸收光谱曲线有差别，在505nm505nm处差处差异最大，由草酸乙酸转变成的丙酮酸所生成的苯腙呈色强度显异最大，由草酸乙酸转变成的丙酮酸所生成的苯腙呈色强度显著大于著大于-酮戊二酸苯腙酮戊二酸苯腙。据此可用比色法测定。据此可用比色法测定ASTAST活性。活性。（）方法评价：（）方法评价：赖氏法的实验结果需与赖氏法的实验结果需与卡门分光法的结果卡门分光法的结果对比后求出；对比后求出；该法的重复性差：该法的重复性差：负

30、干扰现象负干扰现象 【参考范围参考范围】828卡门氏单位卡门氏单位 【临床意义临床意义】肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎：血清肌炎、胸膜炎、肾炎及肺炎：血清ASTAST也可轻度增高。也可轻度增高。心肌梗死：血清中心肌梗死：血清中ASTAST活性增高活性增高 各种肝病病人：血清各种肝病病人：血清ASTAST的升高的升高 (二二)ALP)ALP测定测定 n化学法化学法n连续监测法：连续监测法：鲍氏法鲍氏法金氏法金氏法皮氏法皮氏法、金氏法测定、金氏法测定ALPALP （）原理（）原理：ALPALP在碱性环境中作用于在碱性环境中作用于磷酸苯二钠磷酸苯二钠，使之水解释放出，使之水解释放出酚酚和磷酸和磷酸。酚在碱

31、性溶液中与酚在碱性溶液中与4 4氨基安替比林作用，经铁氰化氨基安替比林作用，经铁氰化钾氧化形成红色醌类化合物钾氧化形成红色醌类化合物，根据红色深浅确定，根据红色深浅确定ALPALP的活力。的活力。(2)(2)方法评价：方法评价：磷酸苯二钠比色法与更早的磷酸苯二钠比色法与更早的-甘油磷酸钠法甘油磷酸钠法相比具有较大的相比具有较大的优点，如优点，如水解速度快，保温时间较短、灵敏度较高、显色稳定、水解速度快，保温时间较短、灵敏度较高、显色稳定、不需去蛋白、操作简单、快速不需去蛋白、操作简单、快速。但与。但与磷酸对硝基酚连续监测法磷酸对硝基酚连续监测法相比，准确度、精密度较低；操作比较繁琐相比，准确度

32、、精密度较低；操作比较繁琐,，灵敏度低。，灵敏度低。【参考范围参考范围】成人：成人：3 313 13 单位单位 ，儿童：，儿童：5 52828单位单位 ALPALP金氏单位金氏单位定义是定义是100ml100ml血清，血清，3737与底物保温与底物保温1515分钟，产生分钟，产生1mg1mg酚为酚为1 1个金氏单位。个金氏单位。ALPALP主要用于诊断肝胆和骨骼疾病主要用于诊断肝胆和骨骼疾病 【临床意义临床意义】(三三)GGT)GGT测定法测定法 化学法（重氮反应比色法）和连续监测法。化学法（重氮反应比色法）和连续监测法。1.1.重氮反应比色法测定重氮反应比色法测定GGTGGT原理：原理：【参

33、考范围参考范围】男性男性 3 3 17 U/L17 U/L；女性女性 2 2 13 U/L13 U/L2.2.连续监测法测定连续监测法测定GGTGGT(1)(1)原理：原理：(2)(2)方法评价：方法评价：(2)(2)方法评价：方法评价：重氮比色法活性单位：重氮比色法活性单位：100ml血清在血清在37下反应下反应1hr,生成生成0.5mol的的-苯胺为苯胺为1个个GGT活性单位。活性单位。男性：男性：111150 U/L50 U/L；(以以-谷氨酰谷氨酰-3-3-羧基羧基-4-4-硝基苯胺为底物硝基苯胺为底物)女性：女性：7 732 U/L 32 U/L 男性：男性：40U/L40U/L；女

34、性：；女性：30U/L(30U/L(以以-谷氨酰谷氨酰-4-4-硝基苯胺为底物硝基苯胺为底物)【参考范围参考范围】(四四)MAO)MAO测定测定 原理原理:MAOMAO主要作用于主要作用于CH2-NH2CH2-NH2基团，在氧参与下，氧化脱氨生成基团，在氧参与下，氧化脱氨生成相应的卞醛、氨及过氧化氢。以苄氨偶氮相应的卞醛、氨及过氧化氢。以苄氨偶氮-萘酚为底物萘酚为底物,在在O2O2和和H20H20参与下，参与下，MAOMAO催化生成苄醛偶氮催化生成苄醛偶氮-萘酚、氨及过氧化萘酚、氨及过氧化氢，用环己烷抽提后进行比色测定。氢，用环己烷抽提后进行比色测定。(2)(2)方法评价：方法评价：【单位定义

35、单位定义】：1ml1ml血清与底物在血清与底物在3737孵育孵育6060分钟，催化单胺氧化产生分钟，催化单胺氧化产生1nmol1nmol苄醛偶氮苄醛偶氮-萘酚为萘酚为1 1 个个MAOMAO单位。单位。【参考范围参考范围】12 1240 U/ml (1240 U/ml (121031034040103 U/L)103 U/L)。【临床意义临床意义】：肝硬化时，肝纤维化现象十分活跃，肝硬化时，肝纤维化现象十分活跃，MAOMAO活性明显升高。活性明显升高。三、血清胆红素测定三、血清胆红素测定重氮盐法重氮盐法胆红素氧化酶胆红素氧化酶(bilirubin oxidase,BOD)(bilirubin

36、oxidase,BOD)法法高效液相色谱法高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)(high performance liquid chromatography,HPLC)、导数分光光度法导数分光光度法直接分光光度计法直接分光光度计法 测测定定方方法法1 1重氮盐改良重氮盐改良J-G(Jendrassik and Grof method,J-G)J-G(Jendrassik and Grof method,J-G)法法(1)(1)原理原理:血清中血清中结合胆红素与重氮盐反应生成偶氮胆红素结合胆红素与重氮盐反应生成偶氮胆红素；同样条

37、；同样条件下，件下，游离胆红素需要在加速剂作用下游离胆红素需要在加速剂作用下，使游离胆红素分子，使游离胆红素分子内的内的次级键断裂次级键断裂，极性上升并与重氮试剂反应。反应完成后，极性上升并与重氮试剂反应。反应完成后加入加入终止试剂终止试剂，继而加入，继而加入碱性酒石酸钾钠碱性酒石酸钾钠使紫色偶氮试剂转使紫色偶氮试剂转变为蓝色，波长变为蓝色，波长600nm600nm下比色分析，求出血样中总胆红素的含下比色分析，求出血样中总胆红素的含量。量。(2)(2)方法评价：方法评价：推荐的常规方法，其方法的线性范围较宽，在推荐的常规方法，其方法的线性范围较宽，在342mol/L(200mg/L)342mo

38、l/L(200mg/L)浓度下有较好的准确性和精确性，浓度下有较好的准确性和精确性，高浓度时准确性高浓度时准确性和精确性降低和精确性降低。因此，建议浓度过高时减少血样用量测定。因此，建议浓度过高时减少血样用量测定。【临床意义临床意义】【参考范围参考范围】黄疸的鉴别诊断黄疸的鉴别诊断 总胆红素总胆红素:5.1:5.119.0mol/L(0.319.0mol/L(0.31.1mg/dL)1.1mg/dL)直接胆红素直接胆红素:1.71:1.716.8mol/L(0.16.8mol/L(0.10.4mg/dL)0.4mg/dL)2 2胆红素胆红素BODBOD测定法测定法(1)(1)原理原理:BOD

39、BOD在不同在不同pHpH条件下催化不同组份的条件下催化不同组份的胆红素氧化生成胆绿素胆红素氧化生成胆绿素，胆绿素与氧进行非酶促反应转变为淡紫色化合物胆绿素与氧进行非酶促反应转变为淡紫色化合物，胆红素的最大，胆红素的最大吸收峰在吸收峰在450nm450nm 附近。随着胆红素被氧化附近。随着胆红素被氧化,450nm,450nm下降，下降程度下降，下降程度与胆红素浓度成正比与胆红素浓度成正比。；在。；在pH8.0pH8.0条件下条件下,未结合胆红素及结合胆未结合胆红素及结合胆红素均被氧化，用于测定红素均被氧化，用于测定总胆红素总胆红素,在在pH=4.5pH=4.5的酸性条件下，的酸性条件下，BOD

40、BOD仅能催化结合胆红素和大部分仅能催化结合胆红素和大部分胆红素，而游离胆红素不被氧化，胆红素，而游离胆红素不被氧化，测定其含量代表测定其含量代表结合胆红素结合胆红素。(2)(2)方法评价：方法评价：BODBOD法测定总胆红素的准确性、精密度比改良法测定总胆红素的准确性、精密度比改良J-GJ-G法好法好 【参考范围参考范围】血清总胆红素：血清总胆红素：10.2610.264.10mol/L 4.10mol/L 血清结合胆红素：血清结合胆红素：2.572.572.56 mol/L 2.56 mol/L 胆红素胆红素mol/L=mol/L=胆红素胆红素mg/L X 17.1mg/L X 17.1【

41、临床意义临床意义】见重氮比色法见重氮比色法四、血清胆汁酸测定四、血清胆汁酸测定高效液相色谱法高效液相色谱法放射免疫分析法放射免疫分析法酶免疫分析法酶免疫分析法比色分析测定法比色分析测定法 测测定定方方法法(1)(1)酶比色法测定原理酶比色法测定原理 3-HSD3-HSD胆汁酸胆汁酸 +NAD+NAD+3-3-氧氧-5-5类固醇类固醇+NADH +NADH （1 1）NADH+NBT NADH+NBT 甲甲jiejie（蓝色化合物（蓝色化合物 =540nm=540nm）（2 2）3-3-氧氧-5-5类固醇类固醇 +NAD+NAD+3-3-氧氧-5-5类固醇类固醇 +NADH +NADH （3 3

42、）黄递酶黄递酶4 4-DH-DHu酶比色法酶比色法 由于胆汁酸在血中含量低，方法检测的灵敏度达不到要求，通过由于胆汁酸在血中含量低，方法检测的灵敏度达不到要求，通过增加增加3-3-氧氧-5-5-类固醇脱氢酶类固醇脱氢酶(4-DH)4-DH)，胆汁酸经，胆汁酸经3-HSD3-HSD催化的产物催化的产物3-3-氧代胆酸在氧代胆酸在4-DH4-DH作用下再作用下再次脱氢，加大了次脱氢，加大了NADHNADH的生成量，提高了反应的检测能力（见反应式的生成量，提高了反应的检测能力（见反应式1 1、2 2、3 3）。但。但以上两种方法都存在一个缺点：生成的蓝色产物是一种染料，易于附着管壁，难于清以上两种方

43、法都存在一个缺点：生成的蓝色产物是一种染料，易于附着管壁，难于清洗或堵塞管道。洗或堵塞管道。酶循环法测定原理为：酶循环法测定原理为：NADNAD+Thio-NAD Thio-NAD Thio-NADH Thio-NADH 胆汁酸胆汁酸3-3-氧代胆汁酸氧代胆汁酸NADHNADH3-HSD(2)(2)酶比色测定法评价：酶比色测定法评价：快速、简便、准确、可靠和适用的优点。它即可以手工操作快速、简便、准确、可靠和适用的优点。它即可以手工操作、也可以在自动化仪器上进行。但试剂价贵、不易保持。对酶量、也可以在自动化仪器上进行。但试剂价贵、不易保持。对酶量的要求严格，以保证酶促反应在零级反应下进行，酶量

44、不足易产的要求严格，以保证酶促反应在零级反应下进行，酶量不足易产生误差。生误差。此外，标准品的制备非常重要。常采用甘氨胆酸溶入小此外，标准品的制备非常重要。常采用甘氨胆酸溶入小牛血清中制成冻干品牛血清中制成冻干品。【参考范围参考范围】1 1 7 mol/L7 mol/L(成人空腹血清总胆汁酸成人空腹血清总胆汁酸)【临床意义临床意义】任何引起肝细胞损伤的病理过程都可能引起血中胆汁酸升高任何引起肝细胞损伤的病理过程都可能引起血中胆汁酸升高可见于各种类型的肝病、肝硬化、脂肪肝，也见于急慢性胆道阻可见于各种类型的肝病、肝硬化、脂肪肝，也见于急慢性胆道阻塞。其中空腹胆汁酸测定是一种敏感、特异性强并相对简

45、单的肝塞。其中空腹胆汁酸测定是一种敏感、特异性强并相对简单的肝功能试验，是目前公认最敏感的肝功能试验之一。特别适用于可功能试验，是目前公认最敏感的肝功能试验之一。特别适用于可疑有肝病但其它生化试验正常或轻度异常的病人诊断。疑有肝病但其它生化试验正常或轻度异常的病人诊断。五、血氨测定五、血氨测定n为一步法，也叫直接测定即不需从全血中分离出氨即可直接测定为一步法，也叫直接测定即不需从全血中分离出氨即可直接测定 n两步法，即先从全血中分离出氨两步法，即先从全血中分离出氨,而后再进行测定；而后再进行测定；微量扩散法、离子交换法微量扩散法、离子交换法 酶法和氨电极法酶法和氨电极法 原理：原理：血浆中的氨

46、在足量血浆中的氨在足量-酮戊二酸和酮戊二酸和NADPHNADPH存在时，经谷氨酸存在时，经谷氨酸 脱氢酶作用生成谷氨酸脱氢酶作用生成谷氨酸,并消耗并消耗NADPHNADPH，NADPHNADPH的下降速率与血浆的下降速率与血浆氨浓度成正比。氨浓度成正比。NHNH3 3-酮戊二酸酮戊二酸NADPH NADPH 谷氨酸谷氨酸NADPNADP+H H2 2O O谷氨酸脱氢酶速率法：谷氨酸脱氢酶速率法：谷氨酸脱氢酶谷氨酸脱氢酶(2)(2)方法评价：方法评价：本法特异性强、分析时间短，是较为理想的氨分析方法。在本法特异性强、分析时间短，是较为理想的氨分析方法。在200200mol/Lmol/L范围内、线

47、性良好。精密度：批内范围内、线性良好。精密度：批内CV=3.9%CV=3.9%；批间；批间CV=4.5%CV=4.5%。回。回收率为收率为97.9%97.9%102.7%102.7%。【参考范围参考范围】血氨测定在诊断治疗肝性脑病中占有重要作用。血氨测定在诊断治疗肝性脑病中占有重要作用。【临床意义临床意义】1872mol/L(酶法酶法)二、肝功能试验的分类二、肝功能试验的分类第三节第三节 肝功能试验选择原则肝功能试验选择原则一、肝功能试验选择原则一、肝功能试验选择原则1、选择原则：、选择原则：任何单项的检查都不能涵盖肝功的全貌，理想的任何单项的检查都不能涵盖肝功的全貌，理想的肝功能检查项目应该

48、是：肝功能检查项目应该是：诊断灵敏度高诊断灵敏度高 诊断特异性强诊断特异性强 对不同疾病鉴别的选择性好对不同疾病鉴别的选择性好 但目前尚难找出完全符合条件的实验项目，故应遵循但目前尚难找出完全符合条件的实验项目，故应遵循以下原则：以下原则：根据实验项目的性质和特点根据实验项目的性质和特点 按临床实际应用的需要按临床实际应用的需要 结合具体病情及所在实验室条件结合具体病情及所在实验室条件2、实验项目的合理组合与筛选：、实验项目的合理组合与筛选：肝功项目联合检查，肝功项目联合检查，首选首选诊断价值高、操诊断价值高、操作简便、价格低廉的项目，对可疑病人加以筛选；作简便、价格低廉的项目，对可疑病人加以

49、筛选；然后然后再根据具体情况增加相对特异的实验项目，再根据具体情况增加相对特异的实验项目，避免滥检查，应遵循的原则是：避免滥检查，应遵循的原则是：一般选用一般选用35个项目；个项目；实验结果应能反映肝脏的主要功能和损伤实验结果应能反映肝脏的主要功能和损伤情况；情况；方法简便，易于标准化；方法简便，易于标准化；病人痛苦小，经济负担低。病人痛苦小，经济负担低。肝功能实验基肝功能实验基础础类型内容以肝脏产生或合成的物质为基础Alb、CHE、凝血因子以肝脏产生代谢物质为基础药物、异源性物质、Bil、ch、TG等以受损组织释放或合成增多的物质为基础AST、ALT、ALP、-GT、5-NT等以肝脏清除排泄物质为基础内源性：胆汁酸、Bil、氨等外源性：吲哚绿、半乳糖、BSP等谢谢你的阅读v知识就是财富v丰富你的人生