1、现代生物制药技术细胞工程技术与免疫技术药物教学目标【学习目的】学习生化反应制药中所应用的免疫学、细胞工程的基本概念,免疫学及细胞工程的技术、方法,了解细胞工程技术与免疫技术药物发展的现状与趋势。【知识要求】掌握免疫学、细胞工程的基本概念,掌握疫苗、免疫蛋白、单克隆抗体、免疫诊断试剂的概念、种类,熟悉其应用。【能力要求】掌握典型的疫苗、免疫蛋白、单克隆抗体、免疫诊断试剂的制备手段,掌握利用动、植物细胞作为制药载体的基本实验方法。第一节 免疫学基础与细胞工程技术一、什么是免疫(一)传统免疫的概念 免疫(immunity),其原意为免除瘟疫,是指当人体患某种传染病痊愈后,该患者对所患传染病就有一定的
2、抵抗力。如天花患者痊愈后不会再次感染天花病毒。这使人们片面地认为免疫就是机体抗感染的防御功能第一节 免疫的概念与功能一、免疫及医学免疫学的概念(二)现代免疫的概念 是机体识别“自己”和“非已”,排除“非已”,维护机体内环境平衡和稳定的一种功能1、免疫功能及表现 功 能 正常表现(利)异常表现(害)免疫防御 抗感染 高:超敏反应 低:免疫缺陷免疫稳定 清除损伤衰老细胞 自身免疫病免疫监视 抗肿瘤、抗病毒 肿瘤、病毒持续感染 第一节 免疫的概念与功能第一节 免疫的概念与功能保护自己保护自己排除异己排除异己超敏反应超敏反应免疫损伤免疫损伤免疫缺陷免疫缺陷2、免疫系统免疫系统(1)免疫器官中枢免疫器官
3、外周免疫器官(2)免疫细胞T细胞B细胞K细胞NK细胞肥大细胞巨噬细胞系统(3)免疫分子免疫球蛋白IgGIgMIgAIgEIgD补体细胞因子作业1、什么是免疫?2、简述免疫系统的组成。3、免疫机理(1)抗原(antigen,Ag)又叫免疫原,是指能刺激机体免疫系统引发免疫应答,并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合,发生免疫效应(特异性反应)的物质。(疫苗)(2)抗体(antibody)是机体在抗原刺激下,由B淋巴细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白(Ig)。主要存在于血液中,也见于其他体液与外分泌液中,是构成机体体液免疫的主要成分。(抗毒素)抗体的分类
4、:按理化性质和生物学功能可分为IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五类;抗体的功能a.结合特异性抗原,b.激活补体,c.结合细胞,d.自然被动免疫初次应答潜伏期长;而再次应答潜伏期明显缩短初次应答产生抗体滴度低;而再次应答产生抗体滴度高;初次应答抗体在体内持续时间短;再次应答抗体在体内持续时间长;初次应答抗体以IgM为主;再次应答以IgG为主。作业1、名词解释:抗原、抗体2、简述抗体的功能。3、简述抗体产生的一般规律。二、什么是细胞工程细胞工程就是在细胞水平上进行人工操作,也称作细胞操作技术。细胞工程的内容包括细胞培养、细胞遗传操作、细胞保藏及将已转化的细胞用于生产实践等。按照研究对象的不同
5、,可分为植物细胞工程和动物细胞工程。1.细胞的生长特点(1)动物细胞的生长特点 附着载体生长 接触抑制现象 动物细胞没有细胞壁 培养工艺极为严格1.细胞的生长特点(2)植物细胞的生长特点 植物细胞具有细胞壁,容易聚集,需搅拌 全能性2.动物细胞的培养(1)生产用动物细胞系原代细胞系二倍体细胞系连续细胞系基因工程细胞系2.动物细胞的培养(2)动物细胞的保藏液氮(-196)冷冻速率和复苏速率冷冻保护剂2.动物细胞的培养(3)动物细胞的培养条件无菌、无毒的环境适宜的温度、湿度和光线渗透压营养成分pH和气体环境2.动物细胞的培养(4)动物细胞的培养工艺 贴壁培养 悬浮培养 悬浮-贴壁培养 固定化细胞3
6、.植物细胞培养(1)植物组织的培养培养要求(培养基、外植体、消毒)愈伤组织的诱导与继代培养愈伤组织的分化与植株再生3.植物细胞培养(2)植物细胞的培养植物细胞培养基同组织培养基类似注意温度的控制作业1.什么是细胞工程?包括哪些内容?2.动植物细胞培养各自有哪些特点?3.什么是细胞融合?促细胞融合的因素都有哪些?4.生产中常用哪些动物细胞系?第二节 疫苗与免疫球蛋白一、疫苗的制备1,疫苗的概念与分类疫苗,是指将病原微生物(如细菌、病毒等)及其代谢产物(如类毒素),经过人工减毒、灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的主动免疫制剂。一、疫苗的制备1、疫苗的概念与分类灭活疫苗减毒活疫苗基因工程
7、疫苗一、疫苗的制备1、疫苗的概念与分类灭活疫苗减毒活疫苗基因工程疫苗一、疫苗的制备1、疫苗的概念与分类灭活疫苗减毒活疫苗基因工程疫苗一、疫苗的制备2,病毒类疫苗的制备(1)毒种的选择和减毒(2)病毒的繁殖(3)疫苗的灭活(4)疫苗的纯化(5)冻干3、细菌类疫苗和类毒素的制备(1)菌的选择(2)培养基营养(3)培养条件的控制(4)杀菌(5)稀释二、免疫蛋白的制备免疫蛋白是另一类免疫类药物,包括人体注射用抗毒素、免疫球蛋白、白蛋白或细胞因子等。这一类蛋白制品,不是由被接种者自己产生的,但可以调节机体的免疫机能,起到治疗或紧急预防感染的作用,属于人工被动免疫。二、免疫蛋白的制备1、抗毒素抗毒素是指细
8、菌毒素(通常指外毒素)的对应抗体或含有这种抗体的免疫血清,具有中和相对应外毒素毒性的作用。二、免疫蛋白的制备2,免疫球蛋白人免疫球蛋白制剂是从混合血浆或胎盘血中分离制成的免疫球蛋白浓缩剂,属于血液制品。(1)人免疫球蛋白(2)白蛋白二、免疫蛋白的制备3.细胞因子细胞因子是指由活化免疫细胞或非免疫细胞合成分泌的有生物学效应的小分子多肽。分为淋巴因子和单核因子两类。细胞因子的提取方法制备的量很低,主要是通过细胞培养获得。作业1、什么是疫苗?疫苗的发展经历了几个阶段?2、制备病毒类疫苗为什么要进行减毒?如何减毒?3、为什么菌苗制备后还要进行灭活?菌苗的灭活都有哪些方法?4、疫苗为什么要冻干?请简述冻干工艺的操作要点。5、常用的抗毒素有哪些?其制备和抗生素的制备有什么不同?,请简述白蛋白的制备工艺。