生物膜实践与应用课件.ppt

1、1 生物膜理论与实践生物膜理论与实践 手术人员手术人员 35%35%口口、鼻鼻、手手手术器械手术器械 10%10%空气空气 5%5%手术部位细菌来源手术部位细菌来源*:Christopher T.Drake,Ann.Surgery 1977.病人病人皮肤皮肤 50%50%2骨科手术最关键的是防止感染骨科手术最关键的是防止感染 髋关节置换术：如感染，死亡率髋关节置换术：如感染，死亡率50%3 生物膜形成生物膜形成细菌污染细菌污染种植种植细菌负荷增加细菌负荷增加感染感染手术薄膜手术薄膜细菌繁殖细菌繁殖 SSISSI感染的过程感染的过程皮肤准备皮肤准备无薄膜无薄膜/薄薄膜起边膜起边所有接触伤口周围皮

2、肤的物品所有接触伤口周围皮肤的物品细菌移行条件细菌移行条件血液血液刺激刺激薄膜回缩薄膜回缩异体植入物异体植入物关节置换关节置换支架支架等等病人危险因素病人危险因素MRSA/MRSE菌落菌落糖尿病糖尿病肿瘤肿瘤免疫力低下免疫力低下高龄高龄创伤创伤肥胖肥胖手术史手术史植入植入物物 手术手术无植入物无植入物 手术手术引起感染的细引起感染的细菌菌=100/g引起感染的细菌引起感染的细菌=1,000,000/g细菌在植入物上形成生物膜细菌在植入物上形成生物膜4 切口深部组织的切口深部组织的SSIu 感染发生在手术后感染发生在手术后:30 天以内（无植入物）天以内（无植入物）或或1 年以内（有植入物）年以

3、内（有植入物）感染与外科手术有关感染与外科手术有关5 植入物与生物膜关系植入物与生物膜关系u 植入物，大大增加感染发生植入物，大大增加感染发生u 活细菌，容易附着于植入物活细菌，容易附着于植入物u 抗菌素和人体免疫系统无法到达植入物表面抗菌素和人体免疫系统无法到达植入物表面 u 植入物上少量细菌不易杀灭，逐渐形成生物膜植入物上少量细菌不易杀灭，逐渐形成生物膜u 一旦生物膜形成，需一旦生物膜形成，需2000多倍抗菌素用量杀灭细菌多倍抗菌素用量杀灭细菌u 通常只能去除植入物，无其它有效治疗方法通常只能去除植入物，无其它有效治疗方法u 死亡率高：死亡率高：5-60%6 器械上生物膜器械上生物膜u 影

4、响清洗过程，很难清洗彻底，尤其是软式内镜影响清洗过程，很难清洗彻底，尤其是软式内镜u 腐蚀器械，影响器械功能腐蚀器械，影响器械功能u 影响消毒灭菌因子的穿透，导致消毒灭菌失败影响消毒灭菌因子的穿透，导致消毒灭菌失败u 降低化学灭菌剂的活性降低化学灭菌剂的活性u 持续性释放微生物污染，导致病人感染持续性释放微生物污染，导致病人感染 78 内镜感染控制内镜感染控制 生物膜形成是内镜感染的重要原因生物膜形成是内镜感染的重要原因美国内镜规范美国内镜规范910 生物膜定义生物膜定义u 生物膜（或叫生物被膜）生物膜（或叫生物被膜）Bacterical Biofilm-BF:集聚的细菌和细胞外物质，紧紧地粘

5、附在表面并不容集聚的细菌和细胞外物质，紧紧地粘附在表面并不容 易被去除易被去除 一些微生物，在水中或水溶液或体内（如：血流）生一些微生物，在水中或水溶液或体内（如：血流）生 长时，有能力粘附表面，然后包埋在多聚糖基质中。长时，有能力粘附表面，然后包埋在多聚糖基质中。基质含细胞，活和死的微生物和多聚糖，阻止抗菌剂如基质含细胞，活和死的微生物和多聚糖，阻止抗菌剂如 灭菌剂、消毒剂和抗菌素到达微生物灭菌剂、消毒剂和抗菌素到达微生物 AAMI ST79（Donlan,2002)11 生物膜生物膜u多数细菌是附着在有生命或无生命物体表面多数细菌是附着在有生命或无生命物体表面 u首次发现于溪流首次发现于溪

6、流 u在温湿度、营养合适的任何表面在温湿度、营养合适的任何表面u 99%的细菌生活在生物膜内的细菌生活在生物膜内u1978 Costerton等首先提出了等首先提出了BF理论理论uBF是细菌在物体表面形成的高度组织化的多细胞结构是细菌在物体表面形成的高度组织化的多细胞结构u同一菌株的同一菌株的BF细菌和浮游生长细菌具有不同的特性细菌和浮游生长细菌具有不同的特性u对抗生素和免疫防御机制的抗性很强，导致严重的临床问题对抗生素和免疫防御机制的抗性很强，导致严重的临床问题u20世纪世纪70年代末，作为独立学科发展年代末，作为独立学科发展u1990年，蒙大拿州立大学建立了世界上第一个生物膜工程中心年，蒙

7、大拿州立大学建立了世界上第一个生物膜工程中心u目前国内外越来越重视目前国内外越来越重视 12牙科器械牙科器械隐形眼镜隐形眼镜航海航海水管系统水管系统生物膜在生活中无处不在生物膜在生活中无处不在花瓶内部的粘液花瓶内部的粘液城市输水管路城市输水管路牙科器械与管路牙科器械与管路快餐店的制冰机快餐店的制冰机饮水机饮水机牙菌斑牙菌斑隐形眼镜隐形眼镜生活中的生物膜生活中的生物膜13 生物膜结构特点生物膜结构特点u 细菌细菌:致病、异物致病、异物u 水份含量：水份含量：97%u 分泌的胞外多聚物包括：分泌的胞外多聚物包括：-胞外多糖胞外多糖(典型特征典型特征)extracellular polysaccha

8、ride,EPS -糖蛋白糖蛋白u EPS在细菌形成生物膜结构、免疫逃避和毒力发挥中起重在细菌形成生物膜结构、免疫逃避和毒力发挥中起重 要作用要作用u 吸附：营养物质，代谢产物，细菌裂解产物吸附：营养物质，代谢产物，细菌裂解产物u 含有：蛋白质、多糖、含有：蛋白质、多糖、DNA、RNA、肽聚糖、脂和磷脂等、肽聚糖、脂和磷脂等14 细菌被大量的胞外多糖包绕形成微菌落，各个微菌落之细菌被大量的胞外多糖包绕形成微菌落，各个微菌落之间充满水通道，是细菌获取营养和排除代谢废物的通道间充满水通道，是细菌获取营养和排除代谢废物的通道Marc habas等人等人成熟生物膜从外到内：成熟生物膜从外到内：生物膜层

9、生物膜层 连接层连接层 条件层条件层 基质层基质层 生物膜结构生物膜结构15细菌生物膜的观察细菌生物膜的观察 扫描电子显微镜扫描电子显微镜16细菌生物膜的观察激光共聚显微镜技术细菌生物膜的观察激光共聚显微镜技术17 生物膜形成生物膜形成1.细菌粘附：细菌粘附：形成形成BF第一步第一步 -在鞭毛作用下移行至异物（如医疗在鞭毛作用下移行至异物（如医疗 设备、机械瓣膜、内置导管）或死设备、机械瓣膜、内置导管）或死 亡组织（如坏死亡组织（如坏死 骨片）表面骨片）表面 -在菌毛作用下粘附固着在菌毛作用下粘附固着2.BF发展规律：发展规律：-生长和繁殖生长和繁殖 -分泌大量分泌大量EPS（胞外多糖）（胞外

10、多糖）-EPS可粘结单个细菌形成细菌团块，既微菌落可粘结单个细菌形成细菌团块，既微菌落 -大量微菌落使大量微菌落使BF加厚加厚 -细胞启动胞间信号系统，产生胞间信号细胞启动胞间信号系统，产生胞间信号18 生物膜形成生物膜形成3.BF的成熟：的成熟：-结构不均匀，类似蘑菇形状的微菌落组成结构不均匀，类似蘑菇形状的微菌落组成 -菌落之间围绕着输水通道，可以运送养料、菌落之间围绕着输水通道，可以运送养料、酶、代谢产物和排出废物，形成原始的循酶、代谢产物和排出废物，形成原始的循 环系统环系统 -因菌种、营养、附着表面和环境条件不同，因菌种、营养、附着表面和环境条件不同，形成疏松或致密以及厚薄不等的形成

11、疏松或致密以及厚薄不等的BF结构结构 -动态过程动态过程 -由纯菌种形成，也可由多菌种组成由纯菌种形成，也可由多菌种组成 -释放游离细菌，游离细菌粘附，形成新的循环系统释放游离细菌，游离细菌粘附，形成新的循环系统19生物膜的形成生物膜的形成l 细菌的可逆吸附；细菌的可逆吸附；l 细菌的不可逆吸附；细菌的不可逆吸附；l 细菌的生长和分裂；细菌的生长和分裂；l 胞外聚合物产生；胞外聚合物产生；l 其他生物附着；其他生物附着；20 生物膜与疾病关系生物膜与疾病关系u细菌可在人体组织如牙齿、牙龈、皮肤、肺、尿道及其它器官细菌可在人体组织如牙齿、牙龈、皮肤、肺、尿道及其它器官 的表面形成的表面形成BF，

12、引起诸如牙周病、龋齿、慢性支气管炎、败血，引起诸如牙周病、龋齿、慢性支气管炎、败血 病、血栓性静脉炎、难治性肺部感染和心内膜炎等疾病。病、血栓性静脉炎、难治性肺部感染和心内膜炎等疾病。u在血液、组织液和淋巴液等体液中一般不形成在血液、组织液和淋巴液等体液中一般不形成BF。u体液有适合细菌生长的有机营养成分。体液有适合细菌生长的有机营养成分。u体液中含有细菌，可在无生命物体表面体液中含有细菌，可在无生命物体表面 形成形成BF(如隐形眼睛、人工关节和心脏如隐形眼睛、人工关节和心脏 人工瓣膜等人工瓣膜等)。u植入物增加细菌形成生物膜植入物增加细菌形成生物膜u大约大约65%人类细菌性感染由人类细菌性感

13、染由 BF细菌引起的。细菌引起的。21 细菌生存的一种机制细菌生存的一种机制 抵抗力大大增强抵抗力大大增强 细菌集合体粘附于器物表面，并通过分泌的粘性细菌集合体粘附于器物表面，并通过分泌的粘性 基质形成菌落基质形成菌落 菌落个体之间进行信号传递，整体适应外部环境菌落个体之间进行信号传递，整体适应外部环境 生物膜特点生物膜特点22 生物膜对消毒、灭菌的影响生物膜对消毒、灭菌的影响 芽胞包裹的效果芽胞包裹的效果 灭菌过程灭菌过程 压力蒸汽压力蒸汽 干热干热 环氧乙烷环氧乙烷 121 121 54_芽胞芽胞 10秒秒 3.5小时小时 30秒秒芽胞在芽胞在CaCO3 结晶结晶 150分分 50小时小时

14、 2周周 _B subtilis spores 8*103,Doyle&Ernst(1967)Appl Micro 726-7302324 生物膜抵抗力生物膜抵抗力u 生物膜中细胞的生理、形态和代谢与游离细胞不同生物膜中细胞的生理、形态和代谢与游离细胞不同u 目前杀菌剂的实验只针对游离细胞，但是并没有针目前杀菌剂的实验只针对游离细胞，但是并没有针 对生物膜里抵抗力更强的细菌对生物膜里抵抗力更强的细菌u 一旦组织、植入物和仪器附着上生物膜，一般清洗一旦组织、植入物和仪器附着上生物膜，一般清洗 很难去除，必须结合其它方法很难去除，必须结合其它方法25 物品处理过程中的生物膜物品处理过程中的生物膜u

15、 医院供水管路：生物膜高发区医院供水管路：生物膜高发区26机器清洗后可以很好去除蛋白质和血液机器清洗后可以很好去除蛋白质和血液27机器清洗后碳水化合物和内毒素反而升高机器清洗后碳水化合物和内毒素反而升高28 清清 洗洗u 如果水的质量受到如果水的质量受到管线中生物膜影响管线中生物膜影响，手术，手术 器械会形成有机残留器械会形成有机残留u 自动清洗器应加强监测保证清洗效果自动清洗器应加强监测保证清洗效果u 水质很重要水质很重要,应该定期监测应该定期监测:AAMI TIR 34:4个必须步骤个必须步骤:步骤步骤1:饮用水质的评价饮用水质的评价 步骤步骤2:执行水处理过程执行水处理过程(如需要如需要

16、)步骤步骤3:保证适当水质用于不同阶段医疗器械再处理保证适当水质用于不同阶段医疗器械再处理 步骤步骤4:持续监测水质持续监测水质29 医疗用品处理过程中的生物膜医疗用品处理过程中的生物膜u 生物膜形成：从几小时到几天生物膜形成：从几小时到几天u 湿性储存：促进湿性储存：促进BF形成形成u 污染物变干：不易清洁污染物变干：不易清洁u 破损表面：细菌堆积破损表面：细菌堆积u 水质质量和清洁剂残留水质质量和清洁剂残留 u 主要出现生物膜的医疗器械：主要出现生物膜的医疗器械：-管腔器械：尤其是软式内镜等管腔器械：尤其是软式内镜等 -清洗器尤其是内镜清洗器清洗器尤其是内镜清洗器 -结构复杂不易清洗医疗器

17、械结构复杂不易清洗医疗器械 -带死腔物品带死腔物品 -植入物植入物 -牙科器械牙科器械 30自动清洗机的生物膜污染自动清洗机的生物膜污染红色与白色生物膜红色与白色生物膜黄色生物膜黄色生物膜31 内镜感染控制内镜感染控制 生物膜形成是内镜感染的重要原因生物膜形成是内镜感染的重要原因美国内镜规范美国内镜规范3271个胃肠镜中的个胃肠镜中的23%其菌量其菌量 105CFU(完成了所有的消毒程序完成了所有的消毒程序)33内镜自动清洗器内镜自动清洗器u自动内镜：爆发绿脓杆菌感染；原因：进水管道、自动内镜：爆发绿脓杆菌感染；原因：进水管道、气道或洗涤器容器气道或洗涤器容器-设计时难以恰当的消毒；形成生设计

18、时难以恰当的消毒；形成生 物膜。爆发的终止用酒精漂洗已经机器处理的内镜，物膜。爆发的终止用酒精漂洗已经机器处理的内镜，接着压缩空气干燥。接着压缩空气干燥。u新的内镜有水过滤器以降低微生物由自来水传给机器新的内镜有水过滤器以降低微生物由自来水传给机器的危险的危险 软式内镜的感染案例软式内镜的感染案例 3436结构复杂难以清洁消毒结构复杂难以清洁消毒u 占占37.14%u 管道复杂：水、气、活检管道复杂：水、气、活检/吸引、纤维光束等结构吸引、纤维光束等结构u 仅仅1.0-1.2mmu 很难机械清洗很难机械清洗u 易于储存不易去除易于储存不易去除 微生物部位：缝隙、微生物部位：缝隙、连接处、咬合处

19、、阀等连接处、咬合处、阀等自动清洁器受污染自动清洁器受污染u 占占29.71%u 未充分清洗未充分清洗u 未充分干燥未充分干燥u 水受污染水受污染37 内道未干燥内道未干燥u 占占4.51%u 微生物如绿脓杆菌等可繁殖微生物如绿脓杆菌等可繁殖39 40 清清 洗洗u 清洗很重要清洗很重要u 要求使用预浸泡要求使用预浸泡,防止污物变干防止污物变干 -尽快使用清洁剂浸泡尽快使用清洁剂浸泡 -防止微生物繁殖和内毒素产生防止微生物繁殖和内毒素产生u 机器清洗机器清洗:可提高清洗效果可提高清洗效果 -第一步第一步:酶洗酶洗 -第二部第二部:碱性洗涤剂碱性洗涤剂(注意对铝金属破坏注意对铝金属破坏)u 日本

20、学者发现日本学者发现:清洗器可以降低清洗器可以降低5个对数羊血个对数羊血u 对于手工清洗对于手工清洗,可以用含消毒剂清洁液可以用含消毒剂清洁液 WFHSS Conference,Crete,October 200941 及时清洁；防止干燥；及时清洁；防止干燥；避免湿性条件避免湿性条件 清洗彻底，尤其是管腔物、复杂物、带死腔设备等；清洗彻底，尤其是管腔物、复杂物、带死腔设备等；一旦形成，要采取多种清洗手段；一旦形成，要采取多种清洗手段；减少异物进入体内；减少异物进入体内；植入物灭菌合格：工业灭菌和医院灭菌植入物灭菌合格：工业灭菌和医院灭菌 严格无菌操作，避免术后植入物污染；严格无菌操作，避免术后

21、植入物污染；降低细菌粘附或杀灭、抑制微生物生长；降低细菌粘附或杀灭、抑制微生物生长；防止器械生物膜形成原则防止器械生物膜形成原则42 生物膜预防生物膜预防u 立即清洗，防止干燥；立即清洗，防止干燥；u 避免过长时间保湿避免过长时间保湿；u 有机物有利于生物膜形成；有机物有利于生物膜形成；u 复杂物品须结合手工刷洗和超声清洗；复杂物品须结合手工刷洗和超声清洗；u 防止器械破损，污物容易堆积于破损处；防止器械破损，污物容易堆积于破损处；u 选择正确清洁剂，并合理使用选择正确清洁剂，并合理使用u 首选碱性清洁剂首选碱性清洁剂+多酶清洁剂：多酶清洁剂：-最佳的清洗组合，最有效地清洁最佳的清洗组合，最有

22、效地清洁u 注意漂洗水质量和水管污染注意漂洗水质量和水管污染u 干燥储存干燥储存u 加强清洗效果的评价和监测加强清洗效果的评价和监测 43有效的清洗取决于多因素有效的清洗取决于多因素有效的清洗是多因素作用的结果：有效的清洗是多因素作用的结果：水：作为溶剂提供清洗作用的介质，并将水：作为溶剂提供清洗作用的介质，并将 污物溶解或悬浮使脱离器械表面污物溶解或悬浮使脱离器械表面机械力：包括擦、刷、机械喷淋或者超声波机械力：包括擦、刷、机械喷淋或者超声波 化学作用：协助污物脱离器械表面，有的化学作用：协助污物脱离器械表面，有的 还伴有杀菌的作用还伴有杀菌的作用热量：增进水或者清洗剂溶液的洗涤效果热量：增

23、进水或者清洗剂溶液的洗涤效果时间：上述作用的充分实现需要一定时间时间：上述作用的充分实现需要一定时间 的保证。的保证。44温温 度度u 选择理想的使用温度：选择理想的使用温度：-过低：降低酶的活性过低：降低酶的活性 -过高：分解酶过高：分解酶u 针对污染物选择合适的酶清洁液：针对污染物选择合适的酶清洁液：-蛋白酶针对蛋白质蛋白酶针对蛋白质 -脂肪酶针对脂肪脂肪酶针对脂肪 -碳水化合物针对碳水化合物碳水化合物针对碳水化合物 -淀粉酶针对纤维素淀粉酶针对纤维素摘自摘自2011年年IAHCSMM大会报告大会报告Biofilms In Medicine&What It Means to Central

24、 Service45稀释比例和稀释比例和pHpH值值u 按厂家的使用指南稀释清洁剂：按厂家的使用指南稀释清洁剂：-过低，影响清洗效果；过高，增加清洁剂残留过低，影响清洗效果；过高，增加清洁剂残留 -手工清洗和机器清洗稀释比例不同手工清洗和机器清洗稀释比例不同u 机器用稀释比例应该机器用稀释比例应该“验收验收”；u 手工清洗量具和容器刻度应该正确；手工清洗量具和容器刻度应该正确；u 保证容器足够大和深，能完全浸没设备；保证容器足够大和深，能完全浸没设备；u 保证保证pH 值在设定范围：值在设定范围：-pH 值越高，清洗效果越好，但腐蚀性增强值越高，清洗效果越好，但腐蚀性增强摘自摘自2011年年I

25、AHCSMM大会报告大会报告Biofilms In Medicine&What It Means to Central Service 46正确使用多酶清洗剂(以蛋白酶为例)pH相对酶活相对酶活/%温度/相对酶活相对酶活/%初始相对酶活（初始相对酶活（%）初始相对酶活（初始相对酶活（%）某蛋白酶活性/稳定性随温度的变化某蛋白酶活性/稳定性随pH的变化最佳使用条件：温度 3560 pH 7.010.547浸泡时间浸泡时间u 按厂方要求拆卸所有部件进行恰当清洁按厂方要求拆卸所有部件进行恰当清洁u 至少浸泡推荐的最低时间至少浸泡推荐的最低时间u 过长时间浸泡可能腐蚀设备或增加生物膜形成过长时间浸泡可

26、能腐蚀设备或增加生物膜形成u 通过辅助手段如超声、清洗搅拌等通过辅助手段如超声、清洗搅拌等 摘自摘自2011年年IAHCSMM大会报告大会报告Biofilms In Medicine&What It Means to Central Service48 清洗清洗u奥地利研究发现奥地利研究发现:-5分钟酶洗时间太短分钟酶洗时间太短 -酶洗酶洗:15分钟分钟;碱性洗涤剂碱性洗涤剂:10分钟分钟u 应进行验收应进行验收u 5.3.9.3 医用清洗剂医用清洗剂（软式内镜清洗消毒技术初稿）（软式内镜清洗消毒技术初稿）a)应选择适用于软式内镜的低泡医用清洗剂。应选择适用于软式内镜的低泡医用清洗剂。b)可根

27、据需要选择特殊用途的医用清洗剂，如具有去除生物可根据需要选择特殊用途的医用清洗剂，如具有去除生物膜作用的医用清洗剂。膜作用的医用清洗剂。49使用合理清洗工具使用合理清洗工具u 真确的直径真确的直径u 正确的长度正确的长度u 真确的柔软度真确的柔软度/硬度硬度u 真确的顶端设计真确的顶端设计u 刷毛类型、硬度、密度刷毛类型、硬度、密度摘自摘自2011年年IAHCSMM大会报告大会报告Biofilms In Medicine&What It Means to Central Service 清洁刷清洁刷 刷毛必须接触管壁刷毛必须接触管壁 去除污物去除污物 刷毛太小不能刷毛太小不能 接触管壁接触管壁

28、 刷毛太大往后倒刷毛太大往后倒 不能清洁不能清洁 5051漂漂 洗洗u 恰当地漂洗可以去除：恰当地漂洗可以去除：-清洁液残留清洁液残留 -去除沉积的矿物质去除沉积的矿物质 -去除污染物去除污染物u 漂洗完全：漂洗完全：-设备厂商要求设备厂商要求 -清洁液；体积；漂洗时间清洁液；体积；漂洗时间u 再处理水质必须符合设备厂商和国家标准要求再处理水质必须符合设备厂商和国家标准要求摘自摘自2011年年IAHCSMM大会报告大会报告Biofilms In Medicine&What It Means to Central Service52水水 质质u 漂洗水质非常重要漂洗水质非常重要u 差的漂洗水导致

29、：差的漂洗水导致：-损伤光学设备损伤光学设备 -内毒素污染内毒素污染 -细菌污染：细菌污染：军团菌，绿脓杆菌，分枝杆菌，军团菌，绿脓杆菌，分枝杆菌，不动杆菌，伯克霍尔德菌不动杆菌，伯克霍尔德菌 53干干 燥燥u 消毒灭菌前干燥：消毒灭菌前干燥：-稀释消毒剂稀释消毒剂 -一些灭菌循环取消：如过氧化氢等离子灭菌一些灭菌循环取消：如过氧化氢等离子灭菌 -水源性微生物定植水源性微生物定植u 安全地干燥和储存安全地干燥和储存u 湿的环境会促进生物膜形成湿的环境会促进生物膜形成 54生物膜对清洗挑战生物膜对清洗挑战 反复使用器械伴随生物膜集聚反复使用器械伴随生物膜集聚 细菌受到基质的保护，更难被清洗细菌受

30、到基质的保护，更难被清洗 成熟的生物膜厚度可达成熟的生物膜厚度可达300个细菌个细菌 干燥的生物膜仅仅降低代谢速率，干燥的生物膜仅仅降低代谢速率，仍然保持活性仍然保持活性 生物膜一旦形成，常规清洗无法去除生物膜一旦形成，常规清洗无法去除 防止生物膜形成，是成功的关键防止生物膜形成，是成功的关键55 生物膜去除生物膜去除u一般清洗手段无法彻底去除生物膜一般清洗手段无法彻底去除生物膜u 建议结合多种方法：建议结合多种方法：-机械清除：刷洗和超声清洗；机械清除：刷洗和超声清洗；-酶清洁剂：酶清洁剂：(1)浓度增加，如：常规使用浓度增加，如：常规使用1:200 或根据厂商规定或根据厂商规定 (2)浸泡

31、时间浸泡时间 (3)多酶；多酶；-含消毒剂清洁剂：清洗和杀菌含消毒剂清洁剂：清洗和杀菌56器械表面预处理：抗菌涂层、离子束预处理、表面活性剂预处理器械表面预处理：抗菌涂层、离子束预处理、表面活性剂预处理使用化学制剂、噬菌体等抑制生物膜基质的生长使用化学制剂、噬菌体等抑制生物膜基质的生长强效灭菌剂杀死细菌强效灭菌剂杀死细菌,然而通常不容易奏效然而通常不容易奏效使生物膜脱离粘附使生物膜脱离粘附 性能优异的性能优异的加酶洗涤剂，辅以机械摩擦加酶洗涤剂，辅以机械摩擦生物膜去除策略生物膜去除策略60分钟含氯制剂处理生物膜分钟含氯制剂处理生物膜外部的细菌被杀死（绿色）外部的细菌被杀死（绿色）内部多数细菌仍

32、存活（红色）内部多数细菌仍存活（红色）Battling Biofiles,200157理想去除生物膜的清洁剂理想去除生物膜的清洁剂杀菌成分杀菌成分高效高效多酶多酶特殊表面特殊表面活性剂活性剂生物膜生物膜 特殊表面活性剂去除特殊表面活性剂去除 生物膜表面污物生物膜表面污物 杀菌成分有效杀灭关杀菌成分有效杀灭关 键微生物键微生物 高效多酶分解多聚物高效多酶分解多聚物 基质基质 配方协同增效配方协同增效58污物污物基质基质 内层生物膜内层生物膜活跃细菌活跃细菌 静息细菌静息细菌123456加酶洗涤剂的作用原理加酶洗涤剂的作用原理生物膜混合了细生物膜混合了细菌、多聚基质与菌、多聚基质与污物污物表面活性

33、剂去除表面活性剂去除污物污物多酶分解多聚基质多酶分解多聚基质器械表面恢复清洁器械表面恢复清洁杀菌成分清除深杀菌成分清除深层细菌层细菌多种成分协同作用多种成分协同作用 生物膜培养方法总结生物膜培养方法总结名称名称参照标准参照标准图片图片特点特点总结总结CDC生物膜反应器ASTM E25621.培养时间48小时2.强剪切力，垂直剪切3.液面下培养4.生物膜生长相对较牢固 每次可培养24片样品，平行性较好，与临床生物膜较接近，适用于实验室制备生物膜样品及生物膜去除评估。滴流式生物膜反应器ASTM E26471.培养时间54 小时 2.低剪切力3.生物膜生长在气液界面4.模拟水管道生物膜的生长方式，生

34、成生物膜较肥厚 每次培养4片样品，样品量较少，实验时需要多台共同用，相对平行性较弱。MBEC生物膜反应器ASTM E27991.培养时间24小时2.低剪切力3.模拟齿科相关生物膜4.适用于配方粗筛 每次可培养96片样品，样品量较大，根据其生长特点，较适合齿科相关产品及配方粗筛。旋转碟片法生物膜反应器ASTM E21961.培养时间48小时2.较强剪切力，水平剪切3.液面下培养4.相对应用较少 每次可培养6片样品，与上述方法相比，因其模拟水平剪切状态下形成的生物膜，相对应用较少。59如何判断清洁剂对如何判断清洁剂对BF去除效果？去除效果？u 必须选择公认的标准方法必须选择公认的标准方法u 方法不同结果可能会很大不同方法不同结果可能会很大不同u 必须用同一种方法进行比较必须用同一种方法进行比较u 结合临床实际清洗效果结合临床实际清洗效果6061保证清洗成功是防止生物膜形成的关键保证清洗成功是防止生物膜形成的关键避免生物膜形成是生物膜控制的关键避免生物膜形成是生物膜控制的关键