新版GMP质量管理体系培训课件.pptx

1、2022年10月3日星期一1肖志坚肖志坚-新版新版GMP质量管质量管理体系培训理体系培训内容内容27日上午 肖志坚n新版GMP特点概述 n风险管理n无菌附录27日下午 华蕾nGMP认证检查（包括自检）n变更控制n微生物室管理28日 季铁军n 固体制剂n偏差n年度质量回顾2肖志坚肖志坚新版GMP特点概述 3要点要点n质量管理体系n注重与注册法规的衔接n引入质量受权人，强调人员资质要求n引入风险管理理念n新增委托加工/检验的要求n无菌附录1在硬件和软件上要求提升很高4什么是质量管理体系？什么是质量管理体系？n为保证产品、过程或服务满足质量要求，把企业的组织机构、职责和权限、工作方法和程序、技术力量

2、和业务活动、资金和资源、信息等协调统一起来所形成的一个有机整体，称之为企业的质量管理体系。5FDA模式模式6质量保证(举例)组织和人员 管理职责 审计/检查 风险管理 培训 文件管理 变更控制 不合规情况 可预见的偏差改正措施和预防措施 投诉/不良事件 召回 产品处理 再加工/返工 验证 计算机相关体系 合同商管理7GMPICH Q10 药品质量管理系统药品质量管理系统药品研发药品研发商业化生产商业化生产生命周期结束生命周期结束技术转移技术转移试验样品试验样品管理层职责管理层职责工艺过程的表现及产品质量监控工艺过程的表现及产品质量监控纠正纠正/预防措施预防措施(CAPA)变更控制变更控制管理层

3、审核管理层审核质量管理系统质量管理系统要素要素知识管理知识管理质量风险管理质量风险管理保证措施保证措施生产环节流程模式生产环节流程模式8质量管理体系质量管理体系供应商管理API制剂生产非无菌无菌包装QC 检验微生物检验和保证QA放行产品质量回顾，持续稳定性考察偏差管理CAPA变更控制风险管理风险管理与注册法规的衔接与注册法规的衔接n至少21处提及n涉及从物料、工艺到成品放行n体现与注册的衔接9引入受权人，明确人员职责和资质引入受权人，明确人员职责和资质n企业负责人n生产管理负责人n质量管理负责人n质量受权人10风险管理风险管理n至少24处提及n目前GMP中仅引入概念，如何实施尚未有指导原则11

4、委托加工委托加工/检验检验n明确委托方和受托方的职责n适应委托加工/检验的行业趋势12肖志坚肖志坚质量风险管理 13本节内容本节内容n风险管理的背景n风险管理概念n风险管理在质量管理中的应用什么是风险什么是风险n个人n是对预计损失的认识和情感的反应n技术术语n风险概率X发生后的代价nICH Q9n出现坏结果的几率和严重程度的综合风险风险 VS 收益收益 低风险低风险 高风险高风险低收益低收益高收益高收益没劲!没那么便宜!没头脑!常识!风险管理风险管理n有什么风险?n从哪儿来?n对什么有影响?n严重程度怎样?n我们如何应对?严重程度严重程度严重轻微 几率低 几率高 发生的可能性发生的可能性应急方

5、案过程控制积极管理忽略风险管理的特点风险管理的特点n很重要n很困难n不精确相对于获得精确的答案相对于获得精确的答案,全面的考量全面的考量,选用足够知选用足够知识和判断力的人员然后有识和判断力的人员然后有效管理主要风险是更为重效管理主要风险是更为重要的要的!为什么要风险管理为什么要风险管理?n业务,变化,人生风险无处不在 n帮助进行战略决策n决策的正确性n方法的正确性n帮助计划性n在充分认识风险的基础上进行有效的计划n实现合理的资源分配n保证实施药品生命周期中的风险管理药品生命周期中的风险管理研究研究临床前临床前 临床临床 上市上市质量质量ICH Q9安全安全有效有效 生产和销售生产和销售GLP

6、GCPGMPGDP生命周期中止生命周期中止为什么药品质量需要引入风为什么药品质量需要引入风险管理的概念险管理的概念?nFDA 首开先河，2002年8月提出“科学的基于风险评估的产品质量管理理念”鼓励制药业采用最新科研技术的成果促进制药业应用现代的质量管理技术确保法规的检查是基于制药业最新的技术发展确保FDA的资源最大限度地发挥作用近二十年制药业环境的变化近二十年制药业环境的变化n日益增加的药品数量以及对公众健康的影响nFDA的法规检查数量呈下降趋势nFDA对规范产品质量的经验和教训的积累n制药科学和生产技术有了快速的发展n生物技术药物的出现和质量管理科学的发展新理念的发展新理念的发展风险管理的

7、应用程序风险管理的应用程序风险回顾风险回顾 风险评估风险评估风险评价风险评价 不接受不接受风险控制风险控制风险分析风险分析风险消减风险消减风险确认风险确认事件的回顾事件的回顾风险的接受风险的接受开始风险管理程序开始风险管理程序 风险管理的结果风险管理的结果 风险评估的工具风险评估的工具 风险信息的交流风险信息的交流ICH Q9风险管理的应用范围风险管理的应用范围流程材料设计生产销售病人设施在各个环节都能应用风险管理的模式G.-Claycamp,FDA,June 2006新版新版GMP的要求的要求n第四节质量风险管理n第十三条质量风险管理是在整个产品生命周期中采用前瞻或回顾的方式，对质量风险进行

8、评估、控制、沟通、审核的系统过程。n第十四条应当根据科学知识及经验对质量风险进行评估，以保证产品质量。n第十五条质量风险管理过程所采用的方法、措施、形式及形成的文件应当与存在风险的级别相适应。2627生产中的质量风险管理应用生产中的质量风险管理应用n验证n使用最接近极端的情况来确定核实、确认和验证工作的范围和程度（如分析方法、过程、设备和清洁方法）n确定后续工作程度（如取样、监控和再验证）n对关键过程步骤和非关键过程步骤加以区分。n生产过程中取样与检验n评估生产过程中控制检验的频率和程度（如：受控的情况下减少测试）。n结合参数和实时释放来评估和过程分析技术（PAT）的使用提供依据。28质量管理

9、中的质量风险管理应用质量管理中的质量风险管理应用n稳定性研究n结合ICH其它指导原则来确定由贮藏或运输条件的差异（如：冷链管理）带来的对产品质量的影响。n偏差和超标结果n确定偏差和OOS的严重程度，确定可能的根本原因和纠正措施，并对受影响的产品进行评价n再试验期/失效期n对中间体、辅料和起始物料的储存和测试是否足够进行评估。29主要的风险管理工具主要的风险管理工具n基本的风险管理的简明方法n流程图n检查表n过程图n因果分析图n失效模式与影响分析（FMEA）n失败模式，影响和关键点分析（FMECA）n过失树枝分析（FTA）n危害源分析和关键控制点（HACCP）n危害源可操作性分析（HAZOP）n

10、初步危害源分析（PHA）n风险评级和过滤n支持性统计学分析工具30质量风险管理工具：流程图质量风险管理工具：流程图n用图表现一个过程n在选择步骤断开流程图流程图活动活动开始开始 判断判断结果结果活动活动活动活动NoYes31质量风险管理工具：检查表质量风险管理工具：检查表n呈现有效信息、清晰的格式n可能完成一个简单的列表检查表检查表 失控工艺调查 常见问题是 否 是否使用了不同测量精度的仪器或方法？是 否 是否不同的方法由不同人使用？是 否 是否环境影响了工艺？例如温度、湿度是 否 是否定期的因素影响了工艺？例如工具磨损是 否 是否在此时对工艺涉及到没有经过培训的人员？是 否 工艺输入是否有变

11、更？是 否 是否人员疲劳影响工艺？32RNP:风险优先数质量风险管理工具：失效模式与影响分析（FMEA）工工艺艺步步骤骤潜潜在在失失效效模模式式潜潜在在失失效效影影响响严严重重性性潜潜在在原原因因发发生生概概率率现现有有控控制制可可控控制制性性优优先先数数职职责责与与目目标标日日期期采采取取措措施施后后严严重重性性发发生生概概率率可可检检测测性性风风险险优优先先性性应用领域：风险优先划分风险控制活动效果监控设备与设施分析制造工艺来识别高风险步骤或关键参数33FMEA矩阵法矩阵法风险因素发生几率严重程度可预知性各种原辅料微生物状况3513X5X115中等风险中间产品存放时间1511X5X15低风

12、险低风险：(18),中等风险(836)，高风险(36125).34质量风险评估质量风险评估功能或需求潜在问题结果或危害s分类原因o现行措施DRPN改进措施责任原材料各种原辅料微生物状况微生物负荷超标5中等物料微生物限度不合格3增加物料微生物限度标准115物料存放中间产品存放微生物负荷超标5中等存放时限或条件不能满足产品需要1存放时限验证SOP规定存放时间15应用示例应用示例1.口服制剂的微生物限度检查2.工厂停电应对方案3.偏差分级4.验证5.项目实施风险评估就像。实施风险评估就像。最薄弱的环节不再是问题。机遇和优势机遇和优势n鼓励透明决策n使决策更科学n帮助交流n多方面团队合作n赢得各方的信

13、任n采用预防措施n主动控制风险n共享知识n行为改变n更好理解风险决策n接受风险肖志坚肖志坚新版GMP 无菌附录及无菌工艺验证 38无菌药品修订重点无菌药品修订重点n无菌药品附录n篇幅：约1 万多字，与WHO、欧盟相近n使我国洁净级别的划分与国际标准一致n增设了“吹-灌-封及隔离操作技术”二章n培养基模拟试验取国际统一的标准n明确无菌生产轧盖要求n强化了无菌生产的全过程监控n为实施国际化标准，保证安全用药创造条件39邓海根 对新版GM要求的理解洁区的划分洁区的划分 40洁净洁净级别级别悬浮粒子最大允许数悬浮粒子最大允许数/米米3 静态静态动态动态Grade0.5m5.0m0.5m5.0mA3 5

14、20203 52020B3 52029352 0002 900C352 0002 9003 520 00029 000D3 520 00029 000不作规定不作规定 不作规定不作规定 A、B级区的粒子分级标准级区的粒子分级标准n目前目前 ISO 14644“洁净室和相关控制环境洁净室和相关控制环境”是国际标准是国际标准nEU，FDA，PIC/S，WHO修订稿均采用其分级方法修订稿均采用其分级方法 n我们应遵循现行国际标准，采用相同的分级限度值，我们应遵循现行国际标准，采用相同的分级限度值，5m粒子限度粒子限度29来源于来源于 ISO14644 中的分级公式：中的分级公式：Cn=10N (0.

15、1/D)2.08,Cn是限度值，是限度值，N是级别，是级别，D是粒径，是粒径，即对于即对于ISO 5级，按级，按5m粒子计算：粒子计算：105 (0.1/5)2.08=29.3ISO 级别级别最高允许粒子计数值（粒子数最高允许粒子计数值（粒子数/立方米）立方米）0.5 m5mISO 5级级3 52029ISO 7级级352 0002930ISO 8级级35 20 00029 30041为什么为什么A级区级区 5m粒子限度是粒子限度是20？n是人为设置，以示与是人为设置，以示与B级区的区别，级区的区别，ISO14644允许设置允许设置中间级别；相当于中间级别；相当于ISO4.8级级洁净洁净级别级

16、别悬浮粒子最大允许数悬浮粒子最大允许数/米米3 静态静态动态动态Grade0.5m5.0m0.5m5.0mA3 520203 52020B3 52029352 0002 900C352 0002 9003 520 00029 000D3 520 00029 000Not definedNot defined42洁净区划分和监测洁净区划分和监测n两者不同两者不同n划分：划分：nISO 14664 规定了级别限度和三个测试状态，规定了级别限度和三个测试状态，由各个应用领域自己规定分级方法和测试状态由各个应用领域自己规定分级方法和测试状态nEU 附录一规定，在静态和动态下测试，必须附录一规定，在静态

17、和动态下测试，必须达到各自状态下的限度标准达到各自状态下的限度标准n监测：监测：n针对生产活动针对生产活动n用风险评估决定取样位置、取样时间和取样量用风险评估决定取样位置、取样时间和取样量43FDA不要求静态测试？不要求静态测试？n此说法是一种误解此说法是一种误解nFDA“无菌生产指南无菌生产指南”第第5页第一段：页第一段：“洁净区洁净区内的控制参数应由确认过程中所获得的微生物及内的控制参数应由确认过程中所获得的微生物及微粒数据来考核和确定。微粒数据来考核和确定。洁净厂房的初始验证至洁净厂房的初始验证至少包括空态、静态条件下对空气质量的评估意见。少包括空态、静态条件下对空气质量的评估意见。厂房

18、的确认及级区的划分应十分注重动态条件下厂房的确认及级区的划分应十分注重动态条件下获得的数据（即设备运行、有人员在生产现场进获得的数据（即设备运行、有人员在生产现场进行操作），这点非常重要。一个比较完善的无菌行操作），这点非常重要。一个比较完善的无菌生产厂房的监控计划，应能评估常规生产动态条生产厂房的监控计划，应能评估常规生产动态条件下达到规定的洁净度标准。件下达到规定的洁净度标准。”44WHO版本：版本：n02年版年版GMP附录附录6n与与03版版EU附录附录1绝大部分相同绝大部分相同n5um粒子（粒子（0 1），），A级微生物级微生物(3 1)n07年版年版-WHO药品质量保证药品质量保证指

19、南及相关指南及相关材料简编第材料简编第2卷，第二更新版（卷，第二更新版（2007）n洁净区分级保持不变，洁净区分级保持不变，A级微生物级微生物 与与EU一致一致n09修订稿草案修订稿草案n基本与基本与EU08版附录版附录1保持一致，结构和语句基本保持一致，结构和语句基本相同相同n增加了隔离器和吹增加了隔离器和吹/灌灌/封技术封技术45EUn03版版n08版版 5大改变大改变n洁净区分级标准洁净区分级标准n洁净区划分和监测说明洁净区划分和监测说明n培养基罐装接受标准培养基罐装接受标准n微生物负荷测试要求微生物负荷测试要求n轧盖环境要求轧盖环境要求46其它其它nPIC/S 等效采用等效采用EU G

20、MP附录附录1 nFDA 无菌工艺指南无菌工艺指南n只用只用0.5um粒子分级标准粒子分级标准47取样量、取样点数、位置取样量、取样点数、位置n ISO14644-1 有明确的采样量的确定方法。其中有明确的采样量的确定方法。其中B.4.2 节公式：节公式：采样量采样量L=(20/级别中最大粒子限度）级别中最大粒子限度）1000，显然对于显然对于A 级，采样量为级，采样量为(20/20)1000=1 米米3n取样点数由取样点数由B.1.1公式：公式：取样点数取样点数 NL=A，A为洁净区面积为洁净区面积 取样点均匀分布，位于工作高度取样点均匀分布，位于工作高度注意：这里仅指在洁区划分时的应用注意

21、：这里仅指在洁区划分时的应用如只需测一个点，连续测量三次如只需测一个点，连续测量三次48动态粒子监测动态粒子监测 n在关键操作的全过程中，包括设备组装操在关键操作的全过程中，包括设备组装操作，应当对作，应当对A级洁净区进行悬浮粒子监测。级洁净区进行悬浮粒子监测。A级洁净区监测的频率及取样量，应能及时级洁净区监测的频率及取样量，应能及时发现所有人为干预、偶发事件及任何系统发现所有人为干预、偶发事件及任何系统的损坏的损坏nWHO 07版：版：“对于产品暴露或容器敞口区域，表对于产品暴露或容器敞口区域，表2中中A级区的动态级区的动态粒子要求必须符合粒子要求必须符合”nEU 08版：除版：除可能损坏粒

22、子计数仪外，应在关键操作的全过程，可能损坏粒子计数仪外，应在关键操作的全过程，包括部件组装、对包括部件组装、对A级区进行微粒监测级区进行微粒监测49自净时间自净时间n生产操作全部结束、操作人员撤出生产现场并经1520分钟（指导值）自净后，洁净区的悬浮粒子应当达到表中的“静态”标准。n验证时可进行挑战试验50培养基灌装培养基灌装n采用采用FDA“无菌生产指南无菌生产指南”的接受标准的接受标准n培养基灌装容器的数量应足以保证评价的培养基灌装容器的数量应足以保证评价的有效性。对于小批量产品而言，培养基灌有效性。对于小批量产品而言，培养基灌装数量应至少等于产品批次量。目标是不装数量应至少等于产品批次量

23、。目标是不长菌并遵循以下原则：长菌并遵循以下原则：n灌装少于灌装少于5000支时，不应检出污染品支时，不应检出污染品n灌装在灌装在5000至至10000时：有一支污染需进行调查，并考虑重复培时：有一支污染需进行调查，并考虑重复培养基灌装试验；二支污染需进行调查，并可即视作再验证的理由养基灌装试验；二支污染需进行调查，并可即视作再验证的理由n灌装超过灌装超过10000支时：一支污染需进行调查；二支污染需进行调支时：一支污染需进行调查；二支污染需进行调查，并可即视作再验证的理由查，并可即视作再验证的理由51轧盖环境轧盖环境n明确两种轧盖的方式：明确两种轧盖的方式：n一种是用无菌铝盖的标准无菌操作方

24、式一种是用无菌铝盖的标准无菌操作方式（B级级下的下的A级）级）n另一种是只需提供另一种是只需提供A级单向流空气的洁净操作级单向流空气的洁净操作方式方式（在无菌灌装区域内保持（在无菌灌装区域内保持B级下的级下的A级，级，轧盖区域允许轧盖区域允许C或或D 级下的级下的A级送风）级送风）52洁净区微生物监测的动态标准洁净区微生物监测的动态标准53洁净度级别浮游菌cfu/m3沉降菌（90mm）cfu/4小时(2)表面微生物接触（55mm）cfu/碟5指手套cfu/手套A级1111B级10555C级1005025D级20010050注：注：（1）表中各数值均为平均值。（2）单个沉降碟的暴露时间可以少于4

25、小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。微生物检测方法的特点微生物检测方法的特点n空气浮游菌n定量、准确、取样量大，但易干扰气流54n沉降菌n取样时间长，不干扰气流，但非定量、检出率低n接触碟n光滑表面，方便，但需特殊的培养碟n棉签法n不规则表面，操作稍复杂55警戒限度和纠偏限度警戒限度和纠偏限度n应当制定适当的悬浮粒子和微生物监测警戒限度和纠偏限度。操作规程中应当详细说明结果超标时需采取的纠偏措施。56最终灭菌产品最终灭菌产品57洁净度级别洁净度级别最终灭菌产品生产操作示例最终灭菌产品生产操作示例C级背景下的局部A级高污染风险(1)的产品灌装（或灌封）C级1.产品灌装（或灌封）

26、；2.高污染风险(2)产品的配制和过滤；3.眼用制剂、无菌软膏剂、无菌混悬剂等的配制、灌装（或灌封）；4.直接接触药品的包装材料和器具最终清洗后的处理。D级1.轧盖；2.灌装前物料的准备；3.产品配制（指浓配或采用密闭系统的配制）和过滤直接接触药品的包装材料和器具的最终清洗。非最终灭菌产品非最终灭菌产品58洁净度级别洁净度级别非最终灭菌产品的无菌生产操作示例非最终灭菌产品的无菌生产操作示例B级背景下的A级1.处于未完全密封(1)状态下产品的操作和转运，如产品灌装（或灌封）、分装、压塞、轧盖(2)等；2.灌装前无法除菌过滤的药液或产品的配制；3.直接接触药品的包装材料、器具灭菌后的装配以及处于未

27、完全密封状态下的转运和存放；4.无菌原料药的粉碎、过筛、混合、分装。B级1.处于未完全密封(1)状态下的产品置于完全密封容器内的转运；2直接接触药品的包装材料、器具灭菌后处于密闭容器内的转运和存放。C级1.灌装前可除菌过滤的药液或产品的配制；2.产品的过滤。D级直接接触药品的包装材料、器具的最终清洗、装配或包装、灭菌。问题问题n目前无菌工艺生产设施中主要的问题有哪些？n设施设备进行改造主要困难有哪些？n目前有哪些方案或对策？59注射剂的风险注射剂的风险n风险1-微生物污染 n风险2-热原的污染n风险3-不溶性微粒n风险4-纯度 其他风险：安全性（组织的刺激性，毒性发应）渗透压pH60注射剂风险

28、控制手段注射剂风险控制手段n微生物污染风险 注射剂必须是无菌n热原污染 控制限度n不溶性微粒 控制限度n纯度 原料工艺其他风险控制手段：其他风险控制手段：安全性临床实验安全性临床实验等渗，等张，等渗，等张，pH调节调节61无菌药品的制造工艺类别无菌药品的制造工艺类别n最终灭菌工艺n先将药品的各个部件（产品，容器和密封件）在符合要求的环境下组成最终的包装形式，最后让产品在其最终容器中进行灭菌处理（通常使用热力学灭菌或辐射灭菌）。n无菌生产工艺n药品的各个部件（产品，容器和密封件）分别经过灭菌处理，再在高洁净度的环境中组装最终产品，但产品装入其最终容器后不再进行灭菌处理。62如何制造出高质量的无菌

29、药品？如何制造出高质量的无菌药品？n对生产工艺的深刻理解n识别、评估各工艺步骤对无菌性，热原，微粒等质量因素及其影响程度n在工艺过程中采取有效控制手段n对这些手段的有效性进行验证n遵循相关法规的要求63无菌生产工艺验证原则无菌生产工艺验证原则n无菌生产工艺验证原则n以无菌保证为核心，在充分评估工艺各步骤微生物污染风险的基础上，利用现有的科学技术，对风险控制手段的有效性进行确认。64无菌冻干粉针剂生产工艺流程无菌冻干粉针剂生产工艺流程配料配料原料，辅料，配料器具，环境，人员操作容器，WFI，配液器具，环境，操作胶塞，过滤器，灌装部件，清洁工具，灭菌釜，清洁及灭菌过程西林瓶，WFI，洗瓶机，干热灭

30、菌设备气体，容器管道过滤器及安装操作，过滤前溶液含菌量环境，人员操作，转移冻干机密闭性压盖前储存时间，转移，胶塞密闭性，压盖后的密闭性65无菌工艺无菌性的保证因素无菌工艺无菌性的保证因素水水原料药原料药辅料辅料气体气体容器容器/密封件密封件设施设施容器、设备的清洗灭菌容器、设备的清洗灭菌配料、配液、过滤、灌装全配料、配液、过滤、灌装全过程过程人员人员环境及培养基灌装环境及培养基灌装无菌试验无菌试验无菌包装无菌包装产品产品 生产过程生产过程原材料原材料66遵循的法规要求遵循的法规要求n中国GMP有关无菌生产工艺的有关规定以及洁净室悬浮粒子、沉降菌和浮游菌检测的国家标准n药品生产质量管理规范实施指

31、南中有关无菌生产的指导原则n药品生产验证指南nFDA无菌生产工艺指南nFDA工艺验证一般原则新药申报资料对灭菌工艺验证的要求n欧盟GMP附录1无菌药品生产67无菌生产工艺验证的具体内容和无菌生产工艺验证的具体内容和方法方法n厂房和设施（布局、空气净化系统包括HEPA，WFI系统）n器具、容器的灭菌除热原过程n灌装部件、胶塞的灭菌过程n洗瓶、干热去热原过程n配液灌、储液罐及管道、冻干机灭菌过程n过滤除菌过程n灌装过程（环境、人员监测）n容器密闭性n综合验证：培养基灌装试验（工艺模拟实验）n实验室控制（微生物测试标准方法、无菌检查）68原辅料的控制原辅料的控制n无菌原料药n其本身的生产工艺应按无菌

32、生产工艺验证原则进行n包装和运输应是考察重点n非无菌原料或辅料n尽可能降低微生物负荷-50CFU/gn生产的洁净环境n设备与其他物料及人员n生产用水69非无菌原料或辅料关键控制点非无菌原料或辅料关键控制点n精烘包阶段环境至少十万级以上n人员着装、人流物流控制，环境清洁规程n设备清洁规程，设定内控限度n预先采取高温或过滤是降低微生物污染的有效方法n生产用水需要达到纯化水要求，并控制内毒素n对除菌、灭菌或去内毒素步骤需评估对产品理化性能的影响70生产环境验证和控制生产环境验证和控制n范围包含所有工艺步骤n遵守相关的GMP规范n验证时考察静态和动态时的环境质量n生产时实行动态监测71环境验证的范围环

33、境验证的范围n空气净化系统的验证（温湿度，压差，空气流向，风速，高效过滤器泄漏测试）n环境性能测试（静态动态）n悬浮粒子和恢复速率测试 n微生物测试：空气浮游菌，沉降菌，表面微生物n日常监控72为什么环境监测是必不可少的？为什么环境监测是必不可少的？在无菌工艺中，产品、容器和密封件分别经过灭菌后再进行灌封。由于产品装入最终容器后不再作进一步灭菌处理，容器在极高洁净环境下进行灌封是至关重要的。FDA无菌生产工艺指南第五页无菌生产工艺指南第五页73制订环境监控方案的原则制订环境监控方案的原则n明确监控的关键控制点n给产品构成最大风险的位置，如产品暴露位置、直接接触表面n人员n科学建立控制标准和方案

34、n标准应满足无菌生产微生物控制要求，并结合取样点位置和生产操作的相互关系n建立警戒和纠偏标准n进行数据分析n全面监控、动态监控n定期的环境再验证74无菌灌装区环境监控频率无菌灌装区环境监控频率洁净室洁净室测试项目测试项目监测频率监测频率无菌灌装间无菌灌装间产品转移间产品转移间灭菌釜卸载间灭菌釜卸载间更衣间更衣间空气悬浮粒子空气悬浮粒子空气浮游菌空气浮游菌表面微生物表面微生物沉降菌沉降菌操作人员操作人员每批一次每批一次或无生产时每周或无生产时每周一次一次产品转移间产品转移间清洁间清洁间物流缓冲间物流缓冲间更衣间更衣间 空气悬浮粒子空气悬浮粒子空气浮游菌空气浮游菌表面微生物表面微生物每周一次每周一

35、次75物料准备区环境监控频率物料准备区环境监控频率洁净室洁净室测试项目测试项目监测频率监测频率配液间配液间压盖间压盖间空气悬浮粒子空气悬浮粒子*空气浮游菌空气浮游菌表面微生物表面微生物沉降菌沉降菌每周一次每周一次（*每月一次）每月一次）更衣间更衣间清洁清洁/灭菌间灭菌间空气悬浮粒子空气悬浮粒子*空气浮游菌空气浮游菌表面微生物表面微生物每周一次每周一次（*每月一次）每月一次）其他其他C级区房间级区房间空气悬浮粒子空气悬浮粒子空气浮游菌空气浮游菌表面微生物表面微生物每月一次每月一次76辅助区环境监测频率辅助区环境监测频率洁净室洁净室测试项目测试项目监测频率监测频率辅助区所有房间辅助区所有房间 空气

36、悬浮粒子空气悬浮粒子空气浮游菌空气浮游菌表面微生物表面微生物每三个月一次每三个月一次77监测的实施监测的实施 n在生产过程中，无菌灌装线上沉降碟的放置应在所有操作开始前完成n空气浮游菌的测试应根据生产情况开空气取样仪n灌装线上的表面微生物测试应在灌装结束后进行n监测人员根据生产和人员操作的情况，可随时要求进行操作人员手套的微生物测试，操作人员在测试前不应喷洒无菌酒精，在测试后应更换手套。对于无菌服的微生物测试一般在操作人员退出B级区之前进行。n 所有的样品在测试后都应装入灭菌袋中适当包裹，以避免样品在转移途中受到污染。78人员控制人员控制n无菌服、头套、眼罩、人员操作行为n无菌灌装人数控制n人

37、员资格认定n体检，操作培训，着装培训，着装测试n着装测试方法n年度资格再确认制度79人员培训和更衣人员培训和更衣(一一)n人员是环境控制区内的主要微生物污染源n只有身体健康者方可进入环境控制区n受训范围应包括工作于环境控制区内的所有人员n包括生产操作人员、环境监测人员、现场维修人员n培训内容nGMP培训n无菌工艺的基本原理n生产和操作程序与产品污染的相关性n基础知识培训80人员培训和更衣人员培训和更衣(二二)n基本无菌操作技术n严格执行更衣规范n只能用无菌器具与无菌物料相接触n所有活动慢而轻n人员身体应始终置于层流区之外n任何操作方式不得影响产品的无菌性81人员培训和更衣人员培训和更衣(三三)

38、n控制好操作人员的微生物污染是环境控制方案的最重要内容之一n无菌更衣及无菌操作规程同样适用于微生物实验室的无菌检查人员和微生物限度检查人员82眼罩也为取样点83过滤系统的验证过滤系统的验证n无菌过滤是截留微生物n具有一定的风险n制造过程中的不均一性n对过滤介质的化学腐蚀n机械缺陷n过高的压力84过滤器验证项目过滤器验证项目 生物性能n微生物截留n客户定制n流速n产量n操作温度n压力n系统尺寸大小 物理性能n完整性n产品水起泡点n扩散流n吸附 化学性能化学性能兼容性兼容性析出物析出物85过滤系统验证小结过滤系统验证小结n过滤器的选择应符合工艺和产品的特性n过滤器的验证是一个技术复杂的过程n国外一

39、般委托过滤器生产厂家进行选择和验证86培养基灌装试验培养基灌装试验n采用正常的生产工艺，用培养基代替产品进行灌装，以考察生产过程、设备和包装形式、人员操作等整个体系能始终如一地生产出符合要求的无菌产品n使用范围n初次验证 对象：新的无菌生产工艺连续3次合格的无菌工艺模拟 有足够的时间模拟实际生产时的操作 最差状况模拟n年度再验证 对象：现行工艺 每年进行两次再验证 有足够的时间模拟实际生产时的操作 最差状况模拟87培养基灌装流程培养基灌装流程n确认设施设备和各灭菌工艺验证的完成n确认培养基灌装的范围n制订培养基灌装方案n培养基选择n灌装数量和灌装总时间n各步骤间的间隔时间n挑战试验的最差条件设

40、计n人员环境监测计划n培养条件、时间和设备n培养基灵敏度试验n总结和失败原因调查88使用范围使用范围计划外的验证：如工艺重大改变，设施设备改造等偏差原因：无菌实验失败，根据偏差调查结果的要求 环境监测结果明显反常，根据偏差调查结果的要求 某个区域的空调关闭时间超过验证的时间段89培养基灌装试验应考虑的因素培养基灌装试验应考虑的因素n培养基的选择n培养基促生长能力n灌装数量n环境监测方案n收集和培养n最差条件的挑战90培养基的选择培养基的选择n适应广谱微生物生长n较好的澄明度，较小的粘度n可除菌过滤n常用培养基：3大豆胰蛋白肉汤（TSB）粉针剂：聚乙二醇，乳糖和/或肉汤粘稠的乳膏剂：n混于肉汤中

41、的琼脂和羧甲基纤维素 91培养基促生长能力培养基促生长能力n灵敏度试验 取灌装前、中、后各阶段的培养基样品 枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠球菌、绿脓杆菌、黑曲霉菌、环境菌 每个菌种接种2支，计数100cfu/瓶 20-25C/30-35 C 培养5天内生长92灌装数量灌装数量n批次量足够大n灌装量一般500010000瓶n批量小的(低于5000瓶)以全批数量灌装93环境监测环境监测n全面、全过程检测n对无菌生产区环境的评估n对人员资格的确认(所有无菌区工作人员）n环境的清洁：灌装结束4小时内94收集和培养收集和培养n按灌装的先后顺序轧盖n翻转接触所有表面n培养：20-25度7天，30-

42、35度7天 n在中间转换温度和培养结束时100灯检n记录污染瓶数n记录丢弃的数量和原因，不得随意丢弃95最差条件挑战最差条件挑战储存时间：灌装设备、灌装部件、储罐、无菌物料、药液在实际灌装前能够放置的最长时间例1:用需要再灭菌前的灌装设备、灌装部件、储罐、无菌物料参与培养基灌装例2:无菌过滤后存放在储罐内的培养基到实际生产时产品的最大储存时间后再灌装 96最差条件挑战最差条件挑战n无菌灌装时间 在培养基灌装中模拟用时最长的瓶子满批量生产需要的时间，其中包括正常的干扰时间（换班、设备维修）n灌装速度和瓶子规格n灌装速度和瓶子规格的关系n最慢的速度，最大的瓶子规格n最小的瓶子规格，最快的速度97最

43、差条件挑战最差条件挑战n人员n培养基灌装时模拟无菌区可能容纳最多的人数n无菌区工作人员至少每年参与一次培养基灌装n操作干扰n正常的（灌装线装配，称量调节，加胶塞，处理倒瓶，取样，环境监测）n 非正常的（设备故障，灌装线堵塞，轨道调节，拆卸/替换破损的部件）n干扰的次数应该不少于正常生产时发生的次数n工艺气体n使用氮气的，因考虑其不利于微生物生长，以压缩空气代替98培养基灌装失败后的调查培养基灌装失败后的调查n不管批次量有多大,只要培养基灌装中存在污染就意味着无菌保证有问题n设计合理、操作适当的无菌灌装污染水平应为零灌装瓶数灌装瓶数结果判断结果判断10000如有如有1瓶污染，进行调查瓶污染，进行

44、调查如有如有2瓶污染，调查并考虑再验证瓶污染，调查并考虑再验证99培养基灌装失败后的调查培养基灌装失败后的调查n环境和人员监测数据n灭菌记录和设备校验记录n灌装区域清洁消毒记录n人员培训记录n高效过滤器完整性测试记录n压差记录n溶液除菌过滤器完整性测试记录n污染菌来源n丢弃的培养基灌装瓶n灌装时的干扰活动n其他偏差和干扰活动100容器密封性验证容器密封性验证n目的：保证灭菌过程后和产品有效期内密封系统的完整性n密闭系统：安瓿或容器/胶塞系统n方法：n物理方法：染料检漏法，盐水渗入法，高压电极检测机n微生物检测法：n气溶胶法n将灌装培养基的压盖容器放置在充满微生物的气溶胶腔室内，保持一定温度、压

45、力、湿度和时间n微生物浸泡法n将灌装培养基的压盖容器倒置在一定浓度的特定微生物的溶液内，保持一段时间101微生物浸泡法操作步骤微生物浸泡法操作步骤菌液待确认密封口支架培养基容器选择试验菌种（大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、粘质沙雷氏菌）选择试验菌种（大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、粘质沙雷氏菌）制备菌悬液制备菌悬液一接种环置一接种环置10ml TSB中中30-35度培养度培养16-18小时，再置于小时，再置于1000 ml TSB中培养中培养22-24小时，浓度不小于小时，浓度不小于106/ml准备灌装有培养基的西林瓶（按正常程序轧铝盖）准备灌装有培养基的西林瓶（按正常程序轧铝盖）试验：试验：将铝盖去

46、除将铝盖去除倒置于菌悬液中倒置于菌悬液中4小时小时取出后消毒外表面取出后消毒外表面培养培养7天，每天观察生长情况天，每天观察生长情况培养基的阳性试验培养基的阳性试验102粉针剂、冻干粉针、小容量注射剂粉针剂、冻干粉针、小容量注射剂工艺验证的异同工艺验证的异同粉针剂粉针剂冻干粉针冻干粉针小容量注射剂小容量注射剂相同点相同点遵循一般验证程序遵循一般验证程序-设计，安装，运行，性能，产设计，安装，运行，性能，产品品基本范围相同：布局设计，建筑材质，环境级别，基本范围相同：布局设计，建筑材质，环境级别，HEPA，工艺用水，纯蒸汽，清洗灭菌去热原设备工艺用水，纯蒸汽，清洗灭菌去热原设备及程序，气体系统，

47、人员，包装，无菌工艺，产品及程序，气体系统，人员，包装，无菌工艺，产品工艺工艺不同点不同点无菌粉末的处理，无菌粉末的处理，分装机，培养基灌分装机，培养基灌装程序装程序冻干机，无菌冻干机，无菌过滤器过滤器洗烘灌封机，洗烘灌封机，不一定是最终不一定是最终灭菌产品灭菌产品103无菌工艺的再验证无菌工艺的再验证n法规性和定期性的再验证n计量器具（每年一次）n培养基灌装（每年两次）n高效过滤器泄漏试验（每年两次）n关键灭菌设备及灭菌程序（灭菌釜，热隧道，冻干机，储液罐）（每年一次）n人员（每年一次）n变更引起的再验证n变更应评估对产品质量可能的影响n原料，包材n工艺参数或路线n设备改变或重大维修n处方改

48、变，批量改变n偏差、质量事故等104不同品种共线生产的验证要求不同品种共线生产的验证要求n评估不同品种共线生产的风险，制定控制措施n核心是防止交叉污染n制订有效的清洁规程n拆卸、清洗、干燥、储存、装配n清洁剂的选择n清洁验证n确定残留物限度标准（化学/微生物）n确定取样点和检验方法n日常监控和再验证105常见问题常见问题n“无菌工艺验证包括工艺无菌性验证和产品验证”，是否可以理解为在产品注册申报时就已形成本产品的完整的工艺规程中规定的各项参数的验证？n在生产过程中，无菌灌装线上沉降碟的放置是否应在所用操作开始前完成？n沉降碟需要暴露多长时间？n动态沉降菌检测中，等结果出来已经是2-3天后了，如何根据结果进行判断？106n压缩空气的微生物检测如何很好的进行？n请问如何建立警戒限或纠偏限？有无相关的计算公式或技术要求？n无菌检查不合格时，如有真菌不合格的情况，可能有哪些原因？最有可能的原因是什么？107