实验室生物安全讲稿课件.ppt

1、第四章第四章 实验室生物平安的主要实验室生物平安的主要设备与仪器设备与仪器常用可防护生物危害的仪器装备常用可防护生物危害的仪器装备移液器生物安全柜高压灭菌锅灭菌器一次性接种环护目镜防护服目的：隔离操作者和感染性样本，防止操作人员被感目的：隔离操作者和感染性样本，防止操作人员被感 染染平安设备平安设备 -生物平安柜生物平安柜 个体防护装备个体防护装备-防护服；平安眼睛；手套鞋套；呼吸防护装置；紧急冲洗装置等。防护服；平安眼睛；手套鞋套；呼吸防护装置；紧急冲洗装置等。华盛顿大学中学生游戏 防护第一节第一节 生物平安柜生物平安柜一、生物平安柜概述一、生物平安柜概述 一概念：生物平安柜biologic

2、al safety cabinet,BSC 是操作有感染性的材料时，用来保护操作者本人、实验室环境及实验材料，使其防止暴露于操作过程中产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的负压排气柜。n生物平安柜的根本设计已经历了屡次改进。n主要的变化是在排风系统增加了HEPAHigh Effieiency Particulate Air Filter过滤器。对于直径0.3m 的颗粒，HEPA 过滤器可以截留99.97%，而对于更大或更小的颗粒那么可以截留99.99%。HEPA 过滤器能够有效地截留所有传染因子，并确保从平安柜中排出的是完全不含微生物的空气。n生物平安柜设计中的第二个改进是将经HEPA 过滤的空气

3、输送到工作台面上，从而保护工作台面上的物品不受污染。生物平安柜的选择生物平安柜的选择生物安全柜生物安全柜保护类型保护类型保护对象保护对象 I 级 第二、三和四类病原微生物；挥发放射性核素/化学品 操作者，环境 级A1型 第二、三和四类病原微生物 操作者，环境和样品 外排风型级A2型 第二、三和四类病原微生物；痕量挥发放射性核素/化学品 操作者，环境和样品 级级B1型型 第二、三和四类病原微生物；少第二、三和四类病原微生物；少量挥发放射性核素量挥发放射性核素/化学品化学品 操作者，环境和样品操作者，环境和样品 级B2型 第二、三和四类病原微生物；挥发放射性核素/化学品 操作者，环境和样品 III

4、级 第一、二、三和四类病原微生物；挥发放射性核素/化学品 操作者，环境和样品 1.I级生物平安柜级生物平安柜 I 级生物平安柜能够为人员和环境提供保护，但不提供产品保护。用途：I级生物平安柜被用作特殊的密封设备例如离心、收获设备或小的发酵设备或可能产生气溶胶的操作过程例如倒笼子的垃圾，通气培养或组织搅拌。也可用来操作放射性核素和挥发性有毒化学物品。B型2.II级生物平安柜级生物平安柜 II 级生物平安柜能够为级生物平安柜能够为人员、环境和产品提供人员、环境和产品提供保护。保护。用途：进展生物平安水平用途：进展生物平安水平1、2、3级相关的操作。级相关的操作。A型II级生物平安柜的种类级生物平安

5、柜的种类II级级A2型生物平安柜型生物平安柜室内空气污染的空气HEPA 滤过的空气正压污染空气3.III级生物平安柜级生物平安柜 III级生物安全柜是一级生物安全柜是一个没有开放式观察窗个没有开放式观察窗的气密性的结构。的气密性的结构。对环境、产品和操作对环境、产品和操作者提供最大的保护。者提供最大的保护。用途：用途：操作4级生物安全水平的微生物病原体。生物平安柜的选择生物平安柜的选择生物安全柜生物安全柜保护类型保护类型保护对象保护对象 I 级 第二、三和四类病原微生物；挥发放射性核素/化学品 操作者，环境 级A1型 第二、三和四类病原微生物 操作者，环境和样品 外排风型级A2型 第二、三和四

6、类病原微生物；痕量挥发放射性核素/化学品 操作者，环境和样品 级B1型 第二、三和四类病原微生物；少量挥发放射性核素/化学品 操作者，环境和样品 级B2型 第二、三和四类病原微生物；挥发放射性核素/化学品 操作者，环境和样品 III级 第一、二、三和四类病原微生物；挥发放射性核素/化学品 操作者，环境和样品 二、生物平安柜的使用二、生物平安柜的使用 一个人防护要求：一个人防护要求：使用生物平安柜时必须穿个人防护服，戴手套使用生物平安柜时必须穿个人防护服，戴手套手套应套在隔离衣的外面手套应套在隔离衣的外面最好带口罩和帽子，根据需要带防护眼罩或者面最好带口罩和帽子，根据需要带防护眼罩或者面罩。罩。

7、工作之前，操作者应调节凳子高度确保自己的脸工作之前，操作者应调节凳子高度确保自己的脸在开口之上。在开口之上。二生物平安柜内物品摆放原那么：二生物平安柜内物品摆放原那么：按照从干净区到污染区的方向摆放。按照从干净区到污染区的方向摆放。所有物品尽可能放在远离前格栅，靠近操作台后缘所有物品尽可能放在远离前格栅，靠近操作台后缘的位置。的位置。将废弃物袋、盛放废弃吸管的托盘以及吸滤瓶等体将废弃物袋、盛放废弃吸管的托盘以及吸滤瓶等体积较大的物品放在柜内某一侧。积较大的物品放在柜内某一侧。前格栅不能被实验记录本、仪器设备或者其他物品前格栅不能被实验记录本、仪器设备或者其他物品阻挡。阻挡。三生物平安柜的操作流

8、程三生物平安柜的操作流程:开启生物安全柜外排风机电源开关 缓慢打开操作窗口，窗口开启距离200mm或设定值，一般生物安全柜有窗口极限报警10分钟后即可以开始实验操作操作完毕后注意对生物安全柜进行消毒清洗工作四生物平安柜的使用本卷须知四生物平安柜的使用本卷须知平安柜只有在工作正常时才能使用。双臂垂直缓慢进入前面的开口，在生物平安柜中等待大约一分钟，以使平安柜调整完毕后才可对物品进展处理。废弃物应丢弃在生物平安柜内的处理容器中，防止胳膊在前开口处快速移动和频繁进出,以免干扰气流。尽量防止污染的物品进入干净区。在生物平安柜内进展操作时，不能进展文字工作。柜内所有的工作要在工作面的中部或后部进展，并能

9、从观察面板中看到。前送风格栅不得被便签、滴管、或其他材料堵住，否那么会干扰气流从而可能使材料受到污染，使人员处在暴露状态。清洁和消毒:应在每次工作完成后及一天完毕时，使用适宜的消毒剂清洁平安柜的外表。柜子的风扇在工作开场前和工作完成后要再各运行5分钟。三、超净工作台三、超净工作台 超净工作台超净工作台是为保护试验样品而设计，为保护试验样品而设计，通过吹过工作区域的层流空气防止试验样品受粉尘或细菌的污染。水平层流的干净台原理图垂直层流干净台原理图超净工作台中不能操作感染性的材料，超净工作台中不能操作感染性的材料，因其气体是正压直接排放。一旦感染性样品放置于工作区域，层流空气将把带有微生物介质的空

10、气吹向前台正在操作的工作人员而产生危险。生物平安柜与超净工作台的区别生物平安柜与超净工作台的区别名称名称结构结构气体气体压力压力气体排放气体排放保护对象保护对象生物安全柜生物安全柜 复杂复杂 负压负压 净化后排放净化后排放 操作者、样操作者、样品、环境品、环境 超净工作台超净工作台 简单简单 正压正压 直接排放直接排放 样品样品n除了了解平安柜各项性能指标，最好最快最方便鉴别平安柜平安性能的方法是了解您购置的平安柜是否获得过以下几项主要的国际平安柜认证：nEN12469(欧洲生物平安柜统一标准)nNSF49(美国生物平安柜标准-二级生物平安柜)nAS2252.2(澳洲生物平安柜标准-二级生物平

11、安柜)nJIS K3800(日本生物平安柜标准)第二节第二节 灭菌器灭菌器 一、概念：一、概念：泛指能到达灭菌要求的一切设备，即能泛指能到达灭菌要求的一切设备，即能在一定时间内杀灭一切活的微生物包括在一定时间内杀灭一切活的微生物包括细菌芽胞的设备，灭菌的保证水平为细菌芽胞的设备，灭菌的保证水平为106 即一件物品经灭菌处理后仍然有微生即一件物品经灭菌处理后仍然有微生物存活的概率为物存活的概率为106。二、灭菌器的种类：二、灭菌器的种类：1.高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器最常用最常用 2.干热灭菌器干热灭菌器 3.环氧乙烷灭菌器和过氧化氢等离子体灭环氧乙烷灭菌器和过氧化氢等离子体灭菌器。菌器。三、

12、使用高压蒸汽灭菌器的本卷须知三、使用高压蒸汽灭菌器的本卷须知 1.需要灭菌的各种包裹不应过大过紧。需要灭菌的各种包裹不应过大过紧。2.放入灭菌器内的包裹放入灭菌器内的包裹不能排得太紧。不能排得太紧。3.定期做好灭菌效果检测。定期做好灭菌效果检测。4.易燃易爆物品禁用高压蒸汽灭菌法。易燃易爆物品禁用高压蒸汽灭菌法。5.瓶装液体灭菌时，所盛液体不超过瓶体积瓶装液体灭菌时，所盛液体不超过瓶体积的的3/4。6.每次灭菌前，应检查平安阀的性能是否良每次灭菌前，应检查平安阀的性能是否良好，使用中也好，使用中也 应密切观察运行是否正常，及时发现问题，应密切观察运行是否正常，及时发现问题，以免发生意以免发生意

13、 外。外。7.在使用高压蒸汽灭菌过程中，应注意排尽在使用高压蒸汽灭菌过程中，应注意排尽灭菌器内冷空灭菌器内冷空 气。气。8.到达灭菌时间后，关闭电源，使压力自然到达灭菌时间后，关闭电源，使压力自然下降，压力指针下降，压力指针 到到“0后，方可翻开锅盖。后，方可翻开锅盖。第第 五五 章章 病原微生物实验室生物平安管理病原微生物实验室生物平安管理 原核生物型微生物：原核生物型微生物：包括两个菌细菌、放线菌，四个体衣原体、支原体、包括两个菌细菌、放线菌，四个体衣原体、支原体、立克次体、螺旋体立克次体、螺旋体.第第 五五 章章 病原微生物实验室生物平安管理病原微生物实验室生物平安管理 -病原微生物的种

14、类及特点病原微生物的种类及特点第第 五五 章章 病原微生物实验室生物平安管理病原微生物实验室生物平安管理 -病原微生物的种类及特点病原微生物的种类及特点原核生物型微生物的特点：原核生物型微生物的特点：1.大局部细菌可在人工培养基上生长繁殖。大局部细菌可在人工培养基上生长繁殖。2.构成细菌毒力的物质根底主要包括细菌的侵袭力构成细菌毒力的物质根底主要包括细菌的侵袭力(invasiveness)毒素毒素toxin.细菌致病性的强弱与细菌细菌致病性的强弱与细菌的毒力、侵入机体的数量、入侵途径及机体的免疫状态密的毒力、侵入机体的数量、入侵途径及机体的免疫状态密切相关。切相关。3.细菌感染可采用抗生素来治

15、疗。细菌感染可采用抗生素来治疗。第第 五五 章章 病原微生物实验室生物平安管理病原微生物实验室生物平安管理-病原微生物的种类及特点病原微生物的种类及特点n真核生物型微生物：真核生物型微生物：真菌单细胞真菌和多细胞真菌真菌单细胞真菌和多细胞真菌n特点：特点：1.真菌的致病：真菌的致病：浅表真菌感染浅表真菌感染-如如:皮肤癣菌。真皮肤癣菌。真菌时机性感染菌时机性感染-如：白色念珠菌，新型隐球菌。真菌毒素如：白色念珠菌，新型隐球菌。真菌毒素的致病作用的致病作用-真菌中毒和引起肿瘤黄曲霉毒素。真菌真菌中毒和引起肿瘤黄曲霉毒素。真菌性超敏反响。性超敏反响。n 2.治疗：治疗：对细菌抗生素不敏感，必须采用

16、抗真对细菌抗生素不敏感，必须采用抗真菌药物治疗。菌药物治疗。第第 五五 章章 病原微生物实验室生物平安管理病原微生物实验室生物平安管理 -病原微生物的种类及特点病原微生物的种类及特点n非细胞型微生物：非细胞型微生物：病毒病毒n病毒构造：核酸病毒构造：核酸DNA/RNA,蛋白衣壳，包膜某些蛋白衣壳，包膜某些病毒有；病毒有；n病毒特点：病毒特点：n1.在易感的活细胞中寄生。病毒的致病作用主要通过侵入在易感的活细胞中寄生。病毒的致病作用主要通过侵入易感细胞、损伤细胞或改变细胞功能而引发。易感细胞、损伤细胞或改变细胞功能而引发。n2.病毒感染用抗生素治疗无效，目前理想的抗病毒药物病毒感染用抗生素治疗无

17、效，目前理想的抗病毒药物不多。不多。第第 五五 章章 病原微生物实验室生物平安管理病原微生物实验室生物平安管理 -病原微生物的种类及特点病原微生物的种类及特点n非细胞型微生物：非细胞型微生物：朊粒朊粒prion：n n 朊粒的特点：朊粒的特点：n 1.一种特殊的致病因子，只含蛋白质，不含核酸。一种特殊的致病因子，只含蛋白质，不含核酸。n 2.朊粒：朊粒：是一种由正常宿主细胞基因编码的、构象是一种由正常宿主细胞基因编码的、构象异常的朊蛋白，是人和动物的传染性海绵状脑病异常的朊蛋白，是人和动物的传染性海绵状脑病TSEs的病原体。的病原体。TSE 可通过多种途径传播消化道、血液、可通过多种途径传播消

18、化道、血液、神经及医源性。神经及医源性。n 3.抵抗力很强，一般高压灭菌条件不能破坏。抵抗力很强，一般高压灭菌条件不能破坏。对患对患者的血液、体液，手术器械等必须用者的血液、体液，手术器械等必须用 1mol/L NaOH 处处理理 1小时小时,再高压灭菌再高压灭菌n 134 C,2小时。小时。一、病原微生物的风险等级一、病原微生物的风险等级第一类病原微生物第一类病原微生物 是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物；如:天花病毒、新疆出血热病毒、埃博拉病毒、猴痘病毒等29种病原体。第二类病原微生物第二类病原微生物 是指能够引起人类或者动物严重疾病，比

19、较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物；如:汉坦病毒、告致病性禽流感病毒、爱滋病毒、乙型脑炎病毒、脊髓灰质炎病毒、狂犬病毒、SARS冠状病毒、西尼罗病毒、炭疽杆菌、布氏杆菌、结核分枝杆菌、霍乱弧菌、鼠疫杆菌等 70 种。第三类病原微生物第三类病原微生物 是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物；如:肠道病毒、轮状病毒、肝炎病毒、风疹病毒、流感病毒、疱疹病毒、沙眼衣原体、破伤风梭菌 致病性大肠杆菌、脑膜炎球菌、伤寒沙门菌、志贺菌、葡萄球菌、白假丝酵母菌 等 2

20、75 种第四类病原微生物第四类病原微生物 是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。如:小鼠白血病病毒二、病原微生物实验室生物平安防护二、病原微生物实验室生物平安防护 危险度等级生物安全水平实验室类型实验室操作安全设施1级基础实验室-一级生物安全水平基础的教学、科研GMT不需要：开放实验台2级基础实验室-二级生物安全水平初级卫生服务；诊断，研究GMT，加防护服，生物危害标志开放实验台，此外需BSC用于防护可能产生的气溶胶3级防护实验室-三级生物安全水平特殊的诊断、研究在二级生物安全防护水平上加特殊防护服，进入制度，定向气流BSC和其他所用实验室工作所需的基本设备4级最高防护实验室-四级

21、生物安全水平危险病原体研究在三级生物安全防护水平上增加气锁入口，出入淋浴，污染物品的特殊处理III级BSC或II级 BSC并穿着正压服，双开门高压灭菌器，经过滤的空气一一 病原微生物样本的采集病原微生物样本的采集 病原微生物菌毒种、样本及或疑含病原体的物质均病原微生物菌毒种、样本及或疑含病原体的物质均称为感染性物质。称为感染性物质。根本要求：根本要求：1.采集设备与器材：采集设备与器材：必须有相应的生物平安防护设备与器材。如个人防护必须有相应的生物平安防护设备与器材。如个人防护用品隔离衣、帽、口罩、鞋套、手套、防护眼镜等、用品隔离衣、帽、口罩、鞋套、手套、防护眼镜等、防防 护器材、生物平安防护

22、设施和实验条件等。护器材、生物平安防护设施和实验条件等。2.采集人员与操作标准：采集人员与操作标准：必须由掌握相关专业知识和操作技能的工作人员进展采必须由掌握相关专业知识和操作技能的工作人员进展采集集 遵循生物平安操作标准遵循生物平安操作标准 具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段 具有详细的样本采集记录具有详细的样本采集记录 具有应急措施与预案具有应急措施与预案3.样本的分类、包装与运输：样本的分类、包装与运输：必须按规定要求对感染性物质行分类、包装与运输。疑必须按规定要求对感染性物质行分类、包装与运输。疑似高致病性病原微生物样本，应该采取特殊明

23、确的标示似高致病性病原微生物样本，应该采取特殊明确的标示.二病原微生物菌毒种的保藏与管理二病原微生物菌毒种的保藏与管理 1.1.菌毒种的供给：菌毒种的供给：第一类、第二类菌毒种：第一类、第二类菌毒种：由卫生部指定的保藏管理机构统一供由卫生部指定的保藏管理机构统一供 应，其他任何单位或个人不得对国内、外办理。应，其他任何单位或个人不得对国内、外办理。第三类、第四类菌毒种：专业实验室负责供给所管理的菌毒第三类、第四类菌毒种：专业实验室负责供给所管理的菌毒 种，其他菌毒种均由各有关保藏管理中心供给。种，其他菌毒种均由各有关保藏管理中心供给。2.2.菌毒种的使用菌毒种的使用:使用单位需符合生物平安要求

24、的条件和设备。菌毒种应有专人负使用单位需符合生物平安要求的条件和设备。菌毒种应有专人负责管理，建立必要的制度。责管理，建立必要的制度。*使用第一类菌毒种的单位，必须经国务院卫生行政部门批准；使用第一类菌毒种的单位，必须经国务院卫生行政部门批准；*使用第二类菌毒种的单位必须经省、自治区、直辖市卫生行政部使用第二类菌毒种的单位必须经省、自治区、直辖市卫生行政部门批准；门批准；*使用第三类菌毒种的单位，应当经县级卫生行政部门批准。使用第三类菌毒种的单位，应当经县级卫生行政部门批准。三实验废弃物的处理三实验废弃物的处理处理方式如下：处理方式如下：感染性废弃物感染性废弃物实验中产生的感染性废弃物，要随时

25、放入盛有适宜消毒液的防碎裂的容器中浸泡，以进行污染清除处理。消毒液在使用时需新鲜配置。然后把消毒液及废弃物置于合适的容器内进行高压灭菌或焚烧处理。可重复使用的运输容器应防渗漏，并附带密闭的盖子。病理性废弃物病理性废弃物质粒、细胞、单克隆抗体、临床组织样本及实验动物组织、尸体等废弃物，应集中放置于实验室指定位置，以备高压蒸汽灭菌后废弃。损伤性废弃物损伤性废弃物使用过的注射针头（包括不能从注射器上取下的针头等）刀片等锐器不应再重复使用，置于一次性容器中，进行高压灭菌或焚烧处理。国外严格规定第六章第六章 临床实验室生物平安管理临床实验室生物平安管理 一、临床实验室的生物平安隐患一、临床实验室的生物平

26、安隐患 最大隐患：最大隐患：存在大量未知因素带存在大量未知因素带来的风险。来的风险。临床实验室接收的标本很多是临床实验室接收的标本很多是来源于未知疾病的个体，其中是来源于未知疾病的个体，其中是否含有致病因子及其危害性大小、否含有致病因子及其危害性大小、传染途径均不明。传染途径均不明。二、临床实验室的生物平安准那么二、临床实验室的生物平安准那么 防护原那么：假设所有来自病人防护原那么：假设所有来自病人的血液、体液和的血液、体液和 组织都具有传染性！组织都具有传染性！要求临床实验室人员严格按照实要求临床实验室人员严格按照实验室平安操作规程操作，重要是验室平安操作规程操作，重要是降低溅出和气溶胶的产

27、生。降低溅出和气溶胶的产生。0 02020404060608080100100120120140140160160180180200200病毒病毒细菌细菌真菌真菌寄生虫寄生虫一级一级二级二级三级三级四级四级临床检验相关生物危险等级分布临床检验相关生物危险等级分布n医务人员职业防护医务人员职业防护n认定病人的血液、体液、分泌物、排泄物均具有传染性，接触上述物质者必须采取防护。n双向防护，既防止疾病从病人传至医务人员，又防止疾病从医务人员传至病人 n防护措施问题：意识薄弱防护措施问题：意识薄弱 措施不到措施不到位位n l 洗手：接触病人的污染物时，不管洗手：接触病人的污染物时，不管是否戴手套，都必

28、须洗手。是否戴手套，都必须洗手。n 2 戴手套：戴手套：n 3 有可能发生喷溅时，应戴眼罩和口有可能发生喷溅时，应戴眼罩和口罩，并穿防护衣。罩，并穿防护衣。n 4 被污染的医疗用品和仪器设备应及被污染的医疗用品和仪器设备应及时处理时处理!n 5 锐利器具和针头应小心处理，以防锐利器具和针头应小心处理，以防被刺伤。被刺伤。n 6 接种疫苗接种疫苗 乙肝疫苗乙肝疫苗 三、临床实验室平安操作的根本要求三、临床实验室平安操作的根本要求一般临床实验室应按一般临床实验室应按BSL-2BSL-2的要求。的要求。平安防护措施包括平安操作标准程序平安防范制度和废弃平安防护措施包括平安操作标准程序平安防范制度和废

29、弃物处理制度等。物处理制度等。1 1所有处理血液、体液或其他可能具有传染性的物质所有处理血液、体液或其他可能具有传染性的物质包括接触病人包括接触病人 的黏膜或有损伤的皮肤、或在处理污染的物品或外表的黏膜或有损伤的皮肤、或在处理污染的物品或外表时的工作人时的工作人 员都应戴手套，如果有可能发生血液或体液的喷溅，员都应戴手套，如果有可能发生血液或体液的喷溅，或必须在生物或必须在生物 平安柜外处理微生物时，那么应使用面部防护装备。平安柜外处理微生物时，那么应使用面部防护装备。如果手套破损、如果手套破损、刺破、或失去其屏障功能，那么应尽快更换。一次性刺破、或失去其屏障功能，那么应尽快更换。一次性手套不

30、得重复使手套不得重复使 用，在接触病员后应更换手套。不能戴着手套离开实用，在接触病员后应更换手套。不能戴着手套离开实验室或接触验室或接触 “干净设施外表如键盘、干净设施外表如键盘、门柄等。、门柄等。2 2工作台面应铺垫一块具有吸收性能的材料，以防止液工作台面应铺垫一块具有吸收性能的材料，以防止液体滴落或溅体滴落或溅 落造成的感染性物质扩散，使用后按感染性废弃物处落造成的感染性物质扩散，使用后按感染性废弃物处理。理。3 3所有可能产生气溶胶或飞沫的操作都应在生物平安柜所有可能产生气溶胶或飞沫的操作都应在生物平安柜中进展。中进展。4实验室应使用机械移液装置，绝对制止用口吸移液。5制止用手直接处置注

31、射器及其他锐器，以防止损伤；使用后或废弃的锐利物品都应放入专用容器内，并及 时运走处理。6实验中用过的污染物品在重复使用或装入容器中按传 染性废弃物进展处理前，应先进展去污处理。7被血液或其他体液污染的设备在进展维修之前应先进 行清洁和消毒，无法彻底消毒的设备必须贴上生物危 害警告标签。8手或其他部位的皮肤在接触血液或其他体液后必须立 即彻底清洗，在实验工作完毕后或取下手套后应立即 洗手;在离开实验室之前应脱下所有的个人防护装备。9血液或其他体液发生泄漏或工作完毕后，要及时用合 适的化学杀菌剂对实验室工作区进展外表消毒。临床实验室平安操作的根本要求临床实验室平安操作的根本要求n2工作台面应铺垫

32、一块具有吸收性能的材料，以防止液体滴落或溅落造成的感染性物质扩散，使用后按感染性废弃物处理。n 3所有可能产生气溶胶或飞沫的操作都应在生物平安柜中进展。临床实验室平安操作的根本要求临床实验室平安操作的根本要求n 4实验室应使用机械移液装置，绝对制止用口吸移液。n 5制止用手直接处置注射器及其他锐器，以防止损伤；使用后或废弃的锐利物品都应放入专用容器内，并及时运走处理。n 6实验中用过的污染物品在重复使用或装入容器中按传染性废弃物进展处理前，应先进展去污处理。n n7被血液或其他体液污染的设备在进展维修之前应先进展清洁和消毒。n 8手或其他部位的皮肤在接触血液或其他体液后必须立即彻底清洗，在实验

33、工作完毕后或取下手套后应立即洗手；在离开实验室之前应脱下所有的个人防护装备。n 9血液或其他体液发生泄漏或工作完毕后，要及时用适宜的化学杀菌剂对实验室工作区进展外表消毒。1.动物尸体解剖动物尸体解剖2.毒液滴到物品外表毒液滴到物品外表3.翻开容器的螺旋盖翻开容器的螺旋盖4.摔碎有培养物的瓶、平皿摔碎有培养物的瓶、平皿5.注射器从安瓿抽取毒液注射器从安瓿抽取毒液6.离心时离心管破裂离心时离心管破裂7.翻开、打碎枯燥菌种安瓿管翻开、打碎枯燥菌种安瓿管8.注射器针尖滴出的毒液注射器针尖滴出的毒液9.拍打、刷衣服拍打、刷衣服10.搅拌搅拌11.小白鼠鼻内接种小白鼠鼻内接种可可造成中重度造成中重度气溶胶

34、气溶胶的操作的操作血液成分制备人员:n据文献显示据文献显示:n无偿献血者无偿献血者HBsAg、抗抗-HCV、抗抗-HIV的的感染率分别为感染率分别为6.1%、2.2%和和0.03%;n未明原因的血液传播性疾病不断地增加未明原因的血液传播性疾病不断地增加;n采集、制备血液标本，难免面临很多危险因素采集、制备血液标本，难免面临很多危险因素和意外暴露。和意外暴露。n危险因素：危险因素：n1 物理因素物理因素 包括针刺损伤和操作擦伤。包括针刺损伤和操作擦伤。针头刺伤为采集成分血样标本后针头误投垃圾桶，捡回时碰伤手指；据统计，血站职工职业暴露中针刺占77.78%，皮损污染占15.7%，黏膜污染占6.52

35、%2。n 2 生物因素生物因素 主要包括乙型肝炎病毒、丙型肝炎病主要包括乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病病毒、结核杆菌、流感病毒等。毒、艾滋病病毒、结核杆菌、流感病毒等。据研究含病毒高的血液和体液依次为：血液、血液成分、伤口分泌物、精液、阴道分泌物、羊水等。Is it a sharps hazard?Is it a sharps hazard?Examples:needles syringes scalpels all biologically contaminated objects that can easily penetrate skin(Pasteur pipettes,razor

36、 blades,etc.)Place sharps in approved sharps container for disposal!n 3.隐患因素：n n 医疗废弃物根本上属于感染性废物；，n 损伤性废物；，n 主要包括：成分血转移袋；一次性耗材；一次性生理盐水和废抗凝剂；注射器及针头；n 渗漏血袋；一次性工作服、帽子、口罩、手套等。n发现损伤后的护理发现损伤后的护理 :n发生针头刺伤，操作中擦伤、割伤等时：发生针头刺伤，操作中擦伤、割伤等时：n(1)暂时停顿接触血液工作；暂时停顿接触血液工作；n(2)立即脱去乳胶手套，用生理盐水冲洗查立即脱去乳胶手套，用生理盐水冲洗查看伤情；看伤情；n

37、(3)在伤口近心端向远心端挤压伤口，尽可在伤口近心端向远心端挤压伤口，尽可能挤出损伤处的血液，再用流水进展冲洗能挤出损伤处的血液，再用流水进展冲洗完成后用完成后用0.5%碘伏消毒，并包扎伤口；碘伏消毒，并包扎伤口；n(4)已污染的工作服先消毒后清洗；已污染的工作服先消毒后清洗；n(5)查看制备的血袋条码，以便检查结果查看制备的血袋条码，以便检查结果n(6)登记受伤情况及处理方法；登记受伤情况及处理方法；n(7)伤情严重者实施生物平安应急预案并承伤情严重者实施生物平安应急预案并承受医学观察。受医学观察。急诊科急诊科 n急诊患者特点：急诊患者特点：在潜伏期的患者和未明确诊在潜伏期的患者和未明确诊断

38、的传染病患者较多。断的传染病患者较多。n必须树立的观念：把任何患者的血液及污染物；必须树立的观念：把任何患者的血液及污染物；呼吸道排泄物等；都认为具有潜在感染性，加呼吸道排泄物等；都认为具有潜在感染性，加强自我防护。强自我防护。n防护措施：戴帽子防护措施：戴帽子 口罩口罩 手套，隔离衣等，在手套，隔离衣等，在特殊情况下可考虑戴双层手套在工作服的口特殊情况下可考虑戴双层手套在工作服的口袋内备袋内备 2 双手套，便于在紧急情况下使用；双手套，便于在紧急情况下使用；重视洗手重视洗手！n实施预防接种：如甲肝实施预防接种：如甲肝 乙肝乙肝 流感疫苗等，流感疫苗等，抗肿瘤药和其他危险药物的生物防护抗肿瘤药

39、和其他危险药物的生物防护 n危险药物：危险药物：指具有致癌性、指具有致癌性、致畸性、致畸性、生殖毒性、生殖毒性、遗传毒遗传毒性及低剂量致器官毒性的药物。性及低剂量致器官毒性的药物。n包括：包括：抗肿瘤药、抗肿瘤药、抗病毒药、抗病毒药、激素、激素、免疫抑制剂等。免疫抑制剂等。n职业暴露风险：研究说明：医务人员在诊疗、职业暴露风险：研究说明：医务人员在诊疗、配制和使用危险药物等过程中可直接或间接暴配制和使用危险药物等过程中可直接或间接暴露于危险药物露于危险药物,产生不良反响。产生不良反响。n暴露的途径：呼吸道吸入、暴露的途径：呼吸道吸入、皮肤接触吸收、皮肤接触吸收、消化道摄入等。消化道摄入等。n危

40、害：危害：职业暴露危险药物可导致机体免疫力职业暴露危险药物可导致机体免疫力n 降低、降低、发生肿瘤的危险性增加和潜在的生殖发生肿瘤的危险性增加和潜在的生殖损害。损害。n平安防护措施平安防护措施:n1，制定平安操作规程，制定平安操作规程;对可能接触危险药物对可能接触危险药物的的 医务人员加强平安教育和培训医务人员加强平安教育和培训;n2，设置专用配药场所，设置专用配药场所;使用生物平安柜使用生物平安柜;n3，个人防护：装备包括手套、，个人防护：装备包括手套、隔离衣、隔离衣、护目护目镜、镜、面罩等面罩等;n4，加强对废弃物处理的管理，加强对废弃物处理的管理;n正确使用个人防护设备正确使用个人防护设

41、备：如防护服、手套、目镜、一次性帽子、口罩及鞋套。n防护服：宜穿一次性低穿透性隔离衣,有条件可选用正压连身工作服；隔离衣应具有低穿透性、开口向后、长袖紧袖口;n手套：手套：n研究证明戴手套是预防抗肿瘤药物皮肤暴研究证明戴手套是预防抗肿瘤药物皮肤暴露的最有效手段露的最有效手段,值得注意的是手套的厚度值得注意的是手套的厚度比质地更为重要比质地更为重要,应使用无粉、应使用无粉、厚、厚、长的乳长的乳胶手套胶手套,长度能覆盖住隔离衣袖口为宜长度能覆盖住隔离衣袖口为宜；nSlevin 等的研究指出等的研究指出,乳胶手套防渗透功能乳胶手套防渗透功能差差,而聚乙烯手套具有防渗透功能而聚乙烯手套具有防渗透功能,

42、但由于但由于聚乙烯手套比较薄聚乙烯手套比较薄,使用过程中容易破损且使用过程中容易破损且不易于精细操作不易于精细操作,因此建议戴双层手套因此建议戴双层手套,在在聚乙烯手套外加戴一层乳胶手套聚乙烯手套外加戴一层乳胶手套,注意手套注意手套须盖住袖口。须盖住袖口。n 戴手套前及脱手套之后应认真洗手。戴手套前及脱手套之后应认真洗手。n切忌因怕麻烦而简化防护程序。切忌因怕麻烦而简化防护程序。n配药本卷须知配药本卷须知 n在进展药物配制操作时在进展药物配制操作时,翻开安瓿时应翻开安瓿时应垫以纱布垫以纱布,以防划破手套以防划破手套;n翻开粉剂安瓿时翻开粉剂安瓿时,应用无菌纱布包裹应用无菌纱布包裹;n溶解药物时

43、溶解药物时,溶媒应沿安瓿壁缓慢注入溶媒应沿安瓿壁缓慢注入瓶底瓶底,以防粉沫溢出。以防粉沫溢出。n抽取药液选用一次性注射器抽取药液选用一次性注射器,以不超过以不超过容器的容器的 3/4容积为宜容积为宜,排气时应排到密排气时应排到密闭容器中。闭容器中。n有害污物的管理：有害污物的管理：n 接触化疗药物的用具、接触化疗药物的用具、污物应放入专用袋污物应放入专用袋内集中封闭处理内集中封闭处理,收集容器应稳固、防漏和收集容器应稳固、防漏和带盖带盖,有明确标识。有明确标识。n勿在放置抗肿瘤药物的冰箱中存放食品勿在放置抗肿瘤药物的冰箱中存放食品;n勿在操作室内饮水和进食。勿在操作室内饮水和进食。发生急性危险

44、药物暴露后的紧急处理：发生急性危险药物暴露后的紧急处理：如不慎将药液溅到皮肤上或眼睛内,可用大量清水或氯化钠注射液反复冲洗接触部位的皮肤,记录接触情况,必要时按化疗药外漏处理。第七章第七章 基因工程实验室的生物平安管理基因工程实验室的生物平安管理 n基因工程：基因工程：n 包括包括 1.利用载体系统的重组体利用载体系统的重组体DNA 技术技术 n 2.利用物理或者化学方法把异源利用物理或者化学方法把异源DNAn 直接导入有机体的技术直接导入有机体的技术n 基因工程基因工程:具有巨大应用前景具有巨大应用前景n基因工程平安性问题也受到广泛关注基因工程平安性问题也受到广泛关注n重组重组DNA技术可能

45、制造出具有潜在危险的新型微生物，技术可能制造出具有潜在危险的新型微生物，对人类、动物和环境造成威胁对人类、动物和环境造成威胁n n 涉及涉及“生物平安性问题生物平安性问题一、基因工程实验室的危险因素一、基因工程实验室的危险因素 基因工程实验中的生物危害基因工程实验中的生物危害基因释放和漂移带来的基因释放和漂移带来的基因污染问题基因污染问题转基因食品潜在转基因食品潜在的毒性问题的毒性问题基因改造微生物的具基因改造微生物的具有潜在的致病危险性有潜在的致病危险性个体危害个体危害 群体危群体危害害2.仪器使用的危险因素仪器使用的危险因素 高压灭菌锅高压灭菌锅 离心机离心机 凝胶成像系统凝胶成像系统 电

46、泳系统电泳系统 超声破碎仪超声破碎仪电穿孔仪电穿孔仪杂交炉杂交炉 溴化乙锭溴化乙锭焦碳酸二乙酯焦碳酸二乙酯DEPCTrizol秋水仙素秋水仙素氯仿氯仿 二、平安防护原那么二、平安防护原那么 根本原那么：根本原那么：1.确保实验操作人员的平安。确保实验操作人员的平安。2.确保实验操作场所及周边环境的平安。确保实验操作场所及周边环境的平安。3.确保实验仪器设备正常运作的平安。确保实验仪器设备正常运作的平安。4.确保实验操作对象的平安。确保实验操作对象的平安。一级屏障：一级屏障：生物平安柜、通风橱柜、高压灭菌锅生物平安柜、通风橱柜、高压灭菌锅等。等。二级屏障：二级屏障：实验室设计建造、设备配置等。实

47、验室设计建造、设备配置等。三、生物平安评估三、生物平安评估n平安性评估考察的依据主要建立于:n 2.转基因动物和基因敲除动物的平安性。n 3.转基因植物的生物平安性。n 4.遗传修饰的生物平安性。三、基因工程的平安控制三、基因工程的平安控制 一相关法规一相关法规 我国相继公布了我国相继公布了?基因工程平安管理方法基因工程平安管理方法?19931993年和年和?农业农业转基因生物平安管理条例转基因生物平安管理条例?20012001年，以及其他相关的微年，以及其他相关的微生物学实验室生物平安管理等规章，为基因工程在我国的生物学实验室生物平安管理等规章，为基因工程在我国的平安管理提供了法律保障。平安

48、管理提供了法律保障。二基因工程工作平安等级二基因工程工作平安等级 按照潜在危险程度，分为四个平安等级按照潜在危险程度，分为四个平安等级:平安等级平安等级:该类基因工程工作对人类安康和该类基因工程工作对人类安康和生态环境尚不存在危险；生态环境尚不存在危险；平安等级平安等级:该类基因工程工作对人娄安康和该类基因工程工作对人娄安康和生态环境具有低度危险；生态环境具有低度危险；平安等级平安等级:该类基因工程工作对人类安康和生该类基因工程工作对人类安康和生态环境具有中度危险；态环境具有中度危险；平安等级平安等级:该类基因工程工作对人类安康和生该类基因工程工作对人类安康和生态环境具有高度危险。态环境具有高

49、度危险。n目前各国实验室中使用的宿主目前各国实验室中使用的宿主载体系统载体系统遵从于美国国立卫生研究院制定的生物控遵从于美国国立卫生研究院制定的生物控制系统标准。制系统标准。n确立以原核生物和低等真核生物作为宿主，确立以原核生物和低等真核生物作为宿主，相关改造的系列质粒为载体的生物控制系相关改造的系列质粒为载体的生物控制系统。统。三基因工程的平安控制三基因工程的平安控制n平安等级的标准，由国务院主管部门制定。平安等级的标准，由国务院主管部门制定。n 属于平安等级属于平安等级和和的工作，由本单的工作，由本单 位行政位行政 负负责人批准。责人批准。n 属于平安等级属于平安等级的工作，的工作，报国务

50、院主管部门批报国务院主管部门批准。准。n 属于平安等级属于平安等级的工作，经国务院主管部门的工作，经国务院主管部门 审审查，报全国基因工程平安委员会批准。查，报全国基因工程平安委员会批准。四平安操作标准四平安操作标准1.常规平安管理:适用于其他类型实验室平安管理的日常标准，同样适用于基因工程实验室。2.生物平安管理:世界卫生组织按实验室所从事研究工作的生物危害等级将实验室分为3个类别，并按照不同的类别制定了相应的平安操作标准。根底实验室平安操作标准根底实验室平安操作标准 从事一、二级平安等级的研究工作场所，操作从事一、二级平安等级的研究工作场所，操作标准根本同一级生物平安实验室。标准根本同一级