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临床检验方法的评价课件.ppt

1、临床检验方法的评价1临床检验方法的评价2 决定性方法(definitive method):经详尽研究尚未发现不准确度或不确定性原因的方法。参考方法(reference method):经详尽研究证实其不准确度与不精密度可以忽略的方法。常规方法(routing method):可满足临床或其他目的需要的日常使用的方法。临床检验方法的评价3分分析析物物 决决定定性性方方法法参参考考方方法法CaID-MS原原子子吸吸收收分分光光光光度度法法Cl电电量量滴滴定定中中子子活活化化法法电电流流滴滴定定法法FeID-MS沉沉淀淀蛋蛋白白后后亚亚铁铁嗪嗪反反应应MgID-MS原原子子吸吸收收分分光光光光度度

2、法法PID-MSKID-MS中中子子活活化化法法火火焰焰光光度度法法Na重重量量分分析析法法中中子子活活化化法法火火焰焰光光度度法法临床检验方法的评价4分分析析物物决决定定性性方方法法参参考考方方法法A Al lb b免免疫疫化化学学法法T TP P双双缩缩脲脲法法C Cr re ea aI ID D-M MS S中中子子活活化化法法离离子子交交换换层层析析U Ur re ea aI ID D-M MS S尿尿素素酶酶法法U UA AI ID D-M MS S尿尿酸酸酶酶法法B Bi il l重重氮氮法法G Gl lu uI ID D-M MS S己己糖糖激激酶酶法法C Ch ho ol lI

3、 ID D-M MS S胆胆固固醇醇氧氧化化酶酶法法T TG GI ID D-M MS S酶酶法法临床检验方法的评价5被测物被测物决定性方法决定性方法参考方法参考方法血细胞计数血细胞计数ICSH血清酶血清酶IFCCHbA1cIFCC or NGSP临床检验方法的评价6临床检验方法的评价7 标准品标准品(reference material):充分均匀并具有一个或多个良好确定的特性值的材料或物质,用来校准仪器设备、评估测定方法或给其它物质赋值。一级标准品一级标准品(原级参考物):具有最高计量学特性的参考物质,由一级参考测量过程定值 二级标准品二级标准品:用一级标准品校准,参考方法定值。校准品校准

4、品:用二级标准品校准,拟被用于校准的常规方法定值。用于对常规方法和仪器的校准。临床检验方法的评价8国际单位国际单位原级参考方法原级参考方法一级参考品一级参考品次级参考方法次级参考方法二级参考品二级参考品厂家选定方法厂家选定方法标准方法标准方法厂家工作校准品厂家工作校准品产品校准品产品校准品终用户方法终用户方法常规样品常规样品检测结果检测结果材料材料 校准和赋值校准和赋值 测量过程测量过程 执行者执行者 不确定度不确定度IFCCARMLMLEnd-user临床检验方法的评价9 校准品的应用校准品的应用 与试剂、仪器配套使用 使用有证参考品(CRM,GBW)不能使用定值质控品(Control Ma

5、terials)代替校准品(Calibrator)临床检验方法的评价10临床样本临床样本国家标样国家标样JJG464-96校准品校准品厂家标准厂家标准TC 158 mg/dl 1.5TG=150 mg/dl 1.4HDL-C=56.2 mg/dl 0.4检测结果检测结果TGTCHDL-C国家计量标准国家计量标准吸光度 0.005波长 340 nm/505nm漂移 0.0015自动生化分析仪自动生化分析仪仪器名称仪器名称:HITACHI 7170A测定范围测定范围:TC=3-800 mg/dl 3%TG=0-11.4 mmol/l 2.4%HDL-C=3-150 mg/dl 2.6%临床检验方法

6、的评价11全血样本稳定性分析(MCV)0.440.460.480.50.520.540.560.580123.556.58放置时间(小时)MCV(%)2-8室温摇床转盘临床检验方法的评价12临床检验方法的评价13 初步评价(NCCLS EP10)精密度(NCCLS EP5)对比及偏差(NCCLS EP9)线性(NCCLS EP6)抗干扰能力(NCCLS EP7)基质效应(NCCLS EP14)临床准确度(NCCLS GP10)临床检验方法的评价14NCCLS文件文件EP9-A用患者样本进行方法对比用患者样本进行方法对比及偏差评估及偏差评估批准指南批准指南1995年年12月月临床检验方法的评价1

7、5 引进新方法前或用一种方法替代另一种引进新方法前或用一种方法替代另一种方法时进行偏差分析。方法时进行偏差分析。评价两种分析方法(同一分析项目)的评价两种分析方法(同一分析项目)的偏差。偏差。临床检验方法的评价16 熟悉仪器操作熟悉仪器操作 熟悉评价方案熟悉评价方案 质控质控 足够的数据足够的数据临床检验方法的评价17 来源于健康人或患者,无干扰,尽量避免贮存;来源于健康人或患者,无干扰,尽量避免贮存;测定物浓度范围应在医学决定水平范围内均匀测定物浓度范围应在医学决定水平范围内均匀分布;分布;样本数至少样本数至少40例,增加数量能提高可信性例,增加数量能提高可信性临床检验方法的评价18 厂家要

8、求的实验室常规方法或公认的参考方法。具有好的精密度 没有已知的干扰物 相同单位 相对国家标准或参考方法的偏差是已知的临床检验方法的评价19 每天分别用两种方法进行测定,每天分别用两种方法进行测定,测定顺序:测定顺序:1、2、3、4、5、6、7、8 8、7、6、5、4、3、2、1 测定次数:至少测定测定次数:至少测定5天,共天,共40个样本个样本临床检验方法的评价20 系统误差系统误差 人为误差人为误差 常规质控常规质控临床检验方法的评价21临床检验方法的评价22临床检验方法的评价23表表 1 1 病病 人人 样样 本本 检检 验验 结结 果果B BE EC CK KM MA AN N(Y Y)

9、(g g/l l)H HI IT TA AC CH HI I(X X)(g g/l l)样样 品品号号结结 果果1 1(Y Y1 1)结结 果果2 2(Y Y2 2)均均 值值Y Yi i)D DY Yi i结结 果果1 1(X X1 1)结结 果果2 2(X X2 2)均均 值值(X Xi i)D DX Xi iY Yi i-X Xi i1 12 25 52 25 52 25 50 02 28 8.3 32 28 8.1 12 28 8.2 20 0.2 2-3 3.2 22 24 46 64 47 74 46 6.5 51 14 47 7.5 54 47 7.4 44 47 7.5 50

10、0.1 1-1 13 33 36 63 36 63 36 60 03 38 8.4 43 38 8.1 13 38 8.3 30 0.2 2-2 2.3 34 43 39 94 40 03 39 9.5 51 14 41 1.3 34 40 0.8 84 41 1.1 10 0.5 5-0 0.6 65 51 14 41 14 41 14 40 01 18 8.7 71 18 8.9 91 18 8.8 80 0.2 2-4 4.8 86 63 32 23 32 23 32 20 03 36 6.1 13 36 6.2 23 36 6.2 20 0.1 1-4 4.2 27 72 27 72

11、28 82 27 7.5 51 13 31 1.2 23 31 1.2 23 31 1.2 20 0-3 3.7 78 84 42 24 43 34 42 2.5 51 14 43 3.8 84 43 3.9 94 43 3.9 90 0.1 1-1 1.4 4临床检验方法的评价2433343434035.636.335.90.3-1.934303030032.132.632.30.5-2.335404040041.14141.10.1-1.136424242043.243.443.30.2-1.337383838038.638.938.70.3-0.73843434304544.944.90

12、.1-1.939353535036.93736.90.1-1.940444544.5144.845.3450.5-0.5平平 均均 数数0 0.3 37 70 0.4 41 1-2 2.7 7临床检验方法的评价25y=1.1722x-9.0485R=0.969510203040501020304050HITACHI 7170(BCG)BECKMAN CX9(BCP)临床检验方法的评价26Yi-Xi对X i偏 倚图-15-10-505101520304050HITACHI 7170(B CG)Yi-Xi偏差图:每次测定的偏差图:每次测定的Y均值与均值与X均值均值 之差之差-相应相应X均值图均值图

13、临床检验方法的评价27临床检验方法的评价28临床检验方法的评价29X 最适范围检查相关最适范围检查相关(ALB)r=N Ni i2 2ijij2 2j jN Ni i2 2ijij2 2j jN Ni i2 2j jijijijij)y y(y(y)x x(x(x)y y)(y)(yx x(x(xr=0.9695临床检验方法的评价30回归系数评价计算回归系数评价计算截距截距 a=-9.05斜率斜率 b=1.17Y=1.17 X 9.05临床检验方法的评价31临床检验方法的评价32B BC CP P 与与B BC CG G 法法测测定定血血清清A AL LB B 时时结结果果的的预预期期偏偏倚倚

14、估估计计B BP PG G 法法(g g/l l)B BC CP P 法法(g g/l l)预预期期偏偏倚倚(g g/l l)相相对对偏偏倚倚(%)3 30 02 26 6.5 5-3 3.5 51 11 1.6 64 40 03 37 7.8 8-2 2.2 25 5.5 55 50 04 49 9.1 1-0 0.9 91 1.8 8临床检验方法的评价33干化学与湿化学结果的比较y=0.7993x+8.1606R2=0.98840501001502002503003500100200300400HITACHI 7170AROCHE Reflotron临床检验方法的评价34Evaluatio

15、n of The Linearity of Quantitative Analytical MethodsEP6-P临床检验方法的评价35 为实验室中采用定量分析方法的用户提为实验室中采用定量分析方法的用户提供评价仪器或方法是否满足厂家线性指供评价仪器或方法是否满足厂家线性指标的评价方法。标的评价方法。用户可为分析方法设定线性范围。用户可为分析方法设定线性范围。临床检验方法的评价36定义定义 实验范围(实验范围(Assay Range):):或者或者 线性范围(线性范围(Linear Range):分析系统最终输出的、分析系统最终输出的、与被测物浓度或活性成比例的、与被测物浓度或活性成比例的、

16、浓度或活性值范围浓度或活性值范围临床检验方法的评价37线性(线性(Linearity):曲线接近直线的程度的量;与完整系统的反应相关(是最后的分析结果或解释,不仅是仪器的输出结果)临床检验方法的评价38 线性是分析方法的一个特征,不同于准线性是分析方法的一个特征,不同于准确性和精密度。确性和精密度。线性实验应该使用与待分析物基质相似线性实验应该使用与待分析物基质相似的样本。的样本。线性检验系统反应,包括校准、线性化线性检验系统反应,包括校准、线性化技术、系数和仪器反应。技术、系数和仪器反应。临床检验方法的评价39 用简单的实验来检验厂家标示的线性范用简单的实验来检验厂家标示的线性范围及定量分析

17、方法的分析范围。围及定量分析方法的分析范围。在实验室中作为方法学的信息(方法线在实验室中作为方法学的信息(方法线性)。性)。进行线性评价实验。进行线性评价实验。临床检验方法的评价40 执行分析过程的实验室人员必须掌握仪执行分析过程的实验室人员必须掌握仪器操作和维护程序、样本准备方法和校器操作和维护程序、样本准备方法和校准。准。对较简单的设备需要对较简单的设备需要5天或更少时间。天或更少时间。对较复杂的多通道设备需要对较复杂的多通道设备需要5天或更长时天或更长时间。间。临床检验方法的评价41 在完成仪器熟悉过程后开始实验并收集在完成仪器熟悉过程后开始实验并收集数据。数据。全部实验和数据采集应在同

18、一工作日内全部实验和数据采集应在同一工作日内完成。完成。临床检验方法的评价42 样本要求:最少4个浓度水平,推荐5个水平。基质效应:应使用与病人样本相似的样本或注明基质类型。临床检验方法的评价43 病人混合血清病人混合血清 理想的样本基质理想的样本基质 高值样本:高于上限高值样本:高于上限30%低值样本:线性低限或更低。低值样本:线性低限或更低。临床检验方法的评价44可以使用的样本可以使用的样本 含添加物的混合病人血清:含添加物的混合病人血清:加入品在没有干扰物存在时不需高纯度。经处理的材料稀释的混合血清 用于降低分析物浓度,材料处理:透析、热处理、层析。临床检验方法的评价45可以使用的样本可

19、以使用的样本 生理盐水稀释的混合血清:生理盐水稀释的混合血清:在线性实验中使用此类样本可掩盖不同的基在线性实验中使用此类样本可掩盖不同的基质效应。质效应。商品质控或校准品:商品质控或校准品:此类样本由于不是正常的生理形式,可掩盖此类样本由于不是正常的生理形式,可掩盖实际的线性结果。实际的线性结果。临床检验方法的评价46 不同比例稀释商品质控物;不同比例稀释商品质控物;水溶液水溶液:一般无基质效应:一般无基质效应 其它溶液:基质效应与有机溶剂相似其它溶液:基质效应与有机溶剂相似临床检验方法的评价47 ALB:白蛋白干粉、:白蛋白干粉、human fraction V.乙醇:无水乙醇乙醇:无水乙醇

20、 ALP:纯酶:纯酶 AMS:腮腺或胰腺提取物:腮腺或胰腺提取物 BIL:胆红素纯品胆红素纯品 Ca:CaCO3 Cl:NaCl临床检验方法的评价48 CHOL:胆固醇纯品或稀释质控品:胆固醇纯品或稀释质控品 CO2:CaCO3 CREA:标准液或高值血清:标准液或高值血清 -ALT:纯酶纯酶 GLU:右旋糖右旋糖 AST:纯酶纯酶 ALT:纯酶纯酶临床检验方法的评价49 HBD:纯酶纯酶 LDH:纯酶纯酶 Lipase:胰腺提取物胰腺提取物 Mg:MgCl2 P:K(H)2PO4或或Na(H)PO4 TP:白蛋白干粉、人或牛的成份白蛋白干粉、人或牛的成份V UA:在得不到高值病人样本时,使用

21、标准储备液或在得不到高值病人样本时,使用标准储备液或干燥尿酸干燥尿酸。BUN:在得不到高值病人样本时,使用标准储备液或:在得不到高值病人样本时,使用标准储备液或干燥尿素干燥尿素。临床检验方法的评价50 分析序列应为随机排列。分析序列应为随机排列。有显著携带污染时,应用空白隔开样本。有显著携带污染时,应用空白隔开样本。每个实验组内应至少分析每个实验组内应至少分析4个(最好是个(最好是5个)不同浓度水平的样本。个)不同浓度水平的样本。临床检验方法的评价51 应覆盖待评线性范围的上、下限。应覆盖待评线性范围的上、下限。评价结果不满意时应重新设定浓度。评价结果不满意时应重新设定浓度。线性范围内至少应保

22、留有线性范围内至少应保留有4个浓度。个浓度。临床检验方法的评价52 足量的混合血清。足量的混合血清。低浓度混合血清(低浓度混合血清(No1);高浓度混合血);高浓度混合血清(清(No5)血清(血清(No2):):3份份“No1”+1份份“No5”血清(血清(No3):):2份份“No1”+2份份“No5”血清(血清(No4):):1份份“No1”+3份份“No5”临床检验方法的评价53 C1V1+C5 V5浓度浓度=-V1+V5临床检验方法的评价54x1 y1-1 y1-2 y1-3 y1-4x2 y2-1 y2-2 y2-3 y2-4x3 y3-1 y3-2 y3-3 y3-4 x4 y4-

23、1 y4-2 y4-3 y4-4x5 y5-1 y5-2 y5-3 y5-4临床检验方法的评价55 观察有无明显的数据错误。观察有无明显的数据错误。若有明显异常时应判断是否为离群点。若有明显异常时应判断是否为离群点。如离群点超出如离群点超出2点,则保留全部数据或重点,则保留全部数据或重做全部实验。做全部实验。临床检验方法的评价56 用于特定浓度用于特定浓度Y值离群点的检验。值离群点的检验。将将4个重复值从大到小排列(个重复值从大到小排列(Y1到到Y4)。)。计算:计算:D=Y1-Y4 若若Y1可能是离群点,计算:可能是离群点,计算:D1=(Y1-Y2)/D 若若Y4可能是离群点,计算:可能是离

24、群点,计算:D4=(Y3-Y4)/D临床检验方法的评价57判断值(判断值(Critical value)(0.05)0.765(0.01)0.889临床检验方法的评价58 线性线性X-Y图,图,X轴为分析物浓度。轴为分析物浓度。反应值或仪器输出值为反应值或仪器输出值为Y轴。轴。目测离群值。目测离群值。(Y=aX+b )目测线性判断是否符合要求。目测线性判断是否符合要求。进行统计学判断和评价。进行统计学判断和评价。临床检验方法的评价59 统计学标准和临床可接受限不同。统计学标准和临床可接受限不同。慎用方法学线性范围从慎用方法学线性范围从0开始。开始。有临床意义的浓度应在线性评价中:有临床意义的浓

25、度应在线性评价中:最小的线性浓度最小的线性浓度 医学决定水平医学决定水平 最大的线性浓度最大的线性浓度临床检验方法的评价60 Dixon W.J.and Massey F.J.introduction to statistical analysis,3rd edition,McGraw-Hill Book Co.,New York,1969,pp308-310,500,536-537.Weissberg A.and Beatty G.H.Tables of tolerance-limit factors for normal distributions,Technometrics 2:4,19

26、60 Graybill,Franklin A.An introduction to linear statistical models,volume I,McGraw-Hill Book Company,1961,p191.临床检验方法的评价61Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices,Approved Guideline,1984EP5临床检验方法的评价62 批内批内 批间批间 日内日内 日间日间 总精密度总精密度临床检验方法的评价63 试剂和校准物:同一批号试剂和校准物:同一批号 样本:基质与临床样本

27、相似,样本:基质与临床样本相似,2个以上浓个以上浓度(参考医学决定水平)。度(参考医学决定水平)。实验天数:实验天数:20天以上天以上 实验次数:每天实验次数:每天2批,每批批,每批2个(批号)个(批号)样本,每个样本重复样本,每个样本重复2次次临床检验方法的评价64天数1批2批XX11X12X1X11-X12X21X22X2X21-X2212345临床检验方法的评价65 批内:批内:日内日内:(批间):(批间)日间:日间:总精密度:总精密度:临床检验方法的评价66IXXSIijijijwt4)(121221I=总实验天数(一般为20天)j=每天测定的批次(一般为2批)Xij1=第i天j批实验

28、第一次结果Xij2=第i天j批实验第二次(重复)结果临床检验方法的评价67I=实验天数(通常为20天)Xi1=第i天第一批实验结果的平均值(通常重复2次)Xi2=第i天第二批实验结果的平均值(通常重复2次)IXXAIiii2)(1221临床检验方法的评价68I=实验天数X=所有结果的平均值Xi第I天所有结果的平均值1)(12IXXBIii临床检验方法的评价69222wtrrddtSSSS2222ABSdd2222wtrrSAS临床检验方法的评价70NCCL GP-10临床检验方法的评价71GP10-A Assessment of The Clinical Accuracy of Laborat

29、ory Tests Using Receiver Operating Characteristic(ROC)Plots;Approved Guideline(1995)“用ROC曲线图评价实验室检验的临床准确性”临床检验方法的评价72 Clinical Accuracy:衡量检验项目对于不同健康状况的区分能力。如:健康与疾病;良性与恶性疾病;对治疗的反应性与不反应性;预测疾病的好转与恶化临床检验方法的评价73 临床有用性临床有用性 Usefulness:检验信息在病人管理中的实用价值。检验信息在病人管理中的实用价值。如:如:检验成本;检验成本;假阳(或假阴)性率;假阳(或假阴)性率;有损伤小、

30、成本低的其他方法;有损伤小、成本低的其他方法;检验技术要求;检验技术要求;检验创伤和舒适性检验创伤和舒适性临床检验方法的评价74临床检验信息:临床检验信息:准确性准确性 敏感性敏感性 Sensitivity 特异性特异性 Specificity 有用性有用性临床检验方法的评价75 ROC:Receiver Operating Characteristic 接收机操作特性接收机操作特性 ROC曲线曲线:描述实验室检验的敏感性和特异性关描述实验室检验的敏感性和特异性关系的曲线。系的曲线。临床检验方法的评价76临床检验方法的评价77 特异性特异性 Specificity真阴性结果(真阴性结果(NT)

31、数)数真阴性结果数真阴性结果数+假阳性结果(假阳性结果(PF)数)数临床检验方法的评价78 敏感性敏感性 Sensitivity真阳性结果(真阳性结果(PT)数)数真阳性结果数真阳性结果数+假阴性结果(假阴性结果(NF)数)数临床检验方法的评价79 阳性预测值阳性预测值(PPV)真阳性结果数真阳性结果数真阳性结果数真阳性结果数+假阳性结果数假阳性结果数临床检验方法的评价80 阴性预测值阴性预测值(NPV)真阴性结果数真阴性结果数真阴性结果数真阴性结果数+假阴性结果数假阴性结果数临床检验方法的评价81临床检验方法的评价82临床检验方法的评价83临床检验方法的评价84临床检验方法的评价85临床检验

32、方法的评价86 进行临床准确性实验进行临床准确性实验 确定诊断的敏感性和特异性确定诊断的敏感性和特异性 绘制绘制ROC曲线图曲线图 ROC分析:敏感性分析:敏感性/特异性的置信区间;特异性的置信区间;ROC曲线下面积;曲线下面积;多实验多实验ROC曲线的比较;曲线的比较;其他其他临床检验方法的评价87判定值判定值 nmol/L 患者阳性数患者阳性数 正常人阳性数正常人阳性数 敏感性敏感性(%)特异性特异性(%)1-特异性特异性1320710002650191000396022100051140521000641816799177227829379025189381191032737100604

33、011627541004258129277410020801422785100991155278910049615527931000100合计合计2793临床检验方法的评价88T4检验结果的R O C 曲线T4检验结果的R O C 曲线0102030405060708090100020406080100(1 -特 异性)敏感性临床检验方法的评价89 CLINROC Metz ROC ANALYZER ROCLAB RULEMAKER SIGNAL TEP-UH临床检验方法的评价90 利用简单易于分辨的图形反应临床准确性指标;利用简单易于分辨的图形反应临床准确性指标;不需要确定临床决定水平;不需

34、要确定临床决定水平;可直接用于不同检验方法临床准确性的比较可直接用于不同检验方法临床准确性的比较临床检验方法的评价91 不能显示实际的临界值;不能显示实际的临界值;不能提示样本数量;不能提示样本数量;ROC曲线分析参数计算复杂;曲线分析参数计算复杂;缺少实用性强的计算机软件。缺少实用性强的计算机软件。临床检验方法的评价92 Mark H.Zweig and Gregory Campbell:Receiver-Operating Characteristic(ROC)Plots:A Fundamental Evaluation tool in Clinical Medicine,Clin.Chem.39(4):561-577;1993临床检验方法的评价93临床检验方法的评价94

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