临床常用免疫学检查培训课件.ppt

1、临床常用免疫学检查lIg通常是指具有抗体活性和（或）抗体样结构通常是指具有抗体活性和（或）抗体样结构的球蛋白。的球蛋白。l应用免疫电泳与超速离心分析可将应用免疫电泳与超速离心分析可将Ig分分5类：类：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。lIgG：含量最多或最主要的：含量最多或最主要的Ig（75%），唯一），唯一能够通过胎盘的能够通过胎盘的Ig。主要由脾脏和淋巴结中的。主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成与分泌。浆细胞合成与分泌。lIgA：约占：约占10%，SIgA在局部免疫中起重要作在局部免疫中起重要作用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。临床常用免疫学检

2、查2lIgM：分子量最大，由：分子量最大，由5个个IgM单体通过单体通过J链连接。是最早出现的链连接。是最早出现的Ig，是抗原刺激，是抗原刺激后最早出现的抗体，其杀菌、溶菌、溶后最早出现的抗体，其杀菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比血、促吞噬以及凝集作用比IgG高高5001000倍。倍。l测定方法：单向免疫扩散法（测定方法：单向免疫扩散法（RID）或）或免疫比浊法。免疫比浊法。临床常用免疫学检查3l参考值：参考值：IgG：7.616.6g/L （RID法）法）IgA：7103350mg/L IgM：0.482.12 g/L 临床常用免疫学检查4l临床意义临床意义 免疫球蛋白增高免疫球蛋白增高

3、多克隆增高多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病，如疾病，如SLE、类风湿关节炎等。、类风湿关节炎等。单克隆增高单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病，如主要见于免疫增殖性疾病，如多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。临床常用免疫学检查5l免疫球蛋白降低：免疫球蛋白降低：常见于各类先天性免疫缺陷常见于各类先天性免疫缺陷病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长期使用免疫抑制剂的病人。期使用免疫抑制剂的病人。l血清血清IgD测定测定

4、 免疫扩散法：免疫扩散法：062mg/L 已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状腺抗体和抗腺抗体和抗“O”抗体等均属抗体等均属IgD，但活性甚，但活性甚低。低。临床常用免疫学检查6 血清血清IgE：主要由鼻咽部、支气管、胃肠主要由鼻咽部、支气管、胃肠道等粘膜固有层的浆细胞分泌，为亲细道等粘膜固有层的浆细胞分泌，为亲细胞抗体，能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞胞抗体，能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞膜上的膜上的FceR结合，产生结合，产生I型变态反应。型变态反应。ELASA：0.10.9mg/L 临床意义：临床意义：1.I型变态反应型变态反应 2.IgE型骨髓瘤、寄生

5、虫感染等型骨髓瘤、寄生虫感染等 3.慢性肝炎、慢性肝炎、SLE、类风湿性关节炎等。、类风湿性关节炎等。临床常用免疫学检查7 l是一种单克隆是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的淋巴细胞异常增殖时产生的IgG分分子或片段，一般不具有抗体活性。子或片段，一般不具有抗体活性。l参考值：参考值：蛋白电泳法，免疫电泳法：阴性蛋白电泳法，免疫电泳法：阴性l意义：意义：1.多发性骨髓瘤（多发性骨髓瘤（MM），占），占35%65%，其，其中中IgG型占型占60%左右；左右；IgA型占型占20%左右；左右；轻链型轻链型占占15%左右；左右；IgD、IgE型罕见。型罕见。2.巨球蛋白血症。巨球蛋白血症。3.重链病

6、（重链病（HCDs）。）。4.半分子病。半分子病。5.恶性淋巴瘤。恶性淋巴瘤。6.良性良性M蛋白血症。蛋白血症。临床常用免疫学检查8l补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白，分补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白，分3组：组：9种补体成分（种补体成分（C1C9）；）；B、D、P、H、I 因子；补体调节蛋白，如因子；补体调节蛋白，如C1抑制物、抑制物、C4结合结合蛋白、促衰变因子等。蛋白、促衰变因子等。l总补体溶血活性（总补体溶血活性（CH50）测定）测定l参考值参考值 试管法：试管法：50000100000U/L 意义：意义：增高增高 见于急性炎症、急性组织损伤、恶见于急性炎症、急性组织损伤、恶性肿

7、瘤及妊娠。性肿瘤及妊娠。降低降低 见于急性肾小球肾炎、见于急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢性肝病、肝硬化、性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。、严重烧伤等。临床常用免疫学检查9l血清血清C3：主要由巨噬细胞和肝脏合成，在经典主要由巨噬细胞和肝脏合成，在经典激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。参考值：参考值：免疫比浊法免疫比浊法0.851.70g/L 增高增高 作为急性时相蛋白，在急性炎症、传染病作为急性时相蛋白，在急性炎症、传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥早期、急性组织损伤、

8、恶性肿瘤、抑制物排斥反应时增高。反应时增高。降低降低 补体合成能力降低；合成原补体合成能力降低；合成原料不足；消耗或丢失太多；先天性补体缺乏。料不足；消耗或丢失太多；先天性补体缺乏。临床常用免疫学检查10l血清血清C4测定：测定：由肝脏、吞噬细胞合成，由肝脏、吞噬细胞合成，参与补体的经典激活途径。参与补体的经典激活途径。l参考值：参考值：单向免疫扩散法：单向免疫扩散法：0.197+/-0.109/L。l临床意义临床意义基本与基本与C3相似，降低还见于多相似，降低还见于多发性骨髓瘤、发性骨髓瘤、IgA肾病、遗传性肾病、遗传性C4缺乏缺乏症等。症等。临床常用免疫学检查11l补体补体C1q测定测定l

9、参考值：参考值：0.1790.04g/L l临床意义：临床意义：与与C3相似，降低还见于活动相似，降低还见于活动性混合性结缔组织病、重度营养不良、性混合性结缔组织病、重度营养不良、肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。lB因子测定因子测定-C3激活剂前体激活剂前体临床常用免疫学检查12l淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l T淋巴细胞表面标志物检测：淋巴细胞表面标志物检测：E玫瑰花玫瑰花形成试验、免疫荧光法（形成试验、免疫荧光法（IFA）、荧光激）、荧光激活细胞分类法（活细胞分类法（FACS）、免疫金银法以）、免疫金银法以及免疫酶染色法等。及免疫酶染色法

10、等。lE玫瑰花形成试验玫瑰花形成试验 SRBC+CD2l参考值参考值 Et 64.4%6.7%l免疫荧光法免疫荧光法临床常用免疫学检查13l意义意义 可用于可用于T淋巴细胞计数，淋巴细胞计数，T淋巴细胞亚淋巴细胞亚群的分类以及判断群的分类以及判断T淋巴细胞的活化程度。淋巴细胞的活化程度。lCD3 分子表达于所有成熟分子表达于所有成熟T淋巴细胞的表面，淋巴细胞的表面，是总是总T淋巴细胞的重要标志，淋巴细胞的重要标志，CD3+常见于甲常见于甲状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力以及器官移植后排斥反应。无力以及器官移植后排斥反应。CD3+主要见主要见于

11、免疫缺陷病，如于免疫缺陷病，如AIDS、先天性胸腺发育不、先天性胸腺发育不全综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶全综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶性肿瘤、性肿瘤、SLE、免疫抑制剂治疗等。、免疫抑制剂治疗等。临床常用免疫学检查14l白细胞分化抗原（白细胞分化抗原（cluster differentiation，CD）lCD3代表总代表总T淋巴细胞，淋巴细胞，CD4是是辅助、诱导辅助、诱导T细胞的标细胞的标志，志，CD8是抑制、杀伤性是抑制、杀伤性T细胞的标志。应用单抗和荧细胞的标志。应用单抗和荧光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数

12、CD的百分率。的百分率。l参考值参考值：免疫荧光法（：免疫荧光法（IFA）：）：CD3为为63.1%10.8%；CD4 为为42.8%9.5%；CD8 19.6%5.9%；CD4/CD8为（为（2.20.7）/1。流式细胞术：流式细胞术：CD3 61%85%；CD4 28%58%；CD8 19%48%；CD4/CD80.92.0/1。临床常用免疫学检查15l临床意义临床意义lCD3lCD4+T细胞下降细胞下降 常见于某些病毒感染性疾病，如常见于某些病毒感染性疾病，如AIDS、MCV、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用免疫抑制剂等；免疫抑制剂等；升高升高见于类风湿

13、性关节炎活动期。见于类风湿性关节炎活动期。lCD8+T细胞下降细胞下降 常见于类风湿性关节炎、常见于类风湿性关节炎、Sjogren综合综合征、重症肌无力、征、重症肌无力、DM（II型）以及膜型肾小球肾炎等；型）以及膜型肾小球肾炎等；升高升高见于传染性单核细胞增多症急性期、见于传染性单核细胞增多症急性期、MCV以及慢以及慢性乙肝。性乙肝。lCD4+/CD8+比值下降，比值下降，常见于常见于AIDS、瘤型麻风病、恶、瘤型麻风病、恶性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传染性单核细胞增多症、染性单核细胞增多症、MCV、血吸虫病等；、血吸虫病等；增高

14、增高见于见于类风湿性关节炎活动期、类风湿性关节炎活动期、SLE、Sjogren综合征、重症综合征、重症肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。临床常用免疫学检查16lT细胞转化试验细胞转化试验l形态学法：形态学法：T细胞转化率细胞转化率60.1%7.6%l3H-TdR掺入法：掺入法：培养淋巴细胞用液体闪乐培养淋巴细胞用液体闪乐烁仪测量，记录每分钟脉冲数（烁仪测量，记录每分钟脉冲数（cpm）。）。lSI（刺激指数）（刺激指数）=PHA刺激管刺激管cpm均值均值/对照管对照管cpm均值均值lSI2为有意义，为有意义，2为淋巴细胞转化率降低。为

15、淋巴细胞转化率降低。临床常用免疫学检查17l临床意义临床意义l判断机体细胞免疫功能水平，降低判断机体细胞免疫功能水平，降低常见常见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者，于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者，如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬化等。化等。增高增高常见于常见于Down综合征。综合征。l估计疾病的疗效与预后估计疾病的疗效与预后临床常用免疫学检查18l表面抗原：表面抗原：CD19、CD20、CD21、CD22和和CD40等等l表面受体：表面受体：B细胞抗原受体（细胞抗原受体（BCR）、细胞因）、细胞因子受体（子受体（CKR）、补体受体（）、补体受体（CR）

16、与）与Fc受体受体等。等。lB细胞表面免疫球蛋白（细胞表面免疫球蛋白（BCR，SmIg）是）是B细细胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类型型Ig的单克隆抗体进行检测，可将的单克隆抗体进行检测，可将B细胞分为细胞分为SmIgG、SmIgM、SmIgA、SmIgD、SmIgE。临床常用免疫学检查19l参考值：参考值：免疫荧光法（羊抗人）（以携带该标免疫荧光法（羊抗人）（以携带该标志的细胞百分数表示）志的细胞百分数表示）lSmIg+细胞总数：均值细胞总数：均值21%（16%28%）lSmIgG+细胞：均值细胞：均值7.1%（4%13%）lSmIgM+细胞：

17、均值细胞：均值8.9%（7%13%）lSmIgA+细胞：细胞：均值均值2.2%（1%4%）lSmIgD+细胞：细胞：均值均值6.2%（5%8%）lSmIgE+细胞：细胞：均值均值0.9%（0%1.5%）临床常用免疫学检查20l临床意义临床意义lSmIg+细胞增高细胞增高 ：常与常与B细胞恶性增殖有细胞恶性增殖有关，主要见于慢淋、毛细胞白血病以及关，主要见于慢淋、毛细胞白血病以及巨球蛋白血症等。巨球蛋白血症等。lSmIg+细胞减低：细胞减低：主要与体液免疫缺陷有主要与体液免疫缺陷有关，常见于性联丙种球蛋白缺乏症、严关，常见于性联丙种球蛋白缺乏症、严重联合免疫缺陷病等。重联合免疫缺陷病等。临床常用

18、免疫学检查21lB细胞分化抗原细胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22测定测定l参考值：参考值：FACS：CD19+细胞细胞 11.74%3.73%l临床意义临床意义 CD19为全部为全部B细胞共有的表面细胞共有的表面标志，标志，增高增高见于见于B细胞系统的恶性种瘤，细胞系统的恶性种瘤，减低减低见于体液免疫缺陷病。见于体液免疫缺陷病。临床常用免疫学检查22lNK细胞细胞能直接杀伤效应细胞，具有抗肿瘤、能直接杀伤效应细胞，具有抗肿瘤、抗感染和和免疫调节等功能，亦参与移植物排抗感染和和免疫调节等功能，亦参与移植物排斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。l

19、LDH释放法释放法 l参考值参考值 细胞毒指数：细胞毒指数：27.5%52.5%l51Cr释放法释放法l参考值参考值 NK细胞活性（自然杀伤率）：细胞活性（自然杀伤率）：47.6%76.8%临床常用免疫学检查23l临床意义临床意义l活性升高活性升高 常见于病毒感染的早期，常见于病毒感染的早期，Down综合征，接综合征，接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患者。者。l活性降低活性降低 常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病，常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病，AIDS和免疫抑制剂治疗者等。和免疫抑制剂治疗者等。l肿瘤疗效观察及预后评价肿瘤疗效观

20、察及预后评价l免疫调节功能免疫调节功能 NK细胞可释放细胞可释放INF-、INF-和和GM-CSF等细胞因子。等细胞因子。临床常用免疫学检查24 病毒性肝炎的实验诊断病毒性肝炎的实验诊断 我国属病毒性肝炎高发区，全国有肝炎病人我国属病毒性肝炎高发区，全国有肝炎病人2700万万人，每年新发病例人，每年新发病例900万人，万人，HBsAg携带者达一亿二千携带者达一亿二千万人。慢性肝炎中有万人。慢性肝炎中有5070有活性性病毒复制，有活性性病毒复制，30发展为肝硬化，发展为肝硬化，510发展为肝癌，故我国又是原发展为肝癌，故我国又是原发性肝细胞癌的高发国家，慢性发性肝细胞癌的高发国家，慢性HBV携带

21、者患肝癌危携带者患肝癌危险性较非携带者高险性较非携带者高100倍。倍。临床常用免疫学检查25 HBV的形态结构的形态结构形态：形态：球形颗粒，直径约球形颗粒，直径约42nm外膜：外膜：厚约厚约7nm，HBsAg+脂类脂类内核（核衣壳）：内核（核衣壳）：直径直径27nm，HBcAg、DNAP、病毒病毒DNA、少量来源于宿主的磷酸激酶、少量来源于宿主的磷酸激酶临床常用免疫学检查26 HBV在血清中的存在形式在血清中的存在形式 完整的病毒颗粒完整的病毒颗粒(Dane颗粒颗粒)，如前述，能复制，有传染，如前述，能复制，有传染 性；性；乙肝表面抗原颗粒，为乙肝表面抗原颗粒，为22 nm的小球型颗粒，由的

22、小球型颗粒，由HBsAg和脂类组成，不含和脂类组成，不含DNA，不能复制，不能复制，不具有传染性不具有传染性*，数，数量最多；量最多；管型颗粒，长管型颗粒，长30-40 nm的，由的，由HBsAg和脂类组成，和脂类组成，不含不含DNA，不能复制，不能复制，不具有传染性不具有传染性*，血清中数量最少。，血清中数量最少。临床常用免疫学检查27 HBV的基因结构的基因结构 HBV基因组由一个双链缺口环型基因组由一个双链缺口环型DNA组成，约组成，约有有3，200个核苷酸，含有个核苷酸，含有4个开放读码框个开放读码框(ORF)，分别为分别为ORF S/PreS、ORF C、ORF P、和、和ORF X

23、,分别编码外膜蛋白分别编码外膜蛋白(根据起始位点不同分别为根据起始位点不同分别为HBsAg、前、前S1、前、前S2)、核壳蛋白、核壳蛋白(HBcAg、HBeAg)、DNA聚合酶和聚合酶和X蛋白蛋白(X抗原，抗原，HBxAg)。临床常用免疫学检查28 基因型基因型1979年年 第一个第一个HBV DNA全序列全序列1988年年 日本学者将日本学者将HBV分为分为A、B、C、D四个基因型。四个基因型。(Okamoto H,et al.J Gen Virol,1988;69:2575)1992年年 增加增加E、F两型两型 (Norder H,et al.Virol,1992;73:3141)临床意义

24、临床意义 不同的基因型可能致病性不同，我国以不同的基因型可能致病性不同，我国以B、C型为主，型为主，台湾发现：台湾发现：50岁以上的肝硬化和肝细胞癌的患者岁以上的肝硬化和肝细胞癌的患者C型较多，型较多，而而50岁以下的肝细胞癌患者岁以下的肝细胞癌患者B型较多型较多(Kao JH,et al.Gastroenterology,2000;118:554)。临床常用免疫学检查29 目前实验室常用的至少有四对抗原抗体系统：目前实验室常用的至少有四对抗原抗体系统：HBsAg和抗和抗HBs HBcAg和抗和抗HBc HBeAg和抗和抗HBe Pre-S2和抗和抗Pre-S2。临床常用免疫学检查30 HBs

25、Ag阳性的意义阳性的意义 （1）HBV感染的潜伏期；感染的潜伏期；（2）乙型肝炎急性期；）乙型肝炎急性期；（3）慢性或迁延性乙型肝炎活动期；）慢性或迁延性乙型肝炎活动期；（4）肝炎后肝硬化或原发性肝癌；）肝炎后肝硬化或原发性肝癌；（5）无症状）无症状HBsAg长期携带者。长期携带者。(6)HbsAg阴性不能完全排除慢性乙型肝炎。阴性不能完全排除慢性乙型肝炎。临床常用免疫学检查31注意注意!一、血清分离不佳或用肝素抗凝血常导致一、血清分离不佳或用肝素抗凝血常导致HBsAg假阳性假阳性 ；二、二、HBsAg假阴性假阴性 常见的原因为：常见的原因为：5%的急性感染者肝炎的急性感染者肝炎症状出现后仍阴

26、性，极少数的慢性感染者也为症状出现后仍阴性，极少数的慢性感染者也为HBsAg阴性，这阴性，这种情况需要检测抗种情况需要检测抗HBc-IgM及及HBV DNA；S基因突变导致基因突变导致HBsAg的氨基酸结构改变，由于多数商用试剂盒检测系统采用的氨基酸结构改变，由于多数商用试剂盒检测系统采用的为多克隆抗体检测的为多克隆抗体检测HBsAg的的a决定簇，这一区域的点突变即决定簇，这一区域的点突变即可导致临界测定值或阴性结果；由于慢性病毒携带者（低水可导致临界测定值或阴性结果；由于慢性病毒携带者（低水平平HBsAg携带者）或携带者）或HBV感染潜伏期，感染潜伏期，HBsAg浓度低于检测浓度低于检测水平

27、的下限。水平的下限。临床常用免疫学检查32 血清抗血清抗HBs检测的意义检测的意义（1）在乙型肝炎感染率调查时）在乙型肝炎感染率调查时,HBsAg、抗、抗-HBs和抗和抗-HBc均为感染率的指标。在这三项指标中均为感染率的指标。在这三项指标中,只要其中一项阳性只要其中一项阳性,表示受过表示受过HBV感染。感染。（2）抗）抗HBs是对是对HBV免疫的指标免疫的指标,抗抗HBs阳性率和滴阳性率和滴度表示人群的免疫状况。度表示人群的免疫状况。（3）乙型肝炎的诊断和鉴别诊断乙型肝炎的诊断和鉴别诊断,在在HBV感染后感染后3个月个月,血清中出现抗血清中出现抗HBs。采集双份血清（急性期和恢复期）。采集双

28、份血清（急性期和恢复期）同时检测同时检测,抗抗HBs阳转，或恢复期与急性期比较阳转，或恢复期与急性期比较,抗体滴抗体滴度有度有4倍或倍或4倍以上增长倍以上增长,表示这次感染为表示这次感染为HBV感染。感染。（4）乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免疫前后）乙型肝炎疫苗免疫效果考察。在疫苗免疫前后,采采集血清检测抗集血清检测抗HBs,如抗如抗HBs阳转或抗体滴度明显提高阳转或抗体滴度明显提高,表示疫苗免疫效果良好。否则免疫效果不佳。表示疫苗免疫效果良好。否则免疫效果不佳。（5）对乙型肝炎预后的判断。抗）对乙型肝炎预后的判断。抗HBs的出现表示疾病的出现表示疾病处于恢复期，预后较佳。处于恢复期，预后

29、较佳。临床常用免疫学检查33同时可检出抗同时可检出抗HBs及及HBsAg见于以下几种情形：见于以下几种情形：1.急性急性HBV感染时一过性存在，两者浓度均很低（以感染时一过性存在，两者浓度均很低（以免疫复合物的形式出现），以后再采血检测仅有抗免疫复合物的形式出现），以后再采血检测仅有抗HBs；2.前后或同时感染两种亚型前后或同时感染两种亚型HBV，HBsAg短暂或持续短暂或持续存在反映其中一种亚型感染，抗存在反映其中一种亚型感染，抗HBs及及HBsAg同时同时检出通常要持续很久，且浓度均很高；检出通常要持续很久，且浓度均很高；3.抗抗HBs假阳性；假阳性；4.编码编码HBsAg的基因变异使得的

30、基因变异使得HBsAg抗原性改变，抗原性改变，原型抗原型抗HBs不能将其清除。不能将其清除。临床常用免疫学检查34临床常用免疫学检查35注意注意!A、临界阳性一般是假阳性，是由于临界阳性一般是假阳性，是由于IgM型引起的交叉反应。型引起的交叉反应。B、抗抗HBc阴性而阴性而HBsAg阳性一般发生在免疫缺陷病例，这时存阳性一般发生在免疫缺陷病例，这时存 HBV复制的其他标志如复制的其他标志如 HBeAg及高滴度的及高滴度的HBV DNA。C、对抗对抗HBc单独阳性，排除假阳性后，美国单独阳性，排除假阳性后，美国CDC有以下解释：有以下解释：急性感染后的恢复早期（窗期）急性感染后的恢复早期（窗期）

31、在在HBV急性感染消退时，急性感染消退时，HBsAg减少甚至消失，抗减少甚至消失，抗HBs尚未出现，抗尚未出现，抗HBc是唯一能检出是唯一能检出 的特异性指标，此时抗的特异性指标，此时抗HBc IgM也为阳性。也为阳性。被动转移：被动转移：HBsAg携带者母亲所生的婴儿可因母体抗体被携带者母亲所生的婴儿可因母体抗体被 动转移（抗动转移（抗HBc可通过胎盘）而呈现抗可通过胎盘）而呈现抗HBc单独阳性。单独阳性。远期感染伴抗远期感染伴抗 HBs消失，这种情况通常在感染后多年才会消失，这种情况通常在感染后多年才会 发生，且相当少见（发生，且相当少见（0.5%）。）。远期感染伴有低水平远期感染伴有低水

32、平HBsAg。HDV重复感染继发重复感染继发HBsAg产生下降产生下降临床常用免疫学检查36抗抗HBc始终不出现或延迟出现者占一定比例，可能始终不出现或延迟出现者占一定比例，可能系系1.与抗原复合与抗原复合2.种族差异种族差异3.免疫缺陷，如化疗后免疫缺陷，如化疗后4.基因变异基因变异 临床常用免疫学检查37HBeAg：A.传染性：传染性：HBeAg是临床上表示病毒复制较为实用的指标，因是临床上表示病毒复制较为实用的指标，因此也反映了血清的感染性。慢性此也反映了血清的感染性。慢性HBsAg携带者中，携带者中，HBeAg及及HBV-DNA检测可以用来评估其传染危险性，特别是对医务界的检测可以用来

33、评估其传染危险性，特别是对医务界的HBsAg携携带者，非常有必要了解他是否会传染给他的病人，带者，非常有必要了解他是否会传染给他的病人，90%HBeAg阳性阳性HBsAg携带者可以传染给她们的新生儿，而携带者可以传染给她们的新生儿，而HBeAg阴性或抗阴性或抗HBe阳阳性的孕妇中只有性的孕妇中只有10%会传染给婴儿。会传染给婴儿。B.预后：急性期预后：急性期HBeAg的消失通常伴随的消失通常伴随ALT的降低，预示着疾的降低，预示着疾病的好转；病的好转；HBeAg持续阳性超过持续阳性超过12个星期提示个星期提示HBV感染趋向慢性；感染趋向慢性；HBeAg阳性的无症状者很少见；如果在慢性感染期阳性

34、的无症状者很少见；如果在慢性感染期HBeAg阳性，一阳性，一般为慢性急性化或病人免疫缺陷，这种情况的病人如果又出现般为慢性急性化或病人免疫缺陷，这种情况的病人如果又出现HBeAg的消失，则被认为是预后好的信号。的消失，则被认为是预后好的信号。临床常用免疫学检查38注意注意!前前C区基因变异（如区基因变异（如1896位位gua变为变为-arg导致终止密码导致终止密码子的出现干扰了子的出现干扰了HBeAg的翻译）导致不能生成和分泌的翻译）导致不能生成和分泌HBeAg，血清中血清中HBeAg阴性，但这种突变并不影响乙肝病毒的复制，阴性，但这种突变并不影响乙肝病毒的复制，仍可形成完整的病毒颗粒，该种情

35、况下尽管检测不到仍可形成完整的病毒颗粒，该种情况下尽管检测不到HBeAg，慢性慢性HBV感染炎症反应也相当强。感染炎症反应也相当强。临床常用免疫学检查39抗抗-HBe：A、反映血清感染性：通常情况下反映血清感染性：通常情况下HBsAg（+）、抗）、抗HBe（+）病例的传染性较低，但有部分病例尽管抗病例的传染性较低，但有部分病例尽管抗HBe（+）也具有很高的传）也具有很高的传染性，因此，要评价染性，因此，要评价HBeAg阴性血清的传染性，推荐用检测阴性血清的传染性，推荐用检测HBV DNA，1/3的病例能达到大于的病例能达到大于106基因组基因组/mL；B、监视急性和慢性、监视急性和慢性HBV感

36、染：血清感染：血清HBeAg消失、抗消失、抗HBe出现出现对监视急慢性对监视急慢性HBV感染很有诊断价值，特别是抗感染很有诊断价值，特别是抗HBe出现更有预见出现更有预见价值，在干扰素治疗中出现表明疾病状况的改善；价值，在干扰素治疗中出现表明疾病状况的改善；C、预后：抗、预后：抗 HBe阳转出现在阳转出现在HBeAg阴转后早期（阴转后早期（2周内），周内），可能预示急性肝炎恢复顺利；如出现在晚期（可能预示急性肝炎恢复顺利；如出现在晚期（HBeAg阴转后阴转后6周以上）周以上）或不出现抗或不出现抗HBe，则提示病程迁延，可能发展为慢性迁延性肝炎或慢，则提示病程迁延，可能发展为慢性迁延性肝炎或慢性

37、活动性肝炎。性活动性肝炎。临床常用免疫学检查40注意注意!HBeAg（-）/抗抗HBe（-）的慢性）的慢性HBV感染有不同的感染有不同的感染状态：有的表示复制病毒已清除，但无抗感染状态：有的表示复制病毒已清除，但无抗HBe应答；应答；有的复制病毒一时减少，有的复制病毒一时减少，HBeAg消失后可再现；有的消失后可再现；有的由于前由于前C区变异不能编码合成区变异不能编码合成HBeAg。临床常用免疫学检查41前前S2抗原及抗体抗原及抗体 pre-S2抗原检测可作为判断抗原检测可作为判断HBV复制的一项指复制的一项指标，同时可对标，同时可对HBV复制作出定量的推断，动态测定复制作出定量的推断，动态测

38、定pre-S2抗原的变化，有助于急、慢性乙型肝炎的治抗原的变化，有助于急、慢性乙型肝炎的治疗预后的判断。疗预后的判断。抗抗pre-S2在急性乙型肝炎恢复早期出现，并发在急性乙型肝炎恢复早期出现，并发挥其保护性抗体的作用，对观察乙型肝炎病情进展、挥其保护性抗体的作用，对观察乙型肝炎病情进展、预后及疫苗免疫效果均有一定的作用。预后及疫苗免疫效果均有一定的作用。临床常用免疫学检查42常规检测常规检测HBV抗原抗体的基本解释抗原抗体的基本解释1.HBsAg 急慢性急慢性HBV感染；可能具有传染性；浓度降低表明感染；可能具有传染性；浓度降低表明感感 染恢复染恢复2.HBeAg 反映反映HBV复制；有传染

39、性；其消失表明急慢性复制；有传染性；其消失表明急慢性HBV感染正在恢复感染正在恢复3.抗抗-HBs 感染后免疫；对疫苗的免疫应答感染后免疫；对疫苗的免疫应答4.抗抗-HBe 表示表示HBV低复制或不复制低复制或不复制5.抗抗-HBc 低滴度表示过去感染，高滴度表示现行感染低滴度表示过去感染，高滴度表示现行感染6.抗抗HBc-IgM 高滴度是诊断急性高滴度是诊断急性HBV感染最好的指标，监视感染最好的指标，监视慢性慢性HBV感染。感染。临床常用免疫学检查43 不同厂家和方法不同厂家和方法HBV标志物测定的比较标志物测定的比较 HBsAg 抗抗-HBsHBeAg 抗抗-HBe抗抗-HBc 进口进口

40、 34 9 22 27 42 A 34 9 12 18 37 B 34 8 13 14 37 C 32 8 33 15 37 n=44 PCR:+26 -18 前前S1:+20 -24 抗前抗前S1:+12 -32临床常用免疫学检查44 国产国产“两对半两对半”试剂与进口试剂比较（阳性符合率试剂与进口试剂比较（阳性符合率%）A B C HBsAg 100(34/34)100(34/34)94.1(32/34)抗抗-HBs 100(9/9)88.9(8/9)88.9(8/9)HBeAg 54.5(12/22)59.1(13/22)(33/22)抗抗-HBe 66.7(18/27)51.9(14/

41、27)55.6(15/27)抗抗-HBc 88.1(37/42)88.1(37/42)88.1(37/42)临床常用免疫学检查45lHBeAgHBeAg，Anti-HBeAnti-HBe或抗或抗HbeHbelHBeAgHBeAg，Anti-HBcAnti-HBc或抗或抗HbcHbc 测定方法：测定方法：ELASAELASA，RIARIAHBsAgHBsAg，Anti-HBsAnti-HBs或抗或抗HBsHBs临床常用免疫学检查46lHBsAg（+）表示肝中有表示肝中有HBV见于：见于：乙型肝炎潜伏期和急性期。乙型肝炎潜伏期和急性期。慢性迁延性肝炎，慢性活动性肝炎，肝硬化，慢性迁延性肝炎，慢性活

42、动性肝炎，肝硬化，肝癌。肝癌。慢性慢性HBsAg携带者。携带者。Anti-HBs或抗或抗HBs：中和抗体中和抗体临床常用免疫学检查47lHBeAg：有乙型肝炎，是病毒复制活跃，有乙型肝炎，是病毒复制活跃，传染性强的指标；持续阳性易转变为慢传染性强的指标；持续阳性易转变为慢性肝炎；性肝炎；HBeAg+和和 HBsAg+可垂直传可垂直传播。播。lAnti-HBe或抗或抗Hbe：出现于急性感染的出现于急性感染的恢复期，持续时间较长。意味着恢复期，持续时间较长。意味着HBV部部分被清除或抑制，复制减少，传染性降分被清除或抑制，复制减少，传染性降低。低。临床常用免疫学检查48lAnti-HBc或抗或抗H

43、Bc：反映肝细胞受到反映肝细胞受到HBVHBV侵害侵害的一种指标，主要包括的一种指标，主要包括IgMIgM、IgGIgG、IgAIgA。l抗抗HBc IgMHBc IgM阳性阳性是最早出现的特异性抗体，是是最早出现的特异性抗体，是诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标，诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标，并提示病人的血液有强传染性。也见于慢性活并提示病人的血液有强传染性。也见于慢性活动性肝炎。动性肝炎。l抗抗HBc IgG HBc IgG 其阳性滴度高，表明患有乙型肝炎，其阳性滴度高，表明患有乙型肝炎，指正在感染；低滴度为既往感染指标，体内时指正在感染；低滴度为既往感染指标，体内时间长

44、。间长。临床常用免疫学检查49lHBV-DNA定性和定量测定：定性和定量测定：目前定量测目前定量测定范围为定范围为102 108 拷贝拷贝/ml。l与血清免疫学结果的综合评价与血清免疫学结果的综合评价HBsAg和和Anti-HBsHBeAg，Anti-HBe，Anti-HBc5项标志物的变化和联合检测的临床意义项标志物的变化和联合检测的临床意义临床常用免疫学检查50l抗抗-HCV（ELISA）l抗抗-HCV IgM阳性阳性 常见于急性常见于急性HCV感染，是诊断感染，是诊断丙肝的早期敏感指标；是丙肝的早期敏感指标；是HCV活动的指标，是判断活动的指标，是判断HCV传染性的指标。传染性的指标。l

45、抗抗-HCV IgGlHCV-RNA测定测定l测定方法测定方法 逆转录巢式逆转录巢式PCR法，荧光定量法，荧光定量PCR法法l（第三代试剂抗原包括（第三代试剂抗原包括C、NS3、NS4、NS5；丙肝病毒易发生变；丙肝病毒易发生变异，异，抗抗-HCV阳转时间差异较大）阳转时间差异较大）临床常用免疫学检查51l参考值：参考值：乳胶凝集法乳胶凝集法（LAT）：）：500U l意义：增高意义：增高 常见于常见于A组溶血链球菌感染相关疾组溶血链球菌感染相关疾病，如扁桃腺炎、感染性心内膜炎、风湿热、病，如扁桃腺炎、感染性心内膜炎、风湿热、链球菌感染后肾小球肾炎等。链球菌感染后肾小球肾炎等。lASO 在在A

46、组溶血链球菌感染后组溶血链球菌感染后1周开始升高，周开始升高，46周达高峰，可持续几个月或几年。周达高峰，可持续几个月或几年。l假阳性与假阴性假阳性与假阴性临床常用免疫学检查52l肥达（肥达（Widal）反应）反应l参考值参考值lO凝集价凝集价1：80l伤寒伤寒H凝集价凝集价1：160l副伤寒副伤寒A、B、C凝集价凝集价1：80l伤寒、副伤寒沙门菌抗体伤寒、副伤寒沙门菌抗体IgM测定测定l参考值参考值 ELASA法：法：阴性或滴度阴性或滴度1：20。临床常用免疫学检查53lC-反应蛋白反应蛋白是一种由肝脏合成的，能与肺炎双球菌是一种由肝脏合成的，能与肺炎双球菌C多糖体起反应的急性时相反应蛋白，

47、具有激活补体，多糖体起反应的急性时相反应蛋白，具有激活补体，促进吞噬和免疫调理作用。促进吞噬和免疫调理作用。l参考值：参考值：8.2mg/L（免疫比浊法）（免疫比浊法）l意义意义 组织损伤组织损伤，如大手术，严重创伤，烧伤，心肌梗，如大手术，严重创伤，烧伤，心肌梗死等，发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下死等，发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下降。又复升高提示继发感染或深部静脉血栓形成。降。又复升高提示继发感染或深部静脉血栓形成。l风湿热活动期，可达风湿热活动期，可达200mg/L以上。以上。l细菌性感染常明显升高，病毒性感染升高不明显或轻细菌性感染常明显升高，病毒性感染升高不明显或

48、轻度升高。度升高。l恶性肿瘤，器官移植后排斥反应，妊娠等可见明显升恶性肿瘤，器官移植后排斥反应，妊娠等可见明显升高可在发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下高可在发病后数小时迅速增高，病情好转后又迅速下降至正常。降至正常。临床常用免疫学检查55l参考值参考值lIFA，ELASA：阴性：阴性l特异性特异性IgM-感染后感染后23天检出，天检出，710天达天达高峰。特异性高峰。特异性IgG感染后两周出现，可持感染后两周出现，可持续多年。续多年。临床常用免疫学检查56l检测抗检测抗HIV（I型或型或II型）型）是是AIDS诊断的一个主要指标。诊断的一个主要指标。抗原为抗原为HIV感染的感染的T细胞

49、株的病毒抗原（细胞株的病毒抗原（HLA-DR抗原抗原污染可出现假阳性）污染可出现假阳性）。l方法：方法：初筛试验初筛试验ELASA，乳胶凝集法，免疫印迹法，乳胶凝集法，免疫印迹法，斑点免疫渗透法。斑点免疫渗透法。确认试验确认试验 可选用蛋白印迹试验（可选用蛋白印迹试验（WB），），PCR法检查法检查HIV病毒病毒DNA。lHIV抗原检测抗原检测 P24抗原（抗原（病毒衣壳蛋白，具群特异病毒衣壳蛋白，具群特异性性）。）。HIV核酸检测核酸检测 DNA-PCR；RNA-PCR临床常用免疫学检查57l是由梅毒螺旋体梅毒亚种所致的一种性是由梅毒螺旋体梅毒亚种所致的一种性传播疾病。传播疾病。l梅毒螺旋体

50、抗体检测：非密螺旋体抗原梅毒螺旋体抗体检测：非密螺旋体抗原试验和密螺旋体抗原试验，前者为筛选试验和密螺旋体抗原试验，前者为筛选试验和治疗效果监测，后者为确诊诊断。试验和治疗效果监测，后者为确诊诊断。l暗视野显微镜检查暗视野显微镜检查l梅毒螺旋体梅毒螺旋体PCR检测检测临床常用免疫学检查58l参考值参考值 CLIA，RIA，ELASA：血清：血清25g/Ll临床意义临床意义l原发性肝癌明显升高，原发性肝癌明显升高，AFP300 g/Ll病毒性肝炎、肝硬化患者不同程度病毒性肝炎、肝硬化患者不同程度AFP升高但升高但常常 300 g/L。l生殖腺胚胎性肿瘤血清生殖腺胚胎性肿瘤血清AFP升高升高l妊娠