病友会上海站张艳主任急性白血病的诊断分型和预后课件.pptx

1、形态形态M 标本直接固定，不容易损失信息，恶性细胞比例更客观，对一些标本直接固定，不容易损失信息，恶性细胞比例更客观，对一些抽不出或少见细胞，仍可诊断。如伴骨髓纤维化、抽不出或少见细胞，仍可诊断。如伴骨髓纤维化、MM、淋巴瘤、淋巴瘤、转移癌、转移癌、等等 可以直接观察到组织结构，容易确定恶性细胞的组织部位可以直接观察到组织结构，容易确定恶性细胞的组织部位形态形态M摘自摘自 Flow Cytometry:First Principle流式流式I流式流式I流式流式IR8R8：幼稚细胞群，正常骨髓中此群细胞数量幼稚细胞群，正常骨髓中此群细胞数量极低或空缺极低或空缺流式流式I流式细胞术判断急性白血病：

2、流式细胞术判断急性白血病：20%20%或者或者25%25%以上细胞表达早期标志以上细胞表达早期标志（CD34CD34、HLA-DRHLA-DR、TdTTdT）或者不表达成）或者不表达成熟标志熟标志系别标志：系别标志：髓系髓系 B B系系 T T系系流式流式I流式流式I流式流式IFCM 的优缺点的优缺点流式流式I病例3 儿童B-ALL,化疗3年后停药，来我院复查，骨髓涂片8%的幼稚细胞微小残留肿瘤（MRD)MLL/AF4(12)AML(病例1）预后价值不如染色体和基因NPM/MLF1(1)PML/RAR(5)T:除了T细胞标志外,CD45dim/-、CD34+、M:形态学、细胞化学、病理AML1

3、/ETO(1)MLL/AF6(4)急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级PML-RARA 阳性的APL，如反复检测出PML-RARA，即使仅有 10-4-6，几乎都复发，需要积极处理MLL/AF17(1)ALL:L1、L2、L3有独立的诊断及预后价值白血病的诊断与分类步骤MLL/AFX(4)病例4 NK细胞白血病移植后40天，骨髓涂片8%的幼稚细胞不能确定组织结构，一些罕见的大细胞不能分析到，一些细胞粘附性高，难以抽出。儿童儿童B-ALL,B-ALL,化疗化疗3 3年后停药，来我院复查，骨年后停药，来我院复查，骨髓涂片髓涂片8%8%的幼稚细胞的幼稚细胞流式幼稚流式幼稚B B淋巴细胞增生，未见异

4、常表型淋巴细胞增生，未见异常表型病例病例4 NK4 NK细胞白血病移植后细胞白血病移植后4040天，骨髓涂片天，骨髓涂片8%8%的幼稚细胞的幼稚细胞流式流式:未见表型异常细胞，未见表型异常细胞，CD34CD34阳性细胞阳性细胞为幼稚为幼稚B B淋巴细胞淋巴细胞细胞遗传学细胞遗传学C AML：50%90%的患者细胞遗传学可检出的患者细胞遗传学可检出异常克隆异常克隆 ALL：大：大约约60%85%的患者可检出克隆性的患者可检出克隆性染色体畸变染色体畸变细胞遗传学细胞遗传学CPML/RAR(5)病例3 儿童B-ALL,化疗3年后停药，来我院复查，骨髓涂片8%的幼稚细胞染色体单体异常、Inv(3)/t

5、(3;3)、3个的复杂染色体异常、-5、5q-、-7、7q-、T(9;22)(BCR-ABL)、-17、伴其它改变的17p异常、除t(9;11)MLL-AF9以外的累及11q23/MLL基因的异常、t(1;22)(p13;q13)RBM15-MKL1、t(6;9)（p23;q34）DEK-NUP214简单快速，有显微镜即可完成报告MLL/AF6(4)一些染色体有诊断价值:如重现性染色体异常，如t(8;21)，inv(16)、t（16；一次可检测数万至数十万个细胞上的数十种标记，可同时检测每个细胞的六个以上参数，敏感性高，分析全面NPM/MLF1(1)MLL/AF4(12)MK-的2yrOS:6

6、1.MLL/AF10(18)利用已知核酸序列作为探针，以荧光素直接标记后与靶DNA进行杂交，最后在荧光显微镜下观察杂交信号，从而对标本中待测核酸进行定性、定位和定量分析更容易区分良恶性，恶性细胞的系列及成熟度NPM/RAR(2)急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级AML1/ETO(1)利用已知核酸序列作为探针，以荧光素直接标记后与靶DNA进行杂交，最后在荧光显微镜下观察杂交信号，从而对标本中待测核酸进行定性、定位和定量分析SIL/TAL1(1)而对AML，95%复发前体细胞型:ALL,淋巴母细胞淋巴瘤 等的等的急性白血病预后不好急性白血病预后不好细胞遗传学细胞遗传学C有丝分裂相少或缺如有丝分

7、裂相少或缺如染色体质量低劣，显带不佳染色体质量低劣，显带不佳染色体异常复杂染色体异常复杂细胞遗传学细胞遗传学C荧光原位杂交（荧光原位杂交（FISH）利用已知核酸序列作为探针，以荧光素直利用已知核酸序列作为探针，以荧光素直接标记后与靶接标记后与靶DNADNA进行杂交，最后在荧光进行杂交，最后在荧光显微镜下观察杂交信号，从而对标本中待显微镜下观察杂交信号，从而对标本中待测核酸进行定性、定位和定量分析测核酸进行定性、定位和定量分析细胞遗传学细胞遗传学CBCR/ABL双色双融合双色双融合探针探针BCR/ABL额外信号探针细胞遗传学细胞遗传学C急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级急性白血病按照细胞遗传

8、学亚型的预后分级单体核型（单体核型（monosomal karyotype,MK)-AML,MDS -AML,MDS 中的预后价值中的预后价值定义：有两条以上的常染色体为单体；定义：有两条以上的常染色体为单体；或或一条常染色体为单体，另一条染色一条常染色体为单体，另一条染色体是结构异常体是结构异常细胞遗传学细胞遗传学C日本两个移植中心进行异基因造血干细胞移植的AML和MDS共183例患者，显示MK组患者4年的OS最短为0%细胞遗传学细胞遗传学CAML：50%90%的患者细胞遗传学可检出异常克隆直观：镜下直接观察细胞形态，对MDS的诊断、一些少见的、大的恶性细胞的确定优于流式细胞分析可以检测出染

9、色体或FISH不能检测出的异常，联合染色体和FISH，增加了对疾病预后的判断能力。MLL/AF9(8)FL：3-10多种（荧光素耦联的单克隆抗体）正常核型，6q-,t(1;19)SIL/TAL1(1)摘自 Flow Cytometry:First Principle中等危险AML：不符合以上白血病细胞的系列特异性标志病例4 NK细胞白血病移植后40天，骨髓涂片8%的幼稚细胞MLL/AF4(12)BCR/ABL双色双融合探针急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级MLL/AF17(1)一些染色体有诊断价值:如重现性染色体异常，如t(8;21)，inv(16)、t（16；诊断时间比染色体及FISH短

10、-5，5q-，-7，7q-或CD19弱阳性并同时有以下标志中的至少2项阳性：CD79a、cCD22、CD10不能提供太多的预后信息EBMTEBMT登记的在登记的在CR1CR1进行异基因造血干细胞移进行异基因造血干细胞移植的初发植的初发AML4119AML4119例例MK-的的2yrOS:61.163.3%MK+的的2yrOS:31.743%细胞遗传学细胞遗传学C分子生物学分子生物学M分子生物学分子生物学M 增加的血液细胞是良性还是恶性增加的血液细胞是良性还是恶性 细胞形态：急性白血病原始细胞明显增加，细胞形态：急性白血病原始细胞明显增加，一些白血病有明显的特征，如一些白血病有明显的特征，如au

11、ers小体；小体；APL的异常早幼粒细胞有外浆、大量的颗粒的异常早幼粒细胞有外浆、大量的颗粒等等 免疫标志异常表达：跨系表达、早晚期同时免疫标志异常表达：跨系表达、早晚期同时表达、罕见细胞大量存在等表达、罕见细胞大量存在等 单克隆轻链表达、克隆性单克隆轻链表达、克隆性TCR基因重排、基因重排、DNA异常异常 急性白血病特有的染色体和急性白血病特有的染色体和/或基因或基因 高危险高危险:低危险低危险AML:染色体正常且无染色体正常且无FLT3-ITD基因突变，但有基因突变，但有NPM1+及及IDH1或或IDH2突变者突变者 无无c-KIT基因突变及基因突变及-Y的的 t(8;21)(q22;q2

12、2)/AML1-RUNX1(AML1-ETO)AML、inv(16)(p13q22)/t(16;16)(p13;q22)/CBF-MYH11 AML 中等危险中等危险AML：不符合以上：不符合以上摘自：摘自：Patel JP,2012 微小残留肿瘤（微小残留肿瘤（MRD)MRD)AML1/MDS1(2)外周(成熟)细胞：无以上前体细胞标记对不分裂的细胞也可以分析，分析的细胞数量比染色体多，更能反映正常和恶性细胞的比例，监测残留白血病比染色体敏感与染色体及FISH分析比较，对检测人员的经验依赖程度低MLL/AF17(1)20%或者25%以上细胞表达早期标志（CD34、HLA-DR、TdT）或者不

13、表达成熟标志MLL/ELL(8)有独立的诊断及预后价值一些染色体有诊断价值:如重现性染色体异常，如t(8;21)，inv(16)、t（16；一些染色体和/或基因有辅助诊断价值，如5q31、CEP7、7q31、CEP8、20q、CEPY、P53 高度疑似MDS等；11q23-非t(9;11)摘自 Flow Cytometry:First PrincipleE2A/PBX1(2)白血病的诊断与分类步骤M:形态学、细胞化学、病理MLL/AF4(12)不能确定组织结构，一些罕见的大细胞不能分析到，一些细胞粘附性高，难以抽出。如伴骨髓纤维化、MM、淋巴瘤、转移癌、组织细胞、巨噬细胞、树突细胞、何杰金细胞

14、等AML1/ETO(1)11q23-非t(9;11)细胞遗传学细胞遗传学C有丝分裂相少或缺如有丝分裂相少或缺如染色体质量低劣，显带不佳染色体质量低劣，显带不佳染色体异常复杂染色体异常复杂细胞遗传学细胞遗传学C荧光原位杂交（荧光原位杂交（FISH）利用已知核酸序列作为探针，以荧光素直利用已知核酸序列作为探针，以荧光素直接标记后与靶接标记后与靶DNADNA进行杂交，最后在荧光进行杂交，最后在荧光显微镜下观察杂交信号，从而对标本中待显微镜下观察杂交信号，从而对标本中待测核酸进行定性、定位和定量分析测核酸进行定性、定位和定量分析细胞遗传学细胞遗传学C分子生物学分子生物学M 增加的血液细胞是良性还是恶性

15、增加的血液细胞是良性还是恶性 细胞形态：急性白血病原始细胞明显增加，细胞形态：急性白血病原始细胞明显增加，一些白血病有明显的特征，如一些白血病有明显的特征，如auers小体；小体；APL的异常早幼粒细胞有外浆、大量的颗粒的异常早幼粒细胞有外浆、大量的颗粒等等 免疫标志异常表达：跨系表达、早晚期同时免疫标志异常表达：跨系表达、早晚期同时表达、罕见细胞大量存在等表达、罕见细胞大量存在等 单克隆轻链表达、克隆性单克隆轻链表达、克隆性TCR基因重排、基因重排、DNA异常异常 急性白血病特有的染色体和急性白血病特有的染色体和/或基因或基因诊断慢、受诊断者个人经验及知识水平影响大M:形态学、细胞化学、病理

16、FL：3-10多种（荧光素耦联的单克隆抗体）MICM整合诊断对恶性血液病进行诊断和分型重复性更好、更客观更容易区分良恶性，恶性细胞的系列及成熟度AML：50%90%的患者细胞遗传学可检出异常克隆TEL/PDGFR(1)单体核型（monosomal karyotype,MK)TEL/AML1(2)荧光原位杂交（FISH）标本直接固定，不容易损失信息，恶性细胞比例更客观，对一些抽不出或少见细胞，仍可诊断。inv(16)或t(16;16)病例4 NK细胞白血病移植后40天，骨髓涂片8%的幼稚细胞急性白血病按照细胞遗传学亚型的预后分级MLL/ENL(4)FIP1L1/PDGFR(4)正常核型，6q-,

17、t(1;19)SIL/TAL1(1)细胞较成熟时，难以鉴别良恶性TEL/PDGFR(1)BCR/ABL额外信号探针MLL/AF17(1)MLL/AF17(1)50 超二倍体 t(12;21)急性白血病特有的染色体和/或基因MLL/AF4(12)原始细胞增多是诊断前体恶性血液病尤其AL的重要指标，但原始细胞应根据免疫学标志/基因/染色体证实为恶性造血前体细胞或单核细胞（至少有以下标志中的2项阳性：NSE、CD11c、CD14、CD64、CD36*、溶酶体更容易区分良恶性，恶性细胞的系列及成熟度正常核型，6q-,t(1;19)一次可检测数万至数十万个细胞上的数十种标记，可同时检测每个细胞的六个以上参数，敏感性高，分析全面复杂异常（累及三条以上染色体异常）SIL/TAL1(1)如果恶性细胞不分裂，其结果是假阴性PML/RAR(5)中等危险AML：不符合以上更容易区分良恶性，恶性细胞的系列及成熟度NPM/ALK(1)TEL/PDGFR(1)治疗后白血病缓解（用形态学方法检测不出，其它部位也无肿瘤浸润），但用更敏感的技术仍可检测到白血病细胞，称为微小残留肿瘤（MRD）微小残留肿瘤（微小残留肿瘤（MRD)MRD)