病毒的感染免疫诊断课件.ppt

1、第第2626章章 病毒的感染与免疫病毒的感染与免疫病毒的感染免疫诊断第一节病毒的感染与类型第一节病毒的感染与类型病毒的传染源、传播方式与感染途径病毒的传染源、传播方式与感染途径传染源传染源人人-感染者（病人），隐性和慢性感染者感染者（病人），隐性和慢性感染者动物动物-发病动物、带病毒动物发病动物、带病毒动物病毒的感染免疫诊断病毒感染途径病毒感染途径1、水平传播：、水平传播：病毒在人群不同个体间的传播病毒在人群不同个体间的传播 病毒侵入机体的三大重要门户：病毒侵入机体的三大重要门户：呼吸道呼吸道 消化道消化道 皮皮 肤肤 泌尿道、血液（特殊）、器官移植泌尿道、血液（特殊）、器官移植 病毒的感染免

2、疫诊断 2、垂直传播、垂直传播 vertical transmission （其他微生物种少见）（其他微生物种少见）通过宫内、胎盘或产道，病毒直接由亲代传给子代通过宫内、胎盘或产道，病毒直接由亲代传给子代的方式的方式HBV、HCMV、HIV、风疹病毒、风疹病毒病毒的感染免疫诊断病毒的感染免疫诊断二、病毒的感染类型二、病毒的感染类型细细胞胞杀细胞感染（杀细胞感染（cytocidal infection）稳定状态感染（稳定状态感染（steady state infection）整合感染（整合感染（integrated infection）病毒的感染免疫诊断急性感染急性感染acute infecti

3、on：发病急，病程短，恢复发病急，病程短，恢复快快显性感染显性感染整整体体 慢性感染慢性感染 潜伏性感染潜伏性感染 慢发病毒感染慢发病毒感染向外播散病毒，重要的传染源向外播散病毒，重要的传染源 机体获得特异性免疫机体获得特异性免疫持续性感染持续性感染(Persistent infection)病毒感染与肿瘤病毒感染与肿瘤病毒与畸胎病毒与畸胎人类肿瘤中有人类肿瘤中有15%由病毒而诱发。由病毒而诱发。如感染了风疹病毒和如感染了风疹病毒和 CMV、HSV、VZV可造成发育异常及畸形。可造成发育异常及畸形。病毒感染的临床类型病毒感染的临床类型隐性感染隐性感染(subclinical infection

4、)病毒的感染免疫诊断潜伏感染潜伏感染Latent infection慢发病毒感染慢发病毒感染Slow viral infection 寻常病毒寻常病毒 非寻常病毒非寻常病毒 麻疹病毒麻疹病毒(SSPE)、HIV持持续续性性感感染染 慢性感染慢性感染Chronic infection病毒可持续存在血液或组织中并不断排出病毒可持续存在血液或组织中并不断排出体外，可出现症状，也可无症状。病程可体外，可出现症状，也可无症状。病程可长达数年或数十年之久。病毒可检出，长达数年或数十年之久。病毒可检出，长长期感染、长期排毒期感染、长期排毒如如HBV经显性或隐性后，病毒基因存在一定的经显性或隐性后，病毒基因存

5、在一定的组织或细胞中，不产生有感染性的病毒组织或细胞中，不产生有感染性的病毒体，在某些条件下可被反复激活而急性体，在某些条件下可被反复激活而急性发作，发作，病毒长期存在，时隐时现，病毒长期存在，时隐时现，如如 HSV、VZV病毒感染后出现很长时间潜伏期，数年病毒感染后出现很长时间潜伏期，数年或数十年后可发生慢性、进行性疾病，或数十年后可发生慢性、进行性疾病，常导致死亡，如儿童期感染麻疹病毒恢常导致死亡，如儿童期感染麻疹病毒恢复后，经过十余年可发生亚急性硬化性复后，经过十余年可发生亚急性硬化性全脑炎（全脑炎（SSPE）病毒的感染免疫诊断l机体免疫力低下；机体免疫力低下；l病毒抗原性弱；病毒抗原性

6、弱；l病毒存在于受保护部位；病毒存在于受保护部位；l病毒发生变异；病毒发生变异；l病毒基因组整合；病毒基因组整合；病毒的感染免疫诊断病毒感染的的致病机制病毒感染的的致病机制1、阻止细胞大分子合成、阻止细胞大分子合成2、改变细胞膜结构、改变细胞膜结构3、诱导细胞凋亡或坏死、诱导细胞凋亡或坏死4、干扰细胞因子的活性、干扰细胞因子的活性5、病毒包涵体的形成、病毒包涵体的形成6、染色体畸变、染色体畸变7、免疫病理损伤、免疫病理损伤病毒的感染免疫诊断病毒的致病及机制病毒的致病及机制一、病毒感染对宿主细胞的致病作用一、病毒感染对宿主细胞的致病作用 1 溶细胞性感染：多见于无包膜病毒溶细胞性感染：多见于无包

7、膜病毒，多引起急，多引起急性感染性感染 2 稳定状态感染：多见于有包膜病毒稳定状态感染：多见于有包膜病毒3 细胞凋亡：细胞自身基因指令的生物学过程细胞凋亡：细胞自身基因指令的生物学过程 4 病毒基因组的整合：多见于肿瘤病毒病毒基因组的整合：多见于肿瘤病毒5 细胞的增殖与转化：促进细胞细胞的增殖与转化：促进细胞DNA的合成的合成6 包涵体的形成：包涵体的形成：细胞被病毒感染后，在细胞浆或细胞细胞被病毒感染后，在细胞浆或细胞核内出现光镜下可见的斑块状结构，称为包涵体核内出现光镜下可见的斑块状结构，称为包涵体病毒的感染免疫诊断Fig 正常猴肾细胞与正常猴肾细胞与HSV感染的猴肾细胞感染的猴肾细胞Fi

8、g A multinucleate giant cell病毒的感染免疫诊断2、对机体的致病作用：、对机体的致病作用：病毒对组织器官的亲嗜性与组织器官的损伤：病毒对组织器官的亲嗜性与组织器官的损伤：免疫病理损伤：体液免疫病理作用和细胞免疫病理免疫病理损伤：体液免疫病理作用和细胞免疫病理作用作用 病毒的感染免疫诊断 二、病毒感染对机体的致病作用二、病毒感染对机体的致病作用（一）对组织器官的亲嗜性与组织器官的损伤（一）对组织器官的亲嗜性与组织器官的损伤病毒性感染具有宿主种属特异性和组织嗜性：病毒性感染具有宿主种属特异性和组织嗜性：组织和器官亲嗜性决定了感染的定位及疾病的症状组织和器官亲嗜性决定了感染

9、的定位及疾病的症状病毒亲嗜性的基础：病毒亲嗜性的基础：由病毒、细胞受体决定由病毒、细胞受体决定病毒亲嗜性的作用：病毒亲嗜性的作用：造成了病毒对特定组织器官的损伤，也是形成临床上不造成了病毒对特定组织器官的损伤，也是形成临床上不同系统疾病的原因。同系统疾病的原因。病毒的感染免疫诊断l病毒感染引起免疫抑制病毒感染引起免疫抑制麻疹病毒等麻疹病毒等l病毒对免疫活性细胞的杀伤病毒对免疫活性细胞的杀伤HIVl病毒感染引起自身免疫病病毒感染引起自身免疫病1、体液免疫的病理作用（、体液免疫的病理作用（III型变态反应）型变态反应）2、细胞免疫的病理作用（、细胞免疫的病理作用（CTL、共同抗原）、共同抗原）早期

10、早期全身症状全身症状 晚期晚期局部损伤和炎症局部损伤和炎症（二）免疫病理损伤（二）免疫病理损伤病毒的感染免疫诊断抗病毒免疫抗病毒免疫1、屏障作用屏障作用2、巨噬细胞、巨噬细胞、NK、DC的作用的作用3、干扰素干扰素获得性非特异性免疫获得性非特异性免疫一、固有免疫一、固有免疫病毒的感染免疫诊断干扰素干扰素定定 义义：由病毒或其他干扰素生剂刺激机体细胞所产生由病毒或其他干扰素生剂刺激机体细胞所产生的一种具有抗病毒等作用的糖蛋白的一种具有抗病毒等作用的糖蛋白种种 类：类：种类种类 产生细胞产生细胞 抗病毒抗病毒 抗肿瘤抗肿瘤 免疫调节免疫调节 人白细胞人白细胞 强强 弱弱 弱弱 人成纤维细胞人成纤维

11、细胞 强强 弱弱 弱弱 T细胞细胞 弱弱 强强 强强病毒的感染免疫诊断抗病毒意义：抗病毒意义：抗病毒特点抗病毒特点种的特异性、间接性、广谱性种的特异性、间接性、广谱性抗病毒机理：抗病毒机理：细胞受干扰素作用后，合成抗病毒蛋白细胞受干扰素作用后，合成抗病毒蛋白 蛋白激酶、蛋白激酶、2-5合成酶、磷酸二酯合成酶、磷酸二酯早期中断病毒复制，阻止病毒扩散早期中断病毒复制，阻止病毒扩散病毒的感染免疫诊断二、适应性免疫二、适应性免疫按种类：按种类：IgG IgM IgA 中和抗体中和抗体体液体液免疫免疫：按功能：按功能：中和抗体、中和抗体、补体结合抗体补体结合抗体、血凝抑制抗体血凝抑制抗体能与病毒结合并使

12、之丧失感染力的抗体一般为病毒表面抗原刺激产生抗体的分子量大，不能进入病毒感染的细胞，清除胞内病毒，故一般无根治感染的作用病毒的感染免疫诊断血凝抑制抗体血凝抑制抗体病毒血凝素刺激机体产生，可抑制血凝现象的抗体与病毒结合后使之丧失感染力，故也为中和抗体非中和抗体非中和抗体由与病毒入侵易感细胞不相关的病毒抗原诱导的无中和作用的抗体，称非中和抗体多为病毒内部抗原刺激产生由于非中和抗体可通过补体结合反应而检测，故又称补体结合抗体，有时具有诊断价值病毒的感染免疫诊断细胞免疫细胞免疫：抗病毒免疫的主要成分抗病毒免疫的主要成分 TH、TC、NKCD8+T细胞：细胞：产杀伤病毒感染细胞CD4+T细胞：细胞：生淋

13、巴因子 引起炎症反应 促进抗体产生病毒的感染免疫诊断第第2727章章 病毒感染的诊断病毒感染的诊断病毒的感染免疫诊断一、病毒的分离、培养一、病毒的分离、培养 形态学形态学二、检测病毒抗原及抗体方法二、检测病毒抗原及抗体方法三、检测病毒核酸的方法三、检测病毒核酸的方法病毒感染的实验室诊断病毒感染的实验室诊断病毒的感染免疫诊断1、标本采集与送检：、标本采集与送检：原则：原则：早、快、冷、防早、快、冷、防用于分离培养的标本：用于分离培养的标本：采取急性期、采取急性期、防止病毒灭活防止病毒灭活血清学诊断的标本：血清学诊断的标本：双份血清双份血清病毒的感染免疫诊断2、常规分离与鉴定、常规分离与鉴定动物接

14、种动物接种鸡胚接种鸡胚接种组织培养组织培养器官培养器官培养移植培养移植培养 细胞培养细胞培养 原代细胞培养原代细胞培养传代细胞培养传代细胞培养三大培养方法三大培养方法病毒的感染免疫诊断生长指征生长指征 1）动物：出现症状）动物：出现症状 2）鸡胚：出现痘斑等）鸡胚：出现痘斑等 3）细胞：出现）细胞：出现致细胞病致细胞病变作用变作用（cytopathic effect，CPE），如细胞皱缩、空斑、融合、坏死等），如细胞皱缩、空斑、融合、坏死等病毒的感染免疫诊断l致细胞病致细胞病变作用变作用 病毒在细胞内增殖，可引起不同的结果，有的细胞完全被破坏，有的只有轻微的病变，或无可见的变化，由病毒引起的细

15、胞病变称CPE 病毒感染引起的，光镜下可见受感染细病毒感染引起的，光镜下可见受感染细胞的形态学改变胞的形态学改变病毒的感染免疫诊断病毒在细胞内增殖的指标病毒在细胞内增殖的指标1、CPE2、红细胞吸附、红细胞吸附正常细胞正常细胞病变细胞病变细胞病毒的感染免疫诊断病毒数量和感染性测定病毒数量和感染性测定 1、蚀斑测定、蚀斑测定 plaque assay2、ID50 或或 TCID50 病毒感染鸡胚动物或细胞后，引起病毒感染鸡胚动物或细胞后，引起 50%发生死亡发生死亡或病变的最小量或病变的最小量 病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称病毒感染单层细胞后，产生的局限性病灶，称蚀斑蚀斑，蚀斑是由一个

16、感染性病毒体复制形成的，称蚀斑是由一个感染性病毒体复制形成的，称蚀斑形成单蚀斑形成单位位，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单，病毒悬液中的感染性病毒量以每毫升的蚀斑形成单位来表示位来表示病毒的感染免疫诊断病毒的快速诊断病毒的快速诊断光镜光镜-包涵体包涵体电镜电镜免疫荧光免疫荧光ELISA分子生物学技术分子生物学技术杂交杂交Southern blotPCRNorthern blot病毒的感染免疫诊断 病毒的血清学诊断（检测病毒抗体）病毒的血清学诊断（检测病毒抗体）中和试验中和试验补体结合试验补体结合试验血凝抑制试验血凝抑制试验免疫扩散等免疫扩散等病毒的感染免疫诊断l掌握掌握l病毒的感染途径l病毒感染的类型：整合感染、慢性感染、潜伏感染和慢病感染的概念l病毒的致病机制l病毒标本采集和送检原则，CPE和PFU的概念l熟悉熟悉l干扰素的类型和抗病毒作用l抗病毒的适应性免疫l病毒感染的检查方法原则（病毒分离与鉴定及血清学诊断）；细胞培养的概念及意义病毒的感染免疫诊断