第5章-致病菌的检验7-革兰氏阳性无芽孢杆菌剖析课件.ppt

1、第第1313章章 革兰氏阳性无芽孢杆菌革兰氏阳性无芽孢杆菌李氏杆菌属李氏杆菌属丹毒丝菌属丹毒丝菌属第第1 1节节 李氏杆菌属（李氏杆菌属（ListeriaListeria）最初，李氏杆菌属仅有产单核细胞李氏杆菌一个种，最初，李氏杆菌属仅有产单核细胞李氏杆菌一个种，之后相继确认了之后相继确认了伊氏李氏杆菌伊氏李氏杆菌(L.ivanovii)、无害李氏杆无害李氏杆菌菌(L.innocua)、威斯梅尔氏威斯梅尔氏李氏杆菌李氏杆菌(L.Welshimeri)和和西里杰氏西里杰氏李氏杆菌李氏杆菌(L.seeligeri)等等5个种。该属代表种是个种。该属代表种是产单核细胞李氏杆菌产单核细胞李氏杆菌(L.

2、monocytogenes)，引致人和动，引致人和动物的李氏杆菌病。物的李氏杆菌病。期间曾将期间曾将默氏李氏杆菌默氏李氏杆菌(L.murrayi)和和格氏李氏杆菌格氏李氏杆菌(L.grayi)也划到本属中，但后来的研究结果表明它们是也划到本属中，但后来的研究结果表明它们是一个独立的特殊属一个独立的特殊属默里亚属默里亚属(Murraya)。李氏杆菌属（李氏杆菌属（ListeriaListeria）一、形态与染色一、形态与染色 短杆状短杆状,革兰氏染革兰氏染色阳性。不形成荚色阳性。不形成荚膜、无芽胞，有膜、无芽胞，有鞭鞭毛毛，20-25培养可培养可产生产生4根周鞭毛根周鞭毛，37至少可产生至少可产

3、生1根根鞭毛鞭毛。R型菌多为型菌多为长丝状。长丝状。R型型产单核细胞李氏杆菌产单核细胞李氏杆菌1、兼性厌氧，营养不高；、兼性厌氧，营养不高；对食盐耐受力很强对食盐耐受力很强(18%)；2、血液葡萄糖琼脂：圆形、光滑、淡蓝色、透明、露、血液葡萄糖琼脂：圆形、光滑、淡蓝色、透明、露滴状菌落，滴状菌落，狭窄狭窄溶血溶血；3、1-45均可生长均可生长，30-37 最适，最适，4 需需7天可天可生长生长 故称故称“冰箱菌冰箱菌”；4、麦康凯上不生长。、麦康凯上不生长。5、普通琼脂平板：、普通琼脂平板：光滑型、蓝绿色光泽菌落光滑型、蓝绿色光泽菌落；6、半固体培养基穿刺、半固体培养基穿刺:沿穿刺线呈云雾状生

4、长沿穿刺线呈云雾状生长。二、培养特性二、培养特性1、可分解多种糖、可分解多种糖2、接触酶：、接触酶：3、H2S：4、尿素酶：、尿素酶：5、硝酸盐还原：、硝酸盐还原：三、生化特性三、生化特性1 耐碱耐碱不耐酸，不耐酸，耐盐耐盐。在土壤、牛奶、青贮饲料和粪。在土壤、牛奶、青贮饲料和粪便中长期存活；便中长期存活；2 对热对热的耐受性较多数无芽孢杆菌的耐受性较多数无芽孢杆菌强强，常规巴氏消毒，常规巴氏消毒法不能杀死该菌，在法不能杀死该菌，在70 5-10min可被杀死；可被杀死；3 对消毒剂对消毒剂的抵抗力不强，常用消毒药的抵抗力不强，常用消毒药5-10min能杀死能杀死本菌：本菌：2.5%石炭酸、石

5、炭酸、70%乙醇、乙醇、2.5%氢氧化钠、氢氧化钠、2.5%福尔马林均可有效杀灭。福尔马林均可有效杀灭。四、抵抗力四、抵抗力具有具有O抗原（阿拉伯数字表示）及抗原（阿拉伯数字表示）及H抗原抗原（小写英文（小写英文字母表示）字母表示）,16个血清型，常见个血清型，常见1a、2a、4b型。与多型。与多种细菌存在共同抗原，故种细菌存在共同抗原，故血清学诊断意义不大血清学诊断意义不大。五、血清型五、血清型六、致病性六、致病性1、本菌、本菌细胞内寄生细胞内寄生，不被宿主细胞吞噬而破坏。产生，不被宿主细胞吞噬而破坏。产生的的李斯特溶血素李斯特溶血素O（listeriolysin O,LLO）与其能在巨）与

6、其能在巨噬细胞内生长有关。噬细胞内生长有关。2、可自然感染多种家畜：猪、马、牛、绵羊；、可自然感染多种家畜：猪、马、牛、绵羊；3、病畜、病畜神经症状神经症状，成年牛、羊往往表现为，成年牛、羊往往表现为“转圈病转圈病”；4、妊畜流产、血液中、妊畜流产、血液中单核细胞增多单核细胞增多。5、鸡可全身感染，心肌坏死。、鸡可全身感染，心肌坏死。6、成人、成人脑膜炎脑膜炎，新生儿脑膜炎，新生儿脑膜炎(10%)。七、微生物学诊断七、微生物学诊断1.镜检：镜检：肝、脾、脑肝、脾、脑组织等涂片、革兰氏染色镜检可见组织等涂片、革兰氏染色镜检可见G呈字排列的小杆菌。呈字排列的小杆菌。2.分离培养：普通琼脂平板分离培

7、养：普通琼脂平板蓝绿光泽蓝绿光泽的菌落的菌落，接种血液接种血液葡萄糖琼脂，葡萄糖琼脂，露滴状菌落，露滴状菌落，溶血溶血。3.纯培养：溶血检查、运动性检查、生化鉴定。纯培养：溶血检查、运动性检查、生化鉴定。4.动物试验动物试验：病料接种病料接种家兔或豚鼠家兔或豚鼠眼内，眼内，1d后发生结后发生结膜炎，不久败血症死亡；小鼠膜炎，不久败血症死亡；小鼠腹腔注射腹腔注射，剖检肝脏坏死，剖检肝脏坏死，分离细菌；妊娠分离细菌；妊娠2w的动物接种后可发生的动物接种后可发生流产流产。5.血清学检查血清学检查：凝集反应。凝集反应。第第2 2节节 丹毒丝菌属（丹毒丝菌属（ErysipelothrixErysipel

8、othrix）本属只有本属只有1种，即猪丹毒丝菌（种，即猪丹毒丝菌（E.rhuriopathiae），），是猪丹毒病的病原体，也可引起人的是猪丹毒病的病原体，也可引起人的“类丹毒类丹毒”，通，通称称猪丹毒杆菌猪丹毒杆菌。1、G+细长小杆菌，细长小杆菌，0.2-0.40.5-2.5m；组织涂片或血；组织涂片或血液涂片中，呈单在、成对或小丝状，无鞭毛，无芽胞，液涂片中，呈单在、成对或小丝状，无鞭毛，无芽胞，无荚膜；无荚膜；2、有形成、有形成长丝状长丝状的趋势（陈旧培养物和慢性病猪的心的趋势（陈旧培养物和慢性病猪的心内膜增生组织）。内膜增生组织）。一、形态与染色一、形态与染色 急性病例急性病例 慢性

9、病例慢性病例 二、培养特征二、培养特征 1、兼性厌氧或微需氧，普通琼脂生长不良，麦、兼性厌氧或微需氧，普通琼脂生长不良，麦康凯不生长。血平板上生长茂盛，康凯不生长。血平板上生长茂盛，针尖大小针尖大小露滴状菌落，圆形、灰白、透明、露滴状菌落，圆形、灰白、透明、溶血溶血，生，生长温度长温度5-42，最适，最适30-37。2、鲜血琼脂平板培养时粗糙型菌落的菌体呈、鲜血琼脂平板培养时粗糙型菌落的菌体呈多多形性形性。三、生化特性三、生化特性 1、糖类发酵：、糖类发酵：糖发酵能力极弱，糖发酵能力极弱，仅葡、果、乳，仅葡、果、乳，；2、接触酶：；、接触酶：；3、H2S：；：；4、不分解尿素；、不分解尿素；5

10、、明胶穿刺：呈试管刷状生长，不液化；、明胶穿刺：呈试管刷状生长，不液化；无芽胞菌中抵抗力最强的一种，无芽胞菌中抵抗力最强的一种，对腐败和干燥环境有对腐败和干燥环境有较强的抵抗力较强的抵抗力：腌肉中可生存腌肉中可生存56个月；个月；深埋尸体中生存深埋尸体中生存710个月；个月；腐败猪粪中生活腐败猪粪中生活5个月；个月；土壤中可长久存活，甚至繁殖。土壤中可长久存活，甚至繁殖。本菌对常用消毒剂抵抗力不强，本菌对常用消毒剂抵抗力不强，0.5甲醛数十分钟甲醛数十分钟可杀死。可杀死。四、抵抗力四、抵抗力 最初被分为最初被分为A、B、N型。型。nA型：强毒型，多分离自急性病例；型：强毒型，多分离自急性病例；

11、nB型：弱毒型，多分离自慢性病例，免疫原性较好；型：弱毒型，多分离自慢性病例，免疫原性较好；nN型：无毒型。型：无毒型。目前根据肽聚糖抗原可分为目前根据肽聚糖抗原可分为25个血清型，个血清型，以阿拉伯数以阿拉伯数字表示字表示。其中：。其中：1a亚型亚型急性败血症；急性败血症；2型型亚急性、亚急性、慢性疾病。慢性疾病。五、血清型五、血清型 六、致病性六、致病性 通过消化道感染，进入血流引起动物高热，可产生透明通过消化道感染，进入血流引起动物高热，可产生透明质酸酶和神经氨酸酶，加强血管通透性并降解宿主组织质酸酶和神经氨酸酶，加强血管通透性并降解宿主组织粘蛋白。粘蛋白。1、毒力因子：、毒力因子：黏附

12、素（本质不清楚）和酶类（可能是神经氨酸酶）。2、感染与传播：、感染与传播：经损伤的皮肤和消化道感染，也可经吸血昆虫传播。3、本菌在自然界分布十分广泛，可寄生于哺乳动物、本菌在自然界分布十分广泛，可寄生于哺乳动物、禽和鱼类。以猪多发，叫猪丹毒禽和鱼类。以猪多发，叫猪丹毒；禽也可发生，称禽丹毒；羊也可以感染；人感染称为类丹毒。（1）猪丹毒是一种急性热性传染病：）猪丹毒是一种急性热性传染病：急性败血症：发热至急性败血症：发热至42，皮肤发红，皮肤发红(紫斑紫斑)，突然死亡，突然死亡，病程一般病程一般3-4d，病死率达，病死率达80%。亚急性疹块型：皮肤出现疹块（指压褪色）。亚急性疹块型：皮肤出现疹块

13、（指压褪色）。慢性型：慢性型：A.关节炎型，关节肿大变形、纤维素性渗出，关节炎型，关节肿大变形、纤维素性渗出，呈胶冻样呈胶冻样；B.心内膜炎，疣状赘生物。心内膜炎，疣状赘生物。（2）治疗：）治疗：青霉素疗效最好，每公斤体重青霉素疗效最好，每公斤体重500010000单位，肌注单位，肌注,每每日日23次，连用次，连用23天；天；若效果不显著，可改用链霉素，每若效果不显著，可改用链霉素，每kg体重体重30mg，肌注。，肌注。猪丹毒病猪猪丹毒病猪n涂片镜检：涂片镜检：G+纤细小杆菌纤细小杆菌n分离培养：分离培养：血平板血平板n细菌鉴定：细菌鉴定：培养和生化特性培养和生化特性n血清学诊断：血清学诊断：凝集试验凝集试验,免免疫荧光试验疫荧光试验n动物实验：动物实验：接种鸽子后接种鸽子后2-5d死亡死亡七七、微生物学诊断、微生物学诊断七七、微生物学诊断、微生物学诊断猪丹毒猪丹毒GC42GC42弱毒菌株制成的冻干苗，抗猪丹毒血清弱毒菌株制成的冻干苗，抗猪丹毒血清可用于紧急预防和治疗，也可用青霉素治疗病猪。可用于紧急预防和治疗，也可用青霉素治疗病猪。八、防治八、防治复习思考题复习思考题1.李氏杆菌和猪丹毒杆菌的微生物学诊断。李氏杆菌和猪丹毒杆菌的微生物学诊断。2.李氏杆菌和猪丹毒杆菌鉴别诊断要点。李氏杆菌和猪丹毒杆菌鉴别诊断要点。