医院感染监测方法课件.ppt

1、医院感染监测方法医院感染监测方法1医院感染监测的定义v医院感染监测的定义医院感染监测的定义:医院感染监测是指长期地、系统地、有计划地、医院感染监测是指长期地、系统地、有计划地、主动地观察一定人群中医院感染发生和分布以及主动地观察一定人群中医院感染发生和分布以及影响医院感染的各种因素，对监测资料进行定期影响医院感染的各种因素，对监测资料进行定期的整理分析，确定其分布动态和变化趋势，向有的整理分析，确定其分布动态和变化趋势，向有关人员和单位发送、反馈，并及时采取防治对策关人员和单位发送、反馈，并及时采取防治对策和措施，同时对其防治效果和经济效益作出评价，和措施，同时对其防治效果和经济效益作出评价，

2、不断改进，以期达到控制和降低医院感染的目的。不断改进，以期达到控制和降低医院感染的目的。医院感染监测方法2医院感染监测的内涵v医院感染监测的内涵医院感染监测的内涵要有一个长期的监测计划，连续系统地收集资料要有一个长期的监测计划，连续系统地收集资料定期汇总并经分析和解释所收集的资料，使之成定期汇总并经分析和解释所收集的资料，使之成为有意义的材料，向有关人员或单位反馈或报送为有意义的材料，向有关人员或单位反馈或报送准确地确定医院感染的各种问题，以便有针对性准确地确定医院感染的各种问题，以便有针对性地采取控制措施地采取控制措施对各种监测方法和手段要进行评价对各种监测方法和手段要进行评价要确定诊断标准

3、要确定诊断标准医院感染监测方法3医院感染监测的目的v医院感染监测是医院感染控制的先行，医院医院感染监测是医院感染控制的先行，医院感染控制水平是反映医疗技术水平的重要评感染控制水平是反映医疗技术水平的重要评价指标之一。价指标之一。v目的是为了控制医院感染的各种危险因素，目的是为了控制医院感染的各种危险因素，降低医院感染的各种危险因素、降低医院感降低医院感染的各种危险因素、降低医院感染的发生率，保证和提高医疗质量和医疗安染的发生率，保证和提高医疗质量和医疗安全全医院感染监测方法4医院感染监测简史v医院感染监测源于医院感染监测源于19世纪中叶，产褥热发生世纪中叶，产褥热发生原因的调查研究原因的调查研

4、究v医院感染监测的系统发展始于医院感染监测的系统发展始于20世纪世纪50年代年代欧美欧美MRSA感染的流行感染的流行v美国在美国在60年代开始成立医院感染控制委员会，年代开始成立医院感染控制委员会，在医院中开展空气和环境的细菌学监测在医院中开展空气和环境的细菌学监测医院感染监测方法5医院感染监测的组织系统v由下列机构和部门构成由下列机构和部门构成院长领导下的医院感染管理委员会院长领导下的医院感染管理委员会医院感染科医院感染科科室医院感染管理小组科室医院感染管理小组组成三级医院感染监测管理网络组成三级医院感染监测管理网络医院感染监测方法6医院感染监测方法7医院感染监测的人员分工和职责v医院感染委

5、员会负责医院感染监测与控制的医院感染委员会负责医院感染监测与控制的全面领导与管理工作。全面领导与管理工作。v医院感染科由专职人员组成，是医院感染管医院感染科由专职人员组成，是医院感染管理委员会的办事机构，负责全面医院感染管理委员会的办事机构，负责全面医院感染管理工作理工作医院感染监测方法8医院感染监测的人员分工和职责v病房医院感染管理小组一般由主治医师、护士长、病房医院感染管理小组一般由主治医师、护士长、感控医生和监控护士组成。感控医生和监控护士组成。v监控护士负责对空气、物体表面、医护人员的手进监控护士负责对空气、物体表面、医护人员的手进行定期监测和对本科进行全面监督检查行定期监测和对本科进

6、行全面监督检查v住院医师负责对住院病人医院感染的临床检查、诊住院医师负责对住院病人医院感染的临床检查、诊断、合理使用抗菌药物并填写医院感染病例登记表，断、合理使用抗菌药物并填写医院感染病例登记表，由科主任、主治医师审核签字后上报医院感染管理由科主任、主治医师审核签字后上报医院感染管理科。科。v由医院感染科汇总制表，送医院感染管理委员会主由医院感染科汇总制表，送医院感染管理委员会主任审核后上报上级部门任审核后上报上级部门医院感染监测方法9医院感染监测的信息反馈系统v和医院感染三级管理机构一起组成完整的管和医院感染三级管理机构一起组成完整的管理体系理体系v在医院感染管理工作中具有互通情报、承上在医

7、院感染管理工作中具有互通情报、承上启下、发现问题、改进工作的重要作用。启下、发现问题、改进工作的重要作用。医院感染监测方法10医院感染监测方法11医院感染监测内容v医院感染率及其病种与部位分布医院感染率及其病种与部位分布常用的统计指标有常用的统计指标有医院感染发生率医院感染发生率例次发病率例次发病率患病率及构成比、均数等患病率及构成比、均数等医院感染监测方法12医院感染监测内容漏报率漏报率采用回顾性调查，一般以月为单位采用回顾性调查，一般以月为单位 漏报率漏报率=漏报病例数漏报病例数 100%原上报病例数原上报病例数+漏报例数漏报例数医院感染监测方法13医院感染监测内容估计（实际）发病率估计（

8、实际）发病率估计（实际）发病率估计（实际）发病率=报告发病率报告发病率 100%1漏报率漏报率“实际实际”病例数病例数=估计发病率估计发病率 报告病例数报告病例数 报告发病率报告发病率医院感染监测方法14医院感染监测内容v病原体与药物敏感性的监测病原体与药物敏感性的监测病原体变迁趋势的监测病原体变迁趋势的监测病原体耐药性的变化趋势的监测病原体耐药性的变化趋势的监测平时及医院感染暴发时微生物实验室监测资料需平时及医院感染暴发时微生物实验室监测资料需及时报告，并在一定时期做出微生物报告小结及时报告，并在一定时期做出微生物报告小结应做好菌种保存及耐药谱变化记录，将菌株生化、应做好菌种保存及耐药谱变化

9、记录，将菌株生化、血清、分子生物学分型结果存于计算机数据库以血清、分子生物学分型结果存于计算机数据库以便于分析生物型、血清型、分子生物型变化便于分析生物型、血清型、分子生物型变化医院感染监测方法15医院感染监测内容v环境卫生监测环境卫生监测病房保洁制度执行情况监测病房保洁制度执行情况监测 是预防医院感染的基本要求，尤其是重点是预防医院感染的基本要求，尤其是重点 病病房及科室房及科室对医院环境细菌学监测对医院环境细菌学监测v医院空气微生物学检验医院空气微生物学检验v微生物气溶胶感染的预防：污染源的监测、对微生物气溶胶感染的预防：污染源的监测、对“排菌排菌者者”和和“带菌者带菌者”的调查的调查医院

10、感染监测方法16附：医院感染监测专用表格医院感染监测方法17医院感染监测方法18医院感染监测方法19医院感染监测方法20医院感染监测方法21医院感染监测方法22医院感染监测方法v监测方法的类型监测方法的类型全面综合性监测全面综合性监测v指对全院所有病人、工作人员及感染有关因素和环境指对全院所有病人、工作人员及感染有关因素和环境的综合监测，了解全院感染率、各科感染率、病原体的综合监测，了解全院感染率、各科感染率、病原体及其耐药性和因院感造成的经济损失等，对全院人员及其耐药性和因院感造成的经济损失等，对全院人员进行宣传教育，发现问题，采取措施，预防发生、中进行宣传教育，发现问题，采取措施，预防发生

11、、中止流行。止流行。v目前我国大多数医院都需要进行全面综合性监测目前我国大多数医院都需要进行全面综合性监测医院感染监测方法23医院感染监测方法目标性监测目标性监测v在全面综合性监测基础上才能进行目标性监测，包括在全面综合性监测基础上才能进行目标性监测，包括部门监测、轮转监测、从优监测等方法部门监测、轮转监测、从优监测等方法v是医院感染监测的一种新观点和方法是医院感染监测的一种新观点和方法医院感染监测方法24医院感染监测方法v资料收集方法资料收集方法医生自报医生自报漏报率高，需提高医生对医感的认识，加强制度与责任管漏报率高，需提高医生对医感的认识，加强制度与责任管理。理。横断面（现况）调查横断面

12、（现况）调查由医院感染专职人员完成，可初步了解医院感染率的本底由医院感染专职人员完成，可初步了解医院感染率的本底及其变动情况，同时分析医院感染的危险因素，找出薄及其变动情况，同时分析医院感染的危险因素，找出薄弱环节，采取控制措施，工作量大，容易做到，结果快弱环节，采取控制措施，工作量大，容易做到，结果快速，漏报率高，可连续定期进行以使结果尽量符合医院速，漏报率高，可连续定期进行以使结果尽量符合医院感染的真实情况感染的真实情况医院感染监测方法25医院感染监测方法回顾性调查回顾性调查v一般回顾性调查（无对照组）一般回顾性调查（无对照组）v病例病例-对照感染危险因素调查对照感染危险因素调查为分析感染

13、原因提供初步依据，常因原始病历记载不完整，为分析感染原因提供初步依据，常因原始病历记载不完整，漏诊难以避免，不能真实反映医院感染水平漏诊难以避免，不能真实反映医院感染水平感染监控护士登记感染监控护士登记每个病房应设一名兼职医院感染监控护士，加以培训，每个病房应设一名兼职医院感染监控护士，加以培训，对其病房发生的感染病例进行登记，随时与感染控制对其病房发生的感染病例进行登记，随时与感染控制科联系科联系医院感染监测方法26医院感染监测方法医院感染专职人员做前瞻性调查医院感染专职人员做前瞻性调查要监测医院感染的发病率，必须由专职医院感染人要监测医院感染的发病率，必须由专职医院感染人员组织进行前瞻性调

14、查员组织进行前瞻性调查v有计划地对某些重点科室或全院进行某时期的医院感有计划地对某些重点科室或全院进行某时期的医院感染前瞻调查，以发现该时期某病房或全院发生的感染染前瞻调查，以发现该时期某病房或全院发生的感染病例病例v计算医院感染发病率，以及有关危险因素的分析计算医院感染发病率，以及有关危险因素的分析v也可对暴露与未暴露于某危险因素的病例进行队列研也可对暴露与未暴露于某危险因素的病例进行队列研究，以进一步证实感染的原因。究，以进一步证实感染的原因。v结果较为真实可靠，但需一定人力、物力及较长时间，结果较为真实可靠，但需一定人力、物力及较长时间，有时难于坚持有时难于坚持医院感染监测方法27医院感

15、染监测方法v资料整理资料整理原始资料整理核实原始资料整理核实v是否按要求认真完整填写院感病例登记表及其它相关是否按要求认真完整填写院感病例登记表及其它相关表格，缺项要立即补上表格，缺项要立即补上v对诊断不确定的感染病例再核实对诊断不确定的感染病例再核实v去除重复的病例去除重复的病例医院感染监测方法28医院感染监测方法统计指标统计指标对核实好的资料计算以下指标对核实好的资料计算以下指标v前瞻性调查资料，要计算全院及各科的医院感染病例前瞻性调查资料，要计算全院及各科的医院感染病例发病率及例次发病率发病率及例次发病率v横断面调查资料可计算医院感染现患率及各部位感染横断面调查资料可计算医院感染现患率及

16、各部位感染率及构成比率及构成比v对平时医生自报资料，要定期整理计算以上各指标对平时医生自报资料，要定期整理计算以上各指标医院感染监测方法29医院感染监测方法除以上指标外，可根据调查登记表项目进行统计，如除以上指标外，可根据调查登记表项目进行统计，如v抗生素使用率抗生素使用率v病原菌及其耐药率病原菌及其耐药率v各种危险因素情况等各种危险因素情况等应对各项指标进行编号以便输入计算机管理应对各项指标进行编号以便输入计算机管理医院感染监测方法30医院感染监测方法v结果分析（一）结果分析（一）比较医院感染率的变动性况，与本底感染率比较是否有比较医院感染率的变动性况，与本底感染率比较是否有上升或下降，分析

17、其原因是什么上升或下降，分析其原因是什么分析各种危险因素与医院感染病例发生的关系分析各种危险因素与医院感染病例发生的关系抗生素使用率与细菌耐药性的情况抗生素使用率与细菌耐药性的情况各种感染病原菌变动及流行株情况各种感染病原菌变动及流行株情况医院感染监测方法31医院感染监测方法v结果分析（二）结果分析（二）医院感染对本院医护人员健康的损害及影响出勤率等情医院感染对本院医护人员健康的损害及影响出勤率等情况况因医院感染增加病人痛苦、延长住院天数以及造成的经因医院感染增加病人痛苦、延长住院天数以及造成的经济损失等济损失等如医院感染暴发，则需立即查清原因，采取针对性措施如医院感染暴发，则需立即查清原因，

18、采取针对性措施并观察其效果如何并观察其效果如何医院感染监测方法32院感监测资料的利用v对医院感染发展趋向预测和预报对医院感染发展趋向预测和预报发现某时期散发感染病例增加，已明显超过了本发现某时期散发感染病例增加，已明显超过了本底感染率底感染率流行菌株及耐药性有变化流行菌株及耐药性有变化可预测将有可能发生医院感染的流行或暴发可预测将有可能发生医院感染的流行或暴发医院感染监测方法33院感监测资料的利用v探索危险因素探索危险因素除传统的院感危险因素外，我们面临着：除传统的院感危险因素外，我们面临着：各种新型侵入性医疗检查治疗手段的大量使用各种新型侵入性医疗检查治疗手段的大量使用患者增加、床位增加、老

19、年与婴幼儿、免疫低下、慢患者增加、床位增加、老年与婴幼儿、免疫低下、慢性病患者不断增加性病患者不断增加新型广谱抗生素的大量使用、多重甚至泛耐药细菌、新型广谱抗生素的大量使用、多重甚至泛耐药细菌、“超级细菌超级细菌”的出现的出现高致性微生物不断出现（高致性微生物不断出现（SARS、H5N1、禽流感、禽流感）使医院感染不断出现新的危险因素，亟需通过监测使医院感染不断出现新的危险因素，亟需通过监测去探索与专题研究去探索与专题研究医院感染监测方法34院感监测资料的利用v防治效果的评价防治效果的评价通过监测工作可跟踪观察某项防治措施对医院感通过监测工作可跟踪观察某项防治措施对医院感染发病率的动态变化，凡

20、是使用后发病率能明显染发病率的动态变化，凡是使用后发病率能明显降低者，可认为该项措施是有效的，反之则认为降低者，可认为该项措施是有效的，反之则认为无效。无效。医院感染监测方法35医院微生物监测方法医院感染监测方法36环境空气的监测v采样时间采样时间清毒处理后与进行医疗活动之前清毒处理后与进行医疗活动之前v采样方法采样方法v仪器采样法仪器采样法:精确精确,结果接近实际结果接近实际,有有JWL、LWC-、Anderson等型号空气采样器。等型号空气采样器。v自然沉降法自然沉降法:简便易行、国内应用广泛。简便易行、国内应用广泛。医院感染监测方法37环境空气的监测v自然沉降法自然沉降法v培养基：直径培

21、养基：直径9cm普通营养琼脂平板普通营养琼脂平板v布点方法：室内面积布点方法：室内面积30m2,设内、中、外对角线设内、中、外对角线3点，内、外点布点部位距墙壁点，内、外点布点部位距墙壁1m处；室内面积处；室内面积30m2，设，设4角及中央角及中央5点，点，4角的布点部位距墙壁角的布点部位距墙壁1m处。处。v采样方法：采样方法：将直径将直径9cm的普通琼脂平板的普通琼脂平板放在室内各放在室内各采样点处，高度采样点处，高度距地面距地面1.5m，将平板盖打开，盖子，将平板盖打开，盖子扣在平板的边缘上扣在平板的边缘上暴露暴露5分钟分钟后送检后送检。医院感染监测方法38环境空气的监测v培养方法：送检平

22、板置培养方法：送检平板置361温箱培养温箱培养48小时，小时，计数各平板菌落数并计算平均菌落数（小数点后一计数各平板菌落数并计算平均菌落数（小数点后一位、四舍五入），并分离致病菌。位、四舍五入），并分离致病菌。v结果报告结果报告计算公式：计算公式：细菌总数（细菌总数（cfu/m3)=50000N/(AT)A：平板面积（：平板面积（cm2)；T：暴露时间（：暴露时间（min)N：平均菌落数（：平均菌落数（cfu)医院感染监测方法39环境空气监测的结果计算（自然沉降法）6cm7.5cm9cm5min35422615810min1771137915min118765230min593826医院感染监

23、测方法40物体表面的监测v采样时间采样时间v消毒处理后消毒处理后4h内进行采样内进行采样v采样方法：采样方法：v棉拭子采样法棉拭子采样法v压印法压印法医院感染监测方法41物体表面的监测v拭子采样法：拭子采样法：v采样面积：被采表面采样面积：被采表面100cm2 时时,取全部表面取全部表面；被；被采表面采表面100cm2时时,取取100cm2。v采样方法：用采样方法：用55cm2的标准灭菌规格板，放在被的标准灭菌规格板，放在被检物体表面。用浸有含相应中和剂的无菌采样液的检物体表面。用浸有含相应中和剂的无菌采样液的棉拭子棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随次，

24、并随之转动棉拭子，连续采样之转动棉拭子，连续采样14个规格板面积，剪去个规格板面积，剪去或折去手接触部份，棉拭子放入装有或折去手接触部份，棉拭子放入装有10ml采样液的采样液的试管中送检，门把手等小型物体则采用棉拭子直接试管中送检，门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样涂抹物体的方法采样医院感染监测方法42物体表面的监测v检测方法：检测方法：v将采样管在混匀器上振荡将采样管在混匀器上振荡20s或用力振摇或用力振摇80次，用无次，用无菌吸管吸取菌吸管吸取1.0ml接种于灭菌平皿，每一样本接种接种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，内加入已溶化的个平皿，内加入已溶化的45480C的营养琼

25、脂的营养琼脂1518ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固后置，边倾注边摇匀，待琼脂凝固后置361温箱培养温箱培养48小时，计数菌落数。小时，计数菌落数。医院感染监测方法43物体表面的监测v结果报告（菌落总数）结果报告（菌落总数）计算公式：计算公式：物体表面细菌菌落总数物体表面细菌菌落总数(cfu/cm2)=平皿上菌落的平均数平皿上菌落的平均数其中小件物品以其中小件物品以cfu/件报告结果件报告结果采样面积(cm2)医院感染监测方法44医务人员手生物学监测v采样时间采样时间v清毒后立即采样清毒后立即采样v采样方法：采样方法：被检人五指并拢被检人五指并拢,用浸有含相应中和剂用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液

26、的棉拭子在双手指屈面从指根到指端的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦往返涂擦2次次(一只手涂擦面积约一只手涂擦面积约30 cm2),并随之转动并随之转动采样棉拭子采样棉拭子,剪去操作者手接触部位剪去操作者手接触部位,将棉拭子投入将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检立即送检.医院感染监测方法45医务人员手生物学监测v检测方法：同前。检测方法：同前。v计算公式：计算公式：手细菌菌落总数手细菌菌落总数(cfu/cm2)=（平皿上菌落的平均数（平皿上菌落的平均数采样液稀释倍数）采样液稀释倍数）/（30 2）医院感染监测方法46皮肤黏

27、膜的监测v采样时间：消毒后立即采样采样时间：消毒后立即采样v采样方法：用采样方法：用55cm2的标准灭菌规格板，放在被的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后。将棉拭子投随之转动棉拭子，剪去手接触部位后。将棉拭子投入入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，立即含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。样。医院感染监

28、测方法47皮肤黏膜的监测v检测方法：将采样管在混匀器上振荡检测方法：将采样管在混匀器上振荡20s或用力振摇或用力振摇80次，用无菌吸管吸取次，用无菌吸管吸取1.0ml接种于灭菌平皿，每一接种于灭菌平皿，每一样本接种样本接种2个平皿，内加入已溶化的个平皿，内加入已溶化的45480C的营的营养琼脂养琼脂1518ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固后置，边倾注边摇匀，待琼脂凝固后置361温箱培养温箱培养48小时，计数菌落数。小时，计数菌落数。医院感染监测方法48v结果报告（菌落总数）结果报告（菌落总数）计算公式：计算公式：皮肤粘膜表面细菌菌落总数皮肤粘膜表面细菌菌落总数(cfu/cm2)=（平皿上菌落（平

29、皿上菌落的平均数采样液稀释倍数）的平均数采样液稀释倍数）/55皮肤黏膜的监测医院感染监测方法49使用中消毒液染菌量测定v涂抹法涂抹法:用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液1.0ml,加入加入9.0ml含有相应含有相应中和剂的采样管内混匀中和剂的采样管内混匀,用无菌吸管吸取上述溶液用无菌吸管吸取上述溶液0.2ml,滴于干燥普通琼脂平板滴于干燥普通琼脂平板,每份样品同时做每份样品同时做2个个平行样平行样,一平板置一平板置200C培养培养7天天,观察霉菌生长情况观察霉菌生长情况,另一个平板置另一个平板置350C温箱培养温箱培养72h,记数菌落数记数菌落数,同时同时检测致病菌检测致病菌 消毒液染菌

30、量消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上菌落数每个平板上菌落数50医院感染监测方法50使用中消毒液染菌量测定v倾注法倾注法:v用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液1.0ml,加入到加入到9.0ml含有相应含有相应中和剂的无菌生理盐水采样管内混匀中和剂的无菌生理盐水采样管内混匀,分别取分别取0.5ml放入放入2只灭菌平皿内只灭菌平皿内,加入已溶化的加入已溶化的45480C的营养的营养琼脂琼脂1518ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，边倾注边摇匀，待琼脂凝固,一平板一平板置置200C培养培养7天天,观察霉菌生长情况观察霉菌生长情况,另一个平板置另一个平板置36 10C温箱培养温箱培养72h,记

31、数菌落数记数菌落数,同时检测致病菌同时检测致病菌 消毒液染菌量消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上菌落数每个平板上菌落数20医院感染监测方法51使用中消毒液染菌量测定v结果判断结果判断:消毒液染菌量消毒液染菌量100 cfu/ml,并未检出致病菌为并未检出致病菌为合格合格v注意事项注意事项:采样后采样后1h内监测内监测医院感染监测方法52消毒灭菌的卫生学标准环境环境类别类别范围范围 标准标准空气空气物体表面物体表面手手类类洁净手术室、洁净病洁净手术室、洁净病房房 10cfu/m3 5cfu/cm25 cfu/cm2类类普通手术室、产房、普通手术室、产房、婴儿室、烧伤病房、婴儿室、烧伤病房、

32、重症监护病房等重症监护病房等200 cfu/m35 cfu/cm2 5cfu/cm2类类各类普通病房、急诊各类普通病房、急诊室、化验室、治疗室室、化验室、治疗室等等 500cfu/m3 10cfu/cm2 10cfu/cm2类类传染科及病房传染科及病房 15cfu/cm2 15cfu/cm2医院感染监测方法53沙门菌检验程序 样品样品 胆盐乳糖采样管胆盐乳糖采样管 SS或伊红美蓝平板或伊红美蓝平板 三糖铁琼脂三糖铁琼脂血清凝集试验血清凝集试验 葡萄糖葡萄糖 乳糖乳糖 甘露醇甘露醇 靛基质靛基质 尿素尿素 赖氨酸脱羧酶赖氨酸脱羧酶医院感染监测方法54大肠菌群检验程序 样品样品 胆盐乳糖采样管胆盐

33、乳糖采样管 麦康凯平板或伊红美蓝平板麦康凯平板或伊红美蓝平板 染色镜检染色镜检 乳糖复发酵乳糖复发酵医院感染监测方法55金黄色葡萄球菌检验程序 样品样品 7.5%氯化钠肉汤氯化钠肉汤 血平板或甘露醇高盐平板血平板或甘露醇高盐平板 染色镜检染色镜检 甘露醇发酵试验甘露醇发酵试验 血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验医院感染监测方法56绿脓杆菌检验程序 样品样品 胆盐乳糖采样液胆盐乳糖采样液 普通琼脂平板或血琼脂平板普通琼脂平板或血琼脂平板 染色镜检染色镜检 氧化酶试验氧化酶试验 阴性阴性 绿脓菌素试验绿脓菌素试验 阴性阴性 阳性阳性 明胶液化试验明胶液化试验 硝酸盐还原试验硝酸盐还原试验 42C0生长试

34、验生长试验医院感染监测方法57乙型溶血性链球菌检测程序 样品样品 1%葡萄糖肉汤葡萄糖肉汤 血平板血平板 染色镜检、生化反应染色镜检、生化反应医院感染监测方法58医疗器械采样及检查方法v无菌检验的定义：指检查经灭菌的敷料、缝线、一无菌检验的定义：指检查经灭菌的敷料、缝线、一次性使用的医疗用品、无菌器械以及适用于无菌室次性使用的医疗用品、无菌器械以及适用于无菌室的其他品种是否无菌的一种方法。的其他品种是否无菌的一种方法。v无菌检验应在洁净度为无菌检验应在洁净度为100级单向流空气区域内进级单向流空气区域内进行行v应严格遵守无菌操作，避免微生物污染应严格遵守无菌操作，避免微生物污染v对单向流空气区

35、域及工作台面，必须进行洁净度验对单向流空气区域及工作台面，必须进行洁净度验证证医院感染监测方法59医疗器械采样及检查方法v采样时间采样时间v在灭菌处理后，存放有效期内采样在灭菌处理后，存放有效期内采样医院感染监测方法60医疗器械采样及检查方法v采样方法采样方法v缝合针、针头、刀片等小件医疗器械：缝合针、针头、刀片等小件医疗器械：取取5件直接浸入件直接浸入6管需管需-厌氧培养管（其中一管作阳厌氧培养管（其中一管作阳性对照）与性对照）与4管霉菌培养管。培养基用量为管霉菌培养管。培养基用量为15ml/管管医院感染监测方法61医疗器械采样及检查方法v注射器：注射器：取取5付注射器，在付注射器，在5ml

36、洗脱液中反复抽吸洗脱液中反复抽吸5次，洗下次，洗下管内细菌，混和后接种需厌氧菌培养管（共管内细菌，混和后接种需厌氧菌培养管（共6管，管，其中其中1管作阳性对照）与霉菌培养管（共管作阳性对照）与霉菌培养管（共4管）接种管）接种量为量为1ml注射器注射器0.5ml,2ml注射器注射器1ml,510ml注注射器射器2ml,2050ml注射器注射器5ml。培养基用量为接。培养基用量为接种量种量2ml以下以下15ml/管管,接种量接种量5ml为为40ml/管。管。医院感染监测方法62医疗器械采样及检查方法v手样钳、镊子等大件医疗器械：手样钳、镊子等大件医疗器械：取取2件用蘸有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采

37、样，件用蘸有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采样，将棉拭子投入将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中，将采样液混匀，无菌洗脱液中，将采样液混匀，接种于需氧接种于需氧-厌氧培养管（共厌氧培养管（共6管，其中管，其中1管作阳性管作阳性对照）与霉菌培养基（共对照）与霉菌培养基（共4管）。接种量为管）。接种量为1ml/管，管，培养基用量为培养基用量为15ml/管。管。医院感染监测方法63医疗器械采样及检查方法v检测方法：检测方法：v需设阳性及阴性对照管需设阳性及阴性对照管v待检样品的需氧待检样品的需氧-厌氧培养管及阳性与阴性对照管厌氧培养管及阳性与阴性对照管30 35 培养培养5天，霉菌培养管与阴性对照管天，霉菌培

38、养管与阴性对照管20 25 培养培养7天，培养期间逐日检查是否有菌天，培养期间逐日检查是否有菌生长。如不能从外观判断的样品需作涂片染色镜检。生长。如不能从外观判断的样品需作涂片染色镜检。医院感染监测方法64医疗器械采样及检查方法v无菌检验的结果判断无菌检验的结果判断v阳性对照在阳性对照在24h内应有菌生长，阴性对照在培养期内应有菌生长，阴性对照在培养期间应无菌生长间应无菌生长v如需如需-厌氧管及霉菌培养管内均为澄清或虽显混浊但厌氧管及霉菌培养管内均为澄清或虽显混浊但经证明并非有菌生长，判为灭菌合格。经证明并非有菌生长，判为灭菌合格。v如任何一管明显混浊并证实有菌生长，应重新取样，如任何一管明显

39、混浊并证实有菌生长，应重新取样，分别按同样方法复试分别按同样方法复试2次，除阳性对照外，其他各次，除阳性对照外，其他各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。医院感染监测方法65无菌检验注意事项v送检时间不得超过送检时间不得超过6h，若样品保存于，若样品保存于0 4 则不则不得超过得超过24hv被采表面被采表面100cm2 时时,取全部表面取全部表面；被采表面；被采表面100cm2时时,取取100cm2。v若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。和剂。医院感染监测方法66医疗用品细菌菌落卫生标准类别类别

40、标准标准进入人体无菌组织、器官进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、黏膜的或接触破损皮肤、黏膜的医疗用品医疗用品无菌无菌接触黏膜的医疗用品接触黏膜的医疗用品 20cfu/g或或100cm，致病性微生物，致病性微生物不得检出不得检出接触皮肤的医疗用品接触皮肤的医疗用品 200cfu/g或或100cm，致病性微生，致病性微生物不得检出物不得检出医院感染监测方法67洗脱液的配制方法蛋白胨蛋白胨10g氯化钠氯化钠8.5g吐温吐温801.0ml加加0.03mol/L PBS至至1000ml注：注：0.03mol/L PBS（PH7.2-7.4）配方：）配方：磷酸氢二钠磷酸氢二钠2.84g磷酸二氢钾磷酸二

41、氢钾1.36g加加H2O至至1000ml医院感染监测方法68常用消毒液的相应中和剂消毒剂（浓度消毒剂（浓度）中和剂（浓度中和剂（浓度）含氯（碘）消毒剂（含氯（碘）消毒剂（0.1-0.5）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1-1.0）过氧乙酸（过氧乙酸（0.1-0.5）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.1-0.5）过氧化氢（过氧化氢（1.0-3.0）硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（0.5-1.0）福尔马林（福尔马林（1.0）（1）双甲酮（）双甲酮（1.0）与吗啉（）与吗啉（0.6）混合）混合液；（液；（2）亚硫酸钠（）亚硫酸钠（0.1-0.5）；（）；（3）氢氧化铵（氢氧化铵（25.0）戊二醛（戊二醛（2.0）甘氨

42、酸（甘氨酸（1.0）季胺盐类消毒剂（季胺盐类消毒剂（0.1-0.5）吐温吐温80（0.5-3.0）+卵磷脂（卵磷脂（1.0-2.0）洗必泰（洗必泰（0.1-0.5）同季胺盐类同季胺盐类酚类消毒剂（酚类消毒剂（30.0-50.0）吐温吐温80（0.5-3.0）汞类消毒剂（汞类消毒剂（0.002-0.5）巯基醋酸钠（巯基醋酸钠（0.2-2.0）碱类消毒剂碱类消毒剂等当量酸等当量酸酸类消毒剂酸类消毒剂等当量碱等当量碱医院感染监测方法69手术室环境的监测v层流手术室的空气监测方法层流手术室的空气监测方法v浮游菌浓度监测法（浮游菌浓度监测法（CFU/m3）v沉降菌浓度监测法（沉降菌浓度监测法（CFU/皿

43、）皿）医院感染监测方法70手术室环境的监测v沉降菌浓度监测法沉降菌浓度监测法v采样时间采样时间:级洁净手术室和洁净辅助用房检测前级洁净手术室和洁净辅助用房检测前,系统已运行系统已运行15min,其他洁净房间应已运行其他洁净房间应已运行40minv采样方法采样方法:用直径用直径90mm培养皿在空气中暴露培养皿在空气中暴露30min,采样点可采样点可布置在地面上或不高于地面布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上的任意高度上,盖盖好培养皿后经过培养得出的菌落数好培养皿后经过培养得出的菌落数,代表空气中可以代表空气中可以沉降下来的细菌数沉降下来的细菌数,单位单位CFU/皿皿医院感染监测方法71手

44、术室环境的监测层流手术室沉降法空气监测采样布点数层流手术室沉降法空气监测采样布点数被测区域洁净度级别被测区域洁净度级别最少培养皿数最少培养皿数(90MM,30MIN)100131000510000310000023000002医院感染监测方法72手术室环境的监测v培养方法培养方法:采样后的培养基采样后的培养基,应立即置于应立即置于37 条件下培养条件下培养24h。v结果报告结果报告:计数生长的菌落数，求出菌落数的平均值（四舍五计数生长的菌落数，求出菌落数的平均值（四舍五入到小数点后入到小数点后1位），单位位），单位CFU/皿皿)医院感染监测方法73手术室环境的监测v层流手术室沉降法空气监测菌落

45、数卫生标准层流手术室沉降法空气监测菌落数卫生标准 (单位单位:CFU/30min)手术区手术区周边区周边区级特别洁净手级特别洁净手术室术室0.2 0.4级标准洁净手级标准洁净手术室术室 0.75 1.5一般洁净手术一般洁净手术室室 2 4准洁净手术室准洁净手术室 5 5医院感染监测方法74血液净化系统的监测v采样时间：采样时间：血液净化系统监测应在透析用水和透析液制做好后血液净化系统监测应在透析用水和透析液制做好后即将进行透析前即将进行透析前v采样方法：采样方法：用灭菌注射器吸取透析用水或透析液用灭菌注射器吸取透析用水或透析液25ml,放入放入无菌管中送检无菌管中送检医院感染监测方法75血液净

46、化系统的监测v检测方法检测方法 用无菌吸管吸取用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿待检样品接种于灭菌平皿,每每一样本接种一样本接种2个平皿个平皿,内加入已溶化的内加入已溶化的4548 的营的营养琼脂养琼脂1518ml,边倾注边摇匀边倾注边摇匀,待琼待琼 脂凝固脂凝固,置置361 温箱培养温箱培养48h,计数菌落数计数菌落数医院感染监测方法76血液净化系统的监测v结果计算结果计算 用析用水用析用水/透析液细菌总数透析液细菌总数(CFU/ml)=2个平板上的个平板上的菌落总数稀释倍数菌落总数稀释倍数v卫生标准卫生标准v透析用水细菌数透析用水细菌数200 CFU/ml,每个月监测每个月监测1次次,结果结果超出范围时超出范围时,应再复查应再复查,当怀疑或确定患者在透析过当怀疑或确定患者在透析过程中有热原反应、菌血症状时应随时进行监测程中有热原反应、菌血症状时应随时进行监测医院感染监测方法77血液净化系统的监测v透析液细菌数透析液细菌数2000 CFU/ml，每个月监测，每个月监测1次，当次，当怀疑有透析液污染或发生严重的感染病例时，应增怀疑有透析液污染或发生严重的感染病例时，应增加采样点。如原水口、反渗水出口、储水箱出口、加采样点。如原水口、反渗水出口、储水箱出口、透析液配比机和浓缩透析液等透析液配比机和浓缩透析液等医院感染监测方法78