1、资料仅供参考,不当之处,请联系改正。本科共同特性:本科共同特性:*革兰氏革兰氏阴性、无芽孢的兼性厌氧菌阴性、无芽孢的兼性厌氧菌*多为正常多为正常肠道菌群成员肠道菌群成员*部分菌部分菌对人和动物有广泛的致病性对人和动物有广泛的致病性*公共卫生公共卫生和兽医临有重要意义。和兽医临有重要意义。第一节第一节 埃希菌属埃希菌属(Escherichia)Escherichia)本属现有本属现有5个种,其中最重要的种是个种,其中最重要的种是大肠埃希菌大肠埃希菌(E.coli),俗称俗称大肠杆菌大肠杆菌,下分血清型。本菌系人和温血动物,下分血清型。本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一肠道内正常菌群成员之一
2、。一、形态染色特性一、形态染色特性革兰氏阴性革兰氏阴性无芽孢的杆菌,无芽孢的杆菌,散在,周生鞭毛,多有菌毛。散在,周生鞭毛,多有菌毛。大肠杆菌光镜照片大肠杆菌光镜照片大肠杆菌电镜照片大肠杆菌电镜照片资料仅供参考,不当之处,请联系改正。v生化特性生化特性 分解多种糖类产酸产气,分解多种糖类产酸产气,分解乳糖、分解乳糖、蔗糖蔗糖产酸产气产酸产气致病性菌株,呈致病性菌株,呈溶血溶血二、培养及生化特性二、培养及生化特性 兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,最适生长温度兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,最适生长温度为为3737(15-42 15-42),),PH 7.2-7.4PH 7.2-7.4。v
3、培养特性培养特性普通肉汤普通肉汤:普通琼脂平板普通琼脂平板伊红美蓝琼脂平板:伊红美蓝琼脂平板:麦康凯琼脂平板:麦康凯琼脂平板:三糖铁(三糖铁(TSI)培养基:培养基:血液琼脂平板:血液琼脂平板:肉汤肉汤:37,:37,2424hh混浊,沉淀,菌环,粪臭味混浊,沉淀,菌环,粪臭味琼脂:琼脂:形成湿润、光滑、隆起、圆形、灰白色形成湿润、光滑、隆起、圆形、灰白色形成形成红色菌落红色菌落紫黑色带金属光泽的菌落紫黑色带金属光泽的菌落高层和斜面均呈黄色高层和斜面均呈黄色伊伊红红美美蓝蓝麦麦康康凯凯琼琼脂脂三三糖糖铁铁S SS S琼琼脂脂菌落呈红色菌落呈红色资料仅供参考,不当之处,请联系改正。三、抗原及血清
4、型三、抗原及血清型1.1.菌体抗原(菌体抗原(O O抗原):抗原):2.K2.K抗原:抗原:3.3.鞭毛抗原(鞭毛抗原(H H抗原)抗原)*多糖多糖-类脂类脂-蛋白质复合物(蛋白质复合物(LPS)耐热耐热*173 173种种 O抗原(抗原(O1 O173)*每个每个菌株只含有一种菌株只含有一种O抗原抗原171个个血清型血清型*被膜被膜或荚膜、菌毛抗原或荚膜、菌毛抗原多糖或蛋白质多糖或蛋白质*K K抗原有抗原有8080种,种,分三个型(分三个型(A-耐热、耐热、B、L-不耐热)不耐热)*K K抗原抗原是区分血清型或亚型的根据是区分血清型或亚型的根据*不不耐热的鞭毛蛋白抗原耐热的鞭毛蛋白抗原*80
5、80或经乙醇即破坏其抗原性或经乙醇即破坏其抗原性*H H抗原有抗原有5656种种大肠杆菌抗原大肠杆菌抗原O:K:H排列表示排列表示其血清型。如其血清型。如O8:K23(L):H19资料仅供参考,不当之处,请联系改正。四、致病性四、致病性*大肠杆菌大肠杆菌条件性病原菌条件性病原菌在特定条件下,可引起疾病在特定条件下,可引起疾病*有极有极少数大肠杆菌少数大肠杆菌病原性大肠杆菌,引起病原性大肠杆菌,引起人和动物疾病人和动物疾病 产肠毒素大肠杆菌产肠毒素大肠杆菌(ETEC)ETEC):初生仔猪腹泻等疾病。初生仔猪腹泻等疾病。产类志贺毒素大肠杆菌产类志贺毒素大肠杆菌(SLTEC)SLTEC):猪水肿病、
6、犊牛出血性结肠炎等。猪水肿病、犊牛出血性结肠炎等。肠致病性大肠杆菌肠致病性大肠杆菌(EPEC)EPEC):兔腹泻、猪腹泻等。兔腹泻、猪腹泻等。败血性大肠杆菌败血性大肠杆菌(SEPEC)SEPEC):多种动物的多种动物的败血症。败血症。尿道致病性大肠杆菌尿道致病性大肠杆菌(UPEC)UPEC):尿道及生殖器官感染,引起炎症。尿道及生殖器官感染,引起炎症。病原性大肠杆菌病原性大肠杆菌资料仅供参考,不当之处,请联系改正。1.1.产肠毒素大肠杆菌产肠毒素大肠杆菌(ETEC)ETEC)ETEC致人和幼畜腹泻,仔猪黄痢、犊牛及断奶仔猪腹泻等致人和幼畜腹泻,仔猪黄痢、犊牛及断奶仔猪腹泻等v毒力因子毒力因子黏
7、附素黏附素(adhesin)定居因子定居因子(colonization factor),*黏附黏附素不是导致宿主腹泻的直接致病因子素不是导致宿主腹泻的直接致病因子*使菌体使菌体黏附于小肠上皮细胞黏附于小肠上皮细胞,定居和繁殖,发挥致病作用定居和繁殖,发挥致病作用如如F4(K88)、F5(K99)、F6(987P)和和F41等等黏附素性菌毛黏附素性菌毛肠毒素肠毒素 不耐热肠毒素不耐热肠毒素(LT)耐热肠毒素耐热肠毒素(ST)肠细胞分泌机能亢进,引起腹泻肠细胞分泌机能亢进,引起腹泻一种蛋白质性毒素一种蛋白质性毒素资料仅供参考,不当之处,请联系改正。2.2.产类志贺毒素大肠杆菌产类志贺毒素大肠杆菌(
8、SLTEC)SLTEC)*体内或体内或体外生长时可体外生长时可产生类志贺毒素产生类志贺毒素(SLT)的病原性大肠杆菌的病原性大肠杆菌*SLTEC SLTEC可致可致猪的水肿病猪的水肿病头部、肠系膜和胃壁浆液性水肿为特征头部、肠系膜和胃壁浆液性水肿为特征毒力因子毒力因子:粘附性菌毛粘附性菌毛细菌在猪肠黏膜上皮细胞定居和繁殖。细菌在猪肠黏膜上皮细胞定居和繁殖。F18菌毛,猪水肿病,毒力因子菌毛,猪水肿病,毒力因子致水肿病致水肿病2型类志贺毒素型类志贺毒素资料仅供参考,不当之处,请联系改正。五、微生物学诊断五、微生物学诊断黏附素黏附素和和毒素毒素的定型,确定其属于何类致病性大肠杆菌的定型,确定其属于
9、何类致病性大肠杆菌*病料病料麦康凯平板麦康凯平板、血平板血平板上划线分离培养上划线分离培养可疑菌落可疑菌落纯培养物做纯培养物做O、K抗原鉴定抗原鉴定1.1.采病料及染色镜检采病料及染色镜检2.分离培养分离培养3.生化鉴定:生化鉴定:4.纯培养物抗原鉴定纯培养物抗原鉴定5.检测毒力因子:检测毒力因子:*腹泻腹泻、猪水肿病、猪水肿病小肠内容物或黏膜刮取物、肠系膜淋巴结小肠内容物或黏膜刮取物、肠系膜淋巴结*败血症败血症病例病例:采集内脏组织(肝、脾、肾等):采集内脏组织(肝、脾、肾等)*革兰氏染色革兰氏染色阴性菌阴性菌资料仅供参考,不当之处,请联系改正。病料病料粪便、肠内容物、粘膜刮取物粪便、肠内容
10、物、粘膜刮取物血、肠淋巴结、其他病变组织血、肠淋巴结、其他病变组织麦康凯麦康凯或或伊红美蓝伊红美蓝琼脂平板划线分离琼脂平板划线分离血液、麦康凯琼脂平板分离划线分离血液、麦康凯琼脂平板分离划线分离挑取疑似菌落挑取疑似菌落5-10个,分别接种于个,分别接种于三糖铁三糖铁(TSI)、)、普通琼脂斜面普通琼脂斜面三糖铁三糖铁(TSITSI)产酸呈黄色产酸呈黄色反应者反应者其其TSITSI生长物或生长物或普通琼脂斜面培养物普通琼脂斜面培养物革兰氏染色革兰氏染色镜检形态,镜检形态,不符合可终止鉴定不符合可终止鉴定生化实验证实生化实验证实为大肠杆菌为大肠杆菌猪水肿病菌株猪水肿病菌株SLT-2e鉴定鉴定血清型
11、鉴定血清型鉴定O:K:HETECETEC菌株毒力因子鉴定菌株毒力因子鉴定粘附素专用培养基粘附素专用培养基CAYE培养基培养基粘附素粘附素抗原鉴定抗原鉴定肠毒素肠毒素鉴定鉴定(LT和和ST)大肠杆菌分离鉴定程序大肠杆菌分离鉴定程序资料仅供参考,不当之处,请联系改正。六、防治六、防治1.1.菌苗预防菌苗预防3.3.抗菌药物抗菌药物:耐药菌株产生,药敏试验。耐药菌株产生,药敏试验。2.2.生物学方法生物学方法:微生态制剂。微生态制剂。*粘附素粘附素的含单价或多价的含单价或多价菌毛抗原的灭活全菌苗菌毛抗原的灭活全菌苗或或亚单位苗亚单位苗*抗肠毒素抗肠毒素的类毒素苗的类毒素苗*基因工程基因工程菌苗菌苗*
12、菌苗免疫菌苗免疫怀孕母畜怀孕母畜仔猪获母源抗体仔猪获母源抗体免疫保护免疫保护*大肠杆菌大肠杆菌灭活油佐剂菌苗灭活油佐剂菌苗资料仅供参考,不当之处,请联系改正。第二节第二节 沙门氏菌属沙门氏菌属(Salmonella)Salmonella)一、形态及染色特性一、形态及染色特性*形态形态染色特性与同科其他菌属相似(大肠杆菌)染色特性与同科其他菌属相似(大肠杆菌)革兰氏阴性革兰氏阴性*有有周生鞭毛可运动(少数无)周生鞭毛可运动(少数无)二、培养及生化特性二、培养及生化特性*与埃希与埃希氏菌属相似氏菌属相似*不发酵不发酵乳糖而形成无色菌落乳糖而形成无色菌落三糖铁(三糖铁(TSITSI)培养基培养基:高
13、层高层黄色黄色和斜面呈和斜面呈红色红色麦康凯琼脂平板:麦康凯琼脂平板:无色或淡桔红色菌落无色或淡桔红色菌落(不分解乳糖不分解乳糖)普通肉汤、普通琼脂平板普通肉汤、普通琼脂平板类似类似资料仅供参考,不当之处,请联系改正。三、抗原及变异三、抗原及变异抗原抗原O O、H H、K K和菌毛抗原,和菌毛抗原,血清型抗原血清型抗原1.O抗原抗原:*细菌细菌细胞壁的成分(细胞壁的成分(LPS),耐热多糖抗原,耐热多糖抗原,58种种主要主要O抗原:抗原:一群细菌所独有的抗原一群细菌所独有的抗原,分为,分为42个群(个群(A-F)2(2(A)A)、4(B)4(B)、7 7和和8(8(C)C)、9(D)9(D)、
14、3 3和和10(10(E)E)、11(F)11(F)、1313等等次要次要O抗原抗原几种细菌几种细菌所共有的抗原,如所共有的抗原,如1、5、6、12等等*O O抗原抗原制备:制备:细菌细菌酒精酒精处理破坏鞭毛抗原的菌液处理破坏鞭毛抗原的菌液2.H抗原抗原:*鞭毛抗原,鞭毛抗原,63种种,热,酒精、稀酸破坏其抗原性热,酒精、稀酸破坏其抗原性,能抵抗甲醛,能抵抗甲醛第第1相:相:仅为少数细菌所独有,特异性较高。小写英文字母表示仅为少数细菌所独有,特异性较高。小写英文字母表示第第2相:相:特异性较低,为几种细菌所共有。阿拉伯数字表示(特异性较低,为几种细菌所共有。阿拉伯数字表示(1-7)3.K抗原:
15、抗原:资料仅供参考,不当之处,请联系改正。四、致病性四、致病性五、致病性类型五、致病性类型 致病性类型根据对宿主嗜性不同,可将沙门氏菌分成三群。致病性类型根据对宿主嗜性不同,可将沙门氏菌分成三群。*对人对人、多种动物有致病性,、多种动物有致病性,人畜共患病人畜共患病*侵害侵害幼、青年动物幼、青年动物败血症败血症、胃肠炎、胃肠炎、局部局部炎症、流产炎症、流产*主要主要传染途径是传染途径是消化道消化道第一群:第一群:具有高度具有高度专嗜性专嗜性沙门氏菌,产生特定的疾病。沙门氏菌,产生特定的疾病。例如例如鸡白痢鸡白痢和和鸡伤寒鸡伤寒沙门氏菌沙门氏菌第二群:第二群:是在一定程度适应于特定动物的是在一定
16、程度适应于特定动物的偏嗜性偏嗜性沙门氏菌,沙门氏菌,猪霍乱猪霍乱第三群:第三群:是是泛嗜性泛嗜性沙门氏菌,它们有广泛宿主谱,能引起人和各沙门氏菌,它们有广泛宿主谱,能引起人和各 种动物的沙门氏菌病,公共卫生意义、种动物的沙门氏菌病,公共卫生意义、鼠伤寒鼠伤寒和和肠炎肠炎资料仅供参考,不当之处,请联系改正。毒力因子多种毒力因子多种主要脂多糖主要脂多糖(LPS)LPS)、肠毒素肠毒素、细胞毒素细胞毒素及及毒力基因毒力基因脂多糖脂多糖(LPS)LPS):细胞壁的成分,构成细胞壁的成分,构成O O抗原和内毒素。重要的毒力因子。抗原和内毒素。重要的毒力因子。抗吞噬作用、白细胞减少、发热、粘膜出血等症状有
17、关。抗吞噬作用、白细胞减少、发热、粘膜出血等症状有关。体液抗体与细胞免疫在抗沙门氏菌感染中都很重要。认为体液抗体与细胞免疫在抗沙门氏菌感染中都很重要。认为细胞细胞免疫免疫在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。七、免疫性七、免疫性六、毒力因子六、毒力因子肠毒素:肠毒素:鼠伤寒沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、毒力基因:毒力基因:毒性质粒(毒性质粒(spv)和染色体的毒力基因和染色体的毒力基因(invA基因)基因)资料仅供参考,不当之处,请联系改正。八、微生物学诊断八、微生物学诊断1.1.采病料及分离培养采病料及分离培养未污染病料:未污染病料:污染材料:污染材料:增菌培养基:增菌
18、培养基:2.2.培养特性和生化特性检查培养特性和生化特性检查鉴别培养基鉴别培养基:生化试验:生化试验:3.血清型分血清型分4.其他鉴定和分型技术其他鉴定和分型技术资料仅供参考,不当之处,请联系改正。病料病料肠道杆菌肠道杆菌鉴别培养基鉴别培养基上划线分离上划线分离用肠道杆菌用肠道杆菌增菌培养基增菌培养基增菌增菌三糖铁三糖铁(TSITSI)高层呈黄色斜面呈红色反应者;高层呈黄色斜面呈红色反应者;尿素分解阴者尿素分解阴者菌株鉴定菌株鉴定沙门氏菌属常规沙门氏菌属常规生化项目鉴定生化项目鉴定沙门氏沙门氏杆菌属的分离鉴定程序杆菌属的分离鉴定程序沙门氏菌沙门氏菌A-FA-F群多价群多价O O血清玻板凝集血清
19、玻板凝集报告初步鉴定结果,必要时进一步鉴定报告初步鉴定结果,必要时进一步鉴定系统系统生化试验生化试验血清型鉴定血清型鉴定报告最后鉴定结果报告最后鉴定结果挑取疑似菌落挑取疑似菌落5-105-10个分别接种于个分别接种于三糖铁三糖铁(TSITSI)和和尿素琼脂尿素琼脂普通琼普通琼脂斜面脂斜面纯培养纯培养物物未污染者未污染者污染者污染者资料仅供参考,不当之处,请联系改正。预防接种预防接种:目前的疫苗多限于预防各种家畜特有的沙门氏菌病,:目前的疫苗多限于预防各种家畜特有的沙门氏菌病,例如猪副伤寒、马流产以及牛、羊的都柏林等沙门氏菌的灭活菌例如猪副伤寒、马流产以及牛、羊的都柏林等沙门氏菌的灭活菌苗。苗。
20、九、防制九、防制抗生素治疗抗生素治疗:常用抗生素如庆大霉素、卡那霉素、氯霉素、:常用抗生素如庆大霉素、卡那霉素、氯霉素、呋喃唑酮等。但本菌属耐药菌株不断在增加,用药前应做呋喃唑酮等。但本菌属耐药菌株不断在增加,用药前应做药敏试验后选择用药。药敏试验后选择用药。资料仅供参考,不当之处,请联系改正。第九章第九章 肠杆菌科复习思考题肠杆菌科复习思考题1.1.简述大肠杆菌的形态染色特征、培养及生化特性。简述大肠杆菌的形态染色特征、培养及生化特性。2.致病性大肠杆菌的分类及毒力因子相关性如何?致病性大肠杆菌的分类及毒力因子相关性如何?3.叙述大肠杆菌的微生物学诊断程序。叙述大肠杆菌的微生物学诊断程序。4.简述沙门氏菌的形态染色特征、培养及生化特性。简述沙门氏菌的形态染色特征、培养及生化特性。3.3.叙述叙述沙门氏菌的沙门氏菌的
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