1、第二节第二节 肠道细菌肠道细菌与医学有关的肠道杆菌与医学有关的肠道杆菌 菌属菌属 代表菌代表菌埃希菌属埃希菌属 大肠埃希菌大肠埃希菌志贺菌属志贺菌属 痢疾志贺菌痢疾志贺菌沙门菌属沙门菌属 伤寒沙门菌伤寒沙门菌克雷伯菌属克雷伯菌属 肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌变形杆菌属变形杆菌属 普通变形杆菌普通变形杆菌摩根菌属摩根菌属 摩氏摩根菌摩氏摩根菌枸橼酸菌属枸橼酸菌属 弗劳地枸橼酸杆菌弗劳地枸橼酸杆菌肠杆菌属肠杆菌属 产气杆菌产气杆菌沙雷菌属沙雷菌属 粘质沙雷菌粘质沙雷菌包括包括埃希菌属埃希菌属志贺菌属志贺菌属沙门菌属沙门菌属变形杆菌属变形杆菌属克雷伯菌属克雷伯菌属摩根菌属摩根菌属枸橼酸菌属枸橼酸菌属肠杆
2、菌属肠杆菌属沙雷菌属等沙雷菌属等致病菌致病菌肠道正常菌群肠道正常菌群条件致病菌条件致病菌医院感染医院感染肠杆菌科肠杆菌科 肠道杆菌共同特点肠道杆菌共同特点n1形态结构形态结构 n小杆菌,钝圆,小杆菌,钝圆,G-n无芽孢,多数有鞭毛及菌毛无芽孢,多数有鞭毛及菌毛n2培养特性培养特性 n需氧或兼性厌氧需氧或兼性厌氧n营养要求不高,普通培养基营养要求不高,普通培养基n菌落相似,形成灰白色,中等大小,菌落相似,形成灰白色,中等大小,S型菌落。型菌落。乳糖发酵试验乳糖发酵试验初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌致病菌致病菌非致病菌非致病菌不发酵乳糖不发酵乳糖 发酵乳糖发酵乳糖
3、EMB(伊红伊红美兰培养基),乳糖、伊红、美兰美兰培养基),乳糖、伊红、美兰选择作用选择作用(弱选)(弱选)大肠埃希菌大肠埃希菌(非致病菌)(非致病菌)乳糖乳糖发酵发酵产酸产酸伊红伊红结合结合美兰美兰形成紫黑色金属光泽形成紫黑色金属光泽化合物化合物有色的乳糖发酵菌落有色的乳糖发酵菌落伤寒沙门菌等伤寒沙门菌等(致病菌)(致病菌)乳糖乳糖不发酵不发酵伊红美兰不能结合伊红美兰不能结合无色的乳糖不发酵菌落无色的乳糖不发酵菌落SS培养基(沙门志贺培养基)培养基(沙门志贺培养基)乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂选择抑制作用选择抑制作用(强选)(强选)大肠埃希菌大
4、肠埃希菌 产酸产酸 桃红色乳糖发酵菌落桃红色乳糖发酵菌落伤寒沙门菌伤寒沙门菌 无色乳糖不发酵菌落无色乳糖不发酵菌落胆盐、煌绿:抑制大肠埃希菌及胆盐、煌绿:抑制大肠埃希菌及G+菌,提高肠道致病菌检出率菌,提高肠道致病菌检出率乳糖乳糖发酵发酵中性红中性红呈红色呈红色乳糖乳糖不发酵不发酵n3生化反应生化反应活跃,常用于鉴别肠道杆菌活跃,常用于鉴别肠道杆菌n4抵抗力不强,抵抗力不强,60 30min 即可灭活即可灭活n5抗原结构复杂抗原结构复杂n菌体(菌体(O)抗原抗原n鞭毛(鞭毛(H)抗原抗原n表面(表面(K、Vi)抗原抗原n6易出现各种变异易出现各种变异抗原构造复杂抗原构造复杂 鞭毛抗原(鞭毛抗原
5、(H)菌体抗原(菌体抗原(O)K或或Vi抗原抗原一、沙门菌属一、沙门菌属 n一、生物学性状一、生物学性状n二、致病性二、致病性n三、免疫性三、免疫性n四、微生物学检查方法四、微生物学检查方法n五、防治方法五、防治方法一、生物学性状一、生物学性状n1 形态染色形态染色n符合肠杆菌特点,多为周毛菌,有菌毛符合肠杆菌特点,多为周毛菌,有菌毛伤寒杆菌的周身鞭毛伤寒杆菌的周身鞭毛n2 培养特性培养特性n营养要求不高营养要求不高 普通培养基普通培养基 中等大小,圆形,无色半透明菌落中等大小,圆形,无色半透明菌落麦康凯培养基上的伤寒杆菌菌落麦康凯培养基上的伤寒杆菌菌落EMB培养基,上为培养基,上为E.col
6、i,下为伤寒杆菌下为伤寒杆菌沙门氏菌在 37 培养 18-24 小时后,无色透明菌落有黑色中心;志贺氏菌呈无色透明菌落。n3 生化反应生化反应n乳糖(乳糖(-)n动力(动力(+)n4 抗原结构抗原结构nO抗原抗原nH抗原抗原nVi抗原(毒力抗原)抗原(毒力抗原)n4 抵抗力抵抗力1、耐低温、耐低温2、水中存活、水中存活2-3周、粪便存活周、粪便存活1-2月月3、理化因素敏感(、理化因素敏感(60 30min)4、消毒剂敏感、消毒剂敏感5、氯霉素等敏感、氯霉素等敏感二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性n(一)致病物质(一)致病物质n1 侵袭力侵袭力n菌毛菌毛吸附吸附nO抗原,抗原,Vi抗原抗原抗
7、吞噬抗吞噬n2 内毒素内毒素n3 肠毒素肠毒素鼠伤寒沙门菌产生鼠伤寒沙门菌产生伤寒杆菌感染示意图伤寒杆菌感染示意图n(二)所致疾病(二)所致疾病菌毛菌毛穿入淋巴液穿入淋巴液胸导管胸导管第二次菌血症第二次菌血症迟发型变态反应迟发型变态反应肠壁坏死、溃疡肠壁坏死、溃疡高热、肝脾肿大、玫瑰疹、白细胞高热、肝脾肿大、玫瑰疹、白细胞等全身中毒症等全身中毒症状状肝肝 脾脾 肾肾 淋巴结淋巴结 胆囊胆囊尿排菌尿排菌 粪便排菌粪便排菌发病期发病期(1-4W)潜伏期潜伏期2Wn1肠热症肠热症伤寒沙门菌等经口伤寒沙门菌等经口吸附小肠黏膜细胞上吸附小肠黏膜细胞上在肠壁、肠系膜淋巴组织中繁殖在肠壁、肠系膜淋巴组织中繁
8、殖(致敏)(致敏)血流(第一次菌血症)血流(第一次菌血症)肠出血、肠穿孔肠出血、肠穿孔伤寒表现伤寒表现n持续高热持续高热n伤寒病容伤寒病容n玫瑰疹玫瑰疹n肝脾肿大肝脾肿大n相对缓脉相对缓脉n肠热症肠热症n临床过程临床过程n潜伏期潜伏期2Wn发病初期:发病初期:第第1W(第一次菌血症)、高热、肝脾肿大、皮疹、第一次菌血症)、高热、肝脾肿大、皮疹、WBS等全身中毒症状等全身中毒症状血液(血液(80%)、骨髓()、骨髓(90%(+)有大量细菌)有大量细菌n发病极期:发病极期:第第2-4W,全身症状持续加重,全身症状持续加重,血、骨髓中仍有菌,但粪便(血、骨髓中仍有菌,但粪便(60%)、尿()、尿(2
9、0%)、皮疹液中可查到细菌)、皮疹液中可查到细菌由于由于型变态反应型变态反应并发症发生,并发症发生,血液抗体达到阳性标准血液抗体达到阳性标准肥达反应肥达反应n恢复期:恢复期:第第3w,体温下降,症状消失,体温下降,症状消失恢复期带菌恢复期带菌1年(粪便仍阳性),血液抗体仍高年(粪便仍阳性),血液抗体仍高n2胃肠炎(食物中毒)胃肠炎(食物中毒)n3败血症败血症n4带菌者带菌者三三 免疫性免疫性 肠热症,病后免疫牢固,其它可重复感染肠热症,病后免疫牢固,其它可重复感染伤寒玛丽伤寒玛丽四、微生物学检查方法四、微生物学检查方法n1 分离培养与鉴定分离培养与鉴定n标本采取标本采取 肠热症:一血、二便、三
10、检尿、要检骨髓全知道肠热症:一血、二便、三检尿、要检骨髓全知道 食物中毒:粪便、呕吐物、可疑食物食物中毒:粪便、呕吐物、可疑食物败血症:血败血症:血带菌者:粪便带菌者:粪便n分离鉴定:分离鉴定:增菌(血、骨髓)增菌(血、骨髓)EMB、SS生化反应生化反应血清鉴定血清鉴定2 血清学诊断血清学诊断肥达反应(肥达反应(Widal)n原理原理 凝集试验凝集试验 TO、TH、PA、PBH H与与O O抗体的性质及其消长意义抗体的性质及其消长意义抗体类抗体类型型体内出现体内出现情况情况体内出现情况体内出现情况O抗体抗体IgM出现较早,出现较早,维持时间短维持时间短高高高高低低H抗体抗体IgG出现较晚,维持
11、时间出现较晚,维持时间长长高高低低高高患肠热症可能性患肠热症可能性大大感染早期、感染早期、其他沙门菌引起其他沙门菌引起的交叉反应的交叉反应预防接种;预防接种;非特异性回忆反非特异性回忆反应应判定结果时,应着重考虑:判定结果时,应着重考虑:n正常凝集价方法:试管凝集法(定量)正常凝集价方法:试管凝集法(定量)TO1:80,TH1:160,PA、PB均均1:80才有意义才有意义动态观察:双份血清抗体四倍升高有诊断意义动态观察:双份血清抗体四倍升高有诊断意义n动态观察动态观察nO与与H抗体的诊断意义抗体的诊断意义五、防治方法五、防治方法n加强水源和食品卫生管理加强水源和食品卫生管理n疫苗疫苗n治疗治
12、疗n以氯霉素效果较好以氯霉素效果较好二、志贺菌(痢疾杆菌)二、志贺菌(痢疾杆菌)生物学性状生物学性状n形态染色形态染色n符合肠杆菌特征,有菌毛,无鞭毛符合肠杆菌特征,有菌毛,无鞭毛n培养特性培养特性n肠道鉴别培养基上的无色透明、乳糖不发酵菌落肠道鉴别培养基上的无色透明、乳糖不发酵菌落n生化反应生化反应n葡萄糖(葡萄糖(+)、乳糖()、乳糖(-)、)、H2S-、尿素(尿素(-)、动力()、动力(-)生物学性状生物学性状n抗原分类抗原分类O抗原抗原nA群群痢疾志贺菌痢疾志贺菌nB群群福氏志贺菌福氏志贺菌nC群群鲍氏志贺菌鲍氏志贺菌nD群群宋内志贺菌宋内志贺菌n抵抗力抵抗力 比其它肠杆菌弱,尤其对酸
13、敏感比其它肠杆菌弱,尤其对酸敏感致病性与免疫性致病性与免疫性n致病物质致病物质n侵袭力侵袭力 菌毛:黏附菌毛:黏附n内毒素内毒素强烈内毒素,作用于局部并可吸附入血引起全身症状强烈内毒素,作用于局部并可吸附入血引起全身症状n外毒素外毒素志贺毒素(志贺毒素(ST)n(1)肠毒素:水样泻)肠毒素:水样泻n(2)细胞毒性)细胞毒性n(3)神经毒性)神经毒性细菌(菌毛)吸附肠黏膜上皮细胞细菌(菌毛)吸附肠黏膜上皮细胞穿入细胞并扩散周围及深入黏膜下层穿入细胞并扩散周围及深入黏膜下层释放内毒素、外毒素释放内毒素、外毒素肠局部肠局部黏膜炎症黏膜炎症(变性、坏死、脱落)(变性、坏死、脱落)出血、坏死、溃疡出血、
14、坏死、溃疡脓血便脓血便/黏液血便黏液血便刺激肠壁植物神经刺激肠壁植物神经肠蠕动肠蠕动肠肌痉挛肠肌痉挛腺体分泌腺体分泌水分吸收水分吸收腹痛、腹泻腹痛、腹泻刺激直肠肛门括约刺激直肠肛门括约肌肌里急后重里急后重便数增加便数增加吸收入血吸收入血发热、白细胞发热、白细胞高热、休克高热、休克中毒性脑病中毒性脑病DIC死亡死亡毒毒血血症症中毒性菌痢中毒性菌痢n所致疾病所致疾病细菌性痢疾细菌性痢疾n传染源:病人、带菌者传染源:病人、带菌者n传播途径:经口传播途径:经口n致病机制致病机制n临床类型临床类型n急性菌痢急性菌痢n中毒性菌痢中毒性菌痢n慢性菌痢慢性菌痢n免疫力免疫力 不牢固,易再感染不牢固,易再感染微
15、生物学检查与防治微生物学检查与防治n微生物学检查微生物学检查n分离鉴定分离鉴定n毒力实验毒力实验n快速诊断快速诊断n防治防治 更有效的疫苗还在研制中,此菌极易出现耐药性,更有效的疫苗还在研制中,此菌极易出现耐药性,依菌株。依菌株。三、三、大肠杆菌(埃希菌属)大肠杆菌(埃希菌属)生物学性状生物学性状n形态染色形态染色 符合肠杆菌特点,周毛菌,有菌毛符合肠杆菌特点,周毛菌,有菌毛n培养特性培养特性 符合肠杆菌特点符合肠杆菌特点EMB紫黑色有金属光泽紫黑色有金属光泽 乳糖发酵菌落乳糖发酵菌落S-S桃红色桃红色n生化反应生化反应 IMViC(+-)n抗原抗原O 抗原抗原H 抗原抗原K 抗原抗原EMB平
16、板上的平板上的E.coli致病性致病性n致病物质致病物质黏附素黏附素具有高度特异性具有高度特异性 吸附、定植、致病吸附、定植、致病外毒素(由外毒素(由ETEC产生的肠毒素)产生的肠毒素)n(1)不耐热肠毒素()不耐热肠毒素(LT),),分分LT-I和和LT-两型两型 蛋白质对热不稳定,与霍乱肠毒素相似蛋白质对热不稳定,与霍乱肠毒素相似 A亚单位亚单位毒素活性成分毒素活性成分机制机制 B亚单位亚单位与肠上皮细胞受体(与肠上皮细胞受体(GM1神经节苷脂)神经节苷脂)结合结合B单位与受体结合单位与受体结合导致导致A进入细胞内进入细胞内激活腺苷酸环化酶激活腺苷酸环化酶ATP CAMP小肠液过度分泌小肠
17、液过度分泌肠腔积液、腹泻肠腔积液、腹泻n(2)耐热肠毒素()耐热肠毒素(ST),),分分STa、STb两型两型 为低分子多肽,对热稳定为低分子多肽,对热稳定 机制为激活细胞鸟苷酸环化酶,使机制为激活细胞鸟苷酸环化酶,使cGMP导致腹泻导致腹泻 LT和和ST同时存在,致病性要强同时存在,致病性要强E.coli的不耐热肠毒素的不耐热肠毒素所致疾病:所致疾病:肠道外感染(内源性感染)肠道外感染(内源性感染)化脓性感染化脓性感染定位转移定位转移腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、败血症、新生儿脑膜炎等败血症、新生儿脑膜炎等 泌尿道感染泌尿道感染病
18、原菌来自病人肠道(上行性)病原菌来自病人肠道(上行性)占泌尿道感染首位、女性多见(尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等)占泌尿道感染首位、女性多见(尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等)肠道感染肠道感染胃肠炎(腹泻),(外源性感染)胃肠炎(腹泻),(外源性感染)肠产毒性大肠埃希菌(肠产毒性大肠埃希菌(ETEC):):婴幼儿、旅游者腹泻,与霍乱功能相似婴幼儿、旅游者腹泻,与霍乱功能相似 肠侵袭性大肠埃希菌(肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC):):成人腹泻,与菌痢相似成人腹泻,与菌痢相似 肠致病性大肠埃希菌(肠致病性大肠埃希菌(EPEC):):婴儿腹泻(水样腹泻)婴儿腹泻(水样腹泻)肠出血性大肠埃希菌(肠出血性大肠埃希菌
19、(EHEC,O157):):出血性结肠炎,出血性结肠炎,溶血性尿毒综合征(溶血性尿毒综合征(HUS)肠集聚性大肠埃希菌肠集聚性大肠埃希菌(EAEC):):婴儿腹泻(持续性)婴儿腹泻(持续性)微生物学检查与防治微生物学检查与防治n肠道外感染肠道外感染标本标本涂片、染色涂片、染色分离培养分离培养鉴定鉴定尿路感染时每尿路感染时每ml尿含菌尿含菌10万,有诊断价值万,有诊断价值n肠道内感染肠道内感染分离培养分离培养+生化反应生化反应+血清分型血清分型+毒素测定毒素测定+核酸检测等核酸检测等n卫生细菌学检查卫生细菌学检查 卫生学标准:每卫生学标准:每ml饮水中细菌总数饮水中细菌总数100个,每个,每1000ml水中大肠杆菌水中大肠杆菌3个,每个,每100 ml 瓶装瓶装汽水、果汁中,大肠杆菌汽水、果汁中,大肠杆菌5个个
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