第13章-莨菪烷类抗胆碱药物的分析课件.ppt

1、第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析第一节第一节 莨菪烷类药物的结构与性质莨菪烷类药物的结构与性质结构莨菪烷类抗胆碱药物莨菪烷衍生的氨基醇与各种不同有机酸缩合酯+生物碱一一.典型药物典型药物莨菪烷NH3C含氮的生物碱(氨基)12345678N莨菪烷(Tropane)一一.典型药物典型药物莨菪醇含氮的醇(莨菪醇)NH3COH12345678NOHH莨菪醇(Tropine)一一.典型药物典型药物H2SO4NH3CH22H2OOHOOH性质区别硫酸莨菪碱H2SO4OOHOHNH3CH2H2O硫酸阿托品熔点、溶解度、旋光度、分子量一一.典型药物典型药物氢溴酸后马托品HBrNH3CHOOOH一一.典型药物典

2、型药物氢溴酸山莨菪碱HBrNH3CHOOHOH一一.典型药物典型药物氢溴酸东莨菪碱3H2OHBrNH3CHOOHOHO一一.典型药物典型药物甲溴酸东莨菪碱BrNH3CHOOHOHOH3C一一.典型药物典型药物丁溴酸东莨菪碱BrNH3CHOOHOHOH3C1.水解性（酯水解生成醇和酸）OHOOHNCH3OHHNCH3+HOOCOH阿托品 莨菪醇 莨菪酸2.碱性：阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子，较强的碱性，易于酸成盐，如阿托品pKb1为4.353.旋光性：可用于鉴别阿托品和东莨菪碱一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)HOOCOH+3HNO3HOOCOHNO2O2NNO2

3、+3H2OKOHC2H5OHHOOCOHNO2O2NNOHOKOHHOOCOHNO2O2NNOKO取供试品约10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇23滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。莨菪酸硝基化脱羧化共轭结构深紫二、氧化反应(与硫酸-重铬酸钾的反应）HOOCOHH2OH2SO4HOOCCH22O2CHO+2CO2H2O药物水药物水解后生成莨菪酸，可与硫酸-重铬酸钾在加热的条件下，发生氧化反应，生成苯甲醛而逸出苦杏仁的臭味。反应式如下：三、与生物碱显色剂或沉淀剂的反应生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀。四、光谱鉴别法紫外光谱法一

4、般通过比较药物的 或吸收光谱的一致性来进行鉴别以及吸光系数。minmax、四、光谱鉴别法红外光谱法CHP收载的原料药一般都采用红外光谱法进行鉴别五、色谱鉴别法色谱法一般用于已知生物碱的鉴别，主要有TLC、HPLC、GC、PC等六、硫酸盐和溴化物的反应药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在通过加沉淀试剂如硝酸银等生成溴化银沉淀或加入氯试剂生成溴溶于三氯甲烷而显色一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺洋金花粗粉乙醇/渗漉渗漉液减压蒸馏浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3,CHCl3/提取总生物碱Na2CO3,CHCl3/分离东莨菪碱HBr/成盐氢溴酸东莨菪碱（粗品）75%C2H5OH/精制成品根据其制备工艺

5、，本品可通过酸度、其它生物碱、和易氧化物质检查进行控制一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查1.酸度如氢溴酸东莨菪碱为弱酸弱碱盐、通过其5%的水溶液pH为4.05.5可控制酸性杂质一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查2.易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色NH3CHOOCH2(杂质)NH3CHOOOCH2(杂质)一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查3.其它生物碱本品水溶液加入氨水试液不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，则易产生混浊。二、硫酸阿托品硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光性对莨菪碱杂质进行检查CHP用HPLC法检查其中有

6、关物质，通过峰面积的比值及保留时间来控制杂质限度莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂量较少，因此测定方法要专属、灵敏酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色谱法有机相(BH+In-)水相(BH+In-)+HIn H+In-+B H+BH+UV 酸性染料比色法在一定的pH条件下，某些生物碱药物可与某些酸性染料结合而呈色，进而可用分光光度法进行测量酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行含量测定应用示例氢溴酸东莨菪碱片的含

7、量测定 精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液4ml，振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫外-可见分光光度法，在420nm波长处分别测定吸光度，计算，即得。影响因素1.水性最佳pH值：使得BH+和In-最多 pH过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低影响离子对的形成；pH过高，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成，因此须有一个最佳pH值存在，使离子对生成最有利。其选择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有机相的分配系数而定影响因素2.2.酸性染料及其浓度：酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量。定量结

8、合，产物溶解性好；可稍过量。一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以；一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以；但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定结果。往往影响测定结果。影响因素3.有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想；一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。影响因素4.水分的影响：影响结果，脱水剂或滤纸除去水分5.酸性染料里面的有色杂质 影响结果，先用萃取溶剂萃取除去二.非水溶液滴定法 非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴

9、定测定法。主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、硫酸盐、磷酸盐以及有机酸碱金属盐类的含量。硫酸是二元酸，在水溶液中可以发生二级解离，生成SO42-。但是冰醋酸非水介质中，只能发生一级解离，生成HSO4-,即只提供一个H+。所以硫酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，可用高氯酸滴定液直接滴定。(BH+)2 SO42-+HClO4 (BH+)ClO4 +(BH+)HSO42-硫酸阿托品与高氯酸反应的化学计量摩尔比为1:1.三.高效液相色谱法 莨菪烷类药物莨菪烷类药物HPLCHPLC分析测定时，常采用烷基磺酸盐作为分析测定时，常采用烷基磺酸盐作为离子对试剂，流动相一般呈酸性，以利于碱性药物的质子离子对

10、试剂，流动相一般呈酸性，以利于碱性药物的质子化。化。ChP2010ChP2010中采用中采用HPLCHPLC测定氢溴酸东莨菪碱测定氢溴酸东莨菪碱及其片剂和注射液的含量。及其片剂和注射液的含量。测定测定丁溴酸东莨菪碱的有关物质丁溴酸东莨菪碱的有关物质及及其胶囊和注射液其胶囊和注射液含量时，均采用含量时，均采用十二烷基硫酸钠十二烷基硫酸钠作为离子对。作为离子对。BP2009BP2009中中HPLCHPLC测定测定硫酸阿托品制剂硫酸阿托品制剂（滴眼液、片剂和注射剂）含量（滴眼液、片剂和注射剂）含量时，均采用时，均采用磺基丁二酸钠二辛脂磺基丁二酸钠二辛脂作为离子对试剂（作为离子对试剂（USPUSP多库酯钠）多库酯钠）ChP2010ChP2010中硫酸阿托品有关物质的检查，采用中硫酸阿托品有关物质的检查，采用庚烷磺酸钠庚烷磺酸钠作为离子对作为离子对试剂。试剂。第五节 体内莨菪烷类药物分析检测临床常规使用剂量小体内样品机制复杂药物浓度低采用专属灵敏方法进行临床监测和法定鉴别研究采用SPE处理，HPLC-MS法