1、自身免疫病与自身抗体检测及应用目录自身免疫病概述自身免疫病概述自身抗体检测自身抗体检测自身抗体检测临床意义自身抗体检测临床意义概念:自身免疫自身抗体自身免疫病自身免疫病分类(按病变组织涉及的范围)器官特异性:自身免疫性溶贫,桥本甲状腺炎非器官特异性:病变累及多器官与组织,如RA,SLE,SS等。(一)概述(一)概述三个基本特征:1.高滴度的自身抗体和(或)致敏淋巴细胞2.病理特征为免疫炎性3.动物中可复制相似疾病模型常伴以下特点病因不明,多为自发性或特发性病程较长,发作与缓解交替出现有遗传倾向女性、老年多发可查到抗核抗体易伴发免疫缺陷病或恶性肿瘤(二)自身免疫病共同特征(二)自身免疫病共同特征
2、(三)发病机制(三)发病机制 隐蔽抗原释放 自身抗原出现 自身抗原成分改变 共同抗原的诱导 淋巴细胞旁路活化免疫调节异常 多克隆刺激剂旁路活化 辅助刺激因子表达异常 遗传因素 多表现在HLA-B、DR抗原上 常见自身免疫病SLE:SLE:累及多器官多系统累及多器官多系统炎症性结缔组织病,多炎症性结缔组织病,多发于青年女性,临床症发于青年女性,临床症状复杂,可出现发热,状复杂,可出现发热,皮疹,蝶形红斑,盘状皮疹,蝶形红斑,盘状红斑,光敏现象,口腔红斑,光敏现象,口腔溃疡,关节痛,肾损伤,溃疡,关节痛,肾损伤,心血管病变,胃肠症状,心血管病变,胃肠症状,贫血等。抗贫血等。抗ds-DNA,ds-D
3、NA,抗抗SmSm抗体是特征标志。抗体是特征标志。常见自身免疫病常见自身免疫病RARA:一种以关节病变为:一种以关节病变为主的全身性结缔组织炎主的全身性结缔组织炎症,多发于青壮年女性,症,多发于青壮年女性,特征:关节及周围组织特征:关节及周围组织呈对称性多发性损害,呈对称性多发性损害,部分疾病可有心肺及血部分疾病可有心肺及血管受累,免疫学检查可管受累,免疫学检查可见血清及滑膜液中有见血清及滑膜液中有RFRF和抗和抗CCPCCP升高。升高。(四)常见自身抗体的检测及应用(四)常见自身抗体的检测及应用类风湿因子(RF)一种抗人或动物IgG分子Fc段抗原决定簇的抗体,是以变性IgG为靶抗原的自身抗体
4、,可与人或动物的变性IgG结合。RF分为IgM,IgG,IgA,IgE,IgM为主要类型。可用散射比浊法或ELISA等方法检测。临床应用RF主要见于RA,但不是RA特异抗体,部分正常人也可出现,但滴度较低。RF阴性不能排除RA。IgM:伴严重关节功能障碍,预后不良IgG:与患者滑膜炎、血管炎和关节症状密切相关IgA:RA临床活动指标,与骨质破坏和关节炎症状严重程度有关。抗核抗体(抗核抗体(ANAANA)lANA是以自身真核细胞成分为靶抗原的一组自身抗体的总称,泛指各种核成分的抗体。lANA在不同的疾病中呈现出不同的组合,不同疾病有自己的抗核抗体谱。l按理化特性和抗原部位分类:l抗DNA抗体l抗
5、组蛋白抗体l抗非组蛋白抗体l抗核仁抗体检测方法检测方法1.ANA检测常用间接免疫荧光法,ELISA等方法,常用间接免疫荧光法作总ANA的筛选试验。用Hep2细胞和猴肝细胞做基质,Hep2细胞特点:人源性、细胞核大、分裂期细胞多、可大批培养。2.常见ANA荧光图形及意义(1)均质型:多由抗DNP抗体引起,也可由核小体抗体和抗双链DNA抗体引起,主要见于SLE,药物性狼疮。(2)斑点型:由抗ENA抗体引起,主要见于SLE,MCTD,PSS,SS等,高滴度斑点型常见于MCTD。(3)周边型:主要由抗双链DNA抗体引起,见于SLE,特别是活动期。(4)核仁型:主要见于硬皮病(5)着丝点型:主要见于局限
6、性硬皮病均质型抗双链抗双链DNADNA抗体检测抗体检测最特异和敏感的方法是绿蝇短膜虫做基质,动基体含有大量纯dsDNA,鞭毛一端动基体内显示清晰荧光。抗双链DNA抗体是SLE特异抗体,特异性大于95%,是SLE活动性重要指标(狼疮肾炎、血管炎、蝶形红斑与该抗体有关)抗抗ENAENA抗体谱抗体谱ENA:可提取性核抗原的总称,是细胞内许多小分子RNA和多肽组成的非组蛋白的酸性核蛋白颗粒。主要包括Sm,RNP,SSA,SSB,Jo-1,Scl-70 等抗原,对自身免疫病的诊断和鉴别有重要意义,常用免疫印迹法检测。抗Sm抗体SLE抗RNP抗体MCTD抗SSA/SSBSS抗Jo-1多发性肌炎抗Scl-70PSS小结小结1.意义重大 自身免疫病给患者带来巨大痛苦和负担,近年来发病率呈上升趋势,并且难以根治,因此,早期诊断和早期治疗对于控制和缓解患者病情具有重要意义,自身抗体的检测为临床诊断自身免疫病提供有力支持,甚至有确诊作用。2.一般原则 有的项目敏感性高,特异性低,有筛选意义,有的敏感性低,特异性强,可以先做ANA筛查,再做其他检测。3.质量控制 每次试验同时设置阴、阳对照,以监测结果的准确性。谢谢!