宫颈标本处理的病理学技能-课件.pptx

1、宫颈标本处理的病理学技能n核对病人的姓名,科室,住院号等。n核对标本性质,取出的部位,标本数目,临床诊断n是否做标记:如带线、切缘、锥顶等n活检组织及时固定n固定液总量 标本5 5倍以上n取材时应描述活检组织大小、颜色、质地n固定好的组织应放滤纸包好放入包埋盒n较小较碎的组织应用纱布或滤纸包裹,滴入伊红放入包埋盒内n直径小于0、1cm的标本,可描述“针尖大小”,直径大于0、1cm的标本应记录实际大小,切忌用“米粒大小”或“绿豆大小”等字样描述。n厚度大于0、5cm 的标本,切开描述切面,切开包埋。n大体可辨认的息肉样组织,则描述之:如-色息肉状-质地组织-块,大小-n组织学检查的组织厚度不得超

2、过3mm 同时长短不能超过使用的包埋盒的大小。n大多数实体标本应该切成 边长10-15mm 厚2-3mmn1 1、_ _色_ _(质地)组织1 1 块,大小为*cmcmn2 2、_ _色_ _(质地)组织2 2 块,大小分别为*cm cm 及*cmcmn3 3、_ _色_ _(质地)组织3 3 块(或3 3 块以上),),最大者大小为*cm,cm,最小者大小为*cmcm用品:装标本用的冻存管/标本瓶,内置固定液。0 0、5cm5cm的微 孔滤膜小块。牙签、镊子、记号笔和登记本。方法:用戴有一次性乳胶手套的左手食指紧贴活检钳,右手 持牙签,将活检钳内钳取的标本,拨到食指上摊平,用已备好的滤膜贴附

3、上面,拇指轻压,迅速置于已装好固定液的标本瓶中,固定液的总量必须大于标本块的5 5倍以上。目的:便于包埋过程中的定位,防止埋面不当造成组织的平 切。描述n锥形体的大小(直径和深度)和形状,应该测量基底宽度及高度,描述颜色、外观、体积(应测量忌用比拟)、质地(软,中等、硬等)n上皮:颜色,光滑,糜烂,修复,撕裂,肿块(大小,形状,部位),),囊肿(内容物,大小)n往常活检的部位取材新鲜状态下用缝线标记12 点位置 将一把锋利的刀尖插入宫颈管在12 点位置纵向剪开 标本(如没有定位,可在任一部位剪开)粘膜面朝上钉于软木板上固定过夜取材:用墨汁小心涂抹手术切缘 间隔23mm 做顺时针方向纵性切面,切

4、取的每一面均应包含鳞柱交界处上皮,必要时可修剪掉部分间质。每一个蜡块在3 3个不同的平面上切片,以观察切缘情况。子宫切除标本(经腹)测量标本大小并称重辨认子宫的前后壁 腹膜反折 附件 剖开方式 从前壁宫颈外口处中央向上纵行剪开宫壁至子宫底,然后呈“一”字型切向双侧宫角、用锋利的刀从宫颈两侧一直打向双侧宫角将子宫分为前后两部分、子宫切除标本(经腹)如有体积大的肿瘤,平行切开钉于软木板上固定过夜n子宫切除术的类型,包含的器官n浆膜面的颜色,纤维性粘连,肿瘤n宫颈外口直径,鳞柱状交界处粘膜性状n宫颈管长度,粘膜性状,切面囊肿n宫体内膜:外观、厚度、出血、息肉、囊肿、肿瘤n子宫肌壁:厚度、出血点或斑、

5、肿瘤(部位、数量、大小、出血、坏死、钙化)n输卵管:根部其形状、粗度,作横切面n卵巢:大小,质地、颜色,切面n从宫颈外口以上大约2 2、5cm 5cm 处离断宫颈,以锥切标本方式取材并分别标记部位。n宫颈深部浸润性癌:至少取3 3 块,其中至少有1 1 块为肿瘤浸润最深处,1 1 块包含宫颈全层n应取阴道壁切缘和左,右侧宫旁组织如有肿瘤则按肿瘤取材原则取材n如没有明显的肿瘤:接近宫底处至少取2 块,尽估计包括宫体全层,任何大体异常处另取n如有明显的肿瘤:肿瘤至少取3 块,其中至少有1 块为肿瘤浸润最深处1 块包含宫体全层,非肿瘤性子宫内膜取2 块,宫体和宫颈交界处取1 块3 个以下每个肌瘤至少

6、取1 块,体积大者可多至3 块,3 个以上认真观察每个肌瘤的不同切面,切面性状相同或相似者共取34 块即可,任何大体上的异常的区域均分布取材。有出血或灰红色斑点状区域多取 _ _侧卵巢切除标本一件,大小为*cm,cm,表面_ _色,光滑/凹凸不平,有/无乳头状突起。垂直于卵巢长轴做平行切面,见切面呈_ _色,可见黄、白体结构。局部见囊腔,大小为*cm,cm,单/多房,内壁光滑/有突起,囊壁厚*cm,cm,内容物淡黄色清亮液体。n单纯或预防性切除标本取12 块n囊肿剔除标本至少取3 块,尽量囊壁最厚处,薄壁囊肿最好打卷取材,良性畸胎瘤应取到头节n复杂的囊性标本尽量多取乳头处及囊壁较厚处n实性肿瘤

7、部分依照实性肿瘤取材n切开前固定标本,假如附着在子宫上,则应在原位固定n测量输卵管长度和最大直径n 假如输卵管大小相对正常,则每隔5mm 连续切开并检查,注意不要完全切断n假如输卵管明显增大,则将输卵管完全纵向剖开,如需要再做平行切面n输卵管长度和最大直径n浆膜:纤维素,出血,纤维性粘连至卵巢或其他器官n壁:厚度异常？破裂？如有,则描述位置n伞端的外观:开放？闭合？内翻？n管腔:明显？扩张？内容物;假如异常增多测量直径n粘膜:萎缩？增厚？n分别在峡、壶腹及伞部各取1 块n标本为全切/阴式切除的全子宫,部分阴道壁及左/右/双侧附件。n阴道壁长*cm,周径为*cm。子宫大小为*cm,浆膜面_色,光

8、滑/不光滑/粗糙/凸凹不平见多个隆起。n子宫颈外口呈_色,粘膜光滑/粗糙/糜烂/中重度糜烂/见一内生性/外生性肿物(肿物大小为*cm,切面呈_色,侵及肌层/外膜层,向上累及/未累及子宫内膜)。n宫颈管长*cm,粘膜呈_色,可见一/多个息肉/小囊肿,大小为*cm,囊内容_,子宫内膜呈_色,光滑/粗糙/见一/多个息肉状突起/见一隆起型肿物(肿物大小为*cm,切面呈灰白/灰红色,侵及肌层/外膜层,向下累及/未累及宫颈)。n子宫内膜厚*cm,子宫体肌壁厚*cm,于内膜下/肌壁间/浆膜下可见一个/多个_色结节状肿物,大者大小为*cm,小者大小为*cm,切面_色,编织状明显/不明显,质地_,与周围肌壁组织

9、分界清楚/不清楚,其余肌壁组织切面可见/未见散在暗红色区域。左侧输卵管长*cm,直径为*cm,卵巢大小为*cm,右侧输卵管长*cm,直径为*cm,卵巢大小为*cm。总技术流程(1)固定:(2)脱水:(3)透明:(4)浸蜡:(5)包埋:(6)切片:(7)烤片:(8)HE染色 二次固定固 定 脱 水 透 明浸 蜡置换作用 媒介作用 石蜡渗透常用10%中性甲醛固定液配方:市售甲醛(40%)100ml D、W、900ml 磷酸二氢钠 4g 磷酸氢二钠 6、5g 固定时间4h以上,大标本应在24h以上n固定是组织制片的基础及关键步骤 n固定是否完全,影响着整个制片的过程 n是整个标本处理过程的一个主要环

10、节固定目的:n1、保持组织形态学特征清楚和稳定n2、阻止组织、细胞自溶与腐败n3、凝固或沉淀组织细胞内物质 n4、保存组织细胞抗原性n5、使组织保持一定的硬度和弹性 一种好的固定液特性:1、渗透力相对较强,能迅速渗入组织内部2、组织收缩、膨胀或变硬相对特别小3、能够硬化、固化组织,增加组织硬度4、使得组织对染料产生较强的亲和力,并产生较佳的折光率影响固定因素:n固定液类型及酸碱度 n固定液浓度 n固定时间与组织体积n固定的温度固定液浓度n固定液浓度过低达不到固定效果,浓度过高穿透力降低,易引起组织中央固定不良。福尔马林的浓度大于10%的会增加组织变硬和收缩的程度。n甲醛 酒精 冰醋酸 丙酮固定

11、时间与组织体积 n一般4-24小时 n组织取材厚度原则在4mm以内 n关于免疫组化而言:固定不足,组织抗原弥散,结构不佳,固定过度,抗原破坏。n组织固定后如不能及时进入脱水,可置70%酒精中进行适度保存。固定温度n温度降低,减慢了固定液渗透速度;温度升高,分子弥散增加,分子活动加快,渗透速度加快。n大多数组织适宜的固定温度为25C,全自动脱水机温度一般控制在35C左右。n一般不建议加热固定 脱水原则:1、将组织内水分脱干净但又不使组织过度脱水 2、酒精脱水应由低浓度至高浓度进行 脱水剂特性及要求:1、能与水、透明剂在任何比例下混合 2、对组织的穿透性能良好 3、脱水速度快 4、对组织有一定硬化

12、作用酒精:n最常用脱水剂,具有亲水性,能溶于水和其他有机 n溶剂,脱水力强,能硬化组织。n能特别好与透明剂混溶 n易使组织收缩、变脆,导致透明剂难进入组织 n从低浓度开始逐级增加浓度n低浓度酒精在组织中穿透力特别强,比高浓度更易渗透到组织内部n组织在低浓度酒精中脱水充分,高浓度只是脱去从低浓度到高浓度之间的水分 n高浓度酒精渗透力不强,延长时间意义不大,反而 会使得组织收缩、变脆 75%酒精(1h)85%酒精(1h)95%酒精(1h30)95%酒精(1h)100%酒精(1h30)100%酒精(1h)二甲苯(1h)二甲苯(1h)蜡(1h30)58-60蜡(1h30)58-60 蜡(1h)58-6

13、0 蜡温过高可降低浸蜡时间,浸蜡用的石蜡要定期更新,保持纯度n透明剂在脱水剂和石蜡之间起着桥梁作用 n它能与两种溶液相溶 n在此过程中,因组织块中的水分被透明剂取代,其 折射指数接近于组织蛋白的折光指数,组织块变得 透亮。二甲苯:n最常用的透明剂 n无色透明、有毒性,不溶于水、易挥发 n透明力强n容易使得组织收缩、变形、变脆 n长期接触会呼吸道黏膜有刺激作用n置换组织中的透明剂,石蜡渗入组织 n组织浸蜡、包埋,实质上一个目的两个步骤 n石蜡是最常用的浸润剂和包埋剂 n一般用于浸蜡的石蜡熔点为56-58C n浸蜡温度应高于石蜡熔点2-4Cn采纳石蜡包埋法n镊子夹取组织薄片,立埋(切记不能平埋)于

14、包埋模中(埋鳞状上皮的那面)。n把包埋修好的蜡块按号顺序排列。n放入4冰箱中保存待切片n注意调节组织平面,使之保持垂直,并与刀刃平行。n切片机的切片厚度标尺,一般34nm n活检组织需连续切片,每张切片上4-8张组织片。n石蜡切片烤后从温箱中拿出应迅速浸入二甲苯洗去切片中的石蜡。n时间宁长勿短,否则脱蜡不尽无法着色。n各级酒精洗去切片中的二甲苯,使切片逐级酒精入水。n苏木精染色时间:依染液的新旧与着色能力强弱有关,染色时间应随时观察切片着色程度n伊红染色时间:染色程度应以苏木精对核的着色程度为参照标准,以求达到对比鲜明。n脱水、透明n中性树胶浓度适宜。n过浓气泡不易扩散,不易排出。n过稀易溢出

15、玻片,胶内二甲苯挥发后产生气泡不便观察。n建议每个实施单位,有2名病理医师阅片,假如诊断一致,确定诊断,假如不一致,应增加第三位医师阅片,对确实有争议的病例,可请上级专家阅片诊断。鳞状细胞癌的组织学报告内容包括以下几个方面:n1、组织学类型及分级n2、肿瘤部位n3、浸润深度或厚度n4、肿瘤大小n5、血管淋巴管浸润n6、淋巴结状况n7、切缘状况n宫颈,LEEP,宫颈锥切,宫颈切除术,子宫切除术n浸润性癌n浸润深度:mmn浸润横径:mmn淋巴管/血管间隙受累:n切缘n 宫颈内口:n 宫颈外口:n 深部:n其他宫颈LEEP活检:n1、子宫颈微小浸润性鳞状细胞癌,位于前唇(0点至3点)浸润深度:3mm

16、,可见两处病灶浸润深度:5mm 淋巴管/血管间隙受累:未查见n2、切缘:宫颈内口切缘:4点处可见浸润癌 宫颈外口切缘:未查见癌组织 深切缘:阴性n3、其他:子宫颈多灶性鳞状上皮内瘤变3级,并见一处原位腺癌以上格式在国内估计被简化为如下报告宫颈LEEP活检标本1、子宫颈微小浸润性鳞状细胞癌,位于前唇(0点至3点),间质浸润深度3mm,最大宽度5mm,可见两处病灶2、宫颈LEEP标本的内口切缘在4点处可见癌组织,其余切缘阴性,未见淋巴/血管间隙受累3、子宫颈多灶性鳞状上皮内瘤变3级,一处见原位腺癌。n 子宫,宫颈,卵巢,输卵管,筋膜内/筋膜外次全/次广/广泛全子宫根除术,双侧附件切除术:n 浸润性癌n 肿瘤部位:(以12点为准)n 组织学分级:(FIGO1,2,3级,如适用的话)n 肿瘤大小:cmXcmXcmn 浸润深度:mm,占子宫颈壁厚度的%n 淋巴管/血管间隙受累:n 阴道壁断端:;切缘阳性/阴性n 阴性切缘与肿瘤的最近距离:mmn 宫旁组织:(如有累及,标明哪一侧)n 子宫内膜:n 子宫肌层:n 子宫浆膜层:n 左右卵巢:n 左右输卵管:n锥切或根治标本要报切缘及锥顶或者颈管n根治标本要报宫旁n1、宫颈锥切标本的取材n2、宫颈癌根治标本的取材n3、宫颈病变的报告模式感谢您的聆听！