1、细菌学各论细菌学各论刘斌波刘斌波细菌学各论怎样学?细菌学各论怎样学?生物学性状生物学性状内内容容致病性致病性免疫性免疫性微生物学检查方法微生物学检查方法防治原则防治原则治疗方面治疗方面 预防方面预防方面标本标本涂片染色镜检涂片染色镜检分离培养分离培养鉴定鉴定致病物质致病物质所致疾病所致疾病致病机制致病机制免疫的特点免疫的特点形态与染色形态与染色 培养和生化反应培养和生化反应 抗原构造抗原构造 分类或分型分类或分型 抵抗力抵抗力 第第9 9章章 化化 脓脓 性性 球球 菌菌 概概 述述 按革兰染色分二类:按革兰染色分二类:G G:葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等:葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等 G G
2、:脑膜炎双球菌、淋球菌等:脑膜炎双球菌、淋球菌等 其中对人类具有致病性球菌其中对人类具有致病性球菌病原性球菌病原性球菌 共性:共性:形态:球形或类球形形态:球形或类球形结构:无鞭毛,无芽胞结构:无鞭毛,无芽胞致病性:致病性:主 要 引 起 化 脓 性 炎 症 化 脓 性 细 菌主 要 引 起 化 脓 性 炎 症 化 脓 性 细 菌(pyogenic bacteria)pyogenic bacteria)对药物的敏感性:对青霉素、磺胺对药物的敏感性:对青霉素、磺胺 类药物敏感类药物敏感 第一节第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属(StaphylococcusStaphylococcus)(一)形态与染色
3、:球形,多呈葡萄串状排列。无鞭毛及芽孢。G+(二)培养特性:营养要求不高 需氧或兼性厌氧 温度37 pH7.4 菌落形态:中等大小,光滑型菌落,产生脂溶性色素。在血琼脂平板上形成溶血环(三)生化反应 致病性葡萄球菌能发酵甘露醇金黄色葡萄球菌纯培养镜下形态(革兰染色)金黄色葡萄球菌纯培养镜下形态(革兰染色)(四)抗原构造(四)抗原构造 1 1 蛋 白 质 抗 原:主 要 有 蛋 白 质 抗 原:主 要 有 葡 萄 球 菌 蛋 白葡 萄 球 菌 蛋 白 A A(Staphlococcus Protein AStaphlococcus Protein A;SPASPA)SPASPA的概念的概念 即葡
4、萄球菌蛋白即葡萄球菌蛋白A A,是金葡菌细胞壁表,是金葡菌细胞壁表面的蛋白质抗原,可与多种哺乳动物面的蛋白质抗原,可与多种哺乳动物IgG FCIgG FC段发生非特异性结合,此点为段发生非特异性结合,此点为SPASPA协同凝集协同凝集试验以及试验以及SPASPA具有抗吞噬等生物学效应的原具有抗吞噬等生物学效应的原理的基础。理的基础。含含A蛋白蛋白的金葡菌的金葡菌结合结合IgG的金葡菌的金葡菌Ag 生物学效应:生物学效应:A A抗吞噬作用抗吞噬作用 FabFc B B促有丝分裂作用:促有丝分裂作用:SPASPA为人的为人的T T、B B 细胞激活剂细胞激活剂TT、B B细胞增殖细胞增殖 C C诱
5、发变态反应:使嗜碱性粒细胞释放组织诱发变态反应:使嗜碱性粒细胞释放组织胺胺 2 2多糖抗原多糖抗原 为半抗原,具有群的特异性,故可用此抗原为半抗原,具有群的特异性,故可用此抗原进行分群进行分群(五)分类:方法很多(五)分类:方法很多 1 1根据色素、生化反应和致病性:金黄色葡萄球菌(S.aureus):金黄色 表皮葡萄球菌(S.epidermidis):白色 腐生葡萄球菌(S.saprophyticus):柠檬色 2根据凝固酶:凝固酶阳性菌株 凝固酶阴性菌株l强于其他无芽胞菌l干燥脓汁、痰液中存活2-3个月l加热601h或8030minl耐盐性强(能在1015%NaCl培养基上生长)l对碱性染
6、料敏感l对多数抗生素敏感,但易产生耐药性(一)致病物质:主要为毒素和酶 1凝固酶(coagulase):致病性葡萄球菌 产生,非致病性葡萄球菌不产生。有两种:结合凝固酶:结合于菌体表面使菌凝聚 游离凝固酶:纤维蛋白元纤维蛋白血浆 凝固 作用:抗吞噬 保护细菌 使病灶局限 易形成血栓 2葡萄球菌溶素(staphlolysin)由致病性葡萄球菌产生 分类:按Ag性不同分为、五种。作用:损伤细胞膜:如RBC,WBC,血小板,肝细胞等。3杀白细胞素(leukocidin)作用:只攻击中性粒细胞和巨噬细胞,主要作用 于细胞膜。4肠毒素(enterotoxin):约1/3的金葡菌能产生肠毒素,为外毒素 特
7、点:耐热:100 30,耐蛋白酶 作用:引起食物中毒:进食含肠毒素食物后16h潜伏期,出现恶心、呕吐、上腹痛、腹泻等症状。呕吐最为突出。大多数病人于12d内可自行恢复,预后良好。5.5.表皮剥脱毒素(表皮剥脱毒素(exfoliative toxinexfoliative toxin)表皮溶解毒素表皮溶解毒素 特点:为蛋白质,具有特点:为蛋白质,具有AgAg性性类毒素类毒素 引起剥脱性皮炎(患者皮肤呈弥漫性引起剥脱性皮炎(患者皮肤呈弥漫性 红斑和水疱红斑和水疱继之表皮上层大片脱落)继之表皮上层大片脱落)6.6.毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素-1-1(toxic shock toxic sh
8、ock syndrome toxin 1,TSST-1)syndrome toxin 1,TSST-1)特点:起病急,高热,昏厥,休克,多器特点:起病急,高热,昏厥,休克,多器 官衰竭官衰竭Pathogenesis of staphylococcal infections(二)所致疾病(二)所致疾病1 1侵袭性疾病:侵袭性疾病:局部化脓性感染局部化脓性感染 特点:特点:全身感染全身感染 2 2毒素性疾病:毒素性疾病:食物中毒:特点:食物中毒:特点:假膜性肠炎:菌群失调假膜性肠炎:菌群失调 烫伤样皮肤综合征烫伤样皮肤综合征 毒素休克综合征毒素休克综合征 1 1取材:根据不同疾病取不同材料取材:根
9、据不同疾病取不同材料 2 2直接塗片镜检:革兰染色直接塗片镜检:革兰染色 3 3Differential Tests:致病性葡萄球菌的鉴别要点:致病性葡萄球菌的鉴别要点:葡萄球菌肠毒素的检查葡萄球菌肠毒素的检查 (动物接种;免疫学方法(动物接种;免疫学方法(ELISAELISA););PCRPCR等)等)致病性葡萄球菌的鉴别要点:致病性葡萄球菌的鉴别要点:性状 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌菌落色素金黄色 白色 白色或柠檬色发酵甘露醇 +-凝固酶 +-溶素 +-耐热核酸酶 +-SPA +-致病性 +-小猫试验总结总结 微生物检查法微生物检查法标本标本脓汁,血液,剩余食物,呕吐物等分
10、离培养分离培养血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检直接涂片镜检革兰阳性葡萄球菌生长现象色素,溶血,生化反应毒素检查防治原则防治原则防防 注意消毒隔离 注意个人卫生 防止医源性感染 防止耐药性产生治 抗菌素药敏试验自身菌苗疗法第二节第二节 链球菌属链球菌属(streptococcus)(streptococcus)一、生物学性状 (一)形态与染色:球形,成链状排列 (二)培养特性:1营养要求较高:血液,血清 2在血琼脂培养基上:细小菌落 3在液体培养基中:沉淀生长 (三)分类(三)分类 1根据溶血现象分为:甲、乙、丙三个型 2根据抗原结构分类:核蛋白Ag(P-Ag):无特异性 多糖Ag(C
11、-Ag):有群特异性,分为A.B20个群,对人致病主要在A群 表面蛋白Ag:表面Ag有型的特异性,主要有M,R,T,S四种:如A群约100个型Hemolytic activity:-hemolytic streptococcus:incomplete hemolysis,green zone around colonies*opportunistic pathogens-hemolytic/pyogenic streptococcus:complete hemolysis,clear zone around colonies *major human pathogens-streptococc
12、us:no hemolyzation,no pathogenicity(一)致病物质:(一)致病物质:主要介绍A群链球菌 依靠外毒素和酶 1链球菌溶素(streptolysis)两种:slo和sls slo:特点:对O2敏感;有Ag性;对机体细胞有毒性作用(如WBC):引起WBC胞内内溶酶的释放,导致细胞死亡 sls:特点:对O2稳定;无Ag性 2致热外毒素(Pyrogenic exotoxin):又称红疹毒素或猩红热毒素:发热,全身红斑 3透明质酸酶:溶解细胞间质的透明质酸 使病菌扩散扩散因子 4链激酶(streptokinase;SK)使血液中纤维蛋白酶元纤维蛋白酶,溶解纤维蛋白又称溶纤维
13、蛋白酶 5链道酶(streptodornase;SD)降解脓汁中具有高度粘稠性的DNA-又称 链球菌DNA酶 6M蛋白:作用:抗吞噬 与心肌、肾小球基底膜有共同抗原 超敏反应性疾病 7F蛋白(protein F):作用:粘附于上皮 细胞,与致病性有关(二)所致疾病(二)所致疾病 1急性化脓性感染 皮肤和皮下组织炎症 特点:易于扩散 呼吸道感染 2中毒性疾病:猩红热 3超敏反应性疾病:急性肾小球肾炎 风湿热 网状淋巴结炎网状淋巴结炎丹毒丹毒管状淋管状淋巴管炎巴管炎 呼吸道感染引起小儿猩红热:临床特征为发热、全身弥漫性皮疹和疹退后的明显脱屑,病后可获得较强的免疫力。猩猩红红热热皮皮疹疹 A.急性肾
14、小球肾炎:多见于儿童和青少年,大多数由A群M12型链球菌引起。临床表现为蛋白尿、浮肿和高血压。B.风湿热:主要在咽炎后有可能发生,由A族链球菌的多种型别引起。临床表现以关节炎、心肌炎为主。致病机理:、超敏反应 1抗M蛋白的抗体 2各型间无交叉免疫,型别多反复感染 3链球菌致热外毒素抗体(SPE抗体)终身免疫,但无交叉免疫 4.ASO试验(antistreptolysin O test)用SLO检测血清中的ASO抗体,常用于风湿热、急性肾小球肾炎的诊断 直接涂片镜检标本革兰阳性链球菌分离培养脓汁,血液,咽喉拭子与金葡菌的鉴别与肺炎链球菌的鉴别 积极治疗儿童链球菌感染,积极治疗儿童链球菌感染,防止
15、风湿热或急性肾防止风湿热或急性肾小球肾炎等并发症的发生。小球肾炎等并发症的发生。选用青霉素,对青霉素过敏者可改用红霉素林选用青霉素,对青霉素过敏者可改用红霉素林可霉素可霉素。疗程不应少于疗程不应少于1010天。天。第三节第三节 肺炎球菌肺炎球菌(PneumococcusPneumococcus)是细菌性肺炎的主要病原菌是细菌性肺炎的主要病原菌(一)形态与染色:G,呈双排列,矛尖状,矛尖向外,宽 端相对,有毒株有荚膜,人工培养后消失。(二)培养特性:营养要求高,在血培养基上草绿色溶血环(三)抗原结构:荚膜多糖抗原、C多糖、M蛋白 CRP(C reaction protein,C反应蛋白):肺炎球
16、菌的C多糖可与人血清中球蛋白非特异性结合,发生沉淀反应,所以又称该蛋白为CRP。CRP不是抗体,正常人血清中含量低,急性炎症或风湿热时,CRP含量升高,可用于风湿热的辅助诊断。二、致病性:二、致病性:(一)致病物质:主要为荚膜 (二)所致疾病:主要引起人类的大叶性肺炎 三、与甲链的鉴别要点三、与甲链的鉴别要点 相同点:G球菌;草绿色溶血环 不同点:见下表 肺炎双球菌肺炎双球菌甲型溶血性甲型溶血性链球菌链球菌排排列列成双成双链状链状菌菌落落脐状(因产生自溶酶)脐状(因产生自溶酶)无脐状无脐状试试验验发酵菊糖发酵菊糖 +-胆汁溶菌试验胆汁溶菌试验 +-奥普托欣试验奥普托欣试验 抑菌圈直抑菌圈直径径
17、20mm20mm第第 四四 节节 奈奈 瑟瑟 菌菌 属属(NeisseriaNeisseria)是一群是一群G G球菌,常呈双排列球菌,常呈双排列 该菌属中只有脑膜炎双球菌和淋球菌对人类该菌属中只有脑膜炎双球菌和淋球菌对人类 致病性致病性 脑膜炎球菌脑膜炎球菌(meningococcusmeningococcus)引起流行性脑脊髓膜炎引起流行性脑脊髓膜炎 一、生物学性状一、生物学性状(一)形态与染色(一)形态与染色 G球菌,多呈双排列。在患者脑脊液中,多位于白细胞内 呈肾形,两凹面相对(二)培养特性(二)培养特性 营养要求高 常用培养基:巧克力血琼脂培养基 初次分离培养:需供给5-10%CO2
18、(三)抵抗力(三)抵抗力 怕冷怕热,怕干燥,怕阳光,易产生 自溶酶二、致病性二、致病性 (一)致病物质(一)致病物质 1菌毛 2荚膜 3内毒素:为主要致病物质飞沫传染源传染源带菌者带菌者健康人鼻咽部健康人鼻咽部上呼吸道上呼吸道症状症状病人病人生长繁殖(生长繁殖(1-4天)天)脑双菌进入血流脑双菌进入血流 畏寒、发热、恶心、呕吐畏寒、发热、恶心、呕吐 菌血症菌血症/败血症:败血症:通过通过 皮肤瘀斑等症皮肤瘀斑等症 血脑屏障血脑屏障 到达到达 脑脊髓膜脑脊髓膜 流行性脑脊髓膜炎流行性脑脊髓膜炎(流脑)(流脑)头痛,喷射性呕吐,发热,颈项强直等头痛,喷射性呕吐,发热,颈项强直等 (为颅内压(为颅内
19、压所致)所致)(二)致病经过及所致疾病(二)致病经过及所致疾病 小结小结:a.人类自然免疫力较强,感染后 只有2-3%发病 b.可为各种钝挫型 c.多见于儿童 d.病后免疫力较强,一般不会患第2次 e.致病因素:主要是内毒素标本标本分离培养与鉴定分离培养与鉴定脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭脑脊液、血液、出血点渗出液、鼻咽拭保暖、保湿、立即送检,培养基预温保暖、保湿、立即送检,培养基预温直接涂片镜检直接涂片镜检中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌,中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌,可作出初步诊断。可作出初步诊断。巧克力(色)培养基巧克力(色)培养基快速诊断快速诊断对流免疫电泳,对流免疫电泳,SP
20、ASPA协同凝集试验协同凝集试验 综合性预防措施综合性预防措施隔离病人、检查带菌者、预防性投药,室内通风隔离病人、检查带菌者、预防性投药,室内通风流脑疫苗:流脑疫苗:6 6个月个月-2-2岁接种两次,间隔岁接种两次,间隔1 1月月 A A群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗 青霉素、磺胺大剂量治疗青霉素、磺胺大剂量治疗 脑膜炎接种脑膜炎接种 淋球菌是引起淋病的病原菌,主要引起人类泌尿生殖系统粘膜的急性或慢性化脓性感染。淋病是一种性传播疾病,目前是我国发病率最高的性病。G球菌,常呈双排列,新分离菌株有荚 膜,有菌毛。初次分离培养时须供给5%CO2,营养要求高,常用培养基为
21、巧克力色血琼脂培养基。抵抗力很低,与脑膜炎双球菌相似白细胞内淋球菌淋球菌电镜观察 (一)致病物质(一)致病物质 1菌毛:粘附作用 2外膜蛋白:P插入中性粒细胞膜上膜损伤 P参与淋球菌与宿主细胞间的粘附 作用 P阻抑杀菌抗体的活性 3IgA1蛋白酶:破坏SIgA1成人淋病 男性:初期为前尿道炎 尿频、尿痛、女性:初期为尿道炎与宫颈炎 尿道流脓 进一步扩散到生殖系统 男性:前列腺炎等 女性:盆腔炎等不孕 药物:青霉素G、氨苄西林、红霉素等2新生儿淋菌性眼结膜炎:新生儿淋菌性眼结膜炎:1硝酸银滴眼硝酸银滴眼标本标本用无菌棉拭沾取用无菌棉拭沾取直接涂片镜检直接涂片镜检在中性粒细胞内发现有革兰阴性双球菌在中性粒细胞内发现有革兰阴性双球菌时,有诊断价值时,有诊断价值分离培养与鉴定分离培养与鉴定标本采集后应注意保暖保湿,立即送检接种标本采集后应注意保暖保湿,立即送检接种子宫颈口表面分泌物子宫颈口表面分泌物泌尿生殖道脓性分泌物泌尿生殖道脓性分泌物巧克力色平板,巧克力色平板,5-10%5-10%二氧化碳二氧化碳防防开展防治性病的知识教育开展防治性病的知识教育防止不正当的两性关系防止不正当的两性关系治治抗生素抗生素 首选壮观霉素(淋必治)首选壮观霉素(淋必治)新生儿新生儿1%1%硝酸银滴眼。硝酸银滴眼。
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