临床检验基础的现状和特点课件.ppt

1、 绪绪 论论一、临床检验基础的现状和特点一、临床检验基础的现状和特点古代古代:感官检查（如：尿液中世纪）感官检查（如：尿液中世纪）17世纪世纪:荷兰荷兰Leeuwenhoek发明显微镜发明显微镜 2020世纪末以来世纪末以来:自然科学基础学科与医自然科学基础学科与医学基础学科结合电脑化、自动化、学基础学科结合电脑化、自动化、微量化微量化2121世纪：现代信息网络技术（远程诊世纪：现代信息网络技术（远程诊断）与系统生物工程（包括分子生物断）与系统生物工程（包括分子生物学）、临床医学结合。学）、临床医学结合。最常用的临床检验，借助先进的检测技最常用的临床检验，借助先进的检测技术，对来自离体的术，对

2、来自离体的血液、尿液、粪便血液、尿液、粪便以以及及分泌物和排泄物分泌物和排泄物等标本进行理学、化等标本进行理学、化学、病原学和显微镜形态学的检查，学、病原学和显微镜形态学的检查，以简便、快以简便、快速的检测结速的检测结果，基本满果，基本满足临床医学足临床医学检验检验筛检筛检疾疾病的需求。病的需求。临床检验现代特征：临床检验现代特征：1从手工从手工 自动化、电脑化检测自动化、电脑化检测 2 （point of care test，POCT）床边检测床边检测3试剂批量、配套、专业和多样化试剂批量、配套、专业和多样化 4.4.检验方法标准化检验方法标准化如：如：19661966年，成立年，成立国际血

3、液学标准化委员国际血液学标准化委员会会（International Committee for International Committee for Standardization of hematology,Standardization of hematology,ICSHICSH，源自，源自19631963年欧洲血液学协会标准年欧洲血液学协会标准化委员会）化委员会）5全面质量保证全面质量保证 人员和物质人员和物质 检验分析前：检验分析前：标本的标本的采集、储存采集、储存和和转运转运过过程尤为重要。现认为，管理好这两个环程尤为重要。现认为，管理好这两个环节，可降低节，可降低70%70%的

4、检验差错率。的检验差错率。(1)(1)标本采集原则标本采集原则保持离体标本保持离体标本质质和和量量的的完整性完整性（2 2）避免非疾病因素的干扰）避免非疾病因素的干扰生理变异：生理变异：第一类：不能控制的第一类：不能控制的生理变异生理变异年龄和性年龄和性别对检验影响为长期效应别对检验影响为长期效应第二类：相对能控制的第二类：相对能控制的生理变异，如食物、生理变异，如食物、药物、情绪、状态、体位和标本采集时药物、情绪、状态、体位和标本采集时间间等，对检验的影响多为短期效应。等，对检验的影响多为短期效应。1 1）饮食因素：刚进食、禁食、饮酒、吸烟）饮食因素：刚进食、禁食、饮酒、吸烟2 2）药物因素

5、：方式、浓度）药物因素：方式、浓度 二、临床检验基础的应用目的二、临床检验基础的应用目的 1为疾病为疾病诊断和鉴别诊断诊断和鉴别诊断提供实验室提供实验室检测客观依据检测客观依据 2.2.为疾病为疾病疗效监测和预后判断疗效监测和预后判断提供动态提供动态变化依据变化依据 3.3.为为预防疾病预防疾病提供检测依据提供检测依据 4.4.为为科学研究科学研究提供医学检验基本数据、提供医学检验基本数据、基本检验方法和操作技能。基本检验方法和操作技能。三、学好临床基础检验的基本要求三、学好临床基础检验的基本要求1 1 掌握检验基础理论掌握检验基础理论2 2掌握检验实验技能掌握检验实验技能3 3熟悉检验方法学

6、评价熟悉检验方法学评价4 4了解检验项目参考值了解检验项目参考值 红 细 胞 计 数红 细 胞 计 数(R B C)(R B C)参 考 值参 考 值男 性：男 性：(4.0(4.0 5.5)5.5)1 01 01 21 2/L/L女性：女性：(3.5(3.55.0)5.0)1010 12 12/L/L 5 5熟悉检验项目临床意义熟悉检验项目临床意义 血液标本采集血液标本采集血液标本采集和抗凝剂选择血液标本采集和抗凝剂选择 全血全血：临床血液学检查：血细胞计数、分类：临床血液学检查：血细胞计数、分类血浆血浆：临床生化检查（内分泌激素测定等）；：临床生化检查（内分泌激素测定等）；血栓与止血的检查

7、血栓与止血的检查血清血清：除纤维蛋白原等凝血：除纤维蛋白原等凝血因子外，其他成分与血浆因子外，其他成分与血浆基本相同，多数临床化学和基本相同，多数临床化学和临床免疫学检查。临床免疫学检查。一、采血方法一、采血方法静脉采血法静脉采血法(venipuncture for blood collectionvenipuncture for blood collection)皮肤采血法皮肤采血法(skin puncture for blood collectionskin puncture for blood collection)真空采血法真空采血法(vacuum tube for blood col

8、lectionvacuum tube for blood collection，负压采血法负压采血法)。定量、安全、转运方便定量、安全、转运方便.封封闭式采血闭式采血,无需容器转移，减少溶血。无需容器转移，减少溶血。真真空定量贮存试管适于不同的检验项目空定量贮存试管适于不同的检验项目 真空采血容器色泽及应用范围真空采血容器色泽及应用范围颜颜 色色 抗抗 凝凝 剂剂应应 用用 范范 围围灰草酸盐、氟化钠草酸盐、氟化钠 全血、血浆：血葡全血、血浆：血葡萄糖萄糖 黄血培养血培养 绿肝素肝素全血、血浆：血气全血、血浆：血气红血清：生化、免疫血清：生化、免疫 蓝枸橼酸盐枸橼酸盐 全血、血浆，凝血全血、血

9、浆，凝血检查检查 紫乙二胺四乙酸盐乙二胺四乙酸盐 全血、血浆、钾盐全血、血浆、钾盐用于血细胞、血小用于血细胞、血小板和血液学检查板和血液学检查【方法学评价】【方法学评价】皮肤采血：易溶血、凝血和可能混入组皮肤采血：易溶血、凝血和可能混入组织液，重复性差。织液，重复性差。开放式采血开放式采血：操作环节多、不规范，易：操作环节多、不规范，易污染。污染。封闭式采血封闭式采血：操作规范，安全性、重复：操作规范，安全性、重复性好。性好。【质量控制】【质量控制】血标本采集是分析前质量控制重要环节。血标本采集是分析前质量控制重要环节。1 1患者患者 2 2采血采血 静脉采血：止血带压迫时间宜静脉采血：止血带

10、压迫时间宜小小于于1min 1min 3 3溶血溶血 4 4血标本处理原则血标本处理原则 及时运送检测及时运送检测。保存：温度和有效时间保存：温度和有效时间5 5实验结果分析实验结果分析 采样时采样时：年龄、性别、饮食、药物、时间：年龄、性别、饮食、药物、时间二、抗凝剂选择二、抗凝剂选择1.1.乙二胺四乙酸（乙二胺四乙酸（ethylenediamine ethylenediamine tetraacetic acid,tetraacetic acid,EDTAEDTA ）盐）盐 NaNa2 2C C1010H H1414O O8 8N N2 2+Ca+Ca2+2+aC aC1010H H121

11、2O O8 8N N2 2+2Na+2Na+2H+2H+特点：对血细胞形态、血小板计数影响很特点：对血细胞形态、血小板计数影响很小（但影响血小板聚集）。小（但影响血小板聚集）。根据根据国际血液学标准化委员会国际血液学标准化委员会(ICSHICSH)19931993年文件建议，年文件建议，血细胞计数用血细胞计数用EDTA-K2EDTA-K2作抗凝剂（作抗凝剂（EDTA-K2-2H2O 1.5EDTA-K2-2H2O 1.52.2mg/ml2.2mg/ml血液血液）。）。2草酸盐（草酸盐（sodium oxalate）：对凝）：对凝血血V因子保护功能差，影响凝血酶原时间因子保护功能差，影响凝血酶原

12、时间测定；草酸盐与凝血酶钙结合后形成的测定；草酸盐与凝血酶钙结合后形成的沉淀物，影响自动凝血仪的使用；高浓沉淀物，影响自动凝血仪的使用；高浓度钾或钠离子易使血细胞脱水皱缩，草度钾或钠离子易使血细胞脱水皱缩，草酸铵使血细胞膨胀。酸铵使血细胞膨胀。3肝素肝素(heparin)加强抗凝血酶加强抗凝血酶III（antithrombin III,AT-III）灭活丝氨酸）灭活丝氨酸蛋白酶的作用，从而蛋白酶的作用，从而阻止凝血酶阻止凝血酶形成，形成，阻止血小板聚集等作用，抗凝力强。用阻止血小板聚集等作用，抗凝力强。用量量（152.5）U/ml血液血液。但常可。但常可引起白引起白细胞聚集细胞聚集，并使血涂片

13、在罗氏染色，并使血涂片在罗氏染色（Romanowskys staining）时产生蓝）时产生蓝色背景。色背景。4 4枸橼酸盐枸橼酸盐 枸橼酸钠枸橼酸钠(trisodium(trisodium citrate)citrate)，能与血液中的钙离子结合形成，能与血液中的钙离子结合形成螯合物，从而阻止血液凝固。螯合物，从而阻止血液凝固。2Na 2Na3 3C C6 6H H5 5O O7 7+2Ca+2Ca2+2+2CaC 2CaC6 6H H5 50 07 7-+6Na+6Na+抗凝力较弱。抗凝力较弱。抗凝比例抗凝比例1 9。多用于临床。多用于临床血液学检查、血液保养（毒性小）。血液学检查、血液保

14、养（毒性小）。血液涂片制备和细胞染色血液涂片制备和细胞染色 一、血液涂片制备一、血液涂片制备厚薄适宜（与血量多少、推片速度有关），厚薄适宜（与血量多少、推片速度有关），头体尾明显：细胞分布要均匀头体尾明显：细胞分布要均匀血膜边缘整齐（留一定空隙）血膜边缘整齐（留一定空隙）二、血液细胞染色二、血液细胞染色（一）瑞氏染色法（一）瑞氏染色法 (Wright(Wrights stain)s stain)1 1瑞氏染料瑞氏染料 酸性染料伊红（酸性染料伊红（eosin,Eeosin,E-）碱性染料亚甲蓝（碱性染料亚甲蓝（methylene blue,Mmethylene blue,M+；又名美蓝）组成复合

15、染料。又名美蓝）组成复合染料。甲醇：溶解美蓝和伊红甲醇：溶解美蓝和伊红MEME；固定细胞的形；固定细胞的形态；提高对染料的吸附作用。态；提高对染料的吸附作用。2 2染色原理染色原理 物理吸附、化学亲和物理吸附、化学亲和3 3pHpH值的影响值的影响 细胞各种成分多属蛋白质，由于细胞各种成分多属蛋白质，由于蛋白质系两性电蛋白质系两性电解质解质，所带电荷随溶液，所带电荷随溶液pHpH而定。而定。在在偏酸时正电荷（偏酸时正电荷（H H）增多）增多，易与伊红结合，易与伊红结合，染色偏红。染色偏红。在在偏碱时负电荷增多偏碱时负电荷增多，易与美蓝或天青结合，染，易与美蓝或天青结合，染色偏蓝。色偏蓝。染料染

16、料贮存时间愈久，染色效果愈好贮存时间愈久，染色效果愈好。染液贮存，必须加塞，以防止甲醇挥发和被氧化染液贮存，必须加塞，以防止甲醇挥发和被氧化成甲酸。成甲酸。加入甘油加入甘油,防止甲醇挥发，染色清晰防止甲醇挥发，染色清晰。（二）（二）姬姆萨染色法姬姆萨染色法姬姆萨染液：由姬姆萨染液：由天青、伊红天青、伊红组成。组成。【方法学评价】【方法学评价】1.1.血涂片制备血涂片制备 手工推片法手工推片法:血量少、操作简单、重复差。血量少、操作简单、重复差。2.血液细胞染色血液细胞染色 瑞氏染色法：最经典、最常用瑞氏染色法：最经典、最常用 瑞氏瑞氏-姬姆萨复合染液：取长补短姬姆萨复合染液：取长补短 观察红细

17、胞的形态及分布观察红细胞的形态及分布obseve erythrocyte form and distribution观察白细胞形态观察白细胞形态observe leukocyte form观察血小板的形态观察血小板的形态observe platelet form观察有无寄生虫观察有无寄生虫observe parasite第二章第二章 血液一般检验血液一般检验第一节第一节 红细胞检验红细胞检验红细胞（红细胞（red blood cell；erythrocyte）起 源 于 骨 髓 造 血 干 细 胞（起 源 于 骨 髓 造 血 干 细 胞（c o l o n y forming unit-spl

18、een，CFU-S）红细胞的主要生理功能：通过胞内的血红红细胞的主要生理功能：通过胞内的血红蛋白来实现的。蛋白来实现的。一、红细胞计数一、红细胞计数(red blood cell countred blood cell count，RBCRBC)【检测原理】【检测原理】1手工显微镜法手工显微镜法2 2血液分析仪法血液分析仪法 利用电阻抗和（或）光散射原理利用电阻抗和（或）光散射原理 红细胞计数红细胞计数2ml稀释液稀释液 充分混匀充分混匀 10ul血液血液 充池、静止充池、静止 镜下计数镜下计数 计算：计算：RBC/L=N510106200Neubauer计数盘 3mm WBC WBC WBC

19、 WBC 1mm【方法学评价】【方法学评价】1 1手工显微镜法手工显微镜法 2 2血液分析仪法血液分析仪法 为目前主要临床检验细胞计数方法为目前主要临床检验细胞计数方法变异系数（变异系数（coefficient of variation,CVcoefficient of variation,CV ）小。小。【质量控制】【质量控制】1 1手工法手工法 误差来源包括：标本、操作、误差来源包括：标本、操作、器材、固有误差（计数域误差）器材、固有误差（计数域误差）2 2仪器法仪器法 严格按操作规程；定期作室内和室间质控。严格按操作规程；定期作室内和室间质控。【参考值】【参考值】成年：成年：男性男性(4

20、(45.5)5.5)10101212/L/L 女性女性(3.5(3.55.0)5.0)10101212/L/L 新生儿新生儿(6.07.0)1012/L。【临床意义】【临床意义】1 1生理性变化生理性变化 (1)(1)年龄与性别的差异年龄与性别的差异(2)(2)精神因素精神因素(3)(3)剧烈体力运动和劳动剧烈体力运动和劳动(4)(4)气压降低气压降低(5)(5)妊娠中、后期妊娠中、后期2 2病理性变化病理性变化（1 1）红细胞和血红蛋白量减少：在临床）红细胞和血红蛋白量减少：在临床最常见于最常见于各种原因的贫血各种原因的贫血。1 1）急性、慢性红细胞丢失过多：如各种）急性、慢性红细胞丢失过多

21、：如各种原因的出血。原因的出血。2 2）红细胞寿命缩短：如各种原因的溶血）红细胞寿命缩短：如各种原因的溶血 3 3）造血原料不足）造血原料不足4 4）骨髓造血功能减退）骨髓造血功能减退（2 2）红细胞增多）红细胞增多 1 1）原发性原发性红细胞增多：见于真性红细胞红细胞增多：见于真性红细胞增多症、良性家族性红细胞增多症等。增多症、良性家族性红细胞增多症等。2 2）继发性红细胞增多：常见于可以引起）继发性红细胞增多：常见于可以引起低氧血症低氧血症的疾病：心血管病、肺疾病、的疾病：心血管病、肺疾病、异常血红蛋白病。异常血红蛋白病。肾上腺皮质功能亢进（库欣病），可能与肾上腺皮质功能亢进（库欣病），可

22、能与皮质激素刺激骨髓使红细胞生成偏高有皮质激素刺激骨髓使红细胞生成偏高有关、关、药物药物肾上腺素、糖皮质激素、肾上腺素、糖皮质激素、雄激雄激素素等。等。(3(3）相对性红细胞增多）相对性红细胞增多二、血红蛋白二、血红蛋白(hemoglobin,Hb或或HGB)测定测定（一）血红蛋白分子结构及成分（一）血红蛋白分子结构及成分 色素：亚铁血红素色素：亚铁血红素 原卟啉和铁原子原卟啉和铁原子组成的一种结合物，合组成的一种结合物，合成受成受-氨基氨基-酮戊酸合成酶（酮戊酸合成酶（-aminolevulinic acid synthetase）、血红）、血红素本身和素本身和FeFe2+2+的调节。的调节

23、。蛋白质：珠蛋白蛋白质：珠蛋白血红蛋白的结构血红蛋白的结构construction of hemoglobin 卟啉 卟啉 Fe 卟啉 卟啉 珠蛋白珠蛋白 在正常状态，在正常状态，机体有机体有99%Hb99%Hb的 铁 原 子 呈的 铁 原 子 呈FeFe2+2+状态，称状态，称为还原为还原Hb,1%Hb,1%的的 Fe Fe3+3+为高铁为高铁血红蛋白，只血红蛋白，只有亚铁状态的有亚铁状态的HbHb才能与氧结才能与氧结合，此时称合，此时称氧氧合血红蛋白合血红蛋白。(二二)血红蛋白的合成血红蛋白的合成血红蛋白的合成受激素的调节。血红蛋白的合成受激素的调节。红细胞生成素红细胞生成素：促：促-氨基

24、氨基-酮戊酸（酮戊酸（-aminolevulinic acidaminolevulinic acid，ALAALA）生成与铁）生成与铁的利用，促血红素和的利用，促血红素和HbHb的合成；的合成；雄激素雄激素：在人体不同生长时期，：在人体不同生长时期，HbHb种类与种类与比例不同。比例不同。【检测原理】【检测原理】血红蛋白形式：血红蛋白形式：氧合血红蛋白（氧合血红蛋白（oxyhemoglobinoxyhemoglobin）碳氧血红蛋白（碳氧血红蛋白（carboxyhemoglobincarboxyhemoglobin）高铁血红蛋白（高铁血红蛋白（hemiglobinhemiglobin，HiHi

25、）其他衍生物其他衍生物1 1氰化高铁血红蛋白氰化高铁血红蛋白（hemiglobincyanide,hemiglobincyanide,HiCNHiCN ）测定法）测定法 吸收波峰：吸收波峰：540nm540nm 2 2其他测定法：其他测定法：叠氮高铁血红蛋白法（叠氮高铁血红蛋白法（hemiglobin hemiglobin azide,HiNazide,HiN3 3）碱羟血红蛋白测定法碱羟血红蛋白测定法沙利（沙利（SahliSahli，已经淘汰，已经淘汰）血红蛋白测定法）血红蛋白测定法【方法学评价】【方法学评价】19661966年，年，ICSHICSH氰化高铁血红蛋白测定法作为国际氰化高铁血红

26、蛋白测定法作为国际标准参考方法。标准参考方法。HiCNHiCN法简便、显色快而稳定法简便、显色快而稳定。可检测除硫化血红蛋白（可检测除硫化血红蛋白（sulphon hemoglobin,sulphon hemoglobin,SHb SHb）外的各种血红蛋白。）外的各种血红蛋白。氰化钾（氰化钾（potassium cyanidepotassium cyanide，KCNKCN）有剧毒）有剧毒十二烷基硫酸钠血红蛋白（十二烷基硫酸钠血红蛋白（sodium dodecyl sodium dodecyl sulfate,SDSsulfate,SDS）测定法：除）测定法：除SHbSHb外，血液中各外，血液

27、中各种种HbHb均可与低浓度均可与低浓度SDSSDS作用，生成作用，生成SDS-HbSDS-Hb棕红棕红色化合物。吸收曲线波峰在色化合物。吸收曲线波峰在538nm538nm，波谷在，波谷在500nm500nm，肩峰在，肩峰在560nm560nm。无公害。破坏白细胞，。无公害。破坏白细胞，不适于不适于同时用于有白细胞计数和同时用于有白细胞计数和HbHb测定的血细测定的血细胞分析仪上使用。胞分析仪上使用。叠氮高铁血红蛋白（叠氮高铁血红蛋白（HiN3）测定法：具）测定法：具有与有与HiCN测定法相似的优点，测定法相似的优点，HbCO转转化慢。化慢。碱羟血红蛋白碱羟血红蛋白(AHD 575)(AHD

28、575)测定法测定法沙利法为传统血红蛋白测定法，已淘汰。沙利法为传统血红蛋白测定法，已淘汰。【质量控制】【质量控制】血标本、方法、器材、采血部位血标本、方法、器材、采血部位【参考值】【参考值】成年：男性成年：男性120120160g/L160g/L女性：女性：110110150g/L150g/L新生儿：新生儿：170170200g/L200g/L老年（老年（7070岁以上）：岁以上）：男性：男性：94.294.2122.2g/L122.2g/L女性：女性：86.586.5111.8g/L111.8g/L【临床意义】【临床意义】与红细胞计数相似，但与红细胞计数相似，但对贫血程对贫血程度判断的准确

29、性优于度判断的准确性优于红细胞计数。红细胞计数。三、红细胞形态检查三、红细胞形态检查 【方法学评价】【方法学评价】虽然虽然血细胞分析仪广泛用于全血细胞计血细胞分析仪广泛用于全血细胞计数，但观察血涂片可用于估计相应血数，但观察血涂片可用于估计相应血细胞数量，因而细胞数量，因而显微镜细胞数量和形显微镜细胞数量和形态的观察态的观察现常作为对仪器分析质控的现常作为对仪器分析质控的参考对照参考对照。注意：注意：如果血片制作不良和染色不佳，如果血片制作不良和染色不佳，常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错常使细胞鉴别发生困难，甚至导致错误结论。误结论。【质量控制】【质量控制】选择细胞分布均匀的区域：选择细胞分布

30、均匀的区域：红细胞堆积棒状穿钱状：细胞过于密集但如红细胞堆积棒状穿钱状：细胞过于密集但如果在血涂片较薄的区域出现：可能是红细果在血涂片较薄的区域出现：可能是红细胞外附有异型球胞外附有异型球 蛋白蛋白注意完整的检查注意完整的检查顺序顺序 观察红细胞观察红细胞 observe erythrocyte色素色素colour大小大小size形态形态shape异常结构异常结构abnormal structure 正常红细胞正常红细胞normal erythrocytered cell observed under electric microscope【临床意义】【临床意义】1.1.红细胞大小不一红细胞大

31、小不一 （1 1）小红细胞小红细胞(microcyte)(microcyte)：6m6m（2 2）大红细胞大红细胞(macrocyte)(macrocyte)：10m10m。常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、恶性贫血等。恶性贫血等。（3 3）巨红细胞巨红细胞(megalocyte)(megalocyte)：15m15m （4）红细胞大小）红细胞大小不均不均(anisocytosis)：同一患者红细胞同一患者红细胞之间直径相差一之间直径相差一倍以上。如大达倍以上。如大达12m，小仅，小仅2.5m。常见于。常见于严重的增生性贫严重的增生性贫血，血，巨幼细胞性巨幼细

32、胞性贫血贫血时尤为明显。时尤为明显。2.2.红细胞内血红蛋白含量改变红细胞内血红蛋白含量改变（1 1）正常色素性）正常色素性(normochromic)(normochromic)：见于急性失：见于急性失血、再生障碍性贫血、白血病等。血、再生障碍性贫血、白血病等。（2 2）低色素性）低色素性(hypochromic)(hypochromic)：见于缺铁性贫血、：见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铁幼粒细胞性贫血，珠蛋白生成障碍性贫血、铁幼粒细胞性贫血，某些血红蛋白病。某些血红蛋白病。（3 3）高色素性）高色素性(hyperchromic)(hyperchromic)：最常见于巨幼最常见于巨

33、幼细胞性贫血。细胞性贫血。（4 4）多色性）多色性(polychromatic)(polychromatic)：刚脱核而尚未完：刚脱核而尚未完全成熟的红细胞，体积较大。正常人外周血占全成熟的红细胞，体积较大。正常人外周血占1%1%左右。尤见于溶血性或急性失血性贫血。左右。尤见于溶血性或急性失血性贫血。（5）细胞着色不一（）细胞着色不一（anisochromia）：双形性）：双形性贫血（贫血（dimorphic anemia）,多见于铁粒幼红多见于铁粒幼红细胞性贫血。细胞性贫血。5 5红细胞形状改红细胞形状改变变（1 1）球形红细胞球形红细胞(spherocyte)(spherocyte)：见于

34、见于遗传性遗传性和获和获得性球形细胞增得性球形细胞增多症（如多症（如自身免自身免疫溶血性贫血疫溶血性贫血或或直接理化损伤如直接理化损伤如烧伤等）。烧伤等）。（2 2）椭圆形红细胞椭圆形红细胞(elliptocyte)(elliptocyte)：见于：见于遗传性遗传性椭圆形细胞增多症、大细胞性贫椭圆形细胞增多症、大细胞性贫血；偶见于缺铁性贫血、骨髓纤维化、血；偶见于缺铁性贫血、骨髓纤维化、巨幼细胞贫血、镰形细胞性贫血。正常巨幼细胞贫血、镰形细胞性贫血。正常人血液约占人血液约占1%1%。（3 3）靶形细胞靶形细胞(target cell)(target cell)：常见于各种低常见于各种低色素性贫

35、血、色素性贫血、尤见于尤见于珠蛋白珠蛋白生成障碍性贫生成障碍性贫血血、HbCHbC病，及病，及阻塞性黄疸、阻塞性黄疸、脾切除后。脾切除后。（4 4）口形红细胞口形红细胞(stomatocyte)(stomatocyte)：常见于口形红细常见于口形红细胞增多症，小儿胞增多症，小儿消化系统疾患引消化系统疾患引起的贫血及酒清起的贫血及酒清中毒、某些溶血中毒、某些溶血性贫血、肝病。性贫血、肝病。（5 5）镰形红细镰形红细胞胞(sickle(sickle cell)cell)：镰状细镰状细胞贫血（胞贫血（HbS-SHbS-S，HbS-CHbS-C），），在缺在缺氧的条件下，氧的条件下，可有大量镰状可有大

36、量镰状红细胞。红细胞。（6 6）棘 红 细 胞棘 红 细 胞(acanthocyte)(acanthocyte)：见于见于遗传性遗传性或获得或获得性性-脂蛋白缺乏脂蛋白缺乏症症；于脾切除后、；于脾切除后、酒精中毒性肝脏疾酒精中毒性肝脏疾病、尿毒症。病、尿毒症。棘红细胞应与棘红细胞应与皱缩红皱缩红细胞细胞（也称（也称锯齿状锯齿状红 细 胞红 细 胞）区 别）区 别（crenated cell,crenated cell,echinocyteechinocyte）。）。（7 7）新月形红细胞（新月形红细胞（meniscocytemeniscocyte）：见）：见于某些溶血性贫血（如阵发性睡眠性血于

37、某些溶血性贫血（如阵发性睡眠性血红蛋白尿症），其意义不明。正常人无。红蛋白尿症），其意义不明。正常人无。（8 8）泪滴形红泪滴形红细 胞（细 胞（t e a r t e a r drop celldrop cell）：）：可能是细胞内可能是细胞内含有含有HeinzHeinz小小体或包涵体所体或包涵体所致。见于贫血、致。见于贫血、骨髓纤维化症骨髓纤维化症，偶见正常人。偶见正常人。（9 9）缗钱状红细胞缗钱状红细胞(rouleaux formation)(rouleaux formation)：见于血浆中纤维蛋白原和免疫球蛋白增高性等见于血浆中纤维蛋白原和免疫球蛋白增高性等疾病。疾病。（1010）

38、裂红细胞）裂红细胞(schistocyte)(schistocyte)：红细胞碎片：红细胞碎片（cell fragmentscell fragments），有各种形态如刺形），有各种形态如刺形(burr)(burr)、盔形、盔形(helmet)(helmet)等。见于弥漫性血管内等。见于弥漫性血管内凝血、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生凝血、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、严重烧伤。成障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、严重烧伤。正常人正常人2%2%。（1111）红细胞形态不整）红细胞形态不整(poikilocytosis)(poikilocytosis)在某在某些感

39、染或严重贫血时多见，最常见于巨幼细胞些感染或严重贫血时多见，最常见于巨幼细胞性贫血。性贫血。（1 2)1 2)有 核 红 细 胞有 核 红 细 胞(n u c l e a t e d (n u c l e a t e d erythrocyte)erythrocyte)即幼稚红细胞。正常时，即幼稚红细胞。正常时，1 1周之内婴幼儿周之内婴幼儿血片中可见到少量有核血片中可见到少量有核红细胞，红细胞，在成人为病理情况在成人为病理情况。1 1）溶血性贫血：最常见。）溶血性贫血：最常见。表明骨髓有良表明骨髓有良好的调节功能。好的调节功能。2 2）造血系统）造血系统恶性恶性疾患或骨髓转移性肿瘤：疾患或骨

40、髓转移性肿瘤：见于各种急、慢性白血病及红白血病。见于各种急、慢性白血病及红白血病。3 3）脾切除后）脾切除后 4 4红细胞内出现异常结构红细胞内出现异常结构（1 1）嗜碱性点彩红细胞（嗜碱性点彩红细胞（basophilic basophilic stippling cellstippling cell）：重金属损伤细胞膜）：重金属损伤细胞膜使嗜碱性物质凝集。嗜碱性物质变性，使嗜碱性物质凝集。嗜碱性物质变性，血红蛋白合成过程中，原卟啉与亚铁结血红蛋白合成过程中，原卟啉与亚铁结合受阻，以合受阻，以铅铅的作用最为明显，常作为的作用最为明显，常作为铅中毒铅中毒诊断筛选指标。诊断筛选指标。（1 1）豪焦

41、小体豪焦小体(Howell(HowellJollys body)Jollys body)：又：又称为称为染色质小体染色质小体。见于脾切除术后、无脾症、。见于脾切除术后、无脾症、脾萎缩、脾功能低下、红白血病和某些贫血患脾萎缩、脾功能低下、红白血病和某些贫血患者；在者；在巨幼细胞贫血巨幼细胞贫血时更易见到。时更易见到。（2 2）卡波环卡波环(Cabot ring)(Cabot ring)：现认为可能是：现认为可能是胞质胞质脂蛋白变性脂蛋白变性，常与豪焦小体同时存在。，常与豪焦小体同时存在。（3）寄生虫：）寄生虫：疟原虫、微疟原虫、微丝蚴、丝蚴、杜利什曼原杜利什曼原虫感染时可虫感染时可见红见红 细胞

42、质内相细胞质内相应病原体。应病原体。四、血细胞比容测定四、血细胞比容测定血细胞比容（血细胞比容（hematocrit,Hct，Ht,HCT 或或packed cell volume,PCV）离心后血液分层离心后血液分层 layer after blood centrifugated 血浆血浆plasm 血小板血小板platlet 白细胞白细胞white cell还原血红蛋白还原血红蛋白reduced hemoglobin 含氧红细胞含氧红细胞oxygen red cell【检测原理】【检测原理】1 1WintrobeWintrobe法法2.2.微量法（微量法（microhematocritmi

43、crohematocrit）3 3血液分析仪法血液分析仪法 Hct=RBC红细胞平均体积（红细胞平均体积（MCV）【方法学评价】【方法学评价】1 1手工法手工法 手工测定血细胞比容的方法较手工测定血细胞比容的方法较多，如折射计法、粘度法、比重测定法、多，如折射计法、粘度法、比重测定法、离心法和离心法和放射性核素法放射性核素法（最准确，（最准确，ICSHICSH定定为参考方法）。为参考方法）。温氏法（温氏法（WintrobeWintrobe法），已属淘汰之列法），已属淘汰之列。微量离心法：微量离心法：WHOWHO定为首选常规方法定为首选常规方法。2 2血液分析仪法血液分析仪法 目前目前常用方法。

44、常用方法。注意：注意：当患者为红细胞增多症或血浆渗透压异常当患者为红细胞增多症或血浆渗透压异常时，仪器法常会出现误差。时，仪器法常会出现误差。【质量控制】【质量控制】1.1.手工法手工法 避免以下因素：避免以下因素：抗凝剂量抗凝剂量不不准确，准确，混匀混匀不充分，不充分，离心离心速度不够。速度不够。2.2.血液分析仪法血液分析仪法 注意注意HctHct是否与红细是否与红细胞计数和红细胞平均体积测定值的胞计数和红细胞平均体积测定值的相相关性关性。【参考值】【参考值】WintrobeWintrobe法：法：男性男性0.40.40.540.54女性女性0.370.370.47 0.47 微量法：微量

45、法：男性男性0.470.470.040.04女性女性0.420.05【临床意义】【临床意义】1 1用于计算红细胞用于计算红细胞3 3个平均指数个平均指数2 2评估血浆容量稀释浓缩程度评估血浆容量稀释浓缩程度五、红细胞平均指数五、红细胞平均指数红细胞平均容积红细胞平均容积（mean corpuscular volume,mean corpuscular volume,MCVMCV），指每个红细胞平均体积的大小，以），指每个红细胞平均体积的大小，以飞飞升（升（flfl）为单位为单位红细胞血平均红蛋白含量红细胞血平均红蛋白含量(mean corpuscular(mean corpuscular he

46、moglobin,MCH)hemoglobin,MCH)，指每个红细胞内平均所含，指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量，以血红蛋白的量，以皮克（皮克（pgpg）为单位为单位红细胞平均血红蛋白浓度红细胞平均血红蛋白浓度(mean corpuscular Hemoglobin concentration,MCHCMCHC)，指平均，指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度每升红细胞中所含血红蛋白浓度（g/Lg/L）。1 1手工法手工法 对同一抗凝血标本同时作对同一抗凝血标本同时作红细胞计数、红细胞计数、血红蛋白测定和血细胞比容测定。血红蛋白测定和血细胞比容测定。（1 1）每升血液中红细胞体积每升血液中红细

47、胞体积 Hct Hct MCV=MCV=（flfl）每升血液中红细胞个数每升血液中红细胞个数 RBC RBC （2 2）每升血液中血红蛋白含量每升血液中血红蛋白含量 Hb Hb MCH=MCH=（pgpg）每升血液中红细胞个数每升血液中红细胞个数 RBC RBC （3 3）每升血液中血红蛋白含量每升血液中血红蛋白含量 Hb Hb MCHC=MCHC=每升血液中血细胞比容每升血液中血细胞比容 Hct 2血液分析仪血液分析仪 能直接导出能直接导出MCV的值的值，再结合仪器直接测定的再结合仪器直接测定的RBC和和Hb，计算出计算出MCH和和MCHC MCH=Hb/RBC MCHC=Hb/RBCMCV

48、【方法学评价】【方法学评价】1.MCV 1.MCV 血液分析仪设定的血液分析仪设定的MCVMCV值最大域值是值最大域值是360fl360fl，可能包含，可能包含红细胞团块红细胞团块，当红细胞凝集，当红细胞凝集如冷凝集综合征可引起如冷凝集综合征可引起MCVMCV假性增高；严重的假性增高；严重的高血糖症（葡萄糖高于高血糖症（葡萄糖高于600mg/L600mg/L）可引起红细）可引起红细胞肿胀，使胞肿胀，使MCVMCV假性增高假性增高。仪器法。仪器法CVCV小于小于1%1%，手工法手工法CVCV在在10%10%左右。左右。2.MCH 2.MCH 高脂血症或白细胞增多症因血浆浊度增高脂血症或白细胞增多

49、症因血浆浊度增加而使加而使MCHMCH假性增高。假性增高。3.MCHC MCHC 手工法手工法MCHCMCHC的测定受到的测定受到HctHct（血浆残留或（血浆残留或出现异常红细胞）和出现异常红细胞）和HbHb（高脂蛋白血症、白细（高脂蛋白血症、白细胞增多症）的影响。胞增多症）的影响。【质量控制】【质量控制】1.1.手工法手工法 红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容的测定必须用同一抗凝血标本，且所测定的数的测定必须用同一抗凝血标本，且所测定的数据必须准确。据必须准确。2.2.血液分析仪法血液分析仪法 必须注意红细胞必须注意红细胞3 3个平均指数个平均指数之间及与红细

50、胞计数、血红蛋白、血细胞比容之间及与红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容测定测定3 3个指标之间的个指标之间的相互关联性相互关联性。3.用于用于XB分析法或浮动均值法分析法或浮动均值法血液分析仪的质量血液分析仪的质量控制：控制：MCHC是最为稳定的指标是最为稳定的指标；任何一个参；任何一个参数如有数如有3次次3%,或连续五次有或连续五次有2%3%的变异，的变异，即表明仪器失控。用浮动均值法进行质控，即表明仪器失控。用浮动均值法进行质控，每每天标本天标本60份。份。【参考值】【参考值】手工法：手工法：MCV 80MCV 8092fl92fl；MCH 27MCH 2731pg31pg；MCHCMCHC