心梗脑梗心肌损伤培训课件.ppt

1、冠状动脉结扎过程冠状动脉结扎过程：大鼠，ip 戊巴比妥钠45 ml/kg麻醉，气管内插管，接人工呼吸机（65次/分，8-10 ml/次）。连接微电脑生理记录仪，描记正常II导联心电图（ECG）。沿前正中线切开胸骨前皮肤，暴露2-5肋，连同肋骨一起结扎肋下动脉，紧靠胸骨旁左缘处用纯头剪刀剪开5、4、3肋。暴露心脏，轻捏右胸廓，抵压左胸背部肋骨挤出心脏。找到肺动脉圆椎，拨起左心房（耳）根部。结扎冠状动脉：用5/0号丝线，在肺动脉圆椎右缘、平左心耳下缘1-2 mm处冠状静脉走行处浅层心肌用小圆针穿线、结扎。记录结扎时间。将心脏纳入胸腔，缝合切口，停止人工呼吸。记录ECG，观察S-T段变化。缺血6 小

2、时时，再次记录ECG。取下心脏，用NBT染色法测心肌梗塞范围，心室内取血，离心制备血清，用比色法测血清乳酸脱氢酶（LDH）含量。心梗脑梗心肌损伤10/23/20221心梗测定指标 心电图心电图（ECG）记录记录：用微电脑生理记录仪记录结扎前、结扎后10 min、结扎后6 h的II导联ECG,观察S-T段变化。心肌梗塞范围测定心肌梗塞范围测定：于结扎后6 h取下心脏，剪去心房，将心室横切为3-4片，立即置0.5%NBT(溶在0.1 mmol/L磷酸缓冲液中，pH 7.4)溶液中，37 孵2 min,以拒染部分为梗塞区，蓝染部分为未梗塞区（见图1），剪下拒染部分心肌，称重，计算该部分心肌占心室全重

3、的%，作为心肌梗塞范围，如下式：心肌梗塞范围/%=100%心梗脑梗心肌损伤10/23/20222冠冠状状动动脉脉结结扎扎部部位位心梗脑梗心肌损伤10/23/20223大鼠心梗大鼠心梗NBT染色染色心梗脑梗心肌损伤10/23/20224大鼠心梗大鼠心梗ECG变化变化心梗脑梗心肌损伤10/23/20225心室内压及心室收缩功能曲线心室内压及心室收缩功能曲线心梗脑梗心肌损伤10/23/20226脑缺血模型的复制方法 颈外血管阻断法（双侧颈总动脉夹闭，沙土鼠结扎一例颈总动脉，双侧颈总动脉夹闭加放血,双侧颈总动脉夹闭加一例或两侧椎动脉结扎)颅内动脉阻塞法 主要是大脑中动脉的阻塞(直接暴露大脑中动脉电凝或

4、结扎),穿线法阻断大脑中动脉（02mm的尼龙线）栓子法:脑表面血管阻塞法 血管周围注射促凝剂 应用光敏剂 心梗脑梗心肌损伤10/23/20227MCA解剖心梗脑梗心肌损伤10/23/20228心梗脑梗心肌损伤10/23/20229大鼠大脑中动脉（大鼠大脑中动脉（MCAMCA）血栓形成模型血栓形成模型 模型制备：模型制备：大鼠术前禁食12小时。0.3%戊巴比妥钠(30 mg/kg)腹腔注射麻醉。右侧卧位固定，沿左眼外眦与左外耳道连线中点垂直线做一约2 cm纵切口，钝性分离颞肌，咬去颧弓，撑开颞颌关节，在蝶骨大翼处用牙科钻打薄骨质，牙科探针挑去骨片，开一约4 mm3 mm骨窗，可见大脑中动脉沿嗅束

5、垂直走行。取3 mm长4号手术丝线，浸50%FeCl3 10 L，将此丝线置MCA嗅束-大脑下静脉之间，即置MCA中段表面，损伤血管诱导血栓形成，每5分钟重置一根，20分钟后除去丝线，用生理盐水洗净创面，缝合皮肤伤口。心梗脑梗心肌损伤10/23/202210指标检测：指标检测：神经损伤症状检测：神经损伤症状检测：术后待大鼠清醒后及24小时进行脑缺血行为评分，按以下标准进行：尾部倒提时，患侧上肢内收，肩外旋，4分；向对侧推左（右）上肢，患侧抵抗力下降，1-3分；将上肢置金属网上，患侧肌张力下降，1-3分；向患侧旋转，1分。总分11分。心梗脑梗心肌损伤10/23/202211梗塞面积梗塞面积：术后

6、24小时将大鼠断头取脑，去除小脑，肉眼可见MCA中段呈黑色，血栓形成。沿冠状面切四刀，切成3 mm厚脑片，将脑片置2%TTC(红四氮唑）溶液中，37温孵30 min染色,用图象分析仪摄像，计算梗死灶(未着色区)面积，脑梗塞面积以梗死灶面积与脑总面积百分比表示。心梗脑梗心肌损伤10/23/202212脑含水量脑含水量：脑片TTC染色摄像后，沿正中矢状线将脑片切为左右两半，取左侧(病变区)及右侧(无病变区)皮质，分别称取左右大脑的湿重，60 96h干至恒重，称干重，计算脑含水量。脑含水量（湿重干重）/湿重100%心梗脑梗心肌损伤10/23/202213正常正常MCA位置位置心梗脑梗心肌损伤10/2

7、3/202214氯化铁致右侧氯化铁致右侧MCA血栓形成血栓形成心梗脑梗心肌损伤10/23/202215大鼠脑梗大鼠脑梗 TTC TTC染色染色未着色区为梗塞区未着色区为梗塞区心梗脑梗心肌损伤10/23/202216异丙肾上腺素诱发大鼠心肌肥厚 SD大鼠，体重136.511.2 g，随机分为4组：生理盐水对照组，异丙肾上腺素(ISO)组，给药前准确称大鼠体重，麻醉状态下描记大鼠标准导联、单极加压肢体导联及CR和CL胸前导联ECG，将心电图异常的动物剔除，然后ISO组用ISO（0.02 mg/kg）sc，每日2次，共6 wk。给药6 wk时，末次给药24 h后，在麻醉状态下描记心电图，然后迅速剖取

8、心脏，用滤纸拭干血液，称取全心重、心室重、左心室重、右心室重和室间隔重，以上均为湿重，测量右心室壁厚、左心室游离壁厚和室间隔厚，取左心室心尖部分组织做常规病理切片，余左心室组织置4冰箱保存，待后供SOD活性和MDA含量测定用。心梗脑梗心肌损伤10/23/202217结果 大鼠心肌肥厚模型中，持续给异丙肾上腺素6周，可使大鼠的心电图J点异常抬高，病检显示大鼠心肌细胞广泛损伤，同时使全心重/体重（hw/bw）、左心室重/体重（lvw/bw）和室间隔重/体重（vsw/bw）增加，左室游离壁和室间隔厚度增加，心梗脑梗心肌损伤10/23/202218异丙肾上腺素异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚诱导大鼠心肌肥厚病理组织学变化病理组织学变化 光镜下光镜下ISO组大鼠心肌损害多表现心肌组大鼠心肌损害多表现心肌灶性坏死融合，在坏死灶处可见毛细灶性坏死融合，在坏死灶处可见毛细血管扩张，间质水肿，白细胞和组织血管扩张，间质水肿，白细胞和组织细胞浸润细胞浸润。心梗脑梗心肌损伤10/23/202219异丙肾上腺素性心肌损伤异丙肾上腺素性心肌损伤心梗脑梗心肌损伤10/23/202220