水中细菌学测定课件.ppt

1、水中的细菌学测定水中的细菌学测定 GB/T5749-2019 GB/T5749-2019 中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准生活饮用水标准检验方法检验方法（20192019年年7 7月月1 1日执行日执行）规定生活饮用水中微生物）规定生活饮用水中微生物指标及限制为指标及限制为:细菌总数（细菌总数（CFU/mLCFU/mL）不得超过）不得超过100100个；个；总大肠菌群（总大肠菌群（MPN/100mL MPN/100mL 或或CFU/100mLCFU/100mL）不得检出；）不得检出；耐热大肠菌群（耐热大肠菌群（MPN/100mL MPN/100mL 或或CFU/10

2、0mLCFU/100mL）不得检出；）不得检出；大肠埃希氏菌（大肠埃希氏菌（MPN/100mL MPN/100mL 或或CFU/100mLCFU/100mL）不得检出。）不得检出。注：注：MPNMPN表示最可能数；表示最可能数；CFUCFU表示菌落形成单位。当水样检出总大肠菌群时，表示菌落形成单位。当水样检出总大肠菌群时，应进一步检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群；水样未检出总大肠菌群，不应进一步检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群；水样未检出总大肠菌群，不必检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群。必检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群。一、水样的采集一、水样的采集 1.1.采水容器采水容器 采样瓶的洗涤采样瓶的洗涤

3、 采样瓶的灭菌采样瓶的灭菌:160:160170170干热灭菌干热灭菌2h2h，或用高压蒸，或用高压蒸汽灭菌器，汽灭菌器，121121灭菌灭菌15min15min 采样瓶：具磨口玻塞的采样瓶：具磨口玻塞的500mL500mL广口瓶广口瓶2.采样步骤及注意事项采样步骤及注意事项(1)(1)去氯和高浓度重金属：灭菌前按去氯和高浓度重金属：灭菌前按500mL500mL采样瓶加入采样瓶加入0.3mL10%Na0.3mL10%Na2 2S S2 2O O3 3溶液溶液(2)(2)采集江、河、湖、库等地表水样时，可握住瓶子下部直接将已灭菌的采集江、河、湖、库等地表水样时，可握住瓶子下部直接将已灭菌的带塞采

4、样瓶插入水中，约距水面带塞采样瓶插入水中，约距水面101015cm15cm处采集处采集（3 3）采集一定深度的水样时，可使用单层采水器或深层采水器）采集一定深度的水样时，可使用单层采水器或深层采水器（4 4）从自来水龙头采集样品时，采水前可先将水龙头打开至最大，放水）从自来水龙头采集样品时，采水前可先将水龙头打开至最大，放水3 35min5min，用酒精灯火焰灼烧约，用酒精灯火焰灼烧约3min3min灭菌灭菌（5 5）在同一采样点进行分层采样时，应自上而下进行，以免不同层次的搅）在同一采样点进行分层采样时，应自上而下进行，以免不同层次的搅扰；同一采样点与理化监测项目同时采样时，应先采集细菌学检

5、验样品扰；同一采样点与理化监测项目同时采样时，应先采集细菌学检验样品（6 6）采样完毕，做好记录）采样完毕，做好记录 二、样品保存二、样品保存 采好的水样，应迅速运往实验室，进行细菌学检验。一采好的水样，应迅速运往实验室，进行细菌学检验。一般从取样到检验不宜超过般从取样到检验不宜超过2h2h，否则应使用，否则应使用1010以下的冷以下的冷藏设备保存样品，但不得超过藏设备保存样品，但不得超过6h6h。三、三、细菌总数的测定细菌总数的测定 细菌总数：指细菌总数：指lmLlmL水样在营养琼脂培养基中，水样在营养琼脂培养基中，于于3737培养培养24h24h后，所生长细菌菌落的总数后，所生长细菌菌落的

6、总数。（一）细菌总数测定的意义（一）细菌总数测定的意义 可以反映水体有机污染的程度可以反映水体有机污染的程度 生活饮用水的细菌总数生活饮用水的细菌总数lmLlmL不得超过不得超过100100个个 （二）物品准备及培养基的制作（二）物品准备及培养基的制作（三）测定步骤（三）测定步骤 稀释度选择及菌落总数报告方式稀释度选择及菌落总数报告方式例例次次不同稀释度的平均菌落数不同稀释度的平均菌落数两个稀释度两个稀释度菌落数之比菌落数之比菌落总数菌落总数/CFUmL/CFUmL-1-1报告方式报告方式/CFUmLCFUmL-1-11010-1-11010-2-21010-3-31 12 23 34 45

7、56 61 3651 3652 7602 7602 8902 890无法计算无法计算2727无法计算无法计算1641642952952712711 6501 65011113053052020464660605135135 512121.61.62.22.216 40016 40037 75037 75027 10027 100513 000513 00027027030 50030 50016 00016 000或或1.61.610104 438 00038 000或或3.83.810104 427 00027 000或或2.72.710104 4510 000510 000或或5.15.1

8、10105 5270270或或2.72.710102 231 00031 000或或3.13.110104 4两位以后的数字采取四舍六入五单双的原则取舍。两位以后的数字采取四舍六入五单双的原则取舍。（四）菌落计数（四）菌落计数（五）计算和报告计数结果（五）计算和报告计数结果 细菌总数是以每个平皿菌落的总数或平均数细菌总数是以每个平皿菌落的总数或平均数(例如同一稀释度例如同一稀释度两个重复平皿的平均数两个重复平皿的平均数)乘以稀释倍数而得来的。各种不同情乘以稀释倍数而得来的。各种不同情况的计算方法如下：况的计算方法如下：首先选择平均菌落数在首先选择平均菌落数在3030300300之间者进行计算，

9、当只有一之间者进行计算，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平均菌落数乘其个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平均菌落数乘其稀释倍数报告稀释倍数报告(见例见例1)1)。若有两个稀释度，其平均菌落数均在若有两个稀释度，其平均菌落数均在3030300300之间，则应按之间，则应按二者之比值来决定。若其比值小于二者之比值来决定。若其比值小于2 2应报告两者的平均数，若应报告两者的平均数，若大于大于2 2则报告其中较小的数值则报告其中较小的数值(见例见例2 2、例、例3)3)。若所有的稀释度的平均菌落数均大于若所有的稀释度的平均菌落数均大于300300，则应按稀释倍数，则应按稀释倍数最

10、大的平均菌落数乘以稀释倍数报告最大的平均菌落数乘以稀释倍数报告(见例见例4)4)。若所有稀释度的平均菌落数均小于若所有稀释度的平均菌落数均小于3030，则应按稀释倍数最小，则应按稀释倍数最小的平均菌落数乘以稀释倍数报告的平均菌落数乘以稀释倍数报告(见例见例5)5)。若所有稀释度的平均菌落数均不在若所有稀释度的平均菌落数均不在3030300300之间，则以最接之间，则以最接近近300300或或3030的平均菌落数乘稀释倍数报告（例的平均菌落数乘稀释倍数报告（例6)6)。菌落计数的报告：菌落数在菌落计数的报告：菌落数在100100以内时按实有数报告；大于以内时按实有数报告；大于100100时，采用

11、二位有效数字，用时，采用二位有效数字，用1010的指数来表示。在报告菌落的指数来表示。在报告菌落数为数为“无法计数无法计数”时，应注明水样的稀释度。时，应注明水样的稀释度。二、二、水中总大肠菌群的测定水中总大肠菌群的测定 总大肠菌群总大肠菌群:指能在指能在37 48h37 48h之内发酵乳糖产酸产气的、之内发酵乳糖产酸产气的、需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽孢杆菌。需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽孢杆菌。主要包括有埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、克雷主要包括有埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属等菌属的细菌。伯氏菌属等菌属的细菌。（一）测定意义（一）测定意义 作为水体受粪便污染

12、的指标。作为水体受粪便污染的指标。生活饮用水的总大肠菌群数每生活饮用水的总大肠菌群数每100100升不得检出升不得检出v伊红美兰特殊培养基上能够长出具有典型特征的菌落伊红美兰特殊培养基上能够长出具有典型特征的菌落 检检 样样稀稀 释释乳糖胆盐发酵管乳糖胆盐发酵管(361)，(242)h不产气不产气总大肠菌群阴性总大肠菌群阴性产产 气气报报 告告伊红美蓝琼脂平板（伊红美蓝琼脂平板（361），（，（18-24）h乳糖发酵管（乳糖发酵管（361），（，（242）h革兰氏染色革兰氏染色大肠菌群阴性大肠菌群阴性产气产气不产气不产气报报 告告大肠杆菌阳性大肠杆菌阳性报报 告告报报 告告大肠杆菌阴性大肠杆菌

13、阴性革兰氏阴性无芽孢杆菌革兰氏阴性无芽孢杆菌革兰氏阳性革兰氏阳性1 1、初发酵试验、初发酵试验（二）测定步骤（二）测定步骤3.3.计算和报告结果计算和报告结果 查查MPNMPN表，按总大肠菌群的计算方法计算每表，按总大肠菌群的计算方法计算每100mL100mL水中总大肠水中总大肠菌群细菌的菌群细菌的MPNMPN值值 三、三、耐热大肠菌群测定耐热大肠菌群测定总大肠菌群（总大肠菌群（+管）管）EC培养基培养基1滴滴不产气不产气（）性）性44.5 242h44.5 1824h产气产气伊红美兰伊红美兰培养基培养基典型菌落典型菌落（+性）性）四、四、大肠埃希氏菌测定大肠埃希氏菌测定总大肠菌群（总大肠菌群

14、（+管）管）ECMUG培养基培养基1滴滴44.5 242h暗处暗处紫外光灯照射紫外光灯照射366nm功率为功率为6W显示篮色荧光为（显示篮色荧光为（+性）性）卫生细菌学检验卫生细菌学检验1 1、要求、要求 团队成员可以自由组合；团队成员可以自由组合；各组自主选择受检对象；制定检验流程和工作方案，从准备到各组自主选择受检对象；制定检验流程和工作方案，从准备到报告全程由小组内部控制，分工合作完成。报告全程由小组内部控制，分工合作完成。2 2、注意事项、注意事项 分析前一阶段分步实验中存在的问题及原因，避免再次出现遗分析前一阶段分步实验中存在的问题及原因，避免再次出现遗漏失误；漏失误；分工要明确，落

15、实要到位。分工要明确，落实要到位。3 3、署名、署名 最终报告作者以团队集体署名。最终报告作者以团队集体署名。工作方案制定工作方案制定流程流程项目项目数量及期限要求数量及期限要求责任人责任人准备工作准备工作平皿平皿试管试管移液管移液管培养基培养基无菌水、采样瓶无菌水、采样瓶灭菌灭菌采样、接种和培养采样、接种和培养采样及记录采样及记录稀释及接种稀释及接种培养基融化及倒培养基培养基融化及倒培养基培养及条件调控培养及条件调控计数、分离和培养计数、分离和培养菌落计数菌落计数培养基融化培养基融化伊红美兰平板制备伊红美兰平板制备阳性管的划线分离阳性管的划线分离培养及条件调控培养及条件调控染色染色试剂准备试

16、剂准备染色及镜检染色及镜检报告报告结果汇总与数据统计处理结果汇总与数据统计处理报告报告）“和而不同”，多元发展。近年来，中医药在防治非典、禽流感和艾滋病方面发挥的独特作用也证实了二者的有机结合，具有肯定的临床疗效。编辑本段东西方医学交融（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）不管是中医学还是西医学，从二者现有的思维方式的发展趋势来看，均是走向现代系统论思维，中医药学理论与现代科学体系（45传染病q566丙肝964jo乙肝28jgsx甲肝gh）之间具有系统同型性，属于本质相同而描述表达方式不同的两种科学形式。可望在现代系统论思维上实现交融或统一，成为中西医在新的发展水平上实现交融慢性胃

17、炎分类慢性胃炎分类慢性胃炎的命名很不统一。依据不同的诊断方法而有慢性浅表性胃炎、慢性糜烂性胃炎、慢性萎缩性胃炎、慢性胆汁返流性胃炎、慢性疣性胃炎、药物性胃炎、乙醇性胃炎等等。慢性胃炎大体可分为三种类型：慢性肥厚性胃炎、慢性浅表性胃炎以及慢性萎缩性胃炎。慢性肥厚性胃炎在临床上较为少见，一般也不会发生癌变。慢性浅表性胃炎主要是指胃粘膜的浅表性炎症，这类炎症主要表现为胃粘膜的固有膜宽度增大并伴有水肿，被炎症细胞浸润，但胃腺体多属正常这类胃炎在临床上较多见，一般也不会发生癌变。只要经过恰当治疗之后，炎症可消退，但如治疗不当，往往可发展成萎缩性慢性胃炎慢性萎缩性胃炎是指胃粘膜除有浅表性胃炎病变外，胃腺体

18、明显减少，脉管间隙扩大，胃粘膜层有全层性细胞浸润，常伴有肠上皮化生，即胃型上皮变为肠型上皮这种性质的慢性胃炎与胃癌的关系密切，特别是有肠上皮化生者更是如此或统一的支撑点，希冀籍此能给（df高血压958心脏病983u6糖尿病87fr）中医学以至生命科学带来良好的发展机遇，进而对医学理论带来新的革命。在胃镜问世以前，胃炎的主要诊断依据是依靠临床症状和上消化道钡餐检查。随着纤维胃镜的临床应用，特别是经胃镜对胃粘膜的活组织检查，对越来越多的胃炎有了较明确的认识。1982年，国内胃炎会议上根据国内外经验，将慢性胃炎分为浅表性和萎缩性两大类。而在浅表性胃炎的命名上，又常常使用病理、部位、形态等含义的词，如

19、“慢性疣状胃炎”、“慢性出血性胃炎”、“慢性糜烂性胃炎”、“慢性胆汁反流性胃炎”等等。1990年8月，在澳大利亚悉尼召开的第九届世界胃肠病学大会上，又提出了新的胃炎分类法，它由组织学和内镜两部分组成，组织学以病变部位为核心，确定3种基本诊断：急性胃炎；慢性胃炎；特殊类型胃炎。加上前缀病因学诊断和后缀形态学描述，并对炎症、活动度、萎缩、肠化、幽门螺杆菌感染分别给予程度分级。内镜部分以肉眼所见描述为主，分别区分病变程度。1慢性糜烂性胃炎慢性糜烂性胃炎 内镜下常表现为多发性点状或阿弗他溃疡。慢性非糜烂性胃炎可为特发性，也可由药物(特别是阿司匹林和非甾体类消炎药，参见消化性溃疡的治疗部分)，克罗恩病或

20、病毒感染所引起。幽门螺杆菌可能在此不发挥重要作用。症状多为非特异性的，可包括恶心，呕吐和上腹部不适。内镜下显示在增厚的皱襞隆起边缘有点状糜烂，中央有白斑或凹陷。组织学变化多样。尚无某种方法具有广泛疗效或可治愈。治疗多为对症治疗，药物包括制酸剂，H2拮抗剂和质子泵。2慢性胃炎的癌变慢性胃炎的癌变 对于胃溃疡发生癌变，人们比较容易理解，但对于有些类型的慢性胃炎也会发生癌变，许多人会感到不可思议然而，慢性萎缩性胃炎发生癌变却是事实编辑本段现代中医史（df4肺炎88gdg青霉素d25f肝炎df6）轴心时代中、西医学的峰巅之作。雅斯贝而斯曾说：“如果历史有一个轴心，那么我们就必须将这轴心作为一系列对全部人类都有意义的事件，发生于公元前800至200年间的这种精神历程似乎构成了这样一个轴心。本文档下载后可以修改编辑，欢迎下载收藏。