1、GG兼性厌氧杆菌兼性厌氧杆菌第一节第一节 肠杆菌科(有肠杆菌科(有2828个属)个属)共同特征:共同特征:1 1G G中等大小杆菌,运动者周身鞭毛,无芽胞,中等大小杆菌,运动者周身鞭毛,无芽胞,无荚膜(个别有),非抗酸染色。无荚膜(个别有),非抗酸染色。2 2需氧兼性厌氧,普通培养基上生长好。需氧兼性厌氧,普通培养基上生长好。3 3糖发酵产酸(糖发酵产酸(+)或产酸产气。)或产酸产气。4 4接触酶阳性(志贺氏菌除外)。接触酶阳性(志贺氏菌除外)。5 5硝酸盐还原试验阳性(欧文氏菌除外)硝酸盐还原试验阳性(欧文氏菌除外)6 6在含在含0.5%0.5%胆盐的培养基上生长。胆盐的培养基上生长。G兼性
2、厌氧杆菌2G兼性厌氧杆菌3(二)培养特性(二)培养特性1 1普通培养基上:生长良好,普通培养基上:生长良好,37 2437 24h h 形成圆形,形成圆形,光滑,隆起,湿润,半透明灰白色菌落。光滑,隆起,湿润,半透明灰白色菌落。2 2普通肉汤:均匀浑浊,管底有粘性沉淀,管壁普通肉汤:均匀浑浊,管底有粘性沉淀,管壁有菌环。有菌环。3 3麦康凯琼脂:红色菌落(沙门氏菌无色)麦康凯琼脂:红色菌落(沙门氏菌无色)原理,麦康凯平板含有乳糖有胆盐,分解乳糖的细原理,麦康凯平板含有乳糖有胆盐,分解乳糖的细菌产酸使指示剂变红,胆盐有利于肠杆菌科细菌生菌产酸使指示剂变红,胆盐有利于肠杆菌科细菌生长,对其它菌有抑
3、制作用。长,对其它菌有抑制作用。G兼性厌氧杆菌4大肠杆菌微菌落照片大肠杆菌微菌落照片 G兼性厌氧杆菌5大肠杆菌革兰氏染色照片大肠杆菌革兰氏染色照片大肠杆菌平板菌落照片大肠杆菌平板菌落照片G兼性厌氧杆菌64 4伊红美蓝琼脂:黑色带金属闪光的菌落(沙门伊红美蓝琼脂:黑色带金属闪光的菌落(沙门氏菌无色)。氏菌无色)。原理:伊红,美兰均为指示剂,又能抑原理:伊红,美兰均为指示剂,又能抑G+G+生长,含生长,含有乳糖。大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷,有乳糖。大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷,染上红色,再与美兰结合形成紫黑色菌落,不分解染上红色,再与美兰结合形成紫黑色菌落,不分解乳糖不着色,伊红美蓝
4、不结合,故沙门氏菌无色。乳糖不着色,伊红美蓝不结合,故沙门氏菌无色。5 5远藤氏琼脂:带金属光泽的红色菌落。远藤氏琼脂:带金属光泽的红色菌落。G兼性厌氧杆菌7G兼性厌氧杆菌8(三)生化特征(三)生化特征G G 乳乳 麦麦 蔗蔗 靛基质实验:靛基质实验:+(I I);MR MR(甲基红试验)甲基红试验)+(M M)VPVP(乙酰甲基醇)(乙酰甲基醇)(ViVi););柠檬酸基利用试验(柠檬酸基利用试验(C C)I M Vi C +I M Vi C +硝酸盐还原试验硝酸盐还原试验+、H H2 2S S、尿素分解尿素分解三糖铁:斜面黄色三糖铁:斜面黄色/底部黄色,不产生底部黄色,不产生H H2 2S
5、 S。G兼性厌氧杆菌9G兼性厌氧杆菌102 2K K抗原:位于菌体表面的荚膜或被膜中,在抗原:位于菌体表面的荚膜或被膜中,在8080种种K K抗原中,除抗原中,除K88K88,K99K99是两种蛋白质抗原外,其余是两种蛋白质抗原外,其余均为多糖。具有均为多糖。具有K K抗原的菌株不能被其相应的抗抗原的菌株不能被其相应的抗O O血血清所凝集叫清所凝集叫“O O不凝集性不凝集性”。因为。因为K K抗原可抑制活细抗原可抑制活细菌在相应抗菌在相应抗O O血清中的凝集反应,这样可作为判定血清中的凝集反应,这样可作为判定大肠杆菌是否具有大肠杆菌是否具有K K抗原的一个标准。抗原的一个标准。据耐热性不同,据
6、耐热性不同,K K抗原又分为:抗原又分为:L L、A A、B B 三型。三型。G兼性厌氧杆菌11L L型型K K抗原:对热敏感抗原:对热敏感100 1100 1h h破坏其抗原性,并失去破坏其抗原性,并失去与相应抗体的结合力和凝集性,位于被膜中,偶见于与相应抗体的结合力和凝集性,位于被膜中,偶见于荚膜中。荚膜中。A A型型K K抗原:耐抗原:耐100 1100 1h h,但但121 2.5121 2.5h h破坏其抗原破坏其抗原性和性和O O不凝集不凝集 性,但保留与相应抗体结合能力。位于性,但保留与相应抗体结合能力。位于荚膜中,抗荚膜中,抗A A血清可使具有相应血清可使具有相应A A抗原的菌
7、体出现荚膜抗原的菌体出现荚膜肿胀现象。肿胀现象。B B型型K K抗原:抗原:100 1100 1h h 破坏其抗原性与相应抗体的凝破坏其抗原性与相应抗体的凝集性,但保留其与相应抗体结合力。集性,但保留其与相应抗体结合力。G兼性厌氧杆菌12G兼性厌氧杆菌13(五)致病性(五)致病性 大多数是在正常条件下不致病的共栖菌,但特大多数是在正常条件下不致病的共栖菌,但特定条件下,如移位侵入肠外组织或器官可致肠杆定条件下,如移位侵入肠外组织或器官可致肠杆菌病;但也有极少数是病原性大肠杆菌。菌病;但也有极少数是病原性大肠杆菌。G兼性厌氧杆菌14G兼性厌氧杆菌15(一)产肠毒素大肠杆菌:由粘附表性菌毛和肠毒素
8、两类毒力(一)产肠毒素大肠杆菌:由粘附表性菌毛和肠毒素两类毒力因子构成,具致病力与二者密切相关,缺一不可。因子构成,具致病力与二者密切相关,缺一不可。1 1粘附素性菌毛:又叫粘附素或定居因子,其对应的抗原叫粘附素性菌毛:又叫粘附素或定居因子,其对应的抗原叫粘附素抗原或定居因子抗原。已发现的粘附素有粘附素抗原或定居因子抗原。已发现的粘附素有F4F4(K K8888)、)、F F5 5(K K9999)、)、F6F6(987P987P),),F F4141,F F4242,F F1717。它不是导致宿主腹泻的它不是导致宿主腹泻的直接致病因子,但是构成直接致病因子,但是构成ETECETEC感染的重要
9、毒力因子。感染的重要毒力因子。ETECETEC必必须首先粘附于宿主的小肠上皮细胞,才能避免肠蠕动和肠液分须首先粘附于宿主的小肠上皮细胞,才能避免肠蠕动和肠液分泌的清除作用,并得以在肠内定居和繁殖,进而发挥致病作用。泌的清除作用,并得以在肠内定居和繁殖,进而发挥致病作用。2 2 在体内或体外生长时产生并分泌到细胞外的一种蛋白质毒在体内或体外生长时产生并分泌到细胞外的一种蛋白质毒素,根据对热的耐受性不同分为:素,根据对热的耐受性不同分为:G兼性厌氧杆菌16不耐热肠毒素(不耐热肠毒素(LTLT):):65 30min65 30min灭活,有抗原性。作用于小灭活,有抗原性。作用于小 肠和兔回肠引起肠液
10、积蓄,引起水样腹泻。肠和兔回肠引起肠液积蓄,引起水样腹泻。耐热肠毒素(耐热肠毒素(STST):):100 30min100 30min不灭活,无抗原性。又可分为:不灭活,无抗原性。又可分为:STaSTa:来源猪,牛来源猪,牛STST:对人和猪、牛、羊均有肠毒性。对人和猪、牛、羊均有肠毒性。ST bST b:来源于人来源于人STST:仅在猪源仅在猪源ETECETEC中产生。中产生。ETECETEC的致病机理:通过口腔进入宿主的小肠,以其菌毛粘附素黏的致病机理:通过口腔进入宿主的小肠,以其菌毛粘附素黏附于肠粘膜上,以抵御肠蠕动和流动肠液的冲刷作用,从而定居附于肠粘膜上,以抵御肠蠕动和流动肠液的冲刷
11、作用,从而定居于肠内,大量繁殖。此时大量产生并释放肠毒素,对其靶细胞产于肠内,大量繁殖。此时大量产生并释放肠毒素,对其靶细胞产生毒性作用。导致肠绒毛细胞吸收功能降低,造成在肠管内水和生毒性作用。导致肠绒毛细胞吸收功能降低,造成在肠管内水和电解质大量积蓄,引起水样腹泻和迅速脱水。电解质大量积蓄,引起水样腹泻和迅速脱水。G兼性厌氧杆菌17(二)产类志贺毒素大肠杆菌(二)产类志贺毒素大肠杆菌(SLTECSLTEC)又称产又称产VeroVero细胞毒素大肠杆菌,系一类在体内或体细胞毒素大肠杆菌,系一类在体内或体外生长可产生类志贺毒素的病原性大肠杆菌。可致外生长可产生类志贺毒素的病原性大肠杆菌。可致猪的
12、水肿,以头部,肠素膜和胃壁浆液性水肿为特猪的水肿,以头部,肠素膜和胃壁浆液性水肿为特征,常伴有共济失调,麻痹或惊厥等神经症状,发征,常伴有共济失调,麻痹或惊厥等神经症状,发病率低但致死率高,有两类毒力因子:病率低但致死率高,有两类毒力因子:1 1粘附性菌毛:粘附性菌毛:F18F18,它有助于细菌在猪肠粘膜上它有助于细菌在猪肠粘膜上皮细胞定居和繁殖。皮细胞定居和繁殖。G兼性厌氧杆菌18G兼性厌氧杆菌19(六)微生物诊断(六)微生物诊断1 1取材:肠系膜淋巴结,心,肝,脾,涂片染色镜检:取材:肠系膜淋巴结,心,肝,脾,涂片染色镜检:G G中等中等大小杆菌。大小杆菌。2 2分离培养:接种麦康凯平板和
13、血平板划线分离,挑取麦康凯分离培养:接种麦康凯平板和血平板划线分离,挑取麦康凯上的红色菌落或血平板上呈上的红色菌落或血平板上呈溶血的菌落(仔猪黄痢与水肿病菌溶血的菌落(仔猪黄痢与水肿病菌株)进行以下生化实验。株)进行以下生化实验。3 3三糖铁:斜面黄色三糖铁:斜面黄色/底部黄色,有气体产生。底部黄色,有气体产生。4 4接种普通肉汤:接种普通肉汤:24362436h h 均匀混浊,底部有粘稠沉淀,液面有均匀混浊,底部有粘稠沉淀,液面有菌环。菌环。5 5生化试验:生化试验:G G 蔗蔗 麦麦 乳乳 IMViCIMViC +-+-6 6动物致病性试验:动物致病性试验:2424h h 肉汤培养小白鼠腹
14、腔肉汤培养小白鼠腹腔0.2-0.40.2-0.4mlml,242448h48h小鼠死亡。小鼠死亡。G兼性厌氧杆菌207 7对对ETECETEC各种粘附性抗原鉴定:应先将待检菌在各种粘附性抗原鉴定:应先将待检菌在粘附素专用培养基上培养。培养物用已知的各种粘粘附素专用培养基上培养。培养物用已知的各种粘附素单因子血清或克隆抗体作玻板凝集,或用免疫附素单因子血清或克隆抗体作玻板凝集,或用免疫荧光,荧光,ELISAELISA等作其它血清学方法鉴定,也可用等作其它血清学方法鉴定,也可用MRHMRH及其抑制试验及其抑制试验MRHIMRHI以及体外肠上皮细胞吸附与吸附以及体外肠上皮细胞吸附与吸附抑制试验加以鉴
15、定。抑制试验加以鉴定。G兼性厌氧杆菌21G兼性厌氧杆菌22(七)防治(七)防治1 1以抗粘附毒素免疫为基础的含单价或多价菌毛以抗粘附毒素免疫为基础的含单价或多价菌毛抗原的灭活菌苗或亚单位苗。抗原的灭活菌苗或亚单位苗。2 2以抗肠毒素免疫为主的类毒素苗或以抗肠毒素免疫为主的类毒素苗或LI-BLI-B亚单位亚单位苗。苗。3 3表达一种或两种粘附素的基因工程苗表达一种或两种粘附素的基因工程苗 K K8888 K K9999双价基因工程苗。双价基因工程苗。G兼性厌氧杆菌23G兼性厌氧杆菌24(二)培养特性(二)培养特性麦康凯平板:无色菌落,麦康凯平板:无色菌落,伊红美蓝琼脂:无色(大肠杆菌黑色带金属光
16、泽)伊红美蓝琼脂:无色(大肠杆菌黑色带金属光泽)运腾氏:无色(大肠杆菌为红色带金属闪光菌落)。运腾氏:无色(大肠杆菌为红色带金属闪光菌落)。(三)生化特性:(三)生化特性:三糖铁斜面:斜面红色三糖铁斜面:斜面红色/底部黄色(若有底部黄色(若有H H2 2S S产生,底部为黑色)产生,底部为黑色)5 5生化试验:生化试验:G G 蔗蔗 麦麦 乳乳 IMViCIMViC -+-+-+-+G兼性厌氧杆菌25G兼性厌氧杆菌262 2H H抗原:蛋白质性质的鞭毛抗原,有抗原:蛋白质性质的鞭毛抗原,有6363种。种。H H抗抗原可分为第原可分为第1 1相和第相和第2 2相两种。第相两种。第1 1相相H H
17、抗原用小写英抗原用小写英文字母表示,特异性高故称特异相;第文字母表示,特异性高故称特异相;第2 2相抗原用相抗原用阿拉伯数字表示,为许多沙门氏菌所共有故称非特阿拉伯数字表示,为许多沙门氏菌所共有故称非特特异相。多数沙门氏菌有第特异相。多数沙门氏菌有第1 1和第和第2 2两相两相H H抗原称为抗原称为双相菌,常发生位相变异。双相菌,常发生位相变异。例如将一个双相菌在平板上划线在所得菌落中,有例如将一个双相菌在平板上划线在所得菌落中,有的有第的有第1 1相相H H抗原,有的有第抗原,有的有第2 2相相H H抗原。若任意挑取抗原。若任意挑取1 1个菌落,在培养基上多次传代,其后代又可出现个菌落,在培
18、养基上多次传代,其后代又可出现部分是第部分是第1 1相而另一部分是第相而另一部分是第2 2相的菌落,这种两个相的菌落,这种两个相的相的H H抗原可以交相产生的现象称为位相变异。在抗原可以交相产生的现象称为位相变异。在鉴别对只能检出鉴别对只能检出1 1个相,而测不出另一个相。个相,而测不出另一个相。G兼性厌氧杆菌273 3K K抗原:被膜抗原,与毒力有关,又称抗原:被膜抗原,与毒力有关,又称ViVi抗原,抗原,60 160 1h h破坏破坏其凝集性和免疫原性。有其凝集性和免疫原性。有K K抗原的菌株不能相应的抗抗原的菌株不能相应的抗O O血清凝集血清凝集。在多次传代后。在多次传代后K K抗原会丢
19、失。抗原会丢失。用已知的沙门氏菌用已知的沙门氏菌O O和和H H单因子血清作玻板凝集试验,确定一个单因子血清作玻板凝集试验,确定一个沙门氏血清型或抗原,对有沙门氏血清型或抗原,对有K K抗原的还须用抗原的还须用K K抗血清鉴定之。抗血清鉴定之。如鼠伤寒沙门氏菌血清型为:如鼠伤寒沙门氏菌血清型为:1 1,4 4,55,1212i1i1,2 2表示该菌有表示该菌有O O抗原:抗原:1,4,5,12 1,4,5,12 四种;第四种;第1 1相相H H抗原为抗原为I I,若若转变为第转变为第2 2相相H H抗原,则是抗原,则是1 1,2 2;括号中抗原表示该抗源可能无。;括号中抗原表示该抗源可能无。G
20、兼性厌氧杆菌28(五)致病性(五)致病性1 1是一种人畜共患病,最常侵害幼、青年动物使之发生败血症是一种人畜共患病,最常侵害幼、青年动物使之发生败血症,胃肠炎及其他组织局部炎症。成年动物为散发性或局限性,发,胃肠炎及其他组织局部炎症。成年动物为散发性或局限性,发生败血症的怀孕母畜可表现流产。主要传播途径为消化道。生败血症的怀孕母畜可表现流产。主要传播途径为消化道。据其对宿主的嗜好不同分据其对宿主的嗜好不同分3 3种类型种类型有广泛嗜性沙门氏菌:能引起人和各种动物的沙门氏菌病,如有广泛嗜性沙门氏菌:能引起人和各种动物的沙门氏菌病,如 鼠伤寒和肠炎沙门氏菌。鼠伤寒和肠炎沙门氏菌。专嗜性沙门氏菌:只
21、对人或某种动物产生特定的疾病,如鸡白专嗜性沙门氏菌:只对人或某种动物产生特定的疾病,如鸡白 痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和炎鸡发病。痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和炎鸡发病。偏嗜性沙门氏菌:如猪霍乱和都柏林沙门氏菌分别是猪和牛羊偏嗜性沙门氏菌:如猪霍乱和都柏林沙门氏菌分别是猪和牛羊 的强适应性菌,但也能感染其它动物。的强适应性菌,但也能感染其它动物。G兼性厌氧杆菌29(六)免疫性(六)免疫性体液免疫和细胞免疫都起重要作用。体液免疫和细胞免疫都起重要作用。动物注射疫苗后,母牛的初乳和奶中含有特异抗体,动物注射疫苗后,母牛的初乳和奶中含有特异抗体,阻断了细菌对肠道上皮的吸附和穿入,为后代提供抗阻断了细菌对肠
22、道上皮的吸附和穿入,为后代提供抗感染能力。用无毒性的沙门氏菌或热灭活的菌体免疫感染能力。用无毒性的沙门氏菌或热灭活的菌体免疫动物后,尽管其有高滴度特异抗体,但仍可免疫失败,动物后,尽管其有高滴度特异抗体,但仍可免疫失败,这肯定了细胞免疫在抗沙门氏菌中具有重要作用,致这肯定了细胞免疫在抗沙门氏菌中具有重要作用,致敏敏T T细胞的转移可以提供保护卫细胞的转移可以提供保护卫.G兼性厌氧杆菌30(七)微生物诊断(七)微生物诊断1 1取材:肠系膜淋巴结,粪便,心血,肝,脾,涂取材:肠系膜淋巴结,粪便,心血,肝,脾,涂片染色镜检可见片染色镜检可见G G中等大小杆菌。中等大小杆菌。2 2分离培养:分离培养:
23、麦康凯,伊红美蓝,麦康凯,伊红美蓝,SSSS琼脂等培养基上,挑取中等大琼脂等培养基上,挑取中等大小的无色菌落,接种三糖铁培养基上。小的无色菌落,接种三糖铁培养基上。3 3三糖铁:斜面红色,底部黄色或黑色(三糖铁:斜面红色,底部黄色或黑色(H2SH2S产生)产生)4 4生化试验生化试验 G G 蔗蔗 麦麦 乳乳 IMViCIMViC -+-+-+-+G兼性厌氧杆菌315 5血清型鉴定:血清型鉴定:分群:取一张洁净玻片,取分群:取一张洁净玻片,取2 2满杯沙门氏菌多价满杯沙门氏菌多价O O血清(血清(A-FA-F群)至玻片上,再挑取沙门氏菌纯培养物与多价群)至玻片上,再挑取沙门氏菌纯培养物与多价O
24、 O血清混匀,血清混匀,2 2minmin内凝集者可初步确定为沙门氏菌。同时设立空白对照。内凝集者可初步确定为沙门氏菌。同时设立空白对照。再用代表再用代表A A群(群(A A群中都含有群中都含有O2O2血清)血清)B B(O4O4),),C1C1(O7O7),),C2C2(O8O8)D D(O9O9),),E E(O3O3)的的O O因子血清作同样玻板凝集反应,因子血清作同样玻板凝集反应,视其被哪一群视其被哪一群O O因子血清所凝集,则确定被检菌为该群。因子血清所凝集,则确定被检菌为该群。定型:菌群确定后,用该群所含的各种定型:菌群确定后,用该群所含的各种O O因子血清与被检菌因子血清与被检菌
25、作玻板凝集反应,以确定其含有哪些作玻板凝集反应,以确定其含有哪些O O抗原,同样用该群中抗原,同样用该群中H H因子血清与被检菌作玻片凝集反应,以确定因子血清与被检菌作玻片凝集反应,以确定H H抗原。据抗原。据O O和和H H抗抗原查沙门氏菌抗原表可检出为哪种沙门氏菌。原查沙门氏菌抗原表可检出为哪种沙门氏菌。G兼性厌氧杆菌32G兼性厌氧杆菌33(八)免疫防治(八)免疫防治1 1灭活疫苗或弱毒疫苗有一定作用。灭活疫苗或弱毒疫苗有一定作用。2 2加强卫生检验,防止饲料和环境污染。加强卫生检验,防止饲料和环境污染。三三 耶尔森氏菌属,克雷伯菌属,变形杆菌属耶尔森氏菌属,克雷伯菌属,变形杆菌属 G兼性
26、厌氧杆菌343 3里氏杆菌属:鸭疫里氏杆菌(过去叫鸭疫巴氏杆菌)。里氏杆菌属:鸭疫里氏杆菌(过去叫鸭疫巴氏杆菌)。4 4放线杆菌属:猪胸膜肺炎放线杆菌,林氏放线杆菌,驹放线杆菌属:猪胸膜肺炎放线杆菌,林氏放线杆菌,驹放线杆菌,猪放线杆菌。放线杆菌,猪放线杆菌。5 5嗜血杆菌属:昏睡嗜血杆菌,副猪嗜血杆菌,血红蛋白嗜血杆菌属:昏睡嗜血杆菌,副猪嗜血杆菌,血红蛋白杆菌,流感嗜血杆菌杆菌,流感嗜血杆菌8 8种。种。6 6泰勒菌属:马生殖道泰勒菌(过去叫马生殖道嗜血杆菌)泰勒菌属:马生殖道泰勒菌(过去叫马生殖道嗜血杆菌)(1 1种)。种)。G兼性厌氧杆菌36(二)培养特性(二)培养特性需氧兼性厌氧,营
27、养要求严格,普通培养基上生长贫瘠,加入需氧兼性厌氧,营养要求严格,普通培养基上生长贫瘠,加入血液血清生长好。血液血清生长好。1 1血平板:圆形光滑,湿润,边缘整齐的露珠状小菌落,不溶血平板:圆形光滑,湿润,边缘整齐的露珠状小菌落,不溶 血。血。2 2血清肉汤:开始清度混浊,血清肉汤:开始清度混浊,4646天后管底出现粘稠沉淀,表天后管底出现粘稠沉淀,表 面有菌环。面有菌环。3 3麦康凯平板:不生长。麦康凯平板:不生长。G兼性厌氧杆菌37G兼性厌氧杆菌38(三)生化特征(三)生化特征葡萄糖葡萄糖 果糖果糖 甘露糖甘露糖 半乳糖半乳糖 大多数甘露醇大多数甘露醇 山梨醇山梨醇 木糖木糖 +乳糖乳糖
28、鼠李糖鼠李糖 杨甘杨甘 菊糖菊糖 靛基质靛基质+触酶触酶+氧化酶氧化酶+VP-MR-H2S+石蕊牛乳无变化石蕊牛乳无变化G兼性厌氧杆菌39(四)抗原性(四)抗原性 2 2种抗原种抗原K K抗原(荚膜抗原)有抗原(荚膜抗原)有6 6种:种:A B C D E FA B C D E F(另一种另一种不详)。不详)。O O抗原(菌体抗原)有抗原(菌体抗原)有1616种:种:116116。用符号表示时荚膜抗原用大写英文字母表示放在前用符号表示时荚膜抗原用大写英文字母表示放在前面,菌体抗原用阿拉伯数字放在后边中间用冒号隔面,菌体抗原用阿拉伯数字放在后边中间用冒号隔开。开。如出血型败血菌株,用如出血型败血
29、菌株,用B6B6表示。表示。G兼性厌氧杆菌40G兼性厌氧杆菌41(六)微生物学诊断(六)微生物学诊断1 1取材:取新鲜的病料如渗出液,心血,肝、脾,淋巴结制成取材:取新鲜的病料如渗出液,心血,肝、脾,淋巴结制成涂片或触片。涂片或触片。美蓝或瑞特氏染色,镜检可见两极着色的小杆菌,美蓝或瑞特氏染色,镜检可见两极着色的小杆菌,G G染色为染色为G G,初诊为巴氏杆菌。初诊为巴氏杆菌。2 2分离培养:分离培养:血平板:湿润露珠样小菌落,不溶血。血平板:湿润露珠样小菌落,不溶血。麦康凯:不生长。麦康凯:不生长。3 3生化特征:三糖铁:斜面黄色生化特征:三糖铁:斜面黄色/底部黄色,不产生气体。底部黄色,不
30、产生气体。糖发酵:葡萄糖糖发酵:葡萄糖+麦麦+肌醇肌醇+棉子糖棉子糖+4 4动物致病性:血清肉汤培养物动物致病性:血清肉汤培养物0.10.1mlml小白鼠腹腔注射,小白鼠腹腔注射,70702020h h死亡,而后剖检可分离到该菌。死亡,而后剖检可分离到该菌。5 5血清试验鉴定荚膜抗原和菌体抗原。血清试验鉴定荚膜抗原和菌体抗原。G兼性厌氧杆菌42(七)免疫防治(七)免疫防治1 1患病动物痊愈后,可获得较强免疫。患病动物痊愈后,可获得较强免疫。2 2疫苗:猪肺疫弱毒疫苗(猪三联疫苗:猪瘟、猪丹毒、猪肺疫苗:猪肺疫弱毒疫苗(猪三联疫苗:猪瘟、猪丹毒、猪肺 疫),禽霍乱疫苗。疫),禽霍乱疫苗。3 3高
31、免多价血清紧急预防和治疗。如抗出败多价血清。高免多价血清紧急预防和治疗。如抗出败多价血清。4 4抗生素:四环素,土霉素,磺胺,链霉素。抗生素:四环素,土霉素,磺胺,链霉素。二、曼氏杆菌属二、曼氏杆菌属 溶血性曼氏杆菌:牛、绵羊的肺炎,新生羔羊的败血症。溶血性曼氏杆菌:牛、绵羊的肺炎,新生羔羊的败血症。三、里氏杆菌属三、里氏杆菌属 鸭疫里氏杆菌(原叫鸭巴氏杆菌):引起雏鸭传染性浆膜炎,鸭疫里氏杆菌(原叫鸭巴氏杆菌):引起雏鸭传染性浆膜炎,引引 起死亡。起死亡。G兼性厌氧杆菌43四、放线杆菌属四、放线杆菌属1 1猪胸膜肺炎放线杆菌:引起猪的传染性胸膜肺炎。猪胸膜肺炎放线杆菌:引起猪的传染性胸膜肺炎
32、。在普通培养基上不生长需添加在普通培养基上不生长需添加V V因子,常用巧克力培因子,常用巧克力培养基培养,血平板上养基培养,血平板上溶血,产生溶血,产生CAMPCAMP现象。现象。2 2林氏放线杆菌:致牛羊的放线杆菌病,主要侵害林氏放线杆菌:致牛羊的放线杆菌病,主要侵害皮肤和软组织,引起化脓及肉芽肿,尤其致下颌淋皮肤和软组织,引起化脓及肉芽肿,尤其致下颌淋巴结的脓肿,牛舌肉芽肿使舌肿大,称为巴结的脓肿,牛舌肉芽肿使舌肿大,称为“木舌木舌病病”。也可致绵羊的皮肤,肺脏及猪的乳房脓肿。也可致绵羊的皮肤,肺脏及猪的乳房脓肿。G兼性厌氧杆菌44G兼性厌氧杆菌45五、嗜血杆菌属五、嗜血杆菌属 是一群酶系
33、统不完全的是一群酶系统不完全的G G杆菌,生长需要血液杆菌,生长需要血液中的生长因子,尤其是中的生长因子,尤其是x x因子和因子和V V因子(因子(5 5、1010因子)因子)故得名为嗜血杆菌。故得名为嗜血杆菌。(一)形态及染色特征:(一)形态及染色特征:G G短杆状,也有呈球状,杆状或长丝状,无短杆状,也有呈球状,杆状或长丝状,无鞭毛,无芽孢,新分离株有荚膜,美蓝染色两极着鞭毛,无芽孢,新分离株有荚膜,美蓝染色两极着色。色。G兼性厌氧杆菌46G兼性厌氧杆菌47(三)致病性三)致病性引起人,猪、鸡多种动物发病。引起人,猪、鸡多种动物发病。1 1流感嗜血杆菌:引起各种呼吸道感染及小儿急性脑膜炎。
34、流感嗜血杆菌:引起各种呼吸道感染及小儿急性脑膜炎。2 2副猪嗜血杆菌:引起猪的多发性浆膜炎,包括心肌炎,副猪嗜血杆菌:引起猪的多发性浆膜炎,包括心肌炎,腹膜炎,脑膜炎,关节炎。腹膜炎,脑膜炎,关节炎。3 3昏睡嗜血杆菌:引起牛的脑膜炎,母畜流产,仔畜败血昏睡嗜血杆菌:引起牛的脑膜炎,母畜流产,仔畜败血症。症。4 4副禽嗜血杆菌:引起鸡、火鸡的鼻炎。副禽嗜血杆菌:引起鸡、火鸡的鼻炎。G兼性厌氧杆菌48(四)微生物诊断(四)微生物诊断1 1取材涂片染色检镜:取材涂片染色检镜:G G,短杆菌,美兰染色两极着色。短杆菌,美兰染色两极着色。2 2分离培养:分离培养:取病料接种巧克力琼脂和鲜血平板上培养观
35、察结果。取病料接种巧克力琼脂和鲜血平板上培养观察结果。血平板:不生长,血平板:不生长,巧克力琼脂:生长良好,则怀疑为嗜血杆菌。巧克力琼脂:生长良好,则怀疑为嗜血杆菌。G兼性厌氧杆菌49G兼性厌氧杆菌50六、泰勒菌属六、泰勒菌属仅有马生殖道泰勒菌属仅有马生殖道泰勒菌属1 1种(过去叫马生殖道嗜血杆菌),致马种(过去叫马生殖道嗜血杆菌),致马接触性子宫炎,通过交配传染。接触性子宫炎,通过交配传染。第三节第三节 弧菌科(此部分内容仅作参考)弧菌科(此部分内容仅作参考)科特征:科特征:G G,直或弯曲,兼性厌氧,无芽孢,化能异养,运直或弯曲,兼性厌氧,无芽孢,化能异养,运动着端鞭毛,氧化酶动着端鞭毛,
36、氧化酶+主要存于水中,引起水产动物及人的病感主要存于水中,引起水产动物及人的病感菌。菌。弧菌属:引起人及动物疾病弧菌属:引起人及动物疾病 气单胞菌属:气单胞菌属:分类:分类:邻单胞菌属邻单胞菌属 发光杆菌属发光杆菌属 水杆菌属水杆菌属G兼性厌氧杆菌51一、弧菌属一、弧菌属1 1霍乱弧菌:引起霍乱,是人类的烈性传染病,对动物无致霍乱弧菌:引起霍乱,是人类的烈性传染病,对动物无致病。病。2 2副溶血弧菌:引起人类食物中毒,表现水样腹泻,呕吐及副溶血弧菌:引起人类食物中毒,表现水样腹泻,呕吐及发。发。3 3鳗弧菌:引起鱼的口部及体表出血性溃疡,肌肉,鳍部局鳗弧菌:引起鱼的口部及体表出血性溃疡,肌肉,
37、鳍部局灶灶 性坏死及全身症状。性坏死及全身症状。二、气单胞菌属二、气单胞菌属分类:分类:1 1 嗜冷性非运动性气单胞菌:杀鲑气单胞菌及其亚种。嗜冷性非运动性气单胞菌:杀鲑气单胞菌及其亚种。2 2 嗜温性运动性气单胞菌:嗜水气单胞菌,温和气单胞菌,嗜温性运动性气单胞菌:嗜水气单胞菌,温和气单胞菌,豚鼠气单胞菌,凡隆气单胞菌,舒伯特气单胞菌,简达气单豚鼠气单胞菌,凡隆气单胞菌,舒伯特气单胞菌,简达气单胞菌,易损气单胞菌。胞菌,易损气单胞菌。嗜水气单胞菌:引起水生动物败血症或皮肤溃疡等局部感染。嗜水气单胞菌:引起水生动物败血症或皮肤溃疡等局部感染。人感染后引起急性胃肠炎。人感染后引起急性胃肠炎。G兼性厌氧杆菌52
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