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克隆酶供体免疫分析培训课件.ppt

1、克隆酶供体免疫分析大片段称为酶受体(大片段称为酶受体(E Enzyme nzyme A Acceptor)cceptor)小片段称为酶供体(小片段称为酶供体(E Enzyme nzyme D Donoronor)有活性的酶有活性的酶有活性的酶有活性的酶ED标记的抗原标记的抗原一、定义一、定义2克隆酶供体免疫分析二、原理二、原理基本原理基本原理:标本中的抗原标本中的抗原和和ED标记的抗原标记的抗原与特与特异性抗体竞争结合,形成两种抗原抗体复合物异性抗体竞争结合,形成两种抗原抗体复合物。ED标记的抗原与抗体标记的抗原与抗体结合后由于空间位阻结合后由于空间位阻,不能再与不能再与EA结合结合。反应平衡

2、后,剩余的。反应平衡后,剩余的ED标记抗原与标记抗原与EA结合,形成具有活性的酶,加结合,形成具有活性的酶,加入底物测定酶活力,酶活力的大小与标本中抗入底物测定酶活力,酶活力的大小与标本中抗原含量呈正比。原含量呈正比。4克隆酶供体免疫分析三、特点三、特点n1.剂量反应曲线线性剂量反应曲线线性n2.高敏感度高敏感度n3.操作简便,快速操作简便,快速5克隆酶供体免疫分析剂量反应曲线线性剂量反应曲线线性6克隆酶供体免疫分析高敏感度高敏感度na.-半乳糖苷的高转换率;nb.大量的可供选择的商品化的色原底物,如氯酚一红色-半乳糖苷;nc.ED上有许多可供选择的结合配体的特殊位点7克隆酶供体免疫分析操作简

3、便操作简便n可直接在自动生化分析仪中应用,节省了检验项目的操作时间n该方法易普及,样品预处理快速,能够满足临床大批量分析的需要8克隆酶供体免疫分析自动生化分析仪9克隆酶供体免疫分析自动生化分析仪外观及主要部件10克隆酶供体免疫分析仪器主要性能介绍仪器主要性能介绍n分析速度:分析速度:800个测定个测定/小时(最大),约小时(最大),约4.5秒加样一次秒加样一次n可分析项目:可分析项目:86项(带项(带ISE的话,最大可达的话,最大可达89项),计算项目项),计算项目8项项n样本量:样本量:1.535.0l,0.1l可调可调n试剂量:试剂量:20270l,1l可调可调n总反应体积:总反应体积:1

4、20300l,测光时必须满足该条件测光时必须满足该条件n光源灯:光源灯:保质期保质期750小时小时n比色杯:比色杯:20只只8组共组共160只,依据杯空白值进行更换只,依据杯空白值进行更换n测光系统:测光系统:采用凹面蚀刻光栅的后分光、双波长测定方式采用凹面蚀刻光栅的后分光、双波长测定方式n12个波长:个波长:340、405、450、480、505、546、570、600、660、700、750、800nmn稳定性高且可有效补偿样本混浊、溶血、黄疸及电源电压变动引发的干扰稳定性高且可有效补偿样本混浊、溶血、黄疸及电源电压变动引发的干扰n测定过程:测定过程:全反应监测,全反应监测,10分钟测定分

5、钟测定34次吸光度值。次吸光度值。15分钟测定分钟测定53次吸光度次吸光度值值n依据实验要求选择相应测光点的吸光度值计算结果依据实验要求选择相应测光点的吸光度值计算结果n样本容器:样本容器:样本针有液面探测装置,可使用原始采血管离出血清后直接上机测样本针有液面探测装置,可使用原始采血管离出血清后直接上机测定定n试剂试剂:同一项目最多可加入四步试剂,两试剂舱位置各同一项目最多可加入四步试剂,两试剂舱位置各45个,温度个,温度515。n反应温度:反应温度:370.1水浴水浴11克隆酶供体免疫分析n试剂和样本试剂和样本微量化微量化。n仪器仪器线性宽线性宽,量程,量程0-32000。n同样一个项目可以

6、同时输入血清和尿液同样一个项目可以同时输入血清和尿液两两套参数套参数(不占试剂通道)。(不占试剂通道)。n反应反应过程监测过程监测,可以察看任意时间反应曲,可以察看任意时间反应曲线和吸光度线和吸光度n样品可以样品可以自动预稀释自动预稀释,便于分析高值样本,便于分析高值样本。12克隆酶供体免疫分析四、临床应用四、临床应用n测定茶碱血药浓度n测定血清地高辛 n监测环孢菌素A的浓度13克隆酶供体免疫分析测定茶碱血药浓度测定茶碱血药浓度EA 试剂盒(定量的试剂盒(定量的 EA和多克隆抗体)和多克隆抗体)ED 试剂盒(试剂盒(ED 茶碱茶碱 结合体和酶反应底物)结合体和酶反应底物)测定酶活力可以计算得茶碱浓度测定酶活力可以计算得茶碱浓度(正比正比)CEDIA420nm14克隆酶供体免疫分析测定茶碱血药浓度测定茶碱血药浓度试剂盒所带低标和高标试剂盒所带低标和高标自动生成标准曲线自动生成标准曲线按输入样本号顺序自动测定按输入样本号顺序自动测定得到样本中氨茶碱的含量得到样本中氨茶碱的含量精确性高精确性高样本用量小样本用量小自动化批量测定自动化批量测定15克隆酶供体免疫分析小结小结n掌握CEDIA的原理n熟悉CEDIA的定义n熟悉CEDIA的特点n了解CEDIA的应用16克隆酶供体免疫分析17克隆酶供体免疫分析

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